血管内皮生长因子及其受体在早产儿视网膜病大鼠模型中的表达和作用

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及受体 (flt 1和flk 1)的表达规律与早产儿视网膜病 (ROP)视网膜血管变化的关系。方法　 86例新生未成熟SD大鼠随机分为高氧组和对照组 ,各组再随机分为 1、3、7及 14天 4个组。高氧组吸入 75 %的氧 ( 7天后置入空气中饲养 )建立ROP大鼠模型 ,对照组则在空气中饲养。取视网膜组织制作标本 ,HE染色及CD34标记血管内皮细胞观察视网膜血管改变 ,采用免疫组织化学方法测定VEGF、flt 1及flk 1在视网膜的表达。结果　①随着天数增加对照组毛细血管密度指数 (RCDI)呈逐渐上升趋势 (F =2 1 5 89,P <0 0 1) ,7天时高氧组RCDI最低 ,停氧 7天 (即 14天 )时增加 ,(F =6 7 885 ,P <0 0 1) ;② 7天时VEGF及flk 1在对照组视网膜中表达最强 ,与第 1天和第 14天比较 ,表达强度差异均有显著意义 (P <0 0 5 ) ;③高氧组 7天时与对照组比较 ,VEGF及flk 1的表达明显减弱 ,统计学处理差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;而高氧组 14天VEGF及flk 1的表达增强 ,与对照组比较 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;④flt 1随着血管的改变 ,其表达部位有所变化 ,但高氧组和对照组总体表达强度变化不明显 ,P >0 0 5。结论　当未成熟的视网膜处于高氧状态时 ,VEGF及flk 1表达减弱 ,视网膜血管减少 ;当视网     

血管内皮生长因子在早产儿视网膜病发病中的作用

血管内皮生长因子(VEGF)是内皮细胞特异性有丝分裂原,是促使血管发育和新生血管形成的最重要物质。VEGF在早产儿视网膜病的发病中起重要作用,并受多因素的调控和影响。氧浓度可进行多环节的调控,高氧抑制VEGF的表达,低氧促进VEGF的表达。胰岛素样生长因子-1的允许作用使VEGF能最大程度地诱导视网膜新生血管的生长。此外,雌激素、转化生长因子-β、血小板源性生长因子、胎盘生长因子和血管紧张素II等均对VEGF有一定的影响。随着对VEGF与早产儿视网膜病研究的不断深入,针对VEGF的一些内科治疗方法已开始动物实验研究,为早产儿视网膜病的早期干预提供了可能。     

早产儿视网膜病血清血管内皮生长因子色素上皮衍生因子的检测和临床意义

目的 观察早产儿生后血清血管内皮生长因子（VEGF）和色素上皮衍生因子（PEDF）水平的动态变化，为早期诊断及预测早产儿视网膜病(ROP)提供依据。方法 从2006年6月至2007年1月复旦大学附属儿科医院新生儿病房的早产儿中按入选标准和排除标准确认研究对象。将出生体重≤2 000 g或胎龄≤34周的患儿进行ROP筛查，将发生ROP患儿作为ROP组；选取与ROP组胎龄和出生体重相匹配的早产儿作为ROP对照组。将未发生ROP的早产儿根据胎龄分为<32周，~33+6周和~36+6周3个胎龄组。所有入选早产儿生后第7、14、21、28和35天分别进行采血，分离血清，经ELISA法检测血清VEGF和PEDF的水平。采用SPSS 13.0中混合线性模型 重复数据测量、相关性分析、t检验和单变量方差分析法进行数据分析。结果 入选的早产儿共170例，其中6例在生后14 d内自动出院失访而排除，11例发生ROP。未发生ROP的153例早产儿中，<32周54例，~33+6周48例，~36+6周51例。各胎龄组血清VEGF水平随日龄的增长而下降（r=－0.167，P=0.000），与第7天比较，差异有统计学意义（第14天，P=0.010；第21天，P=0.000），而自21 d起基本保持稳定；血清PEDF水平在生后14 d内变化无统计学意义（P=0.713），14 d后随日龄的增长而升高（r=0.287，P=0.000），与第7天比较，差异有统计学意义（第21天，P=0.008；第28天，P=0.001；第35天，P=0.000）。胎龄对VEGF和PEDF水平的影响较出生体重显著，胎龄越小，生后血清VEGF和PEDF水平越高，在出生体重的协同作用下，胎龄与VEGF和PEDF水平均呈负相关（r=－0.162，P=0.027；r=－0.165，P=0.024）。早产儿生后PEDF/VEGF比值恒定，且随日龄的增长而升高（r=0.237，P=0.000）。ROP组血清VEGF（P=0.000）水平在生后21 d均较ROP对照组低，且随日龄的增长反有上升； PEDF水平随着日龄的增长未能体现上升趋势；PEDF/VEGF比值在生后第7天显著升高（P=0.036），生后35 d内随着日龄的增长反有下降（r=－0.449，P=0.047）。结论 发生ROP的早产儿血清VEGF、PEDF水平以及PEDF/VEGF比值在生后1～3周可有变化趋势的改变，提示若早产儿生后血清VEGF水平较同胎龄者低，且随着日龄的增长反有升高，PEDF水平随着日龄的增长未能升高，PEDF/VEGF比值在第7天显著升高，在生后28 d内随着日龄的增长反有下降，可能预示着ROP的发生。这可能有助于临床医生更早地预测ROP的发生，从而积极采取有效的干预措施预防和减轻ROP的发生。     

