穿心莲内酯抑制人类胃癌细胞系中的细胞增殖及侵袭

目的观察穿心莲内酯（AD）对胃癌细胞增殖侵袭的影响。方法体外培养胃癌细胞系AGs,分别用1．0μmol／L,3．0μmol／L及5．0μmol／LAD作用后,MTT法检测AOS细胞的增殖情况;ELISA检测细胞内断裂DNA含量,并观察血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子B,（TGFp．）的水平。小室实验检测细胞侵袭力的改变情况。结果AD处理具有浓度和时间依赖性方式抑制AQS细胞的生长增殖,其中5．0umol／LAD作用72h后,AGS的抑制率达（6581±114）％。10～50umol／LAD能增加断裂DNA水平,并减少VEGF和TOFp,水平（p〈O．05）。此外,不同浓度AD能有效减少细胞的迁移。其中10、30和50umol／LAD处理后穿膜细胞百分比分别为（5663±297）％,（3971±5．17）％和（24.28±3．28）％,经统计学分析,组间比较差异有统计学意义。结论AD可能具有阻碍胃癌细胞侵袭及转移的能力。     

穿心莲内酯对胃癌AGS细胞增殖侵袭的影响

目的观察穿心莲内酯（AD）对胃癌细胞增殖侵袭以及Na＋-K＋-ATP酶活性的影响。方法体外培养胃癌细胞系AGS,分别用1.0、3.0、5.0μmol/L穿心莲内酯作用24～72 h,无机磷法检测AGS细胞Na＋-K＋-ATP酶活性改变情况;MTT和ELISA分析AGS细胞的增殖与断裂DNA含量;同时采用ELISA检测血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子β1（TGF-β1）的水平;荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9（MMP-9）的活性;小室侵袭实验检测细胞侵袭。结果 1.0～5.0μmol/L穿心莲内酯能显著降低Na＋-K＋-ATP酶活性,并能在此浓度下抑制AGS细胞生长增殖以及增加断裂DNA水平。同时,穿心莲内酯也能减少VEGF和TGF-β1的水平（P〈0.05）,降低MMP-9酶的活性,并能有效减少癌细胞的侵袭（P〈0.05）。结论穿心莲内酯是一种有效的抗胃癌药物,它可能具有阻碍胃癌细胞侵袭的能力。     

Genistein对鼻咽癌细胞增殖抑制作用的研究

目的：探讨酪氨酸蛋白激酶（TPK）抑制剂Genistein对鼻咽癌细胞增殖的抑制作用。方法：以不同浓度的Genistein作用于鼻咽癌细胞，采用MTT法检测细胞的增殖程度，倒置显微镜下观察肿瘤细胞的形态学变化。结果：Genistein引起鼻咽癌细胞增殖比明显下降，其程度随Genistein浓度增高而增强；Genistein促进鼻咽癌细胞形态发生改变并导致细胞死亡。结论：Genistein对鼻咽癌细胞的增殖有抑制作用，并破坏肿瘤细胞的结构而使其死亡。     

穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖的影响

目的 研究穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖的影响.方法 在不同浓度的穿心莲内酯培养基中将人结肠癌细胞株Caco-2（高分化）、HT-29（中分化）和Lovo（未分化）培养24、48、72 h,用MTT法检测穿心莲内酯对各种癌细胞的药物半数抑制浓度（IC50）,比较穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株之间的增殖抑制的差异.结果 穿心莲内酯对结肠癌细胞Caco-2、HT-29和Lovo有明显增殖抑制作用,且其抑制作用呈剂量效应和时间效应关系;低分化结肠癌细胞株对穿心莲内酯的敏感性高于分化程度较高的结肠癌细胞株.结论 穿心莲内酯对不同分化结肠癌细胞株体外增殖抑制作用不同.     

苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的抑制作用研究

目的:观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响.方法:采用倒置显微镜观察苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞形态的影响:采用CCK-8法检测苦参碱时鼻咽癌CNE2细胞生长的影响.结果:苦参碱处理后CNE2细胞形态发生改变,细胞皱缩,变小变圆.空泡明显.苦参碱能抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖.在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下.72 h内药物作用时间越长,抑制作用越明显.结论:苦参碱能够抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖.     

超微粉体技术对穿心莲药材中穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯溶出率的影响

目的:探讨超微粉碎对穿心莲药材中有效成分溶出率的影响.方法:用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定穿心莲超微粉与药材120目细粉中穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯的溶出率.结果:超微粉药材中穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯的溶出率明显增加.结论:超微粉碎可显著提高穿心莲药材中有效成分的溶出率.     

