Fas、FasL和Caspase-3在人胚早期脊髓发育中的分布

目的观察Fas、FasL和Caspase-3在人胚早期脊髓发育的表达。方法收集早期人胚35天,52天和60天标本9例,用4%多聚甲醛固定后制作8μm厚的石蜡切片。间隔取片分组,分别用Fas(效价1:250,Santa Cruz)、FasL(效价1:250,Santa Cruz)、Caspase-3(效价1:500,Sigma)抗体对5例人胚标本的10张切片行免疫组织化学ABC法染色。观察Fas、FasL和Caspase-3在人胚早期脊髓发育中的分布以及亚细胞定位。DAB棕色反应呈色。结果Fas免疫反应阳性的神经元主要分布在室管膜层、中间层和边缘层,可见胞浆和细胞核内染色。FasL免疫反应阳性产物主要分布在室管膜层和套层,可见细胞膜、胞浆和细胞核染色。Caspase-3免疫反应阳性产物主要分布在神经管的室管膜层和中间层,可见细胞核染色。结论在人胚发育早期,Fas、FasL和Caspase-3分布于脊髓,提示这些因子参与人胚早期脊髓的发育,参与神经元凋亡信号的传递。     

癫痫持续状态大鼠海马Bim与Caspase-3的表达

目的:探讨在匹罗卡品致痫的癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)大鼠模型中,Bcl-2-相互作用细胞死亡介导因子(Bim)与Caspase-3在大鼠海马组织中的表达。方法:雄性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠,应用匹罗卡品产生SE 60 min后终止发作,24 h后取材,行HE染色及TUNEL染色,观察海马神经元的损伤及凋亡情况,Western Blot测定海马组织中Bim的表达,免疫组化检测Caspase-3的表达。采用Pearson相关分析法分析Bim与Caspase-3表达的相关性。结果:SE后24 h,海马组织HE染色见神经元数量减少,TUNEL染色阳性细胞数明显增加,Western Blot中Bim出现相对分子量26kD的条带,免疫组化染色可见大量Caspase-3阳性神经元。结论:大鼠SE后24 h,Bim与Caspase-3在海马组织神经元表达增加,且二者的表达呈正相关(r=0.901,P=0.001),海马神经元出现凋亡。     

多发性硬化症患者PBMC Fas和FasL的表达

多发性硬化 (ＭＳ )病因及发病机制至今未明 ,目前认为它是一种与中枢神经系统髓鞘成分有关的自身免疫性疾病。Ｆａｓ分子是死亡因子Ｆａｓ配体 (ＦａｓＬ )的受体 ,Ｆａｓ/ＦａｓＬ是细胞凋亡的诱导因子[1] ,Ｆａｓ/ＦａｓＬ功能异常可能是自身免疫性疾病的发病机制之一。本文应用ＲＴ ＰＣＲ方法检测ＭＳ患者外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ )Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达 ,探讨其在ＭＳ发病中的作用。1　对象与方法1 1　研究对象　 4 5例ＭＳ患者 ,男性 2 3例 ,女性 2 2例 ,年龄 2 0～ 4 6岁 ,平均 (32 5± 9 1)岁 ,病程 2月～ 11年 ,平均病程 2 …     

心肌缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡与Fas、FasL基因表达的变化

目的探讨异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导的心肌缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡与Fas和FasL基因表达变化。方法健康成年SD大鼠随机分为对照组及心肌缺血损伤组(损伤组),腹腔大剂量注射异丙肾上腺素,造成心肌缺血损伤模型。采用原位末端缺口标记(TUNEL)法观察心肌细胞凋亡的改变;应用Western blotting和免疫组化方法检测Fas和FasL蛋白表达的变化,并使用HPIAS10009图像分析仪进行定量分析。结果与对照组比较,缺血损伤组大鼠心肌细胞凋亡率明显增加(P<0.01)、心肌组织Fas、FasL蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论心肌细胞凋亡及Fas、FasL基因过表达可能参与了心肌缺血损伤的发生和发展。     

