血管内皮生长因子表达降低导致多柔比星肾病大鼠蛋白尿发生

目的在经典多柔比星肾病大鼠模型中动态观察其蛋白尿发生前后血管内皮生长因子（VEGF）分布和表达的时相变化，及其与足细胞裂孔隔膜关键分子nephrin磷酸化水平之间的关系，以深入了解VEGF在蛋白尿发生机制中的作用。方法1．留取正常大鼠（对照组）及多柔比星肾病大鼠模型（肾病组）3、7、14和28d肾皮质标本。2．应用免疫组织化学染色法观察对照组及28d肾病组大鼠肾组织VEGF分布。3．提取对照组及3、7、14和28d肾病组大鼠。肾皮质总RNA，应用反转录获得cDNA，实时定量RT—PCR检测其VEGFmRNA表达。4．提取对照组及3、7、14和28d肾病组大鼠肾皮质总蛋白，应用免疫蛋白印迹检测其VEGF蛋白表达。5．提取对照组及28d肾病组大鼠肾皮质总蛋白，应用免疫沉淀分析其nephrin酪氨酸磷酸化水平。6．采用SPSS10．0软件进行统计学分析，各时间点肾病组与对照组间比较采用t检验。结果1．免疫组织化学染色显示对照组大鼠肾小球VEGF的染色较深，主要分布于肾小球足细胞及近端小管上皮细胞，系膜区亦有少许表达。在28d肾病组大鼠，VEGF在肾小球足细胞和系膜区的染色明显减弱。2．与对照组比较，3、7、14及28d各时间点肾病组大鼠。肾皮质VEGF的mRNA表达无显著性改变（Pa〉0．05）。3．与对照组比较，肾病组大鼠肾皮质VEGF蛋白表达于注射多柔比星后7d显著降低（P〈0．05），且在14d和28d2个时间点亦显著低于对照组（Pa〈0．01）。4．与对照组比较，28d肾病组大鼠肾皮质nephrin磷酸化水平显著降低（P〈0．05）。结论VEGF表达降低可能参与了多柔比星肾病大鼠蛋白尿的发生，VEGF与裂孔隔膜关键分子nephrin的磷酸化水平可能存在联系，它们相互协调、相互作用，共同参与维护肾小球滤过屏障结构和功能的完整。     

阿霉素肾病大鼠中肾小球nephrin表达与氧化应激反应的关系

目的：氧化和抗氧化失衡可能是肾病综合征产生大量蛋白尿的原因之一,而肾小球裂隙膜分子nephrin在维持肾小球滤过屏障功能中起着重要作用。因此该实验初步探讨阿霉素肾病大鼠肾小球裂隙膜分子nephrin表达与氧化应激反应的关系,以及泼尼松和维生素E对阿霉素大鼠肾损伤保护作用的机制。方法：尾静脉单次注射阿霉素5 mg/kg建立肾病发病过程中的氧化应激模型,并增加泼尼松和维生素E干预。应用化学比色法检测肾皮质氧化应激指标变化,应用免疫组织化学技术观察肾小球裂隙膜分子nephrin表达变化,并对两者进行相关性分析。结果：①肾病组大鼠肾皮质丙二醛（MDA）含量及24 h尿蛋白排泄量高于正常对照组,超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）活性低于正常对照组。与肾病组相比,泼尼松和维生素E干预组从14 d开始尿蛋白排泄量明显减少,直到28 d（P<0.05）。维生素E干预组肾皮质MDA含量较肾病28 d组下降,SOD、T-AOC活性较肾病28 d组升高。②正常对照组大鼠nephrin沿肾小球基底膜呈深褐色连续线性分布;肾病组随时间的延长深褐色连续线性分布向浅褐色短线条状或点状分布转化;泼尼松和维生素E干预组减轻了nephrin分子的异常改变;量化分析显示,肾病组肾小球nephrin阳性表达含量明显低于正常对照组,泼尼松及维生素E干预组肾小球nephrin阳性表达含量较肾病组增加。③肾小球nephrin蛋白阳性表达含量与肾皮质MDA含量呈负相关,与肾皮质SOD和T-AOC活性呈正相关。结论：肾小球裂隙膜分子nephrin表达减少与氧化应激反应密切相关;泼尼松和维生素E对阿霉素肾病大鼠肾损伤有保护作用。［中国当代儿科杂志,2009,11（1）：56-60］     

