超高效液相色谱-串联质谱法研究淫羊藿苷在大鼠体内药代动力学

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中淫羊藿苷(ICA)浓度的方法,并用于研究大鼠灌胃ICA的药代动力学。方法采用乙酸乙酯提取血浆中ICA,以香豆雌酚(CMT)为内标,在BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱上以含0.1%(V/V)甲酸的乙腈-2 mmol/L甲酸铵的水溶液为流动相梯度洗脱,流速0.3 m L/min;以负离子电喷雾多反应监测方式定量分析ICA(m/z675.6→351.1)和CMT(m/z 267.0→211.1)。大鼠多次灌胃50 mg/kg ICA,采集不同时刻血样并测定药物浓度。结果 ICA的线性范围为0.5~50 ng/m L,方法定量下限为0.5 ng/m L。ICA日内和日间精密度(RSD)在11.3%以内,准确度在94.3%~98.7%,提取回收率为81.3%~85.2%,基质效应为94.3%~103.2%。大鼠灌胃ICA的t1/2为(1.68±0.29)h,C_(max)为(29.6±5.3)ng/m L,t_(max)为(1.00±0.00)h,AUC0-t为(88.4±13.9)(h·ng)/m L。结论 UPLC-MS/MS法专属性好、准确度高,适用于ICA临床前药代动力学研究。     

超声辅助固相微萃取-超快速液相色谱串联质谱法测定尿液中五氯酚

目的建立准确、灵敏的超声辅助固相微萃取-超快速液相色谱串联质谱(SPME-UFLC-MS/MS)测定尿液中五氯酚(PCP)的方法。方法采用聚离子液体膜(PIL)进行固相微萃取,XR-ODS II色谱柱(100 mm×2.0 mm,2.5μm)为分离柱,以甲醇-乙腈-5 mmol/L乙酸铵水溶液(15∶50∶35,V/V/V)为流动相进行分离,采用电喷雾电离负离子多反应监测模式(MRM)测定。结果尿液中PCP在1.0 ng/L~200.0 ng/L线性相关系数为0.999 1,加标回收率为89.5%~94.9%,日内相对标准偏差(RSDs)为1.3%~4.1%,日间RSDs为2.9%~6.8%,最低定量检出限为1.0 ng/L,与固相萃取方法比较差异无统计学意义。结论建立的方法简便、干扰少、特异性强,可用于尿液中痕量PCP的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中淫羊藿素

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中淫羊藿素(ICT)浓度,并用于研究大鼠静脉注射ICT的药动学。方法采用乙腈提取血浆中ICT,以香豆雌酚(CMT)为内标,在BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)上以流动相乙腈-水-甲酸铵-甲酸梯度洗脱,流速0.3 ml/min,柱温40℃,分析时间6.5 min;在电喷雾离子化电离源上以多反应监测方式进行负离子检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z 367.1→297.1(ICT)和m/z 267.0→211.1(CMT)。大鼠静脉注射10 mg/kg ICT,采集不同时刻血样并测定药物浓度。结果 ICT的线性范围为0.5~20 ng/ml,方法定量下限为0.5 ng/ml。ICT日内和日间精密度(RSD)在8.1%以内,准确度在95.3%~99.3%,提取回收率为90.1%~92.1%,基质效应为97.5%~101.2%。大鼠静脉注射ICT的t1/2为(1.13±0.32)h,表观分布容积为(4.54±0.27)L/kg,清除率为(2.91±0.68)L/(h·kg)。结论该方法速度快、专属性好、准确度高,适用于ICT临床前药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱联用法测定人血清中去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺含量

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS/MS)法同时测定人血清中去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及5-羟色胺(5-HT)含量的检测方法。方法血清样品经液-液萃取后,以乙腈-水-甲酸(75∶25∶0.1,V/V)为流动相,尼莫地平为内标,通过ZORBAX Extend C18柱(2.1 mm×100 mm,3.5μm)进行分离。采用HPLCMS/MS法,以选择离子监测(SIM)方式进行检测。结果 NE、DA、5-HT的浓度分别为0.5 ng/ml~400 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml、1 ng/ml~100 ng/ml时,线性关系良好(r0.99),最低定量限分别为0.5 ng/ml、1 ng/ml、1 ng/ml,相对标准偏差(RSD)分别为11.5%、6.1%、9.3%(n=5),平均回收率分别为85.07%,89.2%、90.67%。基质效应、日内、日间精密度和准确度均符合生物样品的测定要求。结论本法操作简便、准确、灵敏度高,适用于血清中神经递质的测定和研究。     