老化大鼠坐骨神经Fas与FasL的表达及纤维结构变化

为了观察老化对神经纤维组成和结构的影响以及对凋亡相关因子Fas及其配体FasL表达的影响,随机取3月龄(成年组)和24月龄(老年组)正常SD大鼠各16只进行以下实验:采用透射电镜(TEM)观察坐骨神经的超微结构变化;苏木精-伊红(HE)染色计数轴突数与Schwann细胞数的比例;免疫组织化学染色检测大鼠坐骨神经老化时Fas和FasL的表达变化。结果显示:透射电镜下可见老年大鼠坐骨神经轴突直径增加,轴突周围间隙扩大,多数髓鞘分离,部分板层结构排列紊乱、破坏甚至呈气球样变。老年组的轴突数与Schwann细胞数的比例较成年组变大(P<0.01)。两组动物坐骨神经的髓鞘与轴突均可见Fas和FasL免疫组化阳性染色,但老年组大鼠的Fas和Fasl表达量明显增多(P<0.05)。以上结果提示老化大鼠坐骨神经神经纤维的形态结构发生很大的变化,可能与凋亡相关基因产物Fas及其配体FasL的表达增加有关。     

凋亡调节蛋白Fas和Caspase-3在乳腺癌中的表达及意义

目的观察人乳腺癌组织中凋亡调节蛋白Fas和Caspase-3的表达,探讨Fas和Caspase-3与乳腺癌发生、发展的关系。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织(距癌组织5 cm以上),用免疫组织化学方法对23例乳腺癌标本进行检测。结果在相对正常乳腺组织和乳腺癌组织中Fas蛋白的阳性表达率分别为86.9%和47.3%;乳腺癌组织中Fas的阳性表达率明显低于相对正常乳腺组织。在相对正常乳腺组织和乳腺癌组织中Caspase-3的阳性表达率分别为82.6%和43.5%;乳腺癌组织中Caspase-3的阳性表达率明显低于相对正常乳腺组织。乳腺癌组织中caspase-3与Fas的表达率均与淋巴结转移无关。相关性分析表明,乳腺癌癌中的表达caspase-3与Fas表达呈正相关。结论乳腺癌组织中Fas和Caspase-3表达下调,使肿瘤抗凋亡机制过度激活,可能在乳腺癌的发生和发展过程中起重要作用。     

Fas/FasL信号在免疫系统中的作用

Fas/FasL通路是介导细胞凋亡的一条重要途径.近年来研究发现,它可以促进分泌炎症细胞因子,激发炎性反应,参与免疫豁免、免疫逃逸、肿瘤形成及转移等过程.此外,FasL还可以作为受体传递反向信号,促进细胞增殖,并参与一些自身免疫性疾病的发生.     

Caspase-3在出生后大鼠海马中的表达

目的 探讨Wistar大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3与凋亡之间的关系. 方法 应用免疫荧光方法观测活化的Caspase-3和赫斯特荧光染料33342(Hoechst 33342)在生后不同时期大鼠海马CA1、CA3区和齿状回(DG)中的表达情况. 结果 在CA1区,活化的Caspase-3的表达在生后7d(P7)达到高峰;在CA3区,P2达到高峰,然后逐渐减弱.在DG,P7后又有所增强,到P14达到高峰,并在所观测的其余时段维持此水平.观测的3个区的凋亡细胞数目都在P7达到高峰,然后逐渐减少. 结论 在大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3的表达存在特定的时空格局.活化的Caspase-3在CA1区与CA3区有丝分裂后期细胞和DG神经前体细胞中的作用和机制不同.     