α-actinin-4与多柔比星肾病大鼠氧化应激状态的关系

目的 探讨足细胞骨架结构蛋白α-actinin-4与多柔比星肾病大鼠机体氧化应激状态的关系,并从分子水平推测贝那普利降低尿蛋白的作用机制.方法 实验组Wistar大鼠经尾静脉一次性注射多柔比星5 mg/kg建立动物模型,术后药物干预组予贝那普利6 mg/(kg*d)灌胃,对照组则行等量9 g/L盐水灌胃,观察2组大鼠尿蛋白、氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)变化.链酶抗生物素蛋白-生物素过氧化酶复合物(SABC)免疫组织化学染色,观察α-actinin-4在其肾小球中的分布及表达改变.结果 实验组多柔比星注射后7 d即有T-AOC活性递减,α-actinin-4蛋白阳性表达递增,且α-actinin-4由均匀点线样分布,逐渐向不连续粗颗粒状、连续较粗线样、斑片样的分布模式转变;在14～28 d,实验组24 h尿蛋白量、MDA渐增,SOD递减,与对照组比较均有显著性差异(Pa<0.05).与实验组比较,28～35 d贝那普利干预组24 h尿蛋白量及MDA显著降低,SOD、T-AOC活性明显增强;免疫组织化学染色示α-actinin-4表达减弱,并呈线样分布,且紊乱程度减轻(Pa<0.05).相关性分析示α-actinin-4与24 h尿蛋白量、MDA均呈正相关(r=0.948 ,0.825 Pa=0),与SOD、T-AOC均呈负相关(r=-0.956,-0.873 Pa=0). 结论 多柔比星肾病大鼠α-actinin-4分布及表达的改变与蛋白尿的发生及机体氧化应激状态存在相关性.贝那普利降尿蛋白的作用可能与改善机体氧化应激,影响α-actinin-4分布或表达有关.     

Podocin在阿霉素肾病大鼠模型肾皮质部表达及分布的时相变化

目的动态观察足细胞相关分子podocin在阿霉素肾病大鼠模型肾皮质部的表达及分布的时相变化,探讨podocin分子在蛋白尿发生发展过程中的作用。方法建立阿霉素大鼠肾病模型,实验分为模型组(阿霉素肾病大鼠24只)和对照组(正常大鼠24只)。观察1、2、4和6周各项指标的变化,包括24h尿蛋白定量、血浆白蛋白(Alb)和总胆固醇(TC)检测,光镜下观察肾组织病理改变,采用Western blot检测肾皮质部podocin的蛋白表达,采用荧光定量PCR检测肾皮质部podocin的mRNA表达,应用免疫荧光法观察podocin在肾组织中的分布。结果阿霉素肾病大鼠模型组蛋白尿持续增加,并出现低白蛋白血症、高脂血症,表现为典型的肾病综合征;模型组由微小病变逐渐发展至局灶节段性硬化;模型组podocin在肾皮质部的蛋白表达2周时开始增高,4周时明显增高,6周时仍维持在较高水平;模型组podocin在肾皮质部的mRNA表达1周时开始增高,2周时明显增高,4周后较对照组下降;模型组podocin荧光染色由正常的沿肾小球血管襻呈均匀线性分布转变为呈不连续颗粒状分布,且分布异常并进行性加重。结论Podocin在阿霉素肾病大鼠模型中蛋白和mRNA表达变化的时相不同,并且分布异常是发生蛋白尿的关键因素,推测podocin可能参与肾病病程进展的内在分子机制。     

