重组人转化生长因子β3对成纤维细胞作用的观察

目的　观察重组人转化生长因子 β3(recombinehumantransforminggrowthfactorβ3,rhTGFβ3)对成纤维细胞的作用 ,探讨其可能机制。　 方法　取体外培养的人正常皮肤成纤维细胞(normalskinfibroblast,NSFb)和增生性瘢痕成纤维细胞 (hypertrophicscarfibroblast,HSFb) ,经不同浓度的rhTGFβ3处理 ;另设不含rhTGFβ3的DMEM培养液相应细胞组作为对照。通过放射免疫和Northernblot杂交法 ,观察NSFb和HSFb中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及转录水平mRNA表达的变化。　结果　 (1)NSFb和HSFb中Ⅰ、Ⅲ型前胶原的表达有明显不同 ;(2 )与对照组相比 ,经rhTGFβ3处理的各实验组Ⅰ、Ⅲ型前胶原合成明显增加 (P <0 .0 0 1) ,Ⅰ Ⅲ型前胶原的比例变小 ;(3)rhTGFβ3对NSFb和HSFb生物学作用的影响呈明显的量效关系。在相同剂量作用下 ,HSFb的PCⅠ、PCⅢ含量高于NSFb。　结论　rhTGFβ3能有效提高成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和Ⅰ、Ⅲ型构成比中Ⅲ型胶原的相对含量 ,可能对加速创面愈合及减少瘢痕形成具有重要的作用     

外源性碱性成纤维细胞生长因子对创面愈合病理变化的影响

目的:探讨外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在伤口愈合过程中可能的愈合机制以及对瘢痕形成的影响。方法:选用成年健康新西兰兔24只,建立兔耳创面愈合模型96个,随机分为bFGF治疗组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,观察平均愈合时间、瘢痕体积、组织学变化及超微结构。结果:①bFGF组与对照组愈合时间分别为(18．4±1．6)d、(21．3±1．4)d,两组之间有显著性差异(P＜0．05)。②bFGF组瘢痕体积明显小于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0．01)。③光镜观察,bFGF组在愈合期炎症反应、血管形成及成纤维细胞增殖更明显。在愈合后的瘢痕组织中,胶原纤维排列较规则。对照组炎症反应时间较长,胶原纤维较粗大,排列紊乱。④电镜下可见治疗组成纤维细胞胶原合成持续时间较短。肥大细胞与成纤维细胞紧密接触,调整愈合全过程。后期表皮与真皮间有部分基底膜重建;对照组成纤维细胞合成持续时间较长,未见有基底膜的重建。结论:在伤口愈合过程中,外源性bFGF通过对细胞的调控有效地发挥促愈合作用;同时,通过部分重建基底膜结构,改善瘢痕的形成。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子用于烧伤治疗的临床研究

目的:观察重组人碱性成纤维细胞生长因子(Recombinant human basicfibroblast growthfactor,rhbFGF,商品名扶济复)对烧伤、供皮区、残余肉芽创面愈合的影响及安全性.方法:各类创面分别选择创面深度一致、同部位或对称部位创面的患者作为受试对象,采用随机双盲自身对照法,在常规治疗的基础上,试验组加rhbFGF,对照组不加(安慰剂组).观察同一创面不同区域或同体对称部位创面的愈合效果.结果:采用rh-bFGF治疗的浅Ⅱ°、深Ⅱ°烧伤创面及供皮区、残余肉芽创面的愈合时间均较对照组明显缩短,中期愈合率也明显加快.结论:rh-bFGF具有促进烧伤、供皮区、残留肉芽创面的愈合作用.对烧伤深Ⅱ°、供皮区创面的促愈合作用较为明显.不良反应轻微,应用较为安全.     