肝癌发展中FasL及其受体Fas/DcR3的表达分析

目的研究小鼠肿瘤发生早期肿瘤坏死因子超家族成员FasL及其受体的表达特点,及其与免疫调节相关分子表达的时空关系,探讨其在诱导肿瘤免疫耐受中的作用。方法建立小鼠实体瘤模型,采用RT-PCR方法检测肿瘤组织中可溶型FasL、Fas及DcR3、TGF-β、IL-10在肿瘤发生不同时相的表达,同时,应用ELISA方法定量检测血清中TGF-β、IL-10的表达。结果在早期的肿瘤组织中,Fas的表达先于DcR3,其后DcR3大量表达,而Fas的表达则下调直至丢失,DcR3、FasL同时表达并上调,TGF-β和IL-10也随肿瘤的表达而上调。TGF-β同DcR3的表达具有空间位置的一致性。FasL、DcR3、TGF-β和IL-10的表达水平同肿瘤的生长呈正相关。结论随着肿瘤不断的生长,肿瘤局部的免疫应答逐渐趋向于负调节,FasL、DcR3在诱导肿瘤免疫耐受的过程中可能发挥着重要作用。     

大鼠脊髓缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Caspase-1、Caspase-3的表达

目的观察大鼠脊髓缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Caspase-1、Caspase-3的表达。方法 48只成年健康Wistar大鼠,采用Naslund腹主动脉阻断法制作脊髓缺血再灌注损伤模型。随机分为空白对照组(n=6)、假手术组(n=6)和损伤组(n=36),观察脊髓缺血再灌注损伤后,脊髓的病理变化、细胞凋亡及Caspase-1、Caspase-3的表达变化的规律。结果观察脊髓缺血再灌注损伤后Caspase-1阳性细胞在损伤后12h表达明显,1d损伤区域及周边出现表达高峰。Caspase-3阳性细胞在损伤后12h表达明显,2d损伤区域及周边出现表达高峰。TUNEL阳性细胞也在脊髓损伤后12h表达明显,2d出现表达高峰。空白对照组、假手术组:Caspase-1、Caspase-3免疫组化少有表达,少见TUNEL阳性细胞。结论脊髓缺血再灌注损伤后存在神经细胞凋亡,Caspase-1、Caspase-3均参与损伤的调节。     

Fas/FasL和Bcl-2在人乳腺癌组织中的表达及其与浸润淋巴细胞的关系

目的通过观察乳腺癌组织中凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl-2的表达及其与肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的关系,探讨Fas、FasL、Bcl-2与乳腺癌发生、发展的关系,为乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织。用免疫组织化学方法和图像分析技术对21例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中Fas的阳性表达率明显低于相对正常乳腺组织(P<0.05),且淋巴细胞浸润性乳腺癌组织中Fas的阳性表达明显低于非浸润性乳腺癌组织(P<0.05);乳腺癌组织中FasL、Bcl-2的阳性表达率明显高于相对正常乳腺组织(P<0.05),且淋巴细胞浸润性乳腺癌组织明显高于非淋巴细胞浸润性乳腺癌组织(P<0.05);乳腺癌组织中Fas阳性淋巴细胞的数量与相对正常乳腺组织相比明显增多(P<0.05);乳腺癌组织Bcl-2阳性淋巴细胞的数量与相对正常乳腺组织相比明显减少(P<0.05)。结论①乳腺癌组织中Fas表达下调和FasL的过度表达,逃避了免疫监视,诱导Fas敏感的TIL凋亡,从而导致肿瘤的生长;②乳腺癌组织中癌基因Bcl-2过度表达及Bcl-2阳性淋巴细胞的低表达,使肿瘤抗凋亡机制过度激活,肿瘤细胞对Fas/FasL易感性较淋巴细胞相对低,导致TIL死亡,而不是肿瘤细胞死亡。     

视网膜母细胞瘤中Fas/FasL表型的检测及意义

Fas是一种细胞表面分子 [1 ] ,可与其特异性配体 Fas-L igand(Fas L )结合 ,诱导细胞凋亡的发生。许多肿瘤细胞可表达 Fas L ,明显减弱 Fas阳性细胞毒性淋巴细胞的攻击能力 ,是肿瘤细胞逃避机体免疫攻击的新机制 ,在肿瘤的发生和发展中起重要作用。本文拟研究 Fas、Fas L 在视网膜母细胞瘤中的表型及其意义。1　材料与方法1.1　材料　视网膜母细胞瘤 45例及正常视网膜组织 12例。1.2　方法　石蜡切片 4μm,经脱蜡 ,水化 ,内源性酶灭活 ,封闭 ,微波修复 5 m in 2次 ,分别加入一抗 Fas L(1:30 0 ) Fas(1:5 0 0 ) ,4°C过夜 ;加入生物素…     