Podocin在多柔比星肾病大鼠模型中的表达及意义

目的建立多柔比星肾病（ADN）大鼠模型，观察足细胞相关分子podocin在模型不同病理时期mRNA的表达，探讨podocin分子在肾病发生发展过程中的作用。方法雄性sD大鼠48只[体质量（230&#177;20）g，月龄2～3个月]，随机分为模型组和对照组，每组24只。模型组鼠尾静脉注射多柔比星6．5mg／kg，建立ADN模型。对照组注射9g／L盐水。分别于第2、4、6、8周每组各处死大鼠6只。处死前1天收集24h尿液，检测24h尿蛋白，应用光镜和电镜观察各组肾组织病理改变，Trizol法提取肾皮质总RNA，采用实时荧光定量反转录PCR检测其各时间点肾组织podocin mRNA表达。结果模型组大鼠实验第2、4、6、8周均表现为大量蛋白尿，各时间点24h尿蛋白较对照组均明显升高（P。〈0．01），模型组大鼠肾组织病理在肾病早期表现为微小病变型，随着病情进展，第6—8周呈现局灶性节段性肾小球硬化病理表现；电镜下可见模型组随着病变进展，足细胞损伤进行性加重。在病变早期可见足突增宽、融合，晚期足突消失，核固缩等表现。模型组第2周。肾组织podocin分子mRNA表达明显升高（P〈0．01），第4周时下降，第6—8周进一步下降（Pa〈0．05）。结论Podocin分子在肾病综合征发生发展中起重要作用，podocin mRNA表达变化可能与肾病病理类型密切相关。     

黄芪对IgA肾病大鼠蛋白尿及肾组织表达nephrin、podocin的影响

目的 观察黄芪对IgA肾病(IgAN)大鼠蛋白尿及肾组织nephrin、podocin的影响,探讨黄芪对IgAN蛋白尿的治疗作用及其机制.方法 24只6周龄SD大鼠分为对照组、模型组及黄芪组.模型组和黄芪组采用牛血清清蛋白+脂多糖+四氯化碳的方法进行IgAN造模,黄芪组予黄芪颗粒治疗,对照组予等量蒸馏水灌胃,9 g·L<'-1>盐水皮下注射及尾静脉注射.考马斯亮蓝法检测其24 h尿蛋白定量,全自动生化分析仪检测其血生化指标.应用直接免疫荧光法检测其肾小球IgA沉积强度,应用间接免疫荧光法检测肾小球nephrin、podocin蛋白的表达及分布,采用实时荧光定量PCR技术检测肾皮质nephrin mRNA和podocin mRNA的表达.结果 1.黄芪组大鼠尿蛋白较模型组显著减少,差异有统计学意义(P<0.01).2.黄芪组大鼠肾组织病变较模型组减轻.3.黄芪组大鼠肾小球nephrin表达量与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05),但仍显著高于对照组(P<0.01);而podocin表达量较模型组显著降低(P<0.05);黄芪组大鼠肾皮质nephrin mRNA及podocin mRNA的表达均较模璎组及对照组显著升高(P<,a><0.01).4.黄芪组大鼠肾小球nephrin、podocin的不连续斑片状、团块状异常分布较模型组改善.结论 IgAN大鼠肾组织nephrin、podocin出现表达变化及分布异常,黄芪能减少IgAN大鼠尿蛋白,其作用可能与调节nephrin、podocin的表达及分布有关.     

