慢性浅表性胃炎不同证型与胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的相关性

目的:探讨慢性浅表性胃炎不同证型与胃黏膜水通道蛋白3、4基因表达的相关性.方法:胃镜下取胃体上部黏膜,液氮罐保存,荧光定量PCR法检测胃黏膜AQP3、AQP4的基因表达.结果:脾胃湿热证组AQP3、AQP4高于胃阴不足证组和正常人组(4.5980±0.8234 vs 3.4362±0.3450,3.8495±0.5072,7.7062±0.6859 vs 6.800±0.5544,7.0384±0.6706;P<0.051,脾虚湿困证组、寒湿困脾证组AQP3均高于胃阴不足证组(4.5158±0.5603,4.8083±0.8419 vs 3.4362±0.3450,P<0.05).脾胃湿热证组、脾虚湿困证组、寒湿困脾证组3组间AQP3、AQP4比较没有明显差异(P>0.05).胃阴不足证组和正常人组间AQP3、AQP4比较也没有明显差异(P>0.05).结论:慢性胃炎中医证型不同,胃黏膜AQP3、AQP4基因表达不同,胃黏膜AQP3、AQP4可能成为脾虚湿困、寒湿困脾、脾胃湿热、胃阴不足等病证的发生机制之一.     

大承气汤对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺水通道蛋白1的影响

目的 观察急性坏死性胰腺炎( ANP)大鼠胰腺组织水通道蛋白1(AQP1)的表达以及大承气汤对其的影响.方法 160只雄性SD大鼠按随机数字法分为对照组、ANP组、地塞米松组、乙酰唑胺组及大承气汤组,每组32只.采用胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠方法制备ANP模型.地塞米松组于造模后即刻静脉给予地塞米松4 mg/kg体重;乙酰唑胺组于造模前2h用含乙酰唑胺的生理盐水1ml灌胃;大承气汤组于造模前48、24、2h分别用大承气汤2ml/次灌胃;对照组仅开腹触摸胰腺数次后关腹.制模后3、6、12、18 h分批处死8只大鼠.记录腹水量;检测血清淀粉酶;胰腺组织病理检查及电镜观察;伊文思兰(EB)血管外渗法检测毛细血管通透性;实时PCR和蛋白质印迹法检测AQP1 mRNA和蛋白表达.结果 ANP组血清淀粉酶水平显著升高,胰腺损伤明显;地塞米松组和大承气汤组淀粉酶水平较ANP组降低,胰腺损伤减轻;乙酰唑胺组淀粉酶水平高于ANP组,胰腺病理损伤较ANP组加重.造模后6h,对照组、ANP组、地塞米松组、乙酰唑胺组、大承气汤组胰腺组织EB含量分别为(13.44±2.56)、( 126.35±14.80)、(86.31±14.46)、(108.99±15.07)、(78.29±16.85) mg/L;AQP1 mRNA表达量为(170.07±22.48)％、(83.93±8.98)％、(117.09±10.70)％、(69.00±8.98)％、(112.82±11.79)％;AQP1蛋白表达量为0.23±0.06、0.10±0.02、0.32±0.03、0.13±0.02、0.45±0.04.ANP组的EB量显著高于对照组,而AQP1mRNA及蛋白的表达显著低于对照组(P值均＜0.05);地塞米松组及大承气汤组EB含量显著低于ANP组,而AQP1 mRNA及蛋白的表达显著高于ANP组(P值均＜0.05).结论 AQP1在ANP大鼠胰腺组织毛细血管渗漏的发生中起重要作用.大承气汤通过调控AQP1的表达可减轻ANP大鼠的胰腺损伤.     

