角蛋白酶产生茵培养条件优化的初步研究

目的 对本实验室所筛选的两株角蛋白酶产生茵的发醇产酶培养条件进行初步的探究.方法 用 Folin酚法测定在各种发醇条件下角蛋白酶产生菌的酶活力.结果 此两种菌摇瓶发酵F-2菌的最适培养条件是:培养温度45℃,按种量3%,装量20mL(250mL三角瓶),发醇液pH7.5,发酵时间64h;FD-8菌的最适培养条件是:培养温度45℃,接种量4%,装量20mL(250mL三角瓶),发酵液pH7.5,发酵时间64h.最高酶活力分别达到90U·mL-1和100U·mL-1.结论 筛选出最适条件的组合.     

角蛋白酶的研究进展

本文概述了角蛋白酶的理化性质、降解机理,并综述了近年来其应用领域及国内外研究进展情况。     

根霉产生抗生物质发酵条件初步研究

通过对不同培养基及不同C源、N源、接种量等影响因素的单因素多水平实验,确定了最佳发酵工艺;以5%麸皮水,1%玉米浆为培养基,初始pH4.0,种龄为10h,接种量5%,装液量5%,装液量100mL/500mL三角瓶,160r/min,30℃,发酵48h,在优化后的条件下,培养基的成本及制作时间均降低,而且总活力提高为140U/mL。     

环孢菌素A产生菌发酵条件的优化研究

利用“单因素多浓度”和“均匀设计法”对环抱菌素生产菌株茄病镰刀菌的发酵条件和发酵培养基组分进行优化．并在5000L发酵罐上对菌株的发酵动力学规律作了初步的探索。实验结果表明。5．5％玉米粉,0．5％葡萄糖,0．5％干酪素．0．05％KCl,0．05％MgSO4,0．015％KH2PO4和0．3％CaCO3为最佳摇瓶发酵培养基组成;5000L发酵罐的发酵动力学规律表明,菌体浓度发酵培养至80h左右达到最大．产素水平在116h左右达到最大。     

纤溶酶产生菌株BS-26的发酵工艺优化

目的对纤溶酶产生菌株BS-26发酵工艺进行优化。方法通过单因素试验和正交试验,确定了摇瓶发酵的最佳条件。结果该菌株产纤溶酶最佳的发酵条件为:3%糊精、1%酵母粉、0.02%CaCl2、0.07%MgSO4,初始pH7.0,接种量为6%,装液量为70/250(mL/mL),摇床温度37℃,转速180 r/min,发酵时间60 h,在该条件下产酶酶活可达593.03 U/mL,是原发酵培养条件下产酶活力的4.5倍。结论此发酵条件可以很好地提高纤溶酶的活力,为发酵规模的扩大奠定了基础。     

抗霉素产生菌发酵条件的优化

目的 对一株抗霉素产生菌的发酵条件进行优化. 方法 通过单因素实验和正交分析优化发酵条件.考察多种氨基酸的添加对抗霉素效价的影响. 结果 优化后发酵条件为:豆粕粉2.0%,可溶性淀粉2.75%,葡萄糖1.25%,硫酸铵0.6%,碳酸钙0.1%,pH 7.0,接种量1.25%,通气量1∶1.2 (v/v),转速为250r·min-1,28℃发酵72h. 结论 采用上述优化条件后抗霉素的效价有显著提高.     

海洋维生素B12产生菌培养条件研究

用大肠埃希氏菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）１１３－３测定１４株分离自我国海域的海洋细菌维生素Ｂ１２（ＶｉｔＢ１２）产力。试验了它们产生Ｂ１２的培养基及培养条件。结果表明,以海水浸提豆饼并添加一些营养组成的培养基适于进一步确定产Ｂ１２的菌种。培养基 中适当添加二氧化钴等盐类有利于Ｂ１２合成。培养基酸碱度在所试菌种发酵过程中随时间延长而提高。保持偏碱性约９６ｈ,可获得较好的Ｂ１２产生效益。所测菌株中,Ｎｏ．２６２７菌株表现良好,有Ｎｏ．２６２７菌株的混合培养,Ｂ１２产力常常有潜力和优势可取。     

二氢嘧啶酶产生菌培养条件的研究

目的确定二氢嘧啶酶产生菌的最适培养条件。方法采用Plackett Burman法设计和球面对称设计联用。结果最适培养基组成为 (% ,W /V) ;酵母膏 2 .39,葡萄糖 1.81,尿嘧啶 0 .0 6 ,K2 HPO4 ·3H2 O 0 .2 ,MgCl2 ·6H2 O 0 .0 5 ,NaCl 0 .3,pH7.2～ 7.4。 32℃ ,2 2 0r/min振荡培养 10h ,每 1ml培养液酶活力为 3 .0 2U。 结论得到了二氢嘧啶酶产生菌最佳培养条件。     