肾小球硬化大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白的表达特点及其与肾功能的关系

目的 探讨肾小球硬化大鼠肾脏组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达特点及其与肾功能的关系.方法 40只雄性8周龄Wistar大鼠随机分为假手术组及模型组,每组20只.采用单侧肾切除加l周后尾静脉注射多柔比星(5 mg/kg)的方法 建立肾小球硬化大鼠模型,检测12周末各组大鼠24 h尿蛋白、血清肌酐(Scr)、BUN水平,肾脏病理切片采用常规苏木索-伊红(HE)染色,观察肾脏组织病理改变,评估肾小球硬化程度,并计算其肾小球硬化指数.应用免疫组织化学染色方法 (Supervision TM)检测其肾小球及肾小管α-SMA蛋白表达.应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其肾脏组织α-SMA mRNA表达.应用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 与假手术组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白、scr和BUN的水平显著增高(P.<0.01);肾小球硬化指数显著增高(t=13.82 P<0.01);免疫组织化学染色及RT-PCR显示模型组大鼠肾小管、肾小球α-SMA mRNA表达水平均较假手术组显著增高(t=23.86,19.87,8.49 P.<0.01).模型组大鼠肾小球和肾小管α-SMA蛋白表达水平与肾小球硬化指数间存在显著正相关(P.相似文献   

碱性成纤维细胞生长因子在多柔比星肾病大鼠模型中的表达

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在多柔比星诱导肾病大鼠肾组织中的表达和分布,探讨bFGF在微小病变型肾病综合征(MCNS)中的作用.方法 雄性Wistar大鼠50只随机分为正常组(10只)、肾病组(40只).肾病组一次性尾静脉注射多柔比星5 mg/kg,建立多柔比星,肾病模型,于注射多柔比星后第3、7、14、28天检测各组大鼠24 h尿蛋白定量,并分批处死肾病组大鼠,于第28天处死正常组大鼠,采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾脏组织bFGF的表达,采用彩色图像分析系统对hFGF的表达进行定量分析.采用SPSS 10.0软件对各组间差异进行t检验和两变量间相关分析.结果 1.肾病组大鼠尿蛋白排泄量逐渐增加,第7、14、28天与正常组比较,均有显著性差异(P.相似文献   

碱性成纤维细胞生长因子在多柔比星肾病大鼠模型中的表达 鼠

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在多柔比星诱导肾病大鼠肾 组织中的表达和分布,探讨bFGF在微小病变型肾病综合征（MCNS）中的作用。方法 雄性Wistar大鼠50只随机分为正常组（10只）、肾病组（40只）。肾病组一次性尾静 脉注射多柔比星5mg/kg,建立多柔比星肾病模型,于注射多柔比星后第3、7、14、 28天检测各组大鼠24h尿蛋白定量,并分批处死肾病组大鼠,于第28天处死正常组 大鼠,采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾脏组织bFGF的表达,采用彩色图像分析 系统对bFGF的表达进行定量分析。采用SPSS 10.0软件对各组间差异进行t检验和 两变量间相关分析。结果1.肾病组大鼠尿蛋白排泄量逐渐增加,第7、14、28天与 正常组比较,均有显著性差异（Pa〈0.01）;2.在肾病组大鼠肾组织中,bFGF阳性反 应颗粒呈棕黄色染色,主要分布于肾小球足细胞和肾小管上皮细胞的胞质中,并沿 毛细血管襻分布;3.不同时期肾病组bFGF免疫组织化学阳性指数（PI）明显高于同 期正常组的bFGFPI,有显著性差异（Pa〈0.01）,且不同时期bFGF呈现不同程度的表 达;4.肾病组在不同时期bFGFPI的变化与24h尿蛋白的排泄量呈正相关 （r=0.720P〈0.01）。结论1.bFGF在MCNS肾脏组织中存在异常表达和分布。2.MCNS 中bFGF的表达和分布与蛋白尿的进展密切相关,bFGF可能是蛋白尿发生的原因之 一。3.bFGF可能在足细胞损伤发生中起重要作用,可作为判断肾小球足细胞损伤 的重要指标之一。     