久泄脾胃湿热证的免疫组织化学研究

目的 :探讨久泄 (慢性结肠炎 )脾胃湿热证与结肠镜像、炎症细胞和 P16、转化生长因子 - α(TGF- α)表达的关系。方法 :选取符合久泄脾胃湿热证患者 34例 ,脾胃气虚证 31例和正常对照组 11例进行结肠镜检查及炎性细胞和 P16、TGF- α测定。结果 :脾胃湿热证与脾胃气虚证有不同的结肠镜像 (P <0 .0 1)。肠粘膜苏木精 -伊红染色单个核细胞计数脾胃湿热组为 (32 .83± 7.0 1)个 /视野 ,明显高于脾胃气虚组 (17.71± 4 .79)个 /视野 (P <0 .0 1)及正常对照组 (14 .0 9± 5 .0 9)个 /视野 (P <0 .0 1) ,但后两组比较差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。脾胃湿热组、脾胃气虚组、正常对照组 P16表达阳性率分别为 17.6 5 %、4 1.94 %、6 3.6 4 % ;TGF- α则为 5 2 .94 %、2 5 .81%、9.0 9% ,P16和TGF- α表达存在显著的相关关系 (P <0 .0 1)。结论 :久泄脾胃湿热证有一定的炎症基础。与脾胃气虚证比较可能有不同的免疫基础     

脾气虚模型大鼠心脏组织葡萄糖转运蛋白-1和水通道蛋白-1表达水平

目的探讨脾气虚模型大鼠心脏组织中葡萄糖代谢和水转运情况。方法将实验SPF大鼠随机分为两组,采用饮食失节结合劳倦过度方法建立脾气虚大鼠模型。观察其基本活动情况,被毛、粪便情况、体温、进食量、肌力等多个方面,对模型进行评价。RT-PCR法和免疫印迹法分别检测心脏组织中葡萄糖转运蛋白(GLUT)1和水通道蛋白(AQP)1 mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,脾气虚组大鼠被毛蓬松无光泽,体重减轻,活动量减少,反应相对迟缓,大便稀软;体温、进食量、前肢抓力三者降低(P0.05),AQP1和GLUT1 mRNA及其蛋白表达明显低于对照组(P0.01)。结论脾气虚时心生理功能表现为血液生成不足,不能荣养身体,可能与心脏组织GLUT1、AQP1表达减少有关。     

血管内皮生长因子对关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响

目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)对关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达的影响.方法 体外培养乳鼠关节软骨细胞,实验分为4组,加入不同因素干预.A组(对照组):不加处理因素;B组:10 ng/mlVEGF;C组:10 ng/ml白细胞介素(IL)-1β;D组:10 ng/ml VEGF+10 ng/ml IL-1β.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Ⅱ型胶原mRNA的表达,采用蛋白免疫印迹法检测Ⅱ型胶原蛋白的表达.采用单因素方差分析进行统计学处理.结果 各组软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA的相对表达量分别为:A组1.00±0.08,B组0.78±0.07,C组0.67±0.06,D组0.57±0.04,B、C及D组软骨细胞Ⅱ型胶原的mRNA表达量均显著低于A组(P均＜0.01),D组Ⅱ型胶原的mRNA表达水平明显低于B组及C组;与A组(0.95±0.21)比较,B组(0.7 1±.0.14)、C组(0.60±0.11)及D组(0.31±0.09)的Ⅱ型胶原蛋白表达量显著降低(P均＜0.01),D组软骨细胞Ⅱ型胶原的蛋白表达水平明显低于B组及C组(P均＜0.01).结论 在骨关节炎的发病过程中,VEGF可能通过抑制关节软骨细胞Ⅱ型胶原的表达发挥重要作用.     