细胞因子对肾癌细胞株786-0、GRC-1 Fas、FasL表达的调节及其意义

目的 :研究细胞因子对肾癌株Fas、FasL表达的影响及其意义。方法 :单独或联合应用IFNγ ,IFNα ,IL 2 ,TNFα刺激肾癌株 786 0、GRC 1细胞并检测Fas、FasL表达 ,以Fas单克隆抗体 (FasAb)诱导其凋亡 ,以JurkatT细胞共培养试验检测其FasL功能。结果 :1 IFNγ、IFNα均能显著上调 786 0、GRC 1细胞的Fas表达 (P <0 0 1,P <0 0 1) ,并促进FasAb诱导的凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。 2 TNFα、IFNα能分别上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达。IFNγ能显著上调 786 0、GRC 1细胞的FasL表达(P<0 0 1,P <0 0 1) ,并促进JurkatT细胞凋亡 (P <0 0 1,P <0 0 1)。结论 :IFNγ、IFNα可增强肾癌细胞株的Fas表达 ,并促进FasAb介导的凋亡。但其亦能上调肾癌细胞FasL表达并增强其对淋巴细胞的攻击作用。     

白介素10对脑缺血大鼠神经细胞凋亡的作用研究

目的:探讨白介素10(IL-10)对大鼠脑缺血梗死灶周围神经细胞凋亡的作用。方法:成年雄性Sprague-Darley大鼠36只,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)和脑缺血 IL-10干预组(IL-10组),术后24h断头取脑,TUNEL法(Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated biotinylated UTP nick end labeling)测定梗死灶周围凋亡神经细胞的数目,免疫组化和RT-PCR法检测促凋亡基因Fas、FasL和caspase-3的表达。结果:脑缺血诱导神经细胞凋亡显著增多(P<0.05),Fas,FasL和caspase-3表达显著上调(P<0.05);IL-10干预可显著减少脑缺血神经细胞凋亡(P<0.05),并抑制FasL和caspase-3的表达(P<0.05),而对Fas的表达无明显作用(P>0.05)。结论:IL-10可抑制大鼠脑缺血梗死灶周围神经细胞凋亡,其机制可能与抑制促凋亡基因FasL和caspase-3的表达有关。     

大肠癌组织中Fas/FasL系统、nm23表达与转移的关系

目的：探讨Fas、FasL和nm23蛋白在大肠癌组织中表达与淋巴结转移和远处肝转移 的关系及临床意义。方法：应用S－P免疫组化法检测80例大肠癌组织和20例正常肠黏膜组织中Fas、FasL及nm23的表达情况。结果：55％大肠癌有不同 程度的Fas表达，低于正常肠黏膜组织中的表达，其表达与Dukes分期密切相关。分期越高，Fas表达率越低，有淋巴结 转移 的C期和有远处肝转移的D期Fas阳性表达率低于无转移的A期和B期，其中D期显著低于AB期，但C期与AB期、C期与D期的表达差异无显著性。大肠癌组织FasL和nm23的表达率分别为68．75％和57．50％，高于正常组织中的表达，表达与有无淋巴结转移或肝转移均无相关性。Fas/FasL系统与nm23表达亦无相关性。结论：Fas/FasL系统中Fas可作为反映大肠癌生物 学行为和判断预后的重要指征，nm23表达增加可能在大肠癌进展早期而不是在进展播散期起重要作用，与其转移与预后无关。     

Fas/FasL系统与慢性心力衰竭

Fas和FasL是细胞表面蛋白,与机体的分化发育、免疫调控密切相关。Fas/FasL系统在慢性心力衰竭的发生发展过程中参与免疫炎性反应、诱导心肌细胞凋亡、促进心肌细胞肥大增生、加剧心肌缺血再灌注损伤等过程。