HPLC法测定穿心莲叶中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的:测定不同产地的穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,Merck-Lichrospher RP-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(60∶40);检测波长:226nm(用于检测穿心莲内酯),254nm(用于检测脱水穿心莲内酯);流速:0.8ml/min;柱温:35℃。结果:实验表明测定方法在4h内是稳定的,穿心莲内酯线性范围0.050~1.500μg,脱水穿心莲内酯线性范围0.048~1.440μg,平均加样回收率分别为100.9%和98.2%,RSD分别为3.4%(n=6)和3.2%(n=6)。结论:用HPLC法测定穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量方法准确、灵敏、稳定,可作为控制穿心莲质量的方法。     

穿心莲内酯对人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖及细胞周期的影响

目的 探讨穿心莲内酯(Andro)对人乳腺癌细胞MCF-7的增殖及细胞周期的影响,为其应用于乳腺癌的治疗提供理论基础.方法 将实验分为对照组及Andro组,Andro组加入终浓度为10、20、40、60、80、100μmol/L的Andro[Andro粉末先用DMSO溶解,再用培养基稀释至细胞处理浓度,控制DMSO的含量为0.1%(v/v)],对照组仅用0.1%DMSO溶剂.采用CCK8检测Andro不同浓度及不同处理时间(24、48、72 h)对MCF-7细胞增殖的影响;应用流式细胞术检测两组细胞周期分布情况;应用预胶化淀粉细胞块制作方法 ,将两组细胞制作成石蜡切片,应用免疫组织化学方法 检测切片中MCF-7细胞增殖相关的核抗原Ki67及细胞周期相关抗原周期素D1(Cyclin D1)及周期素依赖性激酶4(CDK4)的表达.结果 CCK8检测结果 显示Andro浓度为10、20、40、60、80、100μmol/L显著抑制MCF-7细胞的增殖,IC50值为25μmol/L,并且在IC50浓度下24、48、72 h Andro均显著抑制MCF-7细胞的增殖,并随着作用时间的延长,抑制作用越明显.细胞周期检测结果 Andro处理后G0/G1期细胞数量达(75.51±1.56)%,与对照组(49.16±1.35)%比较,显著升高(P<0.05),而S期的细胞数量仅为(12.69±0.87)%,与对照组(44.07±0.98)%比较,显著降低(P<0.05).细胞块免疫组织化学结果 显示对照组与Andro组Ki67的表达分别为(91.77±2.75)%、(78.05±2.61)%,显著降低(P<0.05),Cyclin D1的IOD值分别为(2.14±0.17)×107、(1.27±0.22)×107,显著降低(P<0.05),CDK4的IOD值分别为(1.14±0.014)×107、(1.16±0.024)×107,无明显差异.结论 Andro可通过抑制MCF-7细胞的增殖及抑制Cyclin D1的表达从而阻断MCF-7细胞的细胞周期进程从而发挥抗肿瘤作用,Andro不能通过影响CDK4的表达发挥阻断MCF-7细胞周期.     

HPLC法测定清感穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

【目的】建立清感穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法。【方法】采用高效液相色谱法:色谱柱为资生堂CAPCELL PAK C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇∶水(52∶48);检测波长:254 nm;流速:1.0 ml/min;柱温:40℃。【结果】穿心莲内酯在0.2~3μg(r=0.9999)、脱水穿心莲内酯在0.2~3μg(r=0.9999)范围内线性关系良好。穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的平均回收率分别为99.45%(RSD=0.19%,n=6),99.57%(RSD=0.19%,n=6)。【结论】该方法简便、准确、重复性好,可用于该制剂中有效成分的含量测定。     

RP-HPLC法测定不同产地及采收期的穿心莲中穿心莲内酯、新穿心莲内酯的含量

采用反相高效液相色谱法测定穿心莲中穿心莲内酯、新穿心莲内酯的含量。色谱柱为 Ｍｅｒｃｋ Ｌｉｃｈｒｏｍａ Ｒ Ｐ Ｃ１８ 柱,流动相为乙腈 水（３５∶６５） ,检测波长为２２５ ｎｍ ,流速为１ ｍｌｍｉｎ ,柱温４０ ℃,穿心莲内酯和新穿心莲内酯的加样回收率分别为１０２ ．６２ ％ 、９８ ．６ ％ , Ｒ Ｓ Ｄ 分别为０ ．４８ ％ 、０ ．４７ ％ ,上述两成分在广东阳春和安徽临泉所产的穿心莲中含量较高,最佳采收期为开花盛期。     

穿心莲片中穿心莲内酯的薄层扫描

对穿心莲内酯的测定方法为:先在硅胶GF_(254)荧光薄层板上用氯仿-无水乙醇(10:1)为展开剂分离穿心莲内酯及其它成分,再用岛津CS-910型双波长薄层扫描仪在紫外区进行荧光熄灭定量扫描(测定波长240nm,参比波长400nm),然后按公式计算含量。其回收率为96.0％(n=5),变异系数为2.1％。     