HIF-1α干扰RNA抑制早产儿视网膜病小鼠模型视网膜新生血管形成的研究

目的：探讨特异性抑制缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达对早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity,ROP）小鼠模型视网膜新生血管的抑制作用。方法：新生C57BL/6J小鼠48只,随机分为实验组和对照组（每组24只）,采用Smith方法制备ROP模型。生后12 d 时实验组玻璃体腔注射HIF-1α特异性小片段干扰RNA 表达载体pSUPERH1-siHIF-1α,同时对照组玻璃体注射空载体。Western blot检测两组小鼠视网膜HIF-1α和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,FITC-Dextran荧光照影视网膜铺片和组织切片观察两组小鼠视网膜新生血管和新生血管内皮细胞核数目的差异。结果：实验组小鼠HIF-1α和VEGF的表达较对照组明显下降（P<0.01）;实验组突破视网膜内界膜血管内皮细胞核数较对照组明显减少（P<0.01）。结论：特异性抑制HIF-1α能有效抑制ROP视网膜新生血管的形成。     

玻璃体腔内注射抗血管内皮生长因子治疗早产儿视网膜病复发的危险因素分析

目的 探讨玻璃体腔内注射抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)治疗早产儿视网膜病(retinopathy of prematurity,ROP)的效果及复发的危险因素。方法 回顾性收集2016年1月—2021年12月在郑州大学第一附属医院出生行抗VEGF治疗的ROP患儿159例的临床资料,根据首次抗VEGF治疗后随访周期内ROP复发与否分为复发组(24例)和非复发组(135例),比较分析2组临床资料,采用多因素logistic回归分析探讨抗VEGF治疗ROP复发的危险因素。结果 经单次抗VEGF治疗后,所有159例患儿均显示附加病变消退。24例(15.1%)抗VEGF治疗后复发,复发平均时间为治疗后(8.4±2.6)周。多因素logistic回归分析显示,术前眼底出血、总用氧时间较长是ROP复发的危险因素(P<0.05),而妊娠高血压是保护因素(P<0.05)。结论 玻璃体腔内注射抗VEGF治疗ROP是有效的。术前眼底出血和氧疗时间较长可增加ROP复发的风险,而对于妊娠高血压对ROP复发的影响,还需进一步研究证实...     

血管内皮生长因子及胰岛素样生长因子-1在早产儿视网膜病变中的作用

早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity,ROP)多发生于早产儿尤其是极低出生体重儿,是导致儿童视力下降甚至失明的重要原因.视网膜新生血管形成是其主要的病理特点,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)通过控制血管内皮细胞增殖,在新生血管形成中起到了关键作用.近年来临床研究表明,玻璃体内注射VEGF抑制剂及生后早期提高早产儿血清IGF-1水平是防治ROP的有效方法.该文以国内外相关研究为背景,综述VEGF及IGF-1在早产儿视网膜病变发病过程中的作用,以及针对其作用机制而采取的防治方法.     

高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体(VEGFR1和VEGFR2)表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的关系。方法新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7d、14d和21d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似"新型"BPD的病理改变。75%氧暴露21d时,VEGF(10.9±2.7vs30.8±6.4)、VEGFR1(5.4±1.4vs15.6±3.4)和VEGFR2(11.3±2.6vs21.7±4.5)的蛋白表达均较对照组减少(P<0.05);VEGF(1.6vs3.3)、VEGFR1(0.4vs6.6)及VEGFR2(0.5vs4.9)的mRNA表达均较对照组减少(P<0.05)。结论在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。     

抗血管内皮生长因子药物治疗早产儿视网膜病的临床研究进展北大核心CSCD

随着早产儿存活率的提高,早产儿视网膜病（retinopathy of prematurity,ROP）病例明显增多,已成为发达国家首位儿童致盲性疾病,也是发展中国家重要的儿童致盲性疾病。我国每年有250000例极低出生体重儿出生,约有近30000例早产儿发生ROP,提高ROP的防治水平非常迫切。目前ROP的主要治疗方法是激光和手术治疗,但经过这些治疗后视网膜血管不再继续发育,导致远期视力受损。因此,药物治疗成为ROP研究的发展方向,     

