血管内皮生长因子反义寡核苷酸抑制Lewis肺癌的血管形成

目的 探讨反义寡核苷酸(ASODN)抑制Lewis肺癌细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因表达的效应.方法 将人工合成的VEGF反义寡核苷酸(ASODN)、正义寡核苷酸(SODN)加入培养的Lewis肺癌细胞中,检测Lewis肺癌细胞中VEGF蛋白的表达,同时测定各上清液刺激血管内皮细胞生长的受抑情况.结果 VEGF-ASODN能明显抑制Lewis肺癌细胞VEGF蛋白的表达,而且可以通过抑制VEGF的表达抑制内皮细胞的生长.结论 VEGF反义寡核苷酸抑制肺癌细胞表达VEGF,有望成为肺癌基因治疗的一种新的治疗手段.     

VEGF-C表达对胰腺癌细胞凋亡的影响

目的 研究VEGF-C反义寡核苷酸对胰腺癌原位种植瘤模型中PANC-1细胞凋亡的影响.方法 建立人胰腺癌细胞株PANC-1裸鼠原位种植瘤自发性淋巴结转移模型,分离、原代培养原位灶和淋巴结转移灶中的胰腺癌细胞,并应用real time定量PCR、流式细胞术检测VEGF-C反义寡核苷酸转染对其凋亡能力的影响.结果 VEGF-C反义寡核苷酸抑制胰腺癌细胞VEGF-C的表达后,淋巴结转移灶组PANC-1细胞凋亡率为(15.2±2.7)%,显著高于空白组、SODN组(P＜0.05);原发灶组PANC-1细胞凋亡率为(5.5±2.7)%,与空白组、SODN组的差异无统计学意义(P＞0.05);并且淋巴结转移灶组PANC-1细胞的凋亡率高于原发灶组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 VEGF-C表达下调能显著诱导淋巴结转移灶中胰腺癌细胞的凋亡.     

血管内皮生长因子促血管形成作用及其调控

血管内皮生长因子是一种具有促血管生成活性的功能性蛋白,它通过与特异性受体的结合,发挥生理功能:(1)促血管内皮细胞分裂从而促进新生血管形成;(2)增强血管通透性的功能.其活性的发挥受到多因素、多水平的调节,如:缺氧、癌基因、细胞因子、细胞间质成分等.本文从血管内皮生长因子的促血管形成机制及其调控因素等方面对其生物学行为和特性作一综述.     

腺病毒介导的反义血管内皮生长因子基因转染治疗胰腺癌的实验研究

目的：构建并鉴定反向插入VEGF165cDNA的重组腺病毒,探讨腺病毒介导的VEGF165反义核酸治疗胰腺癌的可行性。方法：应用基因重组技术，将513bp的人VEGF165cDNA反向克隆入腺病毒粘粒载体pAxCAwt。重组粘粒与腺病毒DNA－TPC混合后以磷酸钙共沉淀法转染293细胞制备重组腺病毒。建立胰腺癌裸鼠皮下种植瘤模型，瘤体内直接注射重组腺病毒，观察肿瘤的生长及血管生长情况。结果：成功构建了反向插入VEGF165cDNA的腺病毒粘粒载体pAxCAwt-αVEGF并制备出高滴度的重组腺病毒。实验第5周时肿瘤生长速度Ad-αVEGF治疗组比PBS和Ad-LacZ对照组均明显减慢（P＜0．01）；肿瘤微血管密度Pd-αVEGF治疗组比两个对照组均明显减少（P＜0．01）。结论：腺病毒介导的VEGF165反义核酸可以抑制胰腺癌的血管生成和肿瘤的生长，为抗血管生成的基因治疗提供了实验依据。     

骨肉瘤微血管密度与血管内皮生长因子表达的关系

目的 研究骨肉瘤微血管密度（MVD）与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达是否具有相关性。方法 对33例骨肉瘤组织标本应用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞。计数骨肉瘤MVD;用VEGF多克隆抗体检测肿瘤细胞浆中VEGF的表达情况。结果 （1）骨肉瘤MVD与VEGF表达程度呈正相关,VEGF高表达组的MVD平均值明显高于VEGF低表达组;（2）骨肉瘤中VEGF的表达和MVD与骨肉瘤组织病理分级无关。结论 VEGF是骨肉瘤血管形成的一种重要调节因子。     

VEGF-C及其受体VEGFR-3在胃癌淋巴转移中的作用

目的:研究胃癌组织中血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其受体3(VEGFR-3)的表达与淋巴管生成和淋巴结转移的关系,探讨其在胃癌淋巴转移中的作用和意义.方法:采用RT-PCR检测67例胃癌及正常胃组织中VEGF-C及VEGFR-3 mRNA表达,酶组织化学方法行淋巴管染色并计数,同时分析胃癌淋巴结转移情况.结果:胃癌组织中VEGF-C及VEGFR-3 mRNA阳性表达分别为62.69%(42/67)、58.21%(39/67),显著高于在正常胃组织中的表达[23/67(34.3%)、21/67(31.3%),P＜0.01],胃癌组织中两者表达有密切联系(P＜0.01);在两者阳性表达的病例中,癌组织淋巴管计数和淋巴结转移显著增多(P＜0.05或0.01).结论:VEGF-C作用于VEGFR-3可诱导胃癌组织淋巴管生成,促进淋巴道转移;阻断两者信号转导、抑制胃癌淋巴管生成有望成为抗胃癌淋巴道转移治疗的新靶点.     