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对骨骼肌源性干细胞的促增殖效应

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）和表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）单独及联合应用对骨骼肌源性干细胞（muscle derived stem cells，MDSCs）生长的影响。方法取出生24h内的昆明小鼠15只，采用连续预贴壁法从小鼠后肢肌分离培养MDSCs，用含2％胎牛血清的DMEM培养基促进其向骨骼肌细胞分化。取原代MDSCs及MDSCs分化细胞，采用免疫细胞化学染色检测干细胞标志Sca-1和骨骼肌细胞标志α-Sarcomeric肌动蛋白的表达。HE染色观察细胞肌管形成。MTT比色法检测不同浓度（6．25、12．50、25．00、50．00、100．00ng／ml）的bFGF和EGF单独应用96h对MDSCs增殖的影响以及二者（100．00ng／ml）联合作用24、48、72和96h对MDSCs增殖的影响。结果从新生小鼠后肢肌成功分离培养MDSCs，免疫细胞化学染色90％以上的MDSCs呈Sca-1阳性，分化形成的肌管呈α—Sarcomeric肌动蛋白阳性。HE染色可见肌管形成。bFGF、EGF对MDSCs的促增殖效应随浓度的增加而增加。与阴性对照组比较，bFGF于12．50ng／ml出现促增殖效应（P〈0．05）；25．00ng／ml组与12．50ng／ml组比较，作用提高（P〈0．01）；50．00、100．00ng／ml组较25．00ng／ml组无明显提升（P〉0．05）；EGF的作用与bFGF类似，但于50．00ng／ml时趋于饱和。与阴性对照组比较，EGF于72h、bFGF于96h表现促增殖效应（P〈0．01），而二者联合应用于24h即表现促增殖效应（P〈0．01），并于48、72和96h增殖效应均较单独应用显著提高（P〈0．05）。结论bFGF和EGF都能促进MDSCs的增殖，联合作用更快、更强。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子联合激光治疗病理性瘢痕的多中心临床研究

目的:评价重组人酸性成纤维细胞生长因子联合激光治疗不同类型瘢痕的疗效及安全性。方法:3个研究中心,入选增生性瘢痕、萎缩性瘢痕、凹陷性瘢痕、瘢痕疙瘩患者共144例,随机分为对照组和治疗组,对照组在激光治疗基础上给予抗感染、抗炎药物,并给予口服抗氧化药物及纱布覆盖等治疗措施;治疗组在对照组基础上给予重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF),喷雾治疗,3~4喷/cm2,6~8次/天,连续应用7~14天。采用VISIA皮肤图像分析仪和SOFT5.5皮肤性质测试仪检测色素沉着、皮肤瘢痕、创面红斑状况,以及分析创面愈合时间等。结果:rh-aFGF治疗对激光引起的红斑,水肿,色素沉着,皮肤发黑具有一定的减少作用,明显缩短创面愈合时间(6.8±1.6 vs 9.2±2.1,P0.05),结痂时间(1.8±1.2 vs 3.2±1.4,P0.05)和脱痂时间(4.2±1.4 vs 6.7±2.8,P0.05);长期随访结果显示,rh-aFGF可明显减少瘢痕面积(2.4±1.6 vs 4.6±1.1cm2,P0.05),色素沉着面积(3.1±1.4vs5.6±1.7cm2,P0.05),未观察到明显不良反应事件发生。结论:rh-aFGF术中以及术后序贯应用,对缩短创面完全愈合时间,减少激光术后红斑、疼痛、浅表瘢痕以及色素沉着的发生具有积极的作用,有待进一步研究。     

人表皮生长因子与碱性成纤维细胞生长因子纳米缓释剂对成纤维细胞的影响

目的:制备碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人表皮生长因子(EGF)可降解缓释微球,考察其生物活性的保存情况,以及它们对成纤维细胞的作用。方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF、EGF的明胶缓释微球,将它们加入成纤维细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况。结果:复合bFGF、EGF的缓释微球平均粒径(11.32±3.64)μm;培养1天后各组细胞计数、吸光度(A)值差异均无显著性;5天后,两种生长因子缓释微球组细胞计数、吸光度(A)值明显高于对照组;7天后,两种生长因子缓释微球组值仍高于其它组,但差异无显著性。结论:复合bFGF、EGF的缓释微球制备工艺简便,成球性好;能较长时间地持续释放活性bFGF、EGF,可促进成纤维细胞的增殖。     