血管内皮生长因子mRNA在高氧诱导新生鼠视网膜异常新生血管化模型中的表达

目的：分析血管内皮生长因子（VEGF）在高氧诱导视网膜异常新生血管化大鼠模型中的表达变化，探讨VEGF在高氧诱导视网膜新生血管化进程中所起的作用。方法：150只SD新生大鼠随机分为氧诱导模型组和正常对照组，各75只。氧诱导模型组大鼠吸入浓度（80±2）% 7 d，随后在正常空气环境。视网膜铺片ADP酶染色了解视网膜血管形态改变；常规苏木精-伊红染色定量反映视网膜血管增生情况，判断建模成功。半定量逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR)定量反映视网膜VEGF mRNA转录水平的变化。结果：氧诱导模型组7日龄时视网膜血管明显收缩、阻塞，出现大片无灌注区；14日龄见新生血管形成；苏木精-伊红染色见模型组14日龄大鼠视网膜出现较多新生血管内皮细胞核；RT-PCR结果显示，氧诱导模型组7 d时VEGF mRNA转录水平明显低于对照组，停氧后逐渐增强。VEGF mRNA的表达在新生血管发生前升高，随新生血管退行逐渐下降。结论：未成熟视网膜VEGF mRNA的转录水平与组织氧状态呈密切负性相关关系；停氧后视网膜的相对缺氧导致VEGF mRNA转录上调，促使视网膜血管病理性增生。VEGF的异常表达在ROP的新生血管化进程中起重要作用。［中国当代儿科杂志，2007，9（4）：371-374］     

血管内皮细胞生长因子受体2 shRNA对白血病鼠微血管生成抑制的研究

目的 研究慢病毒载体携带的血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因短发夹RNA(Lenti6/shVEGFR2)对VEGFR2表达的特异抑制及对HL60人白血病细胞所诱导血管生成的作用.方法 2005年10月至2006年2月,中山大学附属第二医院儿科选择6周龄、体重25～30g的雄性NOD/SCID小鼠15只,分成3组,实验采用双盲法.将pU6/sh VEGFR2入门克隆与pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST载体发生LR重组反应.用HL60人白血病细胞评价Lenti6/sh VEGFR2对血管生成的作用.通过检测骨微血管密度评估Lenti6/sh VEGFR2感染HL60细胞后对VEGFR2活性的特异抑制作用.结果 建立了表达VEGFR2基因小发夹RNA的慢病毒载体(knti6/shVEGFR2).在静脉异体移植的HL60白血病小鼠中,Lenti6/shVEGFR2感染显著抑制了血管生成(P＜0.05).结论 慢病毒介导的VEGFR2 RNA干扰有可能成为通过抑制病理性血管生成治疗白血病的有效方法.     

肾母细胞瘤VEGF及其受体Flk-1的表达及其临床意义

目的 探讨肾母细胞瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flk-1)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)的临床意义.方法 应用免疫组织化学(SABC)法检测33例肾母细胞瘤、瘤旁组织和6例正常肾组织中VEGF、Flk-1表达和MVD计数.观察并分析三个指标之间的相关性,同时分析其临床意义.结果 33例肿瘤组织VEGF阳性表达率81.8%,Flk-1阳性表达率69.7%,瘤旁组织VEGF阳性表达率9.1%,Flk-1阳性表达率6.1%,6例正常肾组织VEGF及Flk-1均为阴性表达,三者之问差异具有统计学意义.肿瘤组织MVD值29.7±12.4,瘤旁组织MVD值10.3±9.6,正常肾组织MVD值9.8±2.3.肿瘤组织的血管密度与后二者比较差异具有统计学意义.VEGF表达与Flk-1、MVD计数正相关,Flk-1与MVD表达正相关,VEGF、Flk-1表达在不同临床分期,及转归之问均具有显著性差异.结论 肾母细胞瘤中VEGF及其受体Flk-1呈高表达,血管生成增多,VEGF、Flk-1表达与MVD密切相关,提示VEGF及其受体Flk-1参与肾母细胞瘤的血管形成过程,促进血管生成,与预后相关.     