氟对小鼠成骨细胞增殖与分化及骨保护蛋白和核因子κβ受体活化因子配体mRNA 表达的影响

目的 观察氟对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、分化、骨保护蛋白(OPG)mRNA及核因子κβ受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达的影响.方法 取出生1～2 d昆明小鼠颅盖骨,分离成骨细胞后进行传代培养.按培养液中加入不同浓度氟化钠(NaF)将成骨细胞分为0(对照)、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4、10-3 mol/L组,分别在培养72 h或120 h后检测氟对成骨细胞增殖、分化(碱性磷酸酶,ALP)的影响;提取成骨细胞总mRNA,采用RT-PCR方法分析成骨细胞OPG mRNA、RANKL mRNA表达,并进行半定量分析.组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 培养72 h后,成骨细胞增殖组间比较差异有统计学意义(F=13.806,P<0.05);与对照组(0.434±0.010)比较,10-7～10-4mol/L组成骨细胞增殖明显增加(0.448±0.010、0.453±0.013、0.454±0.016、0.449±0.018,P均<0.05),10-3 mol/L组成骨细胞增殖降低(0.401±0.009,P<0.05).成骨细胞ALP活性组问比较差异有统计学意义(F=9.021,P<0.05);其中10-7～10-5 mol/L组[(2.447±0.756)×106、(2.603±0.183)×106、(2.687±0.886)×106 U/L]ALP活性明显高于对照组[(1.677±0.682)×106U/L,P<0.05或<0.01];10-4mol/L组[(1.479±0.366)×106 U/L]ALP活性明显低于对照组(P<0.05).OPG mRNA表达组间比较差异有统计学意义(F=11.299,P<0.05);与对照组(11000±0.000)比较,10-7～10-4 mol/L组表达增强(1.058±0.027、1.053 ±0.026、1.088±0.055、1.069±0.008,P<0.05或<0.01),10-3mol/L组表达降低(0.941±0.029,P<0.05).成骨细胞RANKL mRNA表达组间比较差异无统计学意义(F=1.311,P>0.05).RANKL mRNA/OPG mRNA比值,在104～10-5mol/L组逐渐降低,10-4、10-3mol/L组升高,但组间比较差异无统计学意义(F=1.376,P>0.05).结论 氟对小鼠成骨细胞增殖、分化呈双向调节作用,表现为低剂量刺激而高剂量抑制.低剂量染氟可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,抑制骨吸收;而高剂量可能通过降低OPG的表达来促进破骨细胞的分化、成熟,促进骨吸收.

Abstract：

Objective To investigate the effect of sodium fluoride(NaF) on proliferation, differentiation and the mRNA expression of osteoprotegerin (OPG) and receptor activator of nuclear factor κβ ligand (RAN KL) of mouse osteoblasts. Methods Osteoblasts were isolated from calvarias of Kunming mice born in 1 - 2 d and cultured. Various concentrations of NaF(0, 10-8, 10-7, 10-6, 10-5, 10-4, 10-3mol/L) were added to the culture medium, the proliferation and activity of alkaline phosphatase(ALP) was determined after 72 h or 120 h. The expression of OPG mRNA and RANKL mRNA was analyzed by semi-quantification RT-PCR. Difference among groups was analyzed by One-Way AN0VA. Difference between two groups was analyzed by LSD-t test. Results There was significant difference in cell proliferation among groups after 72 h(F = 13.806, P < 0.05). Compared with control group(0.434 ± 0.010) , the proliferation was significantly induced in 10-7 - 10-4 mol/L groups treated osteoblasts (0.448 ± 0.010, 0.453 ± 0.013, 0.454 ± 0.016, 0.449 ± 0.018, all P< 0.05), and was significantly suppressed in 10-3 mol/L group(0.401 ± 0.009, P < 0.05). There was statistic difference in the activity of ALP among groups(F = 9.021, P < 0.05). Compared with control group (1.677 ± 0.682), the activity of ALP significantly increased in 10-7 - 10-5 mol/L groups[ (2.447 ± 0.756) × 106, (2603 ± 0.183) × 106, (2.687 ± 0.886) × 106 U/L, P < 0.05 or P < 0.01 ] and significantly decreased in 10-4 mol/L group[ (1.479 ± 0.366) × 106 U/L, P < 0.05 ]. There was significant difference in the expression of OPG mRNA among groups(F = 11.299, P< 0.05). Compared with control group (1.000 ± 0.000), the expression of OPG mRNA was significantly increased in 10-7 - 10-4 mol/L groups( 1.058 ± 0.027, 1.053 ± 0.026, 1.088 ± 0.055, 1.069 ± 0.008, P < 0.05 or P < 0.01) , while significantly decreased in 10-3 mol/L group (0.941 ± 0.029, P< 0.05). There was no difference in RANKL mRNA expression among groups (F= 1.311, P> 0.05). The ratio of RANKL/OPG decreased with increasing doses of fluoride and increased in 10-4, 10-3 mol/L groups, but there was no difference between groups(F = 1.376, P> 0.05). Conclusions A biphasic pattern of proliferation and differentiation has been induced in mouse osteoblasts, which manifests stimulation effect in low doses and suppression in higher doses. Low doses of sodium fluoride suppress differentiation and maturation of osteoblasts by increasing expression of OPG mRNA, while high doses of sodium fluoride enhance differentiation and maturation of osteoblasts by decreasing expression of OPG mRNA.     

