胚胎胸腺细胞在体外胚胎胸腺器官培养中的发育研究

体外可调控的Ｔ细胞培养系统的建立 ,为研究Ｔ细胞发育及Ｔ细胞和基质细胞的作用提供了很好的实验模型 ,如胸腺或基质细胞的分离培养和胚胎胸腺器官培养 (ＦＴＯＣ) 〔1〕。近年来研究表明 ,长期体外培养的胸腺基质细胞 ,由于表型的变化如ＭＨＣⅡ类分子丢失 ,而失去了支持Ｔ细胞发育的能力 ,其应用受到限制。而ＦＴＯＣ保持了体内胸腺的三维空间结构、恒定的细胞表型、适宜的细胞 细胞间的相互作用、基质细胞分泌的多种细胞因子 ,为研究Ｔ细胞的发育提供了更符合生理的胸腺微环境。研究表明 ,ＦＴＯＣ是目前唯一的能支持前体Ｔ细胞完成整…     

PWM对人胎儿胸腺细胞的增殖效应

本文报道ＰＷＭ单独作用及与其它刺激因子或辅佐细胞共同作用，对胎儿胸腺细胞增殖的影响。据比重不同将胎儿胸腺细胞分为Ｔｈｙ－Ｌ（比重≤１．０７４）和Ｔｈｙ－Ｈ（比重＞１．０７４）两个亚群。用抗－ＣＤ３，抗－ＣＤ４，抗－ＣＤ８单抗加补体杀伤法分别去除ＣＤ＾＋３，ＣＤ＾＋４和ＣＤ＾＋８胸腺细胞。结果表明：ＰＷＭ可单独诱导胎儿胸腺细胞增殖，对Ｔｈｙ－Ｌ亚群的促增殖作用显著，但对Ｔｈｙ－Ｈ亚群无影响，ＣＤ＾－     

雌二醇在体外对脾细胞和胸腺细胞增殖反应的影响

本文研究在体外细胞培养系统中直接加入雌二醇(E_2)对脾细胞和胸腺细胞的作用,发现高剂量(≥5μg/ml)的E_2可直接抑制脾细胞对ConA诱导的增殖反应;但在胸腺细胞的实验中,无论低或高剂量(10~(-2)ng/ml～20μg/ml)的E_2均未发现它对ConA诱导的增殖反应产生明显影响。表明E_2在体外对脾细胞和胸腺细胞的作用存在差异。     

人胚胸腺细胞对多种刺激剂反应性的研究

本文研究结果表明:PHA、SEB(葡萄球菌肠毒素B)、A23187、TPA均有不同程度诱导人胚胸腺细胞活化和增殖作用;TPA单独诱导作用较弱,但加入低浓度rHuIL-2可显著地促进其诱导增殖作用。而加入rHuIL-1则无促进作用;PHA和TPA间在诱导人胚胸腺细胞增殖中有很强的协同效应,而A23187对PHA诱导的增殖有明显的抑制作用,对TPA诱导的增殖有显著的促进作用。不同(20～36)周龄人胚胸腺细胞对上述刺激剂的反应结果基本一致。此结果对于了解人胚胸腺发育与胸腺细胞功能以及对于完善人胚胸腺细胞活化途径均有一定的意义。     

胸腺细胞的发育与凋亡

骨髓淋巴干细胞进入胸腺后，经过初期、中期、后期阶段的分化，最终成熟为具有免疫功能的Ｔ细胞。胸腺细胞的成熟过程实质上是一选择过程，不合要求的细胞如自身反应性细胞随时被淘汰（负向选择），而正常分化的细胞被保留下来（正向选择）。细胞凋亡是负向选择时细胞死亡的主要机制，与正向选择也有密切关系。对于外周成熟Ｔ细胞而言，激活诱导的Ｔ细胞凋亡（ＡＩＣＤ）在控制免疫反应的强度、维持外周耐受方面具有重要的意义。象细胞增殖一样，细胞凋亡也受到严格地调控。     

CD4T细胞缺乏对胸腺细胞凋亡影响的研究

通过对ＬＥＣ大鼠和正常对照鼠胸遥细胞的凋亡的研究，探讨了ＣＤ４Ｔ细胞缺乏对胸腺细胞凋亡的影响。电子显微镜，抗ｓｓ－ＤＮＡ抗体免疫细胞化学染色及ＤＮＡ片段梯形电泳带结果提示：ＣＤ４Ｔ细胞缺乏可诱导不成熟Ｔ细胞凋亡，对成熟Ｔ细胞无明显影响。     