槲皮素逆转K562、K562/ADM细胞耐药性研究

目的探讨槲皮素对K562、K562/ADM细胞热休克蛋白70信使核糖核酸(HSP70 mRNA)及多药耐药基因信使核糖核酸(MDR1 mRNA)表达的影响。方法采用MTT法检测槲皮素对K562细胞生长的抑制作用。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测多柔比星化疗前、后加入槲皮素K562细胞HSP70 mRNA及MDR1 mRNA的表达,及K562/ADM细胞在槲皮素作用后加多柔比星化疗两者的表达情况。结果1.槲皮素对K562细胞的生长抑制作用随浓度增加而增强。2.槲皮素作用后加多柔比星化疗组K562、K562/ADM细胞中HSP70 mRNA及MDR1 mRNA表达均显著降低。多柔比星化疗后加槲皮素组与多柔比星化疗组比较,K562细胞HSP70 mRNA、MDR1 mRNA表达均无显著性差异。结论槲皮素对白血病细胞生长具有抑制作用,并能下调HSP70 mR-NA及MDR1 mRNA表达。槲皮素能增加白血病细胞对多柔比星敏感性,逆转白血病细胞对多柔比星的耐药性。     

黄芪甲苷保护阿霉素心肌损伤的抗氧化机制研究

目的 观察黄芪甲苷对大鼠阿霉素心肌损伤的保护作用,并探讨其抗氧化作用机制。方法 SD大鼠随机分5组,空白对照组（C组）,阿霉素组（ADR组）,阿霉素＋黄芪甲苷低剂量组（ADR＋L）,阿霉素＋黄芪甲苷中剂量组（ADR＋M）,阿霉素＋黄芪甲苷高剂量组（ADR＋H）。C组盐水,余组阿霉索腹腔注射。ADR＋L、ADR＋M、ADR＋H组不同剂量黄芪甲苷灌胃,C、ADR组羧甲基纤维素钠灌胃。观察生存率;血浆脑钠肽（BNP）浓度;心肌谷胱甘肽过氧化物酶（GsH—Px）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）活力;检测Cu-Zn—SOD蛋白水平及mRNA水平表达。结果 （1）大剂量黄芪甲苷可以保护阿霉索心肌损伤。与ADR组比较,ADR＋H组大鼠的生存率明显提高（P〈0．01）,血浆BNP浓度明显下降（P〈0．01）。（2）大剂量黄芪甲苷通过增加心肌抗氧化酶活力,增强心肌组织抗氧化酶mRNA转录水平以及蛋白质表达水平发挥其保护作用,且呈剂量依赖性。结论 黄芪甲苷从多个环节发挥其抗氧化能力,对阿霉索性心肌损伤具有保护作用,为临床治疗药物性心肌病提供新的思路。     

Recent advances in congenital nephrotic syndrome

PURPOSE OF REVIEW: This review provides a concise update of the most recent literature related to the diagnosis and care of patients with congenital nephrotic syndrome. This topic is of particular interest in light of the rapidly growing body of literature regarding mutations of proteins such as nephrin and podocin that are expressed at or near the podocyte slit diaphragm. RECENT FINDINGS: The phenotypic variance of patients with congenital nephrotic syndrome with nephrin and podocin mutations resulting from triallelic mutations represents an important advance in our understanding of the effect of multiple genetic mutations on clinical disease expression. Clinically, the management of patients with unilateral nephrectomy, rather than the classic bilateral nephrectomy, represents an efficacious alternative management strategy and may impart better chances of graft survival by allowing later transplantation. Identification of a subset of patients with congenital nephrotic syndrome at increased risk of recurrence who also have antinephrin antibodies may enhance our understanding of recurrent disease in congenital nephrotic syndrome after transplantation. SUMMARY: Exciting recent findings in the genotypic/phenotypic correlations of patients with congenital nephrotic syndrome may not only modify our understanding of this disease but may also help to revolutionize our understanding of human genetics. Promising outcomes with unilateral nephrectomy in patients with congenital nephrotic syndrome have permitted transplantation to be delayed and may potentially decrease the risk of complications. New findings regarding recurrence of nephrotic syndrome in patients with congenital nephrotic syndrome after transplantation may lead to improved survival in future renal transplantations.     