Effect of HIF-1α on VEGF-C Induced Lymphangiogenesis and Lymph Nodes Metastases of Pancreatic Cancer

The effect of hypoxia inducible factor-1α(HIF-1α) on vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) and the correlation between HIF-1αand lymphangiogenesis and lymph nodes metasta-ses (LNM) in pancreatic cancer were investigated. Immunohistochemical SP method was used to detect the protein expression of HIF-1αand VEGF-C, and Lymphatic vessel density (LVD) was determined by stain of VEGFR-3, collagen type IV in 75 pancreatic head cancers from regional pancre-atectomy (RP) during Dec. 2001 to Dec. 2003. The relationship between HIF-1αand VEGF-C, lymphangiogenesis, LNM was analyzed statistically. The results showed that the positive expression rate of HIF-1αand VEGF-C in pancreatic cancer tissues was 48.00 % (36/75) and 65.33 % (49/75) respectively. In positive group of HIF-1α, the positive rate of VEGF-C and LVD, and LVD rate was 80.56 % (29/36), 13.22±3.76 and 88.89 % (32/36) respectively, and in negative group of HEF-1α, positive rate of VEGF-C and LVD was 51.28 % (20/39), 5.98±2.17 and 66.67 % (26/39) respectively (P<0.01 or P<0.05). It was suggested that HIF-1αcould promote the expression of VEGF-C, lymphangiogenesis and LNM in pancreatic cancer.     

水通道蛋白1和血管内皮生长因子在宫颈癌组织中的表达及相关性

目的:探讨水通道蛋白1(AQP1)和血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组织化学方法对30例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变及10例正常宫颈组织中AQP1和VEGF的表达进行检测。结果:AQP1和VEGF在宫颈癌组的表达高于宫颈上皮内瘤变组及对照组,3组之间差异有统计学意义;AQP1和VEGF的表达与宫颈癌病理分级及淋巴结转移相关,组织分化程度越差,二者的表达越高;在有淋巴结转移组中二者的表达高于无淋巴结转移组;不同临床分期、组织分型以及肿瘤大小宫颈癌组中AQP1和VEGF的表达均无显著统计学差异;二者的表达存在正相关。结论:宫颈癌组织中AQP1和VEGF呈高表达,提示2个因子在宫颈癌的发生、发展过程中起促进癌细胞生长、转移和血管生成的作用。     

血管内皮生长因子-C表达与结肠癌淋巴转移的关系

[目的]探讨结肠癌组织中血管内皮生长因子-C（VEGF—C）表达与淋巴转移、临床病理参数之间的关系。[方法]将64例结肠癌患者按有无淋巴结转移、性别、年龄、肿瘤大小及TNM分期进行分组,采用免疫组化PV-9000二步法检测其结肠癌组织中VEGF—C表达情况,应用X^2检验、直线相关分析进行统计学处理。[结果]结肠癌组织中VEGF—C阳性率为57．8％;在淋巴结转移阳性组VEGF—C表达（80％）明显高于淋巴结转移阴性组（38．2％）（P〈0、01）。VEGF—C表达与患者性别、年龄、肿瘤大小均无显著相关（r=0．008、0．025、0．013,P〉0．05）,而与TNM分期显著相关（r=0．447,P〈0．01）,其中随着TNM分期的增高,VEGF—C阳性表达亦显著增高。[结论]结肠癌可表达VEGF—C,并影响结肠癌的淋巴转移。VEGF—C高表达而淋巴结转移阴性的病人有很强的淋巴结转移倾向,甚至可能已发生淋巴结微转移。     

Vascular endothelial growth factor promotes angiogenesis in gastric carcinoma

Objective: To explore the role of vascular endothelial growth factor (VEGF) in the angiogenesis and development of human gastric carcinoma. Methods: The expressions of VEGF and its receptor KDR (ki-nase-domain insert containing receptor) in human gastric cancer tissue and SGC-7901 cells were detected with immunohistochemical staining. Microvessel density (MVD) was obtained after immunostaining for Factor-VIII. VEGF in SGC-7901 cell line was detected with Western blot. VEGF levels were manipulated in human gastric cancer cell by using eukaryotic expression vector containing the complete VEGF165 complimentary DNA in either the sense or antisense orientation. Finally the biological characteristics of the transfectants were identified. Results: VEGF-positive rate in TNM grade I and IV gastric carcinomas (19. 0%) were significantly higher than that in grade I and I (72. 4%) (P<0. 05). Increased MVD was found in VEGF-positive tumors (16. 4±6. 7). which is significantly larger than in VEGF-negative tumors (6.     