慢性胃炎脾气虚证患者胃窦黏膜内表皮生长因子和三叶因子表达的意义

[目的] 探讨慢性胃炎脾气虚证患者胃窦黏膜内表皮生长因子(EGF)和三叶因子(TFF1)表达的意义。[方法] 采用免疫细胞化学染色的方法。检测慢性胃炎脾气虚和脾胃湿热患者及胃窦黏膜内EGF和TFF1 的表达,并与正常对照者比较。[结果] 脾气虚组和脾胃湿热组患者EGF和TFF1 的表达与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0 .05,P<0. 01)。两组间EGF比较差异也有统计学意义(P<0. 01),在两组间TFF1(++)比较差异无统计学意义,但脾气虚组TFF1的阳性率高于脾胃湿热组。脾胃湿热组Hp的感染率高于脾气虚组(P<0 .01)。[结论] 脾气虚组EGF的表达高于脾胃湿热组,可能与后者Hp感染率较高有关;脾气虚组TFF1的表达高于脾胃湿热组,可能与胃黏膜严重损伤有关。     

白细胞介素10基因修饰干细胞移植对肝纤维化大鼠肝脏炎症和肝再生的影响

目的 探讨白细胞介素10(IL-10)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对大鼠纤维化肝脏的炎症反应和肝再生的影响. 方法 雌性Wistar大鼠50只随机分为4组:(1)正常组(10只):皮下注射橄榄油3 ml/kg,2次/周,首剂加倍,共注射8周;(2)模型组(16只):皮下注射体积分数40%CCl_4和橄榄油(CCl_4:橄榄油=2:3),3 ml/kg,注射次数和时间同正常组,于第4周末经门静脉分支输注1 ml无菌等渗盐水(NS);(3)BDLSC组(12只):造模方法 同模型组,于第4周末经门静脉分支输注BDLSC 1 ml(每毫升NS含BDLSC 2×10~5个),后续处理同模型组,(4)BDLSC/IL-10组(12只):造模方法 同模型组,于第4周末经门静脉分支输注IL-10基因修饰BDLSC 1 ml(每毫升NS含BDLSC 2×10~5个),后续处理同模型组.大鼠于造模第8周末处死,留取肝组织备用.采用酶联免疫吸附法检测肝组织IL-10,肿瘤坏死因子α含量,采用苏木素-伊红染色法观察肝组织病理学改变情况;分别采用实时定量PCR法和免疫组织化学法检测肝组织肝细胞生长因子mRNA和增殖细胞核抗原蛋白的表达.根据不同资料采用方差分析或Kruskal-Wallis检验进行统计学分析. 结果 BDLSC能顺利种植于肝内,并至少维持4周.大鼠肝组织的IL-10/TNF α比值,模型组为0.05±0.01,正常组为0.26±0.04(F=57.538,P<0.01),BDLSC/IL-10组为0.68±0.21,BDLSC组为0.08±0.03,模型组比正常组明显降低,BDLSC/IL-10组比正常组明显升高.单纯BDLSC移植未能改善IL-10/TNF α比值降低情况.模型组大鼠肝组织病理学改变明显,炎症反应重,BDLSC组炎症有所减轻,BDLSC/IL-10组的肝组织形态接近正常组.模型组大鼠肝组织的肝细胞生长因子mRNA和增殖细胞核抗原蛋白表达增强,分别为0.0049±0.0009和8511.80±4560.34,F值分别为84.945和82.376,P值均<0.01.BDLSC组二者表达进一步增强,分别为0.0145±0.0022和15 785.21±6431.66,,值分别为84.945和82.376,P值均<0.01,BDLSC/IL-10组较BDLSC组增强更明显,分别为0.0684±0.0190和44 371.43±13 865.65,F值分别为84.945和82.376,P值均<0.01,差异有统计学意义.结论 IL-10基因修饰BDLSC移植能减轻纤维化肝脏的炎症反应,促进肝再生,为有效治疗肝纤维化提供了依据.     