大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良的影响

目的 探讨大黄对高氧致新生大鼠支气管肺发育不良（BPD）的影响。方法 将64只生后4 d大鼠随机分成空气对照组、大黄对照组、高氧模型组和高氧+大黄组（n=16）。大鼠暴露于60%氧浓度中构建BPD模型。造模同时,两个大黄干预组每天给予600 mg/kg大黄提取物混悬液灌胃1次。各组大鼠于生后14 d、21 d,苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织形态学改变;分光光度计法检测丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性;RT-PCR、Western blot法检测肺组织中TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达水平。结果 高氧模型组大鼠肺组织出现肺泡数目减少、体积增大、结构简单化等发育受阻的表现,并随高氧暴露时间的延长损伤加重;高氧+大黄组大鼠肺组织病理改变明显减轻。大鼠生后14 d及21 d,与两对照组相比,高氧模型组放射状肺泡计数（RAC）明显减少,肺组织中SOD活性降低,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均升高（P < 0.05）。与高氧模型组相比,高氧+大黄组RAC明显增加,肺组织中SOD活性升高,MDA水平、TNF-α mRNA及蛋白水平、IL-6 mRNA及蛋白水平均降低（P < 0.05）。结论 大黄可能通过抑制炎症和氧化应激反应对高氧致新生大鼠BPD发挥保护作用。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血脑损伤模型脑组织神经细胞凋亡及超氧化物歧化酶和脂质过氧化物的影响

目的探讨高压氧(HBO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型脑组织神经细胞凋亡和超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(MDA)的影响。方法新生7d龄健康SD大鼠随机分为4组:空白对照组(n=68),假手术组(分离左颈总动脉后不结扎直接缝合皮肤,n=66),HIBD组(模型制作采用经典的Rice法,n=60),HBO组(HIBD后行HBO治疗,1h/次/d,最长治疗7d,n=66)。TUNEL试剂盒检测脑组织凋亡的神经细胞,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力(nU/ml)和化学比色法测定MDA含量(μmol/L)。结果(1)缺氧缺血后不同时间HIBD组皮质和海马神经细胞凋亡明显增多,24h达高峰后逐渐下降;HBO组凋亡细胞数较HIBD组明显减少,但仍较空白对照组和假手术组高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)缺氧缺血后HIBD组SOD含量下降,HBO治疗后SOD的含量较HIBD组升高,且随着治疗时间的延长SOD的水平逐渐升高,24h达高峰,然后逐渐下降,各组比较差异有统计学意义(P<0.05);(3)缺氧缺血后HIBD组MDA含量明显升高,18至24h达高峰,随着时间的推移逐渐下降;HBO治疗后MDA含量较HIBD组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBO治疗可减轻HIBD后神经细胞凋亡,机制可能与HBO诱导脑组织SOD的表达,增强组织的抗氧化应激损伤有关。     

营养肾病和糖皮质激素对大鼠肝肾组织IGF-I/IGFBPs mRNA表达的影响

目的：探讨营养不良、肾病本身和糖皮质激素作为各自独立因素对大鼠肝肾组织胰岛素样生长因子I/胰岛素样生长因子结合蛋白(IGF-I/IGFBPs) mRNA表达和血清浓度的影响。方法：24只周龄相同体重相近的雄性SD大鼠被随机分成正常对照、食物对照、阿霉素肾病和地塞米松治疗肾病4组。血清IGF-I/IGFBPs和肝肾组织IGF-I/IGFBPs mRNA表达分别采用RIA,Western ligand blot和RT-PCR法检测。结果：①营养不良大鼠血清IGF-I减低,肝肾组织IGF-I mRNA表达增高;肾病本身对血清IGF-I,肝脏IGF-IA mRNA表达无影响,肾脏表达减低;激素治疗使血清IGF-I,肝肾组织IGF-IA mRNA表达均下降。②营养不良大鼠血清IGFBP-2,肝脏IGFBP-2 mRNA表达减低,肾脏表达正常;肾病本身使大鼠血清IGFBP-2,肝脏IGFBP-2 mRNA表达增高,肾脏表达减低;激素治疗使肝肾组织IGFBP-2 mRNA表达均下降,但对血清浓度无影响。③营养不良大鼠血清IGFBP-3减低,肝脏IGFBP-3 mRNA表达正常;肾病本身使血清IGFBP-3,肝脏IGFBP-3 mRNA表达均下降;激素治疗使血清IGFBP-3增高,但肝脏IGFBP-3 mRNA表达下降。肾脏IGFBP-3 mRNA表达仅在激素治疗组大鼠能检测到。结论：营养、肾病和糖皮质激素对大鼠肝肾组织IGF-I/IGFBPs mRNA表达的调节具有器官特异性;除血清IGF-I减低部分源于肾脏合成下降外,血清IGFBPs紊乱主要与肝脏合成有关;肾病时IGFBPs可能在不同的水平对IGF-I生物效应发挥调节作用。     