高浓度氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的:研究持续吸入75%氧对新生大鼠肺血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）及其受体（VEGFR1和VEGFR2）表达的影响,探讨较高浓度吸氧对肺血管发育的影响及与支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的关系。方法:新生足月Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为对照组和实验组。实验组生后12 h开始持续吸入75%氧气。分别于实验开始后的7 d、14 d和21 d处死留取肺组织标本,苏木精-伊红染色观察病理改变,免疫组化检测VEGF及其受体蛋白表达,RT-PCR检测其mRNA表达。结果实验组大鼠肺组织结构发生类似“新型”BPD的病理改变。75％氧暴露21 d时,VEGF（10.9±2.7 vs 30.8±6.4）、VEGFR1（5.4±1.4 vs 15.6±3.4）和VEGFR2（11.3±2.6 vs 21.7±4.5）的蛋白表达均较对照组减少（P<0.05）;VEGF（1.6 vs 3.3）、VEGFR1（0.4 vs 6.6）及VEGFR2（0.5 vs 4.9）的mRNA表达均较对照组减少（P<0.05）。结论:在新生大鼠中,长时间吸入较高浓度氧可能通过抑制肺血管发育导致BPD的发生。［中国当代儿科杂志,2009,11（11）：927-930］     

VEGF体外对人急性白血病细胞株HL-60细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）在体外对人急性白血病细胞株HL-607调亡的影响。方法采用形态学观察、单细胞凝胶电泳、流式细胞仪等方法对分别经过VEGF和（或）VP16处理过的急性白血病细胞株HL-60细胞凋亡进行检测。结果各种不同浓度VEGF（2μg／L、20μg／L、100μg／L）任孵育18h后可明显抑制急性白血病细胞株HL-60的凋亡，并且可对抗VP16诱导的细胞凋亡效应。结论VEGF可以抑制人急性白血病细胞的凋亡，可能是白血病的发病机制之。     

不同氧环境下新生大鼠视网膜血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子间的关系

目的研究不同氧浓度环境对新生大鼠氧视网膜病变新生血管的影响及血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在视网膜血管形成中的作用。方法新生大鼠生后即置于50%和45%～12.5%的氧环境下14d。计数每张切片上突破内界膜且与内界膜有联系的内皮细胞核数,免疫组织化学检测VEGF、PEDF在大鼠视网膜的表达。结果在暴露于45/12.5%氧环境下的大鼠,视网膜新生血管密度为92.62±23.45,持续50%氧组为14.23±12.86,对照组为12.96±10.58;VEGF阳性细胞率在45%～12.5%氧环境组、持续50%氧组分别为57.89%、4.98%,而对照组为13.20%,差异有统计学意义(F=479.461,P=0.000)。离开暴露环境后0、2d的VEGF阳性细胞率在45%～12.5%氧和持续50%氧组分别为(57.89±2.84)%、(39.38±1.10)%和(34.98±4.80)%、(27.80±4.05)%(P均=0.000)。PEDF在三组的表达差异无统计学意义(F=0.271～0.765,P均>0.05)。因此,两实验组病理形态方面差异与视网膜的总VEGF水平相关,而总的PEDF水平在各组间差异无统计学意义。结论在鼠早产儿视网膜病(ROP)模型中,血氧小的波动就可触发随后不成比例的血管增长,后者伴随比PEDF更强烈的VEGF的变化。如果这种变化同样存在,即可解释胎龄、体重、临床相似的早产儿,在相同给氧条件下的部分发生ROP,而部分不发生ROP的现象。     

Treatment of retinopathy of prematurity with vascular endothelial growth factor inhibitors

ROP remains a major cause of childhood blindness worldwide. The smallest, sickest infants develop the most severe forms of zone 1 ROP. Such eyes may not be successfully treated by near confluent laser to the avascular retina (current standard of care).     

RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因的初步研究

目的对RNA干扰抑制神经母细胞瘤细胞（LAN-5）MYCN基因表达进行初步研究。方法体外化学合成针对MYCN基因的小干扰RNA（siRNA），经脂质体Lipofectamine 2000包裹后转染神经母细胞瘤细胞，以无关siRNA和未转染的细胞为对照，采用SYBR绿色荧光染料Ⅰ的实时荧光定量RT-PCR检测siRNA的抑制效果。结果脂质体转染siRNA效率可达84.83％，化学合成的siRNA可抑制神经母细胞瘤细胞MYCN基因mRNA表达，转染72h后抑制率达58．3％。结论化学合成的siRNA可以有效抑制神经母细胞瘤MYCN基因的表达，为神经母细胞瘤基因治疗开辟了新的途径。     

血管内皮生长因子在佐剂关节炎大鼠滑膜组织中的表达

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在佐剂关节炎大鼠滑膜组织中的表达及其与关节病理积分关系。方法　通过右足垫皮内注射完全福氏佐剂建立关节炎大鼠模型 ,常规HE染色 ,计算关节病理积分 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测VEGFmRNA表达 ,免疫组织化学染色检测VEGF蛋白表达 ,观察VEGF蛋白表达与关节病理积分关系。结果　模型组组大鼠滑膜VEGFmRNA及蛋白表达在 3、8周及 2 0周时均明显高于对照组 (P均 <0 .0 1) ,而且与关节病理积分呈正相关 (r =0 .984 ,0 .96 ,0 .92 9　P均 <0 .0 1)。结论　VEGF在关节炎形成及发展过程中起重要作用 ,可直接影响滑膜新生血管形成