弓形虫感染对大鼠脑组织神经丝mRNA表达和细胞免疫水平的影响

目的 探讨弓形虫感染对大鼠大脑组织神经丝(NF)mRNA表达和细胞免疫水平的影响.方法 将4周龄雄性SD大鼠分成两组(每组10只):弓形虫感染组腹腔感染2×10~(10)个/L弓形虫速殖子悬液2 ml;对照组腹腔注射灭菌生理盐水2 ml.9周后,应用RT-PCR法检测大鼠大脑组织中高相对分子质量NF(NF-H)、中相对分子质量NF(NF-M)和低相对分子质量NF(NF-L)mRNA表达水平:流式细胞术检测大鼠外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞;酶联免疫吸附试验测定其血清γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素4(IL-4)水平.结果 大鼠弓形虫感染9周后,大脑组织NF-L、NF-H mRNA表达量(0.51±0.06、0.68±0.05)较对照组(0.79±0.03、0.76±0.05)明显下降(t值分别为3.41、2.17,P<0.01或<0.05);NF-M mRNA表达量(0.69±0.02)与对照组(0.72±0.03)比较.差异无统计学意义(t=2.09,P>0.05).弓形虫感染组大鼠的CD4~+T细胞[(32.19±5.01)%]和CD8~+T细胞[(20.06±2.28)%]与对照组[(35.82±3.71)%、(22.06±3.90)%]比较,差异均无统计学意义(t值分别为1.69、1.88,P均>0.05).弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ[(6.03±0.16)ng/L]、TNF-α[(18.05±1.93)ng/L]、IL-4[(15.76±1.59)ng/L]水平均高于对照组((4.77±0.13)、(9.54±1.57)、(5.67±0.42)ng/L,t值分别为2.81、2.74、2.63,P均<0.05].结论 弓形虫感染可导致大鼠大脑组织中NF亚单位mRNA表达水平下降,血清IFN-γ、TNF-α、IL-4水平升高.     

凝血酶和血红蛋白对大鼠水通道蛋白的影响及与脑积水的相关性研究

目的探讨凝血酶和血红蛋白对水通道蛋白(AQP)的影响及AQP与脑积水的相关性。方法取清洁级健康雄性SD大鼠84只,采用随机数字表法分为对照组、凝血酶组及血红蛋白组,分别通过枕大池注射等渗盐水(0.3 ml)、凝血酶[0.3 ml(10 U/ml)]及血红蛋白[0.3 ml(150 mg/ml)]制作脑积水模型,按照缺失补足的方式,保持各组大鼠24只。观察造模后1、3、7、14 d时的相对侧脑室面积、AQP1和AQP4的表达及AQP与相对侧脑室面积的相关性。结果 (1)相对于对照组,凝血酶组与血红蛋白组在1、3、7、14 d均显示脑积水,且在1 d时最明显,分别为[(6.94±0.19)%和(6.58±0.15)%比(3.40±0.13)%、(6.06±0.12)%和(5.79±0.09)%比(3.55±0.15)%、(5.80±0.13)%和(5.58±0.08)%比(3.78±0.18)%、(5.66±0.14)%和(5.47±0.13)%比(3.52±0.18)%],差异均有统计学意义(P0.01)。(2)AQP1的增加主要在脑室脉络丛上皮细胞基底膜与顶膜,AQP4的增加主要在脑室室管膜细胞。1、3、7、14 d时AQP1与AQP4的相对表达量,对照组分别为1.09±0.07和1.30±0.15、0.91±0.06和1.18±0.12、1.33±0.17和1.16±0.08、1.22±0.11和1.00±0.10,凝血酶组分别为4.40±0.14和3.69±0.11、3.88±0.11和3.17±0.07、3.55±0.07和2.86±0.13、3.36±0.07和2.70±0.07,血红蛋白组分别为4.24±0.07和3.55±0.10、3.77±0.08和3.04±0.09、3.46±0.07和2.76±0.08、3.31±0.10和2.62±0.08;凝血酶组与血红蛋白组在各时点的AQP1与AQP4的相对表达量均明显高于对照组,组间差异均有统计学意义(均P0.01);血红蛋白组各时点的AQP1与AQP4 mRNAs的相对表达量与凝血酶组的差异均无统计学意义(均P0.05);在凝血酶组和血红蛋白组中,相对于1 d时,AQP1与AQP4的表达在3、7、14 d有明显下降(均P0.01);相对于3 d时,AQP1在7、14 d均有明显下降(均P0.05),AQP4在14 d时下降,差异均有统计学意义(均P0.05)。(3)凝血酶组各时点AQP1(r=0.983,P0.01)及AQP4(r=0.987,P0.01)相对表达量与相对侧脑室面积呈正相关;血红蛋白组各时点AQP1(r=0.9 6 4,P0.0 1)及AQP4(r=0.9 6 2,P0.0 1)相对表达量与相对侧脑室面积呈正相关。结论蛛网膜下腔注射凝血酶与血红蛋白后可引起脑室及其周围区域AQP1与AQP4的表达增加,凝血酶与血红蛋白可能是蛛网膜下腔出血后脑积水的重要介导因素。     