缺氧缺血新生大鼠脑组织caspase-1和白细胞介素18 mRNA表达及其关系探讨

目的研究caspase-1及其底物之一白细胞介素(IL)-18 mRNA的表达在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)中的作用及其意义.方法 112只7日龄新生Wistar大鼠按照完全随机化方法分为对照组、HIBD 3、8、24 h、3、6和14 d组,每组16只.其中8只采用RT-PCR 方法检测caspase-1和IL-18 mRNA在HIBD后脑皮层中的表达及其相关性,另外8只光镜下观察脑组织病理学改变.结果对照组有caspase-1 mRNA少量表达(0.2918 ± 0.0809),HIBD 24 h组其水平开始增加(0.5222 ± 0.0941,与对照组比较P<0.01),6 d达高峰(0.7886 ± 0.0480,与其余各组相比P<0.01), 此后下降,但HIBD 14 d (0.5314 ± 0.1272)仍可检测出.对照组IL-18 mRNA水平为0.3218 ± 0.0466,HIBD 24 h至6 d其表达逐渐增加(24 h 0.5823 ± 0.0740; 3 d0.6976 ± 0.1073; 6 d 0.9110±0.0647,与对照组比较均为P<0.01),并达高峰(HIBD 6 d组与其余各组相比P<0.01).HIBD后IL-18 mRNA的表达在时间上与caspase-1具有紧密相关性(r=0.871,P<0.01).组织学检查发现神经元变性、坏死在HIBD 1～6天逐渐加重.结论 HIBD后caspase-1和IL-18 mRNA的表达逐渐增加,其变化规律与光镜观察到的脑损伤进展的时间框架吻合,提示它们均参与了新生鼠HIBD的病理形成过程.     

褪黑素对高氧致新生鼠慢性肺疾病肺组织氧化/抗氧化系统的影响

目的：探讨近年来发现的高效抗氧化剂褪黑素（MT）对高氧致新生鼠慢性肺疾病（CLD）肺组织氧化/抗氧化系统的影响。方法：采用高氧暴露（FiO2＝0.85）致新生鼠CLD模型,足月新生鼠共90只随机分为3组（每组30只）：空气对照组、高氧对照组、MT治疗组。空气对照组置于空气中,高氧对照组、MT治疗组（连同母鼠）置于玻璃氧箱中,维持FiO2为0.85;MT治疗组于生后0 d高氧暴露前30 min和生后每天给予MT 4 mg/kg腹腔注射直至实验结束。每组分别于实验后3,7,14 d随机选取10只处死,观察肺组织形态改变,分别测定肺组织中总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱苷肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、髓过氧化物酶（MPO）、过氧化氢酶（CAT）、NO水平（以NO2-/NO3-衡量）以及丙二醛（MDA）含量改变。结果：MT治疗组病理改变明显减轻。空气对照组、高氧对照组、MT治疗组T-AOC,SOD,GSH-Px及CAT活性随实验时间的延长均逐渐升高,但空气对照组、高氧对照组两组比较各项指标差异均无显著性（P>0.05）,MT治疗组各项指标在实验各时点与空气对照组、高氧对照组相比均明显升高（P<0.05）。高氧对照组NO2-/NO3-,MDA水平以及MPO含量在3,7,14 d均高于空气对照组（P<0.05或0.01）。MT治疗组NO2-/NO3-,MDA水平以及MPO含量则明显降低,与高氧对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。结论：MT通过提高肺组织的抗氧化能力、抑制氧化应激反应,从而逆转了高氧致新生鼠CLD肺组织氧化/抗氧化系统失衡。［中国当代儿科杂志,2009,11（7）：581-584］     