血管内皮生长因子反义RNA抑制人喉鳞癌的生长

目的　观察血管内皮生长因子1 6 5反义 RNA对人喉鳞癌细胞 Hep- 2的作用 ,探讨其治疗喉癌的可行性 .方法　采用亚克隆技术 ,构建并鉴定反义 VEGF1 6 5真核表达载体 ;重组质粒转染人喉鳞癌细胞 Hep- 2后 ,将其接种于裸鼠皮下 ,利用原位杂交、EL ISA、激光共聚焦、图像分析及微血管计数等方法 ,观察转染前后 Hep- 2细胞的生物学性状和致瘤性的改变 .结果　构建的 VEGF1 6 5反义真核表达载体在 Hep- 2细胞中获得表达 ,转染后的细胞 VEGF1 6 5的表达下降 70 % ,其生物学性状不受外源基因表达的影响 ,但其在裸鼠皮下的致瘤性和血管生成能力明显下降 ,实验组、空载体组和对照组肿瘤体积分别为 (736± 2 6 2 ) ,(74 4 0± 335 )和 (772 0± 35 0 ) mm3(P<0 .0 1) ,微血管密度分别为 (9.6± 5 .4 ) ,(45 .5± 8.4 )和 (48.4± 7.6 ) mm- 2 (P<0 .0 1) .结论　 VEGF1 6 5反义 RNA能够显著减少喉癌细胞内 VEGF1 6 5的表达 ,具有抑制肿瘤生长和血管生成的作用 ,有望成为抗喉癌的新基因治疗手段 .     

经心包腔转染腺病毒血管内皮生长因子165基因对猪冠脉血管形成的影响

目的:探讨以腺病毒为载体的血管内皮生长因子165(Ad-VEGF165)基因经心包腔转染的表达规律、合适的剂量及对缺血心肌血管生成的作用.方法:随机将20头中华小型猪分为实验组和对照组,每组10头.采用球囊堵塞前降支第一对角支远端建立心肌梗死模型.构建后即刻,实验组采用经皮剑突下穿刺,中心静脉导管插入心包腔内,以含胶原酶1 200 u及透明质酸酶3 000 u的生理盐水2 ml预处理心包后,在心包腔内注入含Ad-VEGF165基因2.0×109pfu的生理盐水1 ml;对照组同样方法预处理心包后,在心包腔内注射生理盐水1 ml.注射后3 d(n=2)、7 d(n=2)及28 d(n=6)分别用免疫组化、超声心动图检测缺血心肌血管新生情况及心功能,并以酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血浆及心肌组织中Ad-VEGF165的表达.结果:Ad-VEGF165基因经心包腔转染缺血心肌组织后,在心肌组织中呈高表达,于7 d达到高峰,28 d降至基线水平,血浆中无目的基因的表达;28 d时,实验组缺血心肌微血管密度(MVD)、心功能均明显高于对照组(MVD(517.00±75.70)mm-2vs(226.50±54.10)mm-2,P=0.009;LVEF(%)(72.11±5.20)w(55.14±4.37),P=0.005).结论:用胶原酶及透明质酸酶预处理心包后,经其转染Ad-VEGF165可以诱导急性心肌梗死模型局部VEGF蛋白表达,促进缺血心肌组织血管新生并能改善心功能.     

反义寡核苷酸抑制肝癌细胞血管内皮生长因子的表达

目的 研究血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒ ｃｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）反义寡核苷酸（ＯＤＮ）抑制人肝癌细胞系ＶＥＧＦ的表达,探讨肝癌基因治疗的新方法。方法 人肝癌细胞系７７２１能表达ＶＥＧＦ,采用人工合成反义、正义ＯＤＮ分别作用于７７２１细胞,免疫组化图像分析方法比较各处理组ＶＥＧＦ的表达情况,即可了解ＶＥＧＦ反义ＯＤＮ抑制肝癌的血管形成情况。结果 ＶＥＧＦ反     

Expression of Vascular Endothelial Growth Factor C and Its Correlation with Lymph Node Metastasis in Colorectal Carcinoma

Lymphnodemetastasiswastheunderlyingcauseforincurablenessandthehighmortalityratesofmalignantsolidtumor.Asaconsequence,detectionoftumorcellsinlymphaticvesselsandregionallymphnodeswasakeyfactorinthestagingandtreatmentofhumantumors[1],buttheexactmechanismands…     