非酒精性脂肪性肝病客观化指标与中医辨证分型关系探讨

目的:探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)客观化指标与中医辨证分型的关系。方法:筛选NAFLD患者176例及健康对照组60例,观察记录两组人员中医证侯、肝功能、血脂、B超、CT肝脾比值结果,根据临床证候对`NAFLD患者进行中医辨证分为肝郁脾虚型、湿热内蕴型、痰瘀互结型、肝肾不足型4组,与对照组及各组间相互比较,分析辨证分型与客观化指标之间的关系。结果:NAFLD患者中医辨证分型以肝郁脾虚居多(29.54%)。各临床分型与对照组相比其客观化指标均有不同程度的异常。各组间比较ALT升高多集中在湿热内蕴型和痰瘀互结型,TG升高多为痰瘀互结型,LDL、TC升高多为肝肾不足型,CT肝脾比值降低以湿热内蕴型和痰瘀互结型为甚,B超呈重度改变多发于湿热内蕴型。结论:NAFLD患者客观化指标与中医辨证分型具有一定的内在关系。     

原发性肝癌不同血瘀证患者肝组织微小RNA表达差异的初步研究

目的对原发性肝癌中医辨证分型提供客观的量化标准。方法采用微小RNA（miRNA）芯片检测、实时定量PCR验证,对比观察原发性肝癌气虚血瘀证、肝郁血瘀证、肝胆湿热证及肝瘀痰结证患者（各3例,分别以证型命名组名）肝组织10种miRNA表达水平的差异;并与3例正常肝组织（正常组）进行比较。结果 miR-122-3p各证型组均明显高于正常组（P〈0.05）,气虚血瘀组明显高于其他各证型组（P〈0.05）;miR-30b-5p在肝胆湿热组明显低于其他各证型组（P〈0.05）,其他各证型组与正常组比较无显著性差异;miR-182-5p在气虚血瘀组、肝郁血瘀组和肝胆湿热组均明显高于正常组（P〈0.05）;miR-221-5p在肝胆湿热组和肝郁血瘀组明显低于其他各证型组及正常组（P〈0.05）,但这两组间无显著性差异;miR-221-3p在肝郁痰结组高于其他各证型组,但无统计学差异;miR-21-5p在气虚血瘀组、肝郁血瘀组和肝郁痰结组均高于肝胆湿热组和正常组,但无统计学差异。miR-222-3p、miR-214-3p、miR-491-3p、miR-422a各组间未见明显差异。结论原发性肝癌不同血瘀证患者肝组织miRNA水平存在显著性差异;本研究为原发性肝癌的中医辨证分型提供了客观的量化标准。     