重组人表皮生长因子配合超脉冲C02激光磨削治疗痤疮后瘢痕127例

面部痤疮后瘢痕为常见的皮肤损容性疾病,采用激光磨削进行治疗,可取得明显效果,本文旨在探讨重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor, rhEGF)对面部痤疮瘢痕磨削后创面愈合的作用.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子与纳米银敷料联合治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床观察

目的:探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(recombinant human acidic fibroblast growth factor~rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗深Ⅱ度烧伤创面的疗效。方法:深Ⅱ度烧伤创面患者98例,随机采用自身对照选择相同深度的两个创面分为应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗组(简称治疗组);应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与凡士林纱布治疗(简称对照组)。结果:与对照组比较,治疗组创面愈合时间明显缩短。差异有统计学意义(P<0.05),抑(杀)菌效果显著。结论:重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)与纳米银敷料联合应用治疗深Ⅱ度烧伤创面能明显促进深Ⅱ度创面愈合,有效抑制或杀灭烧伤创面病原菌,明显缩短深Ⅱ度烧伤创面愈合时间。     

成纤维细胞生长因子和表皮生长因子及复合因子对兔ACL、MCL体外增殖作用

目的观察酸性成纤维细胞生长因子(acid fibroblast growth factor，aFGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)和表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)以及复合因子对兔前交叉韧带(anterior cruciate ligament，ACL)和内侧副韧带(medial collateral ligament，MCL)的促增殖作用。方法分离传代培养10周龄新西兰大白兔骨关节韧带的ACL和MCL的成纤维细胞，接种96孔板，并加入浓度为0(对照组)、1、5、10、50、100ng／ml的aFGF或bFGF，浓度为0(对照组)、1．56、3．13、6．25、12．50、25、50ng／ml的EGF，单独或aFGF EGF两种因子联用与细胞(n=4)共同培养48h，以XTT方法测定其促细胞增殖作用。结果3种生长因子单独应用对ACL和MCL都有促进作用，aFGF对两种细胞均存在量效关系；bFGF 1ng／ml，EGF 5ng／ml对ACL作用最好，而对MCL则是bFGF和EGF均存在量效关系。浓度为5ng／ml的aFGF与50ng／ml的EGF联合1ng／ml aFGF与3．13ng／mlEGF作用于ACL或MCL均有协同作用。结论3种生长因子对ACL和MCL均有促进作用，单独应用aFGF或联用EGF优于单一因子促进兔ACL和MCL细胞的增殖，并且提示低浓度的aFGF联用EGF优于单一生长因子。     

CTGF反义寡核苷酸对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用

目的探讨结缔组织生长因子在人瘢痕疙瘩发病机制中的作用。方法在脂质体介导下,将异硫氰酸荧光素标记的结缔组织生长因子反义寡核苷酸转染至体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,通过MTT比色实验检测细胞增殖活力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡,通过H3脯氨酸掺入法检测细胞胶原合成。结果转染后和对照组相比,反义寡核苷酸能够抑制细胞增殖及胶原合成,并促进细胞凋亡(P<001)。结论在体外,结缔组织生长因子反义寡核苷酸具有抗人瘢痕疙瘩纤维化的作用;结缔组织生长因子在人瘢痕疙瘩纤维化进程中具有促进作用。     

重组人表皮生长因子对各类皮肤创面的疗效观察

目的:观察重组人表皮生长因子(rhEGF)对各类皮肤创面的治疗作用。方法:应用重组人表皮生长因子(rhEGF)治疗各种烧伤创面及术后创面,观察不同创面的愈合时间、愈合质量、不良反应等指标。结果:共治疗75例,总有效率100%;与对照组相比,普遍愈合时间缩短(P<0.01);创面再生上皮质量较好,瘢痕轻或无;所有病例均无不良反应。结论:在各类皮肤创面的治疗中应用rhEGF,能缩短愈合时间,提高愈合质量。保湿技术可延长rhEGF的作用时间。     