几种细胞因子对成年小鼠CD4^—CD8^—胸腺细胞的增殖作用

本实验观察了多种细胞因子对成年小鼠CD4~-CD8~-(Double negative,DN)胸腺细胞增殖和分化的影响。结果表明,IL-7能诱导DN细胞增殖;IL-2只在高浓度下轻度支持其增殖。IL-1α、IL-4、IL-6、SCF(干细胞因子)、TGF(转化生长因子)-β_1和TGF-β_2单独作用不能支持DN细胞生长。IL_2、IL—6和SCF与IL—7联合应用不同程度地协同促进DN细胞增殖。TGF—β_1和TGF—β_2则抑制IL—7诱导的DN细胞增殖。PMA活化的DN细胞能对IL—2、IL—4或IL—7应答进行增殖。     

IL—2对人胚胎胸腺细胞的增殖作用

本文报道IL-2对HFT的增殖反应性。12.5U/ml的IL-2能诱导HFT明显的增殖作用,与IL-2反应的高峰在培养后的第三天,细胞密度以1.25×10~6/ml为宜。这种增殖作用与培养体系中是否含有血清成分无关。这些提示,在HFT上表达有IL-2受体。这对人类个体发育的认识将是重要的,且对HFT的有关应用具有参考意义。     

胸腺细胞的凋亡部位:在胸腺内还是在胸腺外

ＣＤ４－ＣＤ８－前体细胞（Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｔｈｙｍｏｙｔｅｓ，Ｐｒｅ－Ｔ）进入胸腺后，随即开始γ、δ和βＴＣＲ基因的重排，其中一个结局是发展成ＣＤ４－ＣＤ８－γδ＋Ｔ细胞，而另一个结局是发育成ＣＤ４＋ＣＤ８＋双阳性（ｄｏｕｂｌｅｐｏｓｉｔｉｖｅ，Ｄ...     

小鼠胸腺树突状细胞系MTSC4诱导早期T细胞株C320…

通过流式细胞仪分析了我室自建的小鼠胸腺树突状细胞系ＭＴＳＣ４与小鼠肿瘤性早期Ｔ细胞株Ｃ３２０细胞共育后，Ｃ３２０细胞表达ＩＬ－２Ｒ的状态，分析了ＣｏｎＡ和ＰＨＡ对Ｃ３２０及与ＭＴＳＣ４共育后的Ｃ３２０表达ＩＬ－２Ｒ的诱导促进作用以及ＩＬ－２Ｒ＾＋Ｃ３２０细胞在脱离外源性刺激后其比例的变化，ＭＴＳＣ４及ＣｏｎＡ和ＰＨＡ在不同程度上抑制Ｃ３２０细胞的无限制增殖，ＣｏｎＡ和ＰＨＡ对与ＭＴＳＣ４共育后的Ｃ     

实时定量PCR检测正常人外周血T细胞和胸腺细胞中sjTRECs水平

目的了解正常人外周血T细胞和胸腺细胞中信号结合T细胞受体删除 DNA环(sjTRECs)的含量,从而推测正常人中幼稚T细胞的含量和胸腺的输出功能. 方法利用实时定量PCR和TaqMan方法检测11例正常人外周血单个核细胞、7例儿童和3例成人胸腺细胞DNA中sjTRECs的水平. 结果正常人中sjTRECs含量分别为8.83±4.81/1000个外周血单个核细胞;27.31±3.23/1000个成人胸腺细胞和170 .29 ±59.52/1000个儿童胸腺细胞. 结论 sjTRECs水平与年龄有关,正常人外周血中每1000个单个核细胞中约含4.5个幼稚T细胞.     

地塞米松及CD4T细胞缺乏对胸腺细胞Apoptosis影响的再观察

地塞米松及ＣＤ４Ｔ细胞缺乏对胸腺细胞Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ影响的再观察姜玉珍张凤春林玉梅张秀梅（白求恩医科大学第三临床学院，长春１３００３１）王志申（吉林省人民医院，长春１３００２１）中国图书分类号Ｒ９７７．１１Ｒ９６７细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）在胸...     

初代培养的胸腺基质细胞对小鼠胸腺细胞的粘附和吞噬作用

目的 探讨胸腺基质细胞（TSC）对胸腺细胞的调节作用。方法 应用光镜、电镜和流式细胞术等，观察初代培养的TSC对胸腺细胞发育的调节作用。结果 光镜和电镜均可见，TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞，其中部分胸腺细胞发生凋亡。尽管与TSC共培养的胸腺细胞存活率高，凋亡率低，但其总数却显著减少。结论 TSC可通过粘附和吞噬作用，清除部分胸腺细胞。     

地塞米松诱导大鼠胸腺细胞凋亡

细胞凋亡是细胞受到特异刺激后启动内在“自杀”程序而引起的一种控制性死亡。为观察糖皮质激素对免疫器官──胸腺的调节作用,本文加地塞米松与大鼠胸腺细胞共同孵育,胸腺细胞是现了凋亡的典型形态学改变;提取该培养细胞的ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳可见典型“阶梯状”条带,提供了该细胞发生凋亡的生物化学依据。本研究结果表明糖质激素能诱导胸腺细胞凋亡。     