清浊安中汤对脾胃湿热证患者血胃泌素和胃动素及生长抑素含量的影响

目的：探讨脾胃湿热证患者血胃泌素，胃动素，生长抑素含量变化及中药自拟方清浊安中汤对其的影响。方法：选取脾胃湿热证患者31例，服用自拟方清浊安中汤进行治疗。以放射免疫法观察血中胃泌素，胃动素和生长抑素水平，并与15例脾气虚证患者及10例健康志愿者对照。结果：经过2-3周的治疗，93.5%的脾胃湿热证患者症状完全消失；经治疗患者胃泌素，胃动素水平恢复正常，脾胃湿热证症状也随之解除。结论：脾胃湿热证与胃泌素水平的升高有关；胃动素可能与脾胃湿热证和脾气虚证的某种共同病理特性有关；生长抑素与脾胃湿热证的关系尚有待进一步的研究；清浊安中汤是治疗脾胃湿热证的良药。     

不同证型胃炎大鼠能量代谢指标差异的探讨

[目的]探讨不同证型胃炎大鼠能量代谢指标的差异。[方法]选取40只清洁级SD大鼠,随机分成4组:脾胃湿热组,脾胃虚弱组,单纯胃炎组,正常组。造模5周后取胃黏膜和骨骼肌通过酶促反应,检测并比较各组能量代谢指标ATP酶活性。[结果]与正常组胃黏膜和骨骼肌ATP酶活性相比,脾胃虚弱组偏低(P<0.01),单纯胃炎组、脾胃湿热组偏高(P<0.01);单纯胃炎组、脾胃虚弱组均较脾胃湿热组偏低(P<0.05、P<0.01)。[结论]脾胃虚弱组数值明显偏低,表明长期处于脾胃虚弱状态的大鼠ATP合成减少;脾胃湿热组数值明显偏高,表明基础酶活性和能量代谢增高。     

结直肠息肉水通道蛋白3、4的表达

目的:观察水通道蛋白(aquaporin,AQP)3、4蛋白在结直肠息肉中的表达.方法:选择结直肠息肉患者103例,肠镜下收集115个息肉组织样本和10例正常人结直肠黏膜组织样本,采用免疫组织化学方法检测AQP3、4的蛋白表达.结果:AQP3、4蛋白在人结直肠黏膜上皮细胞呈阳性表达,均表达在细胞的基底部与侧面.AQP3、4蛋白在炎性息肉中的表达均明显高于正常组,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05);增生性息肉AQP3蛋白表达低于正常组,差异有显著性意义(P<0.01);腺瘤AQP4蛋白表达低于正常组,差异有显著性意义(P<0.01).AQP3与AQP4在结直肠息肉及正常结直肠黏膜中的表达呈正相关(r=0.61,P=0.000).结论:AQP3、4蛋白在结直肠息肉中存在异常表达,二者之间呈正相关.     

温病湿热证大鼠IL-23表达水平的变化及应用加味藿朴夏苓汤干预后的影响

目的观察大鼠血清与舌组织IL-23表达水平的变化以及应用加味藿朴夏苓汤干预后的影响,探讨IL-23在湿热证发病中的作用和意义。方法 96只大鼠随机分为正常组、模型组和干预组。多因素复合造模方法制备温病湿热证大鼠模型,干预组第25天起予加味藿朴夏苓汤治疗,连服7 d。于造模后4、24、48、72 h四个时相点分批处死大鼠并取材。ELISA法检测大鼠血清IL-23的水平,SP免疫组化法检测舌组织IL-23的表达。结果湿热模型组大鼠血清与舌IL-23表达水平在各时相点均显著高于正常组(P0.01),药物干预组则在各时相点均显著低于模型组(P0.01)。随时间点变化模型鼠血清与舌IL-23均呈逐渐下降趋势,在4 h时最高;血清IL-23的含量水平48 h和72 h时相点分别与4 h时相点比较差异有统计学意义(P0.05),72 h时相点与24 h时相点比较差异亦有统计学意义(P0.05);舌IL-23的表达水平在各时相点分别比较差异均有统计学意义(P0.01)。在湿热模型组病情分级为轻、中、重度的大鼠血清与舌IL-23的表达水平均呈逐渐升高趋势,组间比较差异均有统计学意义(P0.01);均与病情的严重程度呈正相关(P0.01)。结论 IL-23参与了湿热证的发生、发展过程,其表达水平变化与湿热证的病情严重程度密切相关。加味藿朴夏苓汤可减少温病湿热证大鼠IL-23的表达,抑制炎症反应而减轻病情严重程度。     