二氧化碳气腹致大鼠肾脏缺血再灌注损伤及异丙酚诱导核因子 E2相关因子表达的保护作用

目的：探讨二氧化碳气腹后致大鼠肾脏缺血再灌注损伤,以及异丙酚在缺血再灌注损伤过程中的保护作用机制。方法成年雄性 Wistar 大鼠48只,体重280~320 g,实验前12 h 禁食,自由饮水,采用随机数字表法将大鼠随机分为对照组、缺血组及再灌注组和异丙酚组,每组12只。对照组未经任何处理,仅经尾静脉泵注生理盐水1 h[10 ml /(kg.h)];缺血组在对照组的基础上,给予20 mmHg (1 mmHg =0.133 kPa)气腹压力1 h;再灌注组在缺血组的基础上,放开气腹压力后持续0.5 h;异丙酚组给予20 mmHg 气腹压力1 h,放开气腹压力后持续0.5 h,经尾静脉泵注异丙酚10 ml /(kg.h)(生理盐水10倍稀释)。观察各组尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,Cr)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、核因子 E2相关因子(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)表达的变化。结果对照组、缺血组、再灌注组的 BUN、Cr、MDA 水平逐渐增高,SOD 水平逐渐降低(P 均﹤0.05);与缺血组及再灌注组比较,异丙酚组的 BUN、Cr、MDA 水平明显降低,SOD 水平明显增高(P 均﹤0.05)。Nrf2蛋白及 mRNA 在对照组、缺血组、再灌注组、异丙酚组中的表达逐渐增加(P 均﹤0.05)。结论二氧化碳气腹对大鼠肾脏造成缺血再灌注损伤;异丙酚可通过调节 Nrf2蛋白的表达,对大鼠肾脏缺血再灌注损伤产生保护作用。     

牛初乳短链胰岛素样生长因子-1对多柔比星肾病大鼠胰岛素样生长因子-1的影响

目的研究牛初乳短链胰岛素样生长因子-1（BctIGF-1）对肾病大鼠胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的影响,为治疗肾病综合征（NS）提供理论依据。方法将30只周龄相同、体质量相近的雌性SD大鼠随机分为对照组、肾病组、BctIGF-1治疗组;实验第6周末杀鼠,采用放射免疫法测定其血清与尿IGF-1水平,反转录酶-聚合酶链反应（RT-PCR）测定其肝、肾组织IGF-1 mRNA表达,采用考马斯亮蓝法测定24h尿蛋白排泄量。结果BctIGF-1治疗组24h尿蛋白及病理积分均低于肾病组（P〈0.05,0.01）;肾病大鼠血清IGF-1水平明显低于BctIGF-1治疗组（P〈0.05）,尿IGF-1排泄量明显高于BctIGF-1治疗组（P〈0.01）;各组大鼠肝组织IGF-1 mRNA表达差异无显著性;肾组织IGF-1mRNA表达由高至低依次为对照组、BctIGF-1治疗组、肾病组,BctIGF-1治疗与对照组比较差异无显著性,但BctIGF-1治疗与对照组IGF-1 mRNA表达均显著高于肾病组（P〈0.01,0.05）。结论BctIGF-1可有效降低肾病大鼠尿蛋白,减轻肾脏病理损伤,其机制可能是通过增加其血清游离IGF-1水平、促进肾局部IGF-1mRNA表达来实现。