重组人表皮生长因子对皮片体外培养生长的影响

为探讨不同浓度重组人表皮生长因子(rhEGF)对成人皮片体外培养生长的影响。采用约2mm~2的皮片接种到24孔培养板内加入不同浓度的rhEGF培养4天,测量皮片生长面积。结果表明:rhEGF对皮片生长有明显的调控作用,皮片生长面积与rhEGF浓度呈抛物线型相关,当浓度为5μg/L,时,皮片生长面积达到最大值7.08±2.40mm~2,约为对照组(3.64±1.98mm~2)的2倍。提示rhEGF在促进皮肤快速生长方面有潜在的临床应用价值。     

重组人表皮生长因子对皮片体外培养生长的影响

为探讨不同浓度重组人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）对成人皮片体外培养生长的影响。采用约２ｍｍ２的皮片接种到２４孔培养板内加入不同浓度的ｒｈＥＧＦ培养４天，测量皮片生长面积。结果表明：ｒｈＥＧＦ对皮片生长有明显的调控作用，皮片生长面积与ｒｈＥＧＦ浓度呈抛物线型相关，当浓度为５μｇ／Ｌ时，皮片生长面积达到最大值７．０８±２．４０ｍｍ２，约为对照组（３．６４±１．９８ｍｍ２）的２倍。提示ｒｈＥＧＦ在促进皮肤快速生长方面有潜在的临床应用价值。     

The effect of various concentrations of human recombinant epidermal growth factor on split-thickness skin wounds

Epidermal growth factor (EGF) is a potent stimulant of epithelialisation. However, topical application of EGF to achieve facilitated re-epithelialisation in partial thickness wounds has been controversial. A total of 10 pigs, each with eight 4 x 4 cm partial thickness wounds, were treated twice a day for 10 days to observe the effect of human recombinant EGF in concentrations of 0.1, 1, 5, 10, 25 ug/g, vehicle only and two controls. The control and the vehicle-only wounds each demonstrated 100% healing time (HT100) of 9.31 +/- 1.34 and 8.5 +/- 1.12 while the wounds treated with EGF ointment with concentrations of 0.1 (HT100 = 6.4 +/- 0.71), 1 (HT100 = 5.2 +/- 0.63), 5 (HT100 = 5.8 +/- 0.85), 10 (HT100 = 7.1 +/- 1.45) and 25 ug/g (HT100 = 7.4 + 0.57) demonstrated significant reduction in time to achieve re-epithelialisation. Among the EGF-treated wounds, the wounds treated with EGF concentrations of 1 and 5 ug/g achieved the fastest re-epithelialisation with evidence of substantial increase in basal keratinocyte activity observed through Ki-67 activity. In conclusion, this article demonstrates the efficacy of human recombinant EGF in facilitating re-epithelialisation of partial thickness wounds with the most efficient healing found in EGF concentrations of 1 and 5 ug/g.     

重组人表皮生长因子促进兔创面愈合及其量效关系的实验研究

目的：观察重组人表皮生长因子（rh-EGF）对兔皮肤创面愈合的促进作用及其量效关系。方法：制作兔子背部创伤模型,20只兔子背部制作共100个创面,这些创面分为实验组和对照组,实验组包括：低剂量rh-EGF（0.5μg/g）组、中剂量rh-EGF（10μg/g）组、高剂量rh-EGF（100μg/g）组,对照组包括：生理盐水组和EGF基质组,观察五组的大体形态和组织学改变、创面愈合时间和愈合率,测定创面羟脯氨酸（OHP）含量。结果：rh-EGF低剂量组、中剂量组、高剂量组、盐水组和EGF基质组的愈合时间分别为（14.7±0.67）天,（12.9±0.92）天,（11.8±0.99）天,（15.8±0.90）天,（15.5±0.85）天,P〈0.05）。组织学检查可见经rh-EGF高剂量组作用的创面肉芽组织生长活跃,创面的再上皮化迅速。rh-EGF高剂量组的创面中羟脯氨酸含量也最高。结论：rh-EGF对皮肤创面愈合有促进作用,并存在一定的量效关系。以高剂量的rh-EGF（100μg/g）促进作用最大。     