大鼠脑缺血再灌注后水通道蛋白-4表达与弥散加权成像表观弥散系数的相关性研究

目的 探讨缺血再灌注后脑组织表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)与水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)表达的相关性.方法 线栓法建立右侧大脑中动脉闭塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)模型,70只Wistar 大鼠随机分为假手术组、MCAO 30 min组、MCAO30 min再灌注30 min组、MCAO 30 min再灌注60 min、MCAO 60 min组、MCAO 60 min再灌注30 min和MCAO 60 min再灌注60 min组,每组10只.各组大鼠分别行弥散加权成像(diffusion-weightedimaging,DWI)检测相对ADC(relative ADC,rADC),用红四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色检测缺血Ⅸ面积比,应用免疫组织化学、原位杂交和逆转录聚合酶链反应等检测AQP4表达.结果 假手术组DWI末见异常信号,其他MCAO 30 min组、MCAO 60 min组、MCAO 30 min再灌注30 min组、MCAO 30 min再灌注60 min、MCAO 60 min再灌注30 min和MCAO 60 min再灌注60 min组DWI高信号病灶范围由小扩大,随后逐渐缩小,缺血面积旱相同改变.MCAO 30 min组和MCAO60 min组AQP4表达毋显著上调,再灌注后各组AQP4表达显著下降,与MCAO 30 min组和MCAO60 min组相比均差异显著(P均<0.05),rAOC与AQP4表达呈负相关(r=-0.72,P<0.01).结论 缺血再灌注后脑绀织AQP4表达与ADC变化密切相关,DWI可间接反映AQP4表达水平.     

Traditional Chinese medicine syndromes of chronic hepatitis B with precore mutant

ABM: This study aims at exploring the distribution of TCM syndromes in CHB patients with HBV pre-core mutation (1896) and the relationship between pre-core mutation and T lymphocytes subgroup, through which to provide objective data on clinical syndrome differentiation of TCM, and further to suggest the therapeutic principle and guide clinical treatment. METHODS: One hundred and forty CHB patients were evenly divided into two study groups, HBV pre-core mutant group and HBV pre-core wild-type group. Besides, 30 healthy blood donors were selected as a healthy control group. HBV-labeled compound, T lymphocytes subgroup, and HBV-DNA pre-core mutant were tested in the study groups. T lymphocytes subgroup were also tested in the control group. All the patients were both diagnosed by syndrome differentiation of TCM and western medicine. RESULTS: The most common syndrome in mutant group was damp-heat combined with blood stasis, and the most common syndrome in the wild-type group was damp-heat stasis in the middle-jiao. There were more cases of medium and severe hepatitis in mutant group than that in wild-type group. The content of CD4+ lymphocytes and CD4+/CD8+ ratio were decreased gradually (healthy control group>wild-type group>mutant group). In the wild-type group, severe and medium CHB patients had considerably lower level of them than mild CHB patients. However, in the mutant group, the opposite result appeared. Meanwhile, the content of HBV-DNA in mutant group was higher than that in wild-type group. CONCLUSION: Damp, heat, toxin and blood stasis were the basic pathogens of CHB, whether pre-core mutant or not. CHB with precore mutant may lead to more severe hepatitis. The decreased content of CD4+ lymphocytes and ratio of CD4+/CD8+ may be taken as one of the indices in confirming the deficiency syndrome of CHB patients with pre-core mutation.     

慢性胃病脾虚患者胃窦粘膜胃泌素细胞和分泌生长抑素细胞的变化及其意义

目的：观察以慢性胃病为主的脾虚患者胃窦粘膜分泌胃泌家(Gas)细胞(G细胞)、生长抑素(SS)细胞(D细胞)与脾虚证发生的关系。方法：将84例脾虚患者分为脾胃虚寒组、脾虚夹热组、胃阴不足组、脾胃湿热组、肝胃不和组，应用免疫组化技术标记胃窦粘膜G、D细胞，并定量分析。结果：以慢性胃病为主的脾虚证患者G、D细胞数均减少，D细胞面积缩小，G/D细胞数和细胞面积比值均增高(P＜0．05)。结论：G、D细胞的变化可能是慢性胃病脾虚证胃肠功能障碍的一个重要病理机制。