胰腺癌组织的平均微血管密度和血管内皮细胞生长因子的表达

目的:通过检测胰腺癌、慢性胰腺炎及正常胰腺标本中的平均微血管密度(MVD)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平,了解胰腺癌肿瘤血管生成情况.方法:胰腺癌标本26例,慢性胰腺炎标本7例,癌旁正常胰腺组织26例(采用胰腺癌标本中无肿瘤浸润的组织),所有标本均行免疫组化染色.MVD检测为在200倍显微镜下计数5个视野最高数目的微血管,以其平均数表示.VEGF的定量标准为VEGF染色强度与阳性细胞百分比分值的乘积.统计分析采用t检验和二元变量相关分析法.结果:VEGF在胰腺癌、慢性胰腺炎及癌旁正常胰腺组织中均有表达.胰腺癌组织的MVD值及VEGF表达水平均明显高于慢性胰腺炎及癌旁正常胰腺组织(P<0.01).26例胰腺癌组织MVD值及VEGF表达水平在统计学上有相关性(Spearman法r=0.862,P<0.000;Pearson法r=0.855, P<0.000).结论:胰腺癌的微血管生成水平高于慢性胰腺炎及癌旁正常胰腺组织;胰腺癌组织内MVD值及VEGF表达水平在统计学上有相关性.     

血管内皮生长因子在人胎盘绒毛滋养层表达与绒毛血管生成

目的确定血管内皮生长因子(VEGF)在人胎盘绒毛滋养层的表达,探讨VEGF在绒毛间质血管生成中的作用。方法取孕6-9周行人工流产术的胎盘10例、孕18-22周行水囊引产术的胎盘(10例)、孕37-38周行剖宫产的胎盘(10 例),分3组进行免疫组织化学染色与定量分析并对绒毛血管行体视学研究。结果在3组中,VEGF在绒毛滋养层的表达有显著性差异(28．19±3．01,18．65±2．43,4．95±0．86,P<0．01),绒毛间质血管的管径短轴参数无显著性变化(26．67±7．74, 25．08±4．67,23．36±5．30,P>0．05),血管的长度密度呈显著性增加(1．46±0．64,5．58±1．31,19．56±1．40,P<0．01)。结论随着孕期发展,VEGF在绒毛滋养层的表达逐渐减弱,但血管长度密度却增加,说明VEGF并非调控绒毛血管生成的唯一因子。     

大鼠颌下腺血管内皮生长因子cDNA的转移及表达

目的：探讨以颌下腺为靶器官,进行血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因治疗后,颌下腺中ＶＥＧＦ含量变化。方法：构建了ＶＥＧＦ基因表达的真核细胞表达载体,以阳离子脂质体为介质,向大鼠颌下腺转染外源性的ＶＥＧＦ基因,应用ＲＴ－ＰＣＲ技术观察ＶＥＧＦ基因的表达,ＥＬＩＳＡ方法检测颌下腺中ＶＥＧＦ的含量变化。结果：转ｐＢＫＣＭＶ－ＶＥＧＦ１２１基因后第１天,大鼠颌下腺内ＶＥＧＦ的表达及涎液中ＶＥＧＦ的含量即开始     

子宫内膜癌中VEGF-C及其受体mRNA的表达及临床意义

目的 研究子宫内膜癌组织中血管内皮生长因子C及其受体mRNA的表达情况,分析其在肿瘤转移中的作用.方法 采用RT-PCR法分析48例新鲜子宫内膜癌组织标本中VEGF-C/KDR/Flt-4mRNA的表达情况,并分析其与各临床病理参数之间的关系.结果 48例子宫内膜癌组织中的VEGF-C及其受体mRNA表达率明显高于正常子宫内膜组织,肿瘤组织中VEGF-CmRNA表达与Flt-4mRNA的表达呈显著正相关.结论 VEGF-C可能在子宫内膜癌转移尤其是淋巴转移中起重要作用,是一个反映病人淋巴转移和预后的良好指标.     

金仓鼠肝内胆管癌中VEGF的表达与血管生成的相关性研究

目的　探讨血管内皮生长因子 (Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和血管生成在金仓鼠肝内胆管癌发生、发展的关系。方法　应用氨基比林和亚硝酸钠诱导金仓鼠肝内胆管癌 ,免疫组化方法检测标本中VEGF、MVD的表达。结果　VEGF在肝内胆管癌组和实验对照组中的阳性率分别是 78 6 %和 10 0 % ,有明显的统计学意义 (P <0 0 1)。肝内胆管癌中VEGF阳性组MVD值明显高于阴性组 (P <0 0 1)。结论　VEGF与肝内胆管癌的血管生成相关 ,并且促进其生长、侵袭及转移 ,血管生成在肝内胆管癌的形成及生长过程中可能起重要的作用。