重组人表皮生长因子在预防儿童尿道下裂术后尿瘘的应用观察

目的探讨重组人表皮生长因子(rh EGF)凝胶在预防尿道下裂术后尿瘘中的应用效果。方法选取136例行尿道下裂手术的患儿,随机分为2组,每组68例。观察组瘘口表面应用rh EGF凝胶,对照组瘘口表面涂以0.9%氯化钠溶液。比较2组的治愈率、小瘘口和大瘘口发生率。结果观察组患儿临床治愈率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。2组患儿小瘘口和大瘘口发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 rh EGF凝胶用于尿道下裂术后患儿,可有效促进创面愈合,降低尿瘘发生风险。     

重组人表皮生长因子凝胶（易孚）在压疮创面床准备中的临床观察

目的：探讨重组人表皮生长因子（rhEGF）凝胶（易孚）在手术修复复杂压疮（Ⅲ期与IV期）前期创面床准备阶段的疗效。方法：将80例压疮患者随机分为治疗组及对照组,各组40例,在常规清创及生理盐水冲洗创面后,治疗组将重组人表皮生长因子凝胶（易孚）置于湿纱布上;对照组用碘伏纱布湿敷创面,换药均为1次/天。观察创面床改善情况。结果：实验组的创面床改善时间与手术后恢复时间较对照组明显缩短,差异有显著性。结论：重组人表皮生长因子凝胶（易孚）在复杂压疮创面床准备阶段疗效显著,可促进肉芽组织生长,炎症消失,有利于创面的内源性愈合并增加后续治疗的有效性。     

贝复新对美容外科手术切口愈合影响的临床研究

目的:研究重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rb-bFGF,商品名:贝复新)对美容外科手术切口愈合的影响。方法:采用自体配对对照法,共计60例美容外科手术切口,手术后切口处,每天1次自行涂抹贝复新,持续至伤口拆线。对照组伤口常规处理,观察两组切口的愈合时间和质量,以及不良反应发生情况。数据用统计学方法处理。结果:rb-bFGF组切口愈合质量显著好于对照组,愈合时间显著短于对照组。结论:rb-bFGF对美容外科手术切口的愈合作用肯定。     

重组人表皮生长因子对肛周脓肿术后创面愈合的影响

目的观察重组人表皮生长因子对肛周脓肿患者术后创面愈合的影响。方法随机将112例肛周脓肿手术患者分为治疗组(n=56)和对照组(n=56)。治疗组:创面用生理盐水消毒,以浸有重组人表皮生长因子凝胶纱条填塞。对照组:常规消毒,用甲硝唑纱条或雷佛奴尔纱条填塞。手术后3、7、10 d观察创面水肿情况及愈合时间。结果治疗组和对照组手术后3、7、10 d创面水肿评分分别为[(1.20±0.70)、(1.00±0.67)、(1.05±0.69)]和[(1.70±0.66)、(1.90±0.74)、(1.70±0.73)],两组比较差异有统计学意义(P0.05),两组创面愈合时间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论重组人表皮生长因子能明显促进创面愈合。     

人胚胎成纤维细胞作为组织工程皮肤种子细胞的可行性研究

目的：评估人胚胎成纤维细胞（human embryonic fibroblasts,HEF）作为组织工程皮肤种子细胞的可行性和优越性。方法：取人流产胚胎皮肤、正常儿童皮肤,相同条件下分离培养成纤维细胞,比较两组细胞镜下、超微结构以及增殖特性,异体淋巴细胞混合实验对比其抗原性。以第三代细胞复合鼠尾胶原构建三维培养,ELASA法分别测定两组三维构建培养液中IL-6,TGF-β1含量。结果：与普通成纤维细胞相比,胚胎成纤维细胞扩增后具有更好的细胞形态和功能,生长速度快,分裂指数高,几乎不刺激异体淋巴细胞增殖。在鼠尾胶原支架中成纤维细胞生长状态良好,并且具有一定的组织强度。胎儿成纤维细胞组培养液中的TGF-β1和IL-6在各个时相上分别显著低于和高于普通成纤维细胞组。结论：胚胎成纤维细胞是组织工程皮肤较理想的种子细胞。