ECO-0501产生菌的发酵条件优化

优化东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)dA9发酵制备ECO-0501的工艺条件,包括种龄、初始pH、培养温度、碳氮源种类等,并通过正交试验优化发酵培养基的组成。在30℃、种龄3d、接种量8%、发酵4d的条件下,摇瓶发酵单位达115mg/L,比优化前提高了约60%。     

埃博霉素产生菌Myxobacteria sp．Ery1369的培养条件优化

对前期筛选得到的埃博霉素产生菌Myxobacteria sp．Ery1369,通过单因素筛选结合正交试验进行发酵培养基优化,同时对摇瓶发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH等进行实验探讨,确定了最佳培养条件：土豆淀粉0．8％,酵母提取物0．5％,葡萄糖0．3％,CaCl2·2H200．05％,MSS04·7H200．15％,XAD-163％,初始pH值7．4,种子菌龄72h,500mL三角瓶装液量100mL,接种量20％,摇床转速200r·min^-1,发酵温度30℃;最佳发酵时间为8d,其埃博霉素B产量相比对照提高45％以上,为埃博霉素的工业化生产奠定基础。     

黄嘌呤氧化酶产生菌的产酶条件优化

通过恒化富集培养分离得到一株黄嘌呤氧化酶（XOD）产量较高的节杆菌Arthrobacter sp．。采用响应面分析法优化培养基组成，XOD比活力较初始水平提高了1．9倍。利用正交试验研究摇瓶发酵条件，结果发现，当培养温度为32℃、培养基初始pH为8．0、转速为230r/min时，产酶水平又提高50％，XOD比活力达0．083u（mg蛋白）^-1。在此基础上，绘制菌株产酶曲线，确定最佳产酶时间为45h。     

麦考酚酸产生菌液体发酵条件的优化

研究了短密青霉菌L产生麦考酚酸的发酵工艺条件，包括斜面培养基种类、初始pH、培养温度、碳氮源种类等，并通过均匀设计法优化了发酵培养基的组成。在优化条件下，摇瓶发酵单位达8565μg／ml，比优化前提高了89％。     

海洋维生素B_(12)产生菌培养条件研究

用大肠埃希氏菌 ( Escherichia coli) 113- 3测定 14株分离自我国海域的海洋细菌维生素 B12 ( VitB12 )产力。试验了它们产生 B12 的培养基及培养条件。结果表明 ,以海水浸提豆饼并添加一些营养组成的培养基适于进一步确定产 B12 的菌种。培养基中适当添加二氯化钴等盐类有利于 B12 合成。培养基酸碱度在所试菌种发酵过程中随时间延长而提高。保持偏碱性约 96h,可获得较好的 B12 生产效益。所测菌株中 ,No.2 62 7菌株表现良好。有 No.2 62 7菌株的混合培养 ,B12 产力常常有潜力和优势可取。     

Wortmannilactone F产生菌邬氏黄丝曲霉F01Z0195的培养条件优化

本研究通过单因素实验和响应面分析法相结合的方法,以新组织蛋白酶B抑制剂wortmannilactone F的生成量为考察对象,对邬氏黄丝曲霉F01Z0195的培养条件进行优化.确立邬氏黄丝曲霉F01Z0195的培养方式为固态静置发酵培养,培养基为含水的玉米渣,接种量7%,培养周期为14d,最优培养基为40.0g玉米渣和18.3mL含有2.2%DMSO的1/15mol/L磷酸盐缓冲液(自来水配制,pH值为7.46),在此条件下wortmannilactone F生成量为3.90mg/g,与理论值基本一致,与初始培养条件相比提高了341倍.     

黄精皂苷提取条件的Design-Expert优化及其降血糖效果初步研究

摘 要 目的：优化黄精皂苷提取工艺并研究黄精皂苷降血糖效果。方法: 利用设计软件Design Expert回归设计得到黄精皂苷提取率与提取温度、提取时间、乙醇浓度关系的回归模型优化提取工艺;建立糖尿病动物模型;取模型内小鼠50只,随机分为模型对照组、阳性对照组（二甲双胍200 mg·kg-1）、样品组高（300mg·kg-1）、中（200mg·kg-1）、低（100mg·kg-1）剂量组,阳性对照组、样品组按10 ml·kg-1的剂量灌胃给药,模型对照组、空白组(10只模型外小鼠)给予等量的生理盐水,连续给药7 d后,测定餐后1 h的血糖值。结果: 通过二次回归设计得到黄精皂苷提取率与提取温度、提取时间、乙醇浓度关系的回归模型,得到优化的提取工艺参数为：提取温度20.7℃,提取时间12.28 h,乙醇浓度为82%（v/v）,此条件下黄精皂苷的提取率为2.95%。降血糖实验中,阳性对照组与样品各剂量组小鼠餐后血糖值均明显低于模型对照组（P<0.01或P<0.05）。样品高剂量组小鼠血糖值显著低于中剂量和低剂量组（P<0.01）,与阳性对照组血糖值比较差异无统计学意义（P>0.05）,与阳性对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。样品低剂量组和中剂量组血糖值差异无统计学意义（P>0.05）,与阳性对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论: 通过二次回归设计得到的回归模型能够较好的预测黄精皂苷提取率,预测值和试验结果相对误差约为1%。降血糖实验证明,黄精皂苷提取物对用四氧嘧啶建立糖尿病小鼠降血糖效果显著。     