两种小鼠胸腺基质细胞对胸腺细胞凋亡的不同作用

采用两种体外建系的小鼠胸腺基质细胞（ＴＳＣ）系，即上皮样ＴＳＣ（ＭＴＥＣ１）和树突状ＴＳＣ（ＭＴＳＣ４），观察其对胸腺细胞凋亡的影响。小鼠胸腺细胞在体外培养过程中，可自发地出现细胞凋亡的特征，表现为ＤＮＡ呈梯度断裂片段，细胞经ＦＡＣＳ分析出现亚二倍体ＤＮＡ波峰，以及Ｆｅｕｌｇｅｎ′ｓ染色镜检所见的ＤＮＡ凝聚和断裂。胸腺细胞在与ＴＳＣ共育后，在ＭＴＥＣ１组可见其凋亡过程受到抑制和存活率的增加；在ＭＴＳＣ４组，仅在共育１２至１８小时时，见到胸腺细胞凋亡加强，而其存活率不受影响。结果提示在胸腺细胞发育过程中，其阴性选择作用的主要机制之一的ＰＣＤ过程受不同来源的胸腺基质细胞的调节。     

松果体及其褪黑素影响胸腺T细胞发育周期

目的 探讨松果体对胸腺分化发育时细胞周期的影响。方法 选用清洁级SD大鼠,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除、松果体摘除 褪黑素腹腔注射7．5mg／kg组和松果体摘除 褪黑素腹腔注射15mg／kg组。术后4、8周取材。用ABC法染胸腺cyclin A、cyclinE阳性细胞,计算机图像分析仪测量各阳性细胞面积及其染色强度。以碘化丙啶(PI)一步插入性DNA定量荧光染色法,流式细胞术测定胸腺T淋巴细胞不同细胞周期的分布状况。以Rrr-PCR法检测褪黑素对胸腺细胞周期依赖性激酶1β表达的影响。结果 松果体摘除对胸腺cyclin E表达的影响甚于对cyclin A的影响,促进cyclinE的合成,松果体摘除后胸腺细胞周期的变化表现为G1期减少,S期和G2 M期百分比增多。补充褪黑素后上述改变有所恢复,但与剂量不成线性关系,且对皮髓质影响有所不同。褪黑素能促进胸腺细胞表达细胞周期依赖性激酶1β。结论 松果体摘除能显著影响胸腺细胞分化发育,补充褪黑素能缓解相关影响。     

α1胸腺肽对胸腺细胞发育和成熟的影响

目的:探讨α₁胸腺肽对胸腺细胞发育的影响。方法:测定CD4⁺CD8⁺胸腺细胞群的比例及 5-FU和胸腺肽处理组在CD4^-CD8^-胸腺细胞群上Hh信号的Smo分子(增生反应的潜在阴性调节者)的表达效果来估价胸腺肽对胸腺细胞成熟和发育的影响。结果:发现α₁胸腺肽在30μg/kg的低剂量下显示活性。流式细胞仪分析根据CD4^-CD8^-胸腺细胞上Hh信号的Smo分子的表达确定α₁胸腺肽在此剂量加快了胸腺细胞的成熟。结论:α₁胸腺肽能加快CD4^-CD8^-胸腺细胞向CD4⁺ CD8⁺阶段的发展。     

小鼠胸腺上皮细胞株MTECB与胸腺细胞结合的形态学观察

用本室建立的小鼠胸腺上皮细胞株ＭＴＥＣＢ，分别在１．无钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）；２．无钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）；３．含钙镁Ｈａｎｋ液中（４℃）下；４．含钙镁Ｈａｎｋ液中（３７℃）与胸腺细胞共育（基质细胞：胸腺细胞＝１：１０），光镜和扫描电镜下观察它们之间的结合特点。发现在各种实验条件下，９０％的ＭＴＥＣＢ能与胸腺细胞结合，这种结合从形态上分为两种形式，其一为胸腺细胞均匀结合于ＭＴＥＣＢ周围，呈花     

实时定量PCR检测正常人外周血T细胞和胸腺细胞中sjTRECs水平

目的了解正常人外周血T细胞和胸腺细胞中信号结合T细胞受体删除 DNA环(sjTRECs)的含量,从而推测正常人中幼稚T细胞的含量和胸腺的输出功能. 方法利用实时定量PCR和TaqMan方法检测11例正常人外周血单个核细胞、7例儿童和3例成人胸腺细胞DNA中sjTRECs的水平. 结果正常人中sjTRECs含量分别为:8.83±4.81/1000个外周血单个核细胞;27.31±3.23/1000个成人胸腺细胞和170 .29 ±59.52/1000个儿童胸腺细胞. 结论 sjTRECs水平与年龄有关,正常人外周血中每1000个单个核细胞中约含4.5个幼稚T细胞.