穿心莲内酯对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用及其机制

目的：观察穿心莲内酯（Andro）对胶质瘤U87细胞增殖的抑制作用,阐明其作用机制。方法：取对数生长期U87细胞,分为二甲基亚砜(DMSO)对照组、4H-穿心莲内酯(4H-Andro)对照组和Andro组, MTT法检测不同浓度(0、5、10、15、20和25 μmol•L^-1) DMSO 、4H-Andro 及Andro对U87细胞活力的影响,计算U87细胞半数抑制浓度（IC50）;Western blotting法检测各组U87细胞NF-κB蛋白表达强度。结果：通过浓度筛选,Andro平均IC50为8 μmol•L^-1。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol•L^-1 Andro处理24 h后U87细胞增殖活性降低（P<0.01）,增殖抑制率达到50%;Andro处理96 h时,U87细胞增殖活性进一步降低（P<0.01）,增殖抑制率达到65%。与DMSO和4H-Andro对照组比较,8 μmol?L-1 Andro处理48 h后, U87细胞中NF-κB（即磷酸化p65）蛋白表达强度下降（P<0.01）。结论：Andro作为临床上常用的天然抗炎药物,具有抑制胶质瘤细胞增殖的功能,并且可通过靶向抑制NF-κB蛋白表达强度发挥作用。     

穿心莲内酯的研究进展

穿心莲内酯为二萜内酯类化合物,结构复杂,人工合成困难,国内均从植物中提取。提取分离方法有醇提法、水提法、微波和超声波辅助提取法。其具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病等多种药理作用。利用Michael加成、羟基上的反应、分子内环化、分子内酯环化等反应进行结构修饰取得了新的研究进展。随着对其药理作用及其机制以及结构修饰的深入研究,将极大地促进穿心莲内酯类新药的研究和开发。     

穿心莲二萜内酯有效部位的化学成分研究

目的对穿心莲二萜内酯有效部位的化学成分进行研究;方法利用硅胶柱层析,制备薄层色谱进行分离纯化,通过理化性质结合波谱方法鉴定化合物结构;结果穿心莲二萜内酯有效部位中分离并鉴定了5个主要化合物,分别为:穿心莲内酯、异穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯;结论为探讨穿心莲有效部位的物质基础提供了依据。     

皂角刺提取液对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨皂角刺提取液对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞,予不同的浓度皂角刺提取液作用于细胞,分别作用12、24、48 h后,通过MTT比色法检测细胞的增殖抑制情况。予不同浓度的皂角刺提取液作用于鼻咽癌CNE-2细胞48 h后,通过流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果较高浓度皂角刺提取液组（3.2、6.4、12.8、25.6 mg/mL）作用于细胞48 h的增殖抑制率分别为（89.61±1.88）%、（96.99±0.66）%、（93.88±1.24）%、（84.15±0.86）%,均高于阴性对照组（P < 0.05）。2、2.5、3 mg/mL皂角刺提取液作用于细胞48 h后,细胞凋亡率分别为（15.61±1.21）%、（22.08±1.70）%、（37.62±2.07）%,均高于阴性对照组（P < 0.01）。结论皂角刺提取液可抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖并诱导其凋亡。     

HPLC法测定穿心莲内酯滴丸中穿心莲内酯的含量

目的:探讨测定穿心莲内酯滴丸中穿心莲内酯含量的方法。方法:采用HPLC法测定,使用Hypersil-CN(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇∶水(40∶60)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长254 nm。结果:穿心莲内酯在20.0~100.0μg/ml范围内有很好的线性关系,其线性方程为A=11484C+35642(n=5,r=0.9998),回收率为100.53%,RSD=0.39%(n=6)。结论:HPLC法测定穿心莲内酯滴丸中穿心莲内酯线性关系好、准确度高、稳定性好、专属性强,可作为该产品的定量控制方法。     

HPLC测定新雪颗粒中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的建立测定新雪颗粒中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为D iamonsil-C18柱,甲醇-水(体积比55∶45)为流动相,流速1.0 mL/m in,检测波长225 nm和254 nm,柱温为30℃。结果穿心莲内酯在0.06387~1.597μg范围内、脱水穿心莲内酯在0.06534~1.634μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为100.2%和98.0%。结论所用方法简便、准确,能有效的控制该制剂的质量。     

HPLC法测定穿黄清热胶囊中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的：采用HPLC法测定穿黄清热胶囊中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。方法：色谱柱为Thermo syncronis C18（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-水（65∶35）,流量1.0mL/min,检测波长检测波长穿心莲内酯225nm,脱水穿心莲内酯254nm。结果：穿心莲内酯在0.10024~2.5060μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为98.6%,RSD为1.6%;脱水穿心莲内酯在0.10064~2.5160μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为98.4%,RSD为1.5%。结论：本法简便、快速、准确,可用于产品的质量控制。     

RP-HPLC法测定穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量

目的建立穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Hypersil ODS C18(4.0mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-体积分数0.1%磷酸水溶液(体积比25∶75),检测波长226 nm,流速1.0 mL/min。结果穿心莲内酯在0.5~5.0μg(r=0.9995)范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.73%,RSD为1.32%。结论本方法简便、准确、重现性好,可作为穿心莲提取物中穿心莲内酯的含量测定方法。