化妆品中维生素D_2、维生素D_3的高效液相色谱测定

目的建立化妆品中维生素D2、维生素D3的高效液相色谱检测方法,用于监测化妆品中维生素D2、维生素D3的使用情况。方法通过考察不同型号液相色谱柱、不同类型流动相及配比,确定了最佳色谱条件,并进行了线性范围、检出限、精密度、准确度试验。结果在AlltimaC18(250mm×4.6mmI.D.,5μμm)色谱柱;流动相为甲醇∶乙腈=90∶10;流速为1.0ml/min;检测波长为265nm;柱温为25℃时,维生素D2、维生素D3在0.5~100mg/L浓度范围内具有良好的线性关系,检出限分别为0.12mg/L和0.06mg/L;不同浓度维生素D2、维生素D3的变异系数分别小于3.8%和3.5%;加标量为20μg/g时,维生素D2、维生素D3的加标回收率分别在94.2%~101.4%和91.6%~97.2%之间。结论该方法具有操作简便、准确、快速等特点,适于同时测定化妆品中的维生素D2、维生素D3。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定醋和黄酒中的邻苯二甲酸酯类塑化剂

目的建立醋和黄酒中13种邻苯二甲酸酯类塑化剂的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法样品加入适量盐后,经乙酸乙酯-正己烷(1∶1,V/V)提取,涡旋离心后,吸取上清液浓缩吹干,用甲醇定容后进液相色谱-串联质谱系统分析,内标法定量。色谱柱采用Agilent EC-C18柱(2.1 mm×75 mm,2.7μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸,进行梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源,在正离子多反应监测模式下进行检测。结果 13种邻苯二甲酸酯类塑化剂在10 ng/ml~500 ng/ml线性关系良好(r≥0.995 0);检出限和定量限分别为0.1 ng/ml~0.8 ng/ml和0.3 ng/ml~2.5 ng/ml;低、中、高3种浓度(20 ng/ml、100 ng/ml、500 ng/ml)的回收率分别为90.2%~114.2%、97.1%~114.3%、94.7%~107.0%,精密度(RSD)分别为3.1%~13.0%、4.5%~12.1%、3.8%~9.4%。结论该方法简便、灵敏、准确、稳定,适用于醋和黄酒中邻苯二甲酸类塑化剂的测定。     

溶剂解吸-气相色谱法测定工作场所空气中甲基丙烯酸缩水甘油酯

目的建立工作场所空气中甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)的活性炭管采集溶剂解吸-气相色谱测定方法。方法采用活性炭管采集空气样品,二甲基甲酰胺-二硫化碳(1∶1,V/V)溶液解吸,经毛细管气相色谱柱分离,火焰离子化检测器检测。结果 GMA质量浓度在3.78~151.00 mg/L呈线性关系,相关系数为0.999 8,检出限为0.06 mg/L,定量下限为0.20 mg/L,最低检出浓度和最低定量浓度分别为0.02和0.07 mg/m3(以采集3.00 L空气计);平均解吸效率为94.00%~99.10%,批内、批间精密度分别为1.34%~2.46%和2.30%~4.11%。空气样品在-20℃冰箱中至少可保存7 d。结论本方法灵敏度高,精密度和准确度好,操作方法简单,适用于工作场所空气中GMA的采样与检测。     

超高效液相色谱法测定保健食品中木香烃内酯和去氢木香烃内酯

目的利用超高效液相色谱技术,建立保健食品中木香烃内酯和去氢木香烃内酯含量的检测方法。方法样品经甲醇提取,采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以乙腈-水(40∶60,V/V)为流动相,紫外检测器波长为225 nm,流速为0.5 ml/min,进样体积为5μl,柱温为30℃,通过超高效液相色谱分离,以外标法定量。结果木香烃内酯和去氢木香烃内酯的浓度为0μg/ml~1 000μg/ml时,标准曲线的线性关系良好,线性相关系数为0.999 9。相对标准偏差(RSD)为0.5%~3.7%,加标回收率分别为96.2%~100.6%、96.2%~103.9%。结论本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且更快捷,适合保健食品的日常检测工作。     

HPLC法测定血清肉碱的研究

目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定血清中肉碱浓度的方法。方法:血清样品用乙腈、甲醇沉淀蛋白,加入肉碱衍生剂,60℃恒温水浴2h后进样10μl。色谱柱为AtlantisC18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇∶异丙醇∶乙腈(35∶45∶20,v/v),流速1.0ml/min,紫外检测波长260nm。结果:在上述色谱条件下,血清肉碱分离良好,回归方程为Y=8490X-48200,r=0.9999,线性范围为12.5~400μmol/L。最低检测浓度为12.5μmol/L。日内精密度1.6%~13.2%,日间精密度(%)1.8%~12.1%,回收率98.5%。结论:通过加入肉碱衍生剂,建立了HPLC法测定血清中肉碱浓度的方法。此法操作简单,耗时少,有良好的准确度,适用于临床检测。     

尿液中杀它仗的高效液相色谱-串联质谱测定研究

目的建立尿液中测定杀它仗的高效液相色谱-串联质谱联用检测方法.方法尿液酸化后经固相萃取浓缩、净化,采用XDB C18柱(150 mm×2.1 mm i.d.,5 μm);流速0.5 ml/min;柱温30℃;流动相甲醇+0.2%乙酸(88+12);通过电喷雾电离离子化在多离子反应监测技术(MRM)模式下测定.结果在0.002～0.5 mg/L范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.5%,其批内精密度小于6.0%,批间精密度小于6.5%,定量检出限为0.087 ng.结论本方法简便、灵敏、重现性好、专属性强,能满足杀它仗中毒病人的诊断要求.