芥子碱氯化盐制备条件的优化与平喘作用的研究

目的优化芥子碱氯化盐的制备条件并研究其平喘作用。方法采用响应面分析法对芥子碱氯化盐制备的提取时间、液料比、提取次数进行优化。使用整体动物引喘实验和豚鼠离体肺支气管灌流实验考察芥子碱氯化盐的平喘效果。结果优化后的提取时间为3.9 h,液料比为8.6∶1(L/kg),提取4次。整体动物引喘实验结果显示高、中剂量芥子碱氯化盐具有平喘效果,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。离体肺支气管灌流实验结果显示高剂量芥子碱氯化盐具有松弛气道平滑肌的作用,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论优化制备条件后,测得芥子碱平均得率为0.55%。芥子碱氯化盐具有平喘作用,其平喘机制与舒张肺支气管气道平滑肌有关。     

液态发酵法生产达托霉素的培养条件优化研究

目的 研究液态发酵法生产达托霉素的发酵工艺,提高达托霉素的产量.方法 通过用玫瑰孢链霉菌液态发酵法生产达托霉素的优化实验,对发酵的主要影响因素进行了单因素的试验,并用正交试验对发酵温度、前体量、接种量进行了优化,确定了最佳培养基组成和培养条件.结果 最佳的培养基组成和培养优化条件为:黄豆粉3％、豆粕2％、补前体量50μL、初始pH8.5、接种量0.5％、转速250r/min、装液量80mL/500mL、发酵温度32℃,优化后罐上效价较以前配方提高了近50％.结论 新工艺为达托霉素的工业化大生产打下了良好的基础.     

水蛭素基因工程菌的培养条件优化

通过正交实验对水蛭素基因工程菌的发酵培养基进行了优化,并由此得到较佳培养基配方为玉米浆4.5%,牛肉膏2.5%,谷氨酸钠1.5%;以此优化培养基在初始PH6.5,种龄12小时和温度37℃等条件下,摇瓶发酵液水蛭素活力可达到1200ATU/ml.     

何首乌根部分离菌株的鉴定及其培养条件的优化研究

目的 对从何首乌根部土壤筛选出能够缓解何首乌泄下作用的4株菌的培养条件进行优化.方法 4株菌进行单孢子分离后,分别在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、查氏、麦芽汁培养基上置于28℃的恒温培养箱中培养,逐日观察、记录菌落形态.7～10d后挑取子实体镜检、观察,拍摄菌株菌丝形态,并观察分生孢子.采用正交试验方法,对培养条件进行优化.A为碳源;B为氮源;C为pH;D为温度.结果 这4株菌的编号为FJ001、FJ002、FJ005、FJ006.经形态学鉴定,FJ001为青霉属,FJ002为镰孢菌属,FJ005为根霉属,FJ006为曲霉属.FJ001菌株的最佳培养条件为A1B3C2D3,FJ002菌株的最佳培养条件为A4B1C2D3,FJ005菌株的最佳培养条件为A4B1CD2,FJ006菌株的最佳培养条件为A4B3C2D4.结论 FJ001菌株最佳碳源为大米,最佳氮源为蛋白胨,最佳pH为7.0,最佳培养温度为30℃;FJ002菌株最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为土豆,最佳pH为7.0,最佳培养温度为30℃;FJ005菌株最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为大豆、最佳pH为中性偏酸性,最佳培养温度为25℃;FJ006菌株最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨,最佳pH为7.0,最佳培养温度为35℃.     

石刁柏细胞的L-天冬酰胺酶发酵条件的研究

优化了石刁柏细胞L-天冬酰胺酶发酵条件并对其粗提进行了探索。其最佳产酶条件为:最适培养基为MS 蔗糖(35 g/L) 6-(苄胺基)嘌呤(0.01 mg/L) α-奈乙酸(3 mg/L)最适pH值为6.4、最适温度为27℃、最适转速为110 r/min、接种量为5.0×104个/ml。在此发酵条件下,L-天冬酰胺酶发酵液酶活力的峰值可达到22.37 U/ml、产酶稳定期持续7~8 d,利用吴氏提取工艺可以得到回收率为30.8%,纯化倍数为9.85,比活力为0.55 U/mg的L-天冬酰胺酶。