不同阶段使用维吾尔药槌果藤提取物治疗硬皮病动物模型的实验性研究

目的:观察槌果藤乙酸乙酯提取物、乙醇提取物对硬皮病小鼠模型真皮厚度、Ⅰ型(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)合成及转化生长因子(TGF)-β1表达的影响及不同性别小鼠、用药时间之间是否有差异.方法:甲实验:通过给小鼠皮下注射博莱霉素(BLM)连续4周致小鼠硬皮病模型,再给予槌果藤乙酸乙酯提取物、乙醇提取物外用治疗;2、4、6周末皮肤病理观察真皮厚度变化,免疫组化观察COL-Ⅰ、COL-Ⅲ及TGF-β1的合成表达.乙实验:用BLM制摸的同时给予槌果藤两种不同提取物,连续4周后观察上述指标的变化.结果:制摸后使用槌果藤乙酸乙酯提取物、乙醇提取物组,硬皮病小鼠模型真皮厚度、COL-Ⅰ合成及TGF-β1表达均明显降低,对COL-Ⅲ影响不大.和硬皮病鼠模型比较,注射BLM同时外用槌果藤不同提取物组小鼠皮损处表真皮厚度、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ及TGF-β1的表达均无统计学差异.结论:槌果藤乙酸乙酯提取物、乙醇提取物外用硬皮病模型组通过抑制COL-Ⅰ,TGF-β1的表达,从而达到了抗皮肤硬化作用,随时间的增加其作用明显,小鼠模型性别对其影响无统计学差异,用BLM皮下注射同时给予槌果藤不同提取物不能阻止BLM诱导硬皮病模型的建立,其机理尚待进一步研究.     

刺山柑总生物碱对系统性硬皮病小鼠Wnt3a/β-catenin 表达的影响 *

目的??研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病小鼠 Wnt 通路相关蛋白 Wnt3a、Wnt1 诱导的信号通 路蛋白 1（WISP1）和 β- 连环蛋白（β-catenin）的调控作用。方法??采用盐酸博莱霉素皮下注射法复制系 统性硬皮病小鼠模型后,给予受试药乳膏冶疗 8 周。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠皮肤组织 Wnt3a 和 WISP1 的浓度,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测小鼠皮肤组织 β-catenin?mRNA 的表达, 免疫组织化学法检测小鼠皮肤组织 β-catenin 蛋白表达。结果??刺山柑总生物碱 450 mg/kg 可降低 Wnt3a 的 浓度; 450 mg/kg和900 mg/kg可降低β-catenin?mRNA和蛋白表达 （ P <0.05） , 对WISP1浓度无影响 （ P >0.05） 。 结论??刺山柑总生物碱可抑制系统性硬皮病小鼠皮肤组织 Wnt3a 和 β-catenin 的异常表达,对系统性硬皮病 Wnt/β-catenin 通路的过度激活有一定抑制作用。     

刺山柑总生物碱对系统性硬皮病小鼠皮肤纤维化相关指标的影响

目的 研究刺山柑总生物碱对系统性硬皮病(SSc)小鼠Ⅰ型胶原α1链(COL1A1)、纤维连接蛋白(Fn)、血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和白细胞介素-1β(IL-1β)等皮肤纤维化相关指标的影响.方法 90只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、青霉胺组及刺山柑总生物碱低、中、高剂量组,每组15只.除对照组外,其余各组小鼠背部注射盐酸博莱霉素建立SSc模型,成模后刺山柑总生物碱组小鼠背部外敷刺山柑总生物碱乳膏,青霉胺组给予青霉胺灌胃,对照组、模型组背部外敷不合药基质.末次给药后,Western blot检测皮肤COL1A1表达,ELISA法测定小鼠皮肤Fn和血清Ang Ⅱ、IL-1β水平.结果 刺山柑总生物碱中、高剂量可明显降低小鼠皮肤COL1A1表达,刺山柑总生物碱高剂量可降低SSc小鼠皮肤Fn和血清AngⅡ水平(P＜0.05),对IL-1β没有明显影响(P＞0.05).结论 刺山柑总生物碱可抑制SSc皮肤组织COL1A1和Fn表达,调节Ang Ⅱ的异常升高,改善SSc皮肤纤维化.     

phVEGF165基因导入促进硬皮病小鼠模型毛发生长及再生

目的观察VEGF对硬皮病小鼠模型毛发生长的作用.方法将phVEGF165质粒导入博莱霉素诱导的硬皮病小鼠模型背部皮肤.每周测量毛发的长度,常规病理观察皮肤组织病理学改变,并用免疫组化及原位杂交方法检测VEGF的表达.结果发现VEGF有明显促毛发生长作用.phVEGF165质粒导入的小鼠皮肤毛囊数目明显增多,真皮及毛囊区VEGF及VEGF mRNA表达增强.结论 VEGF对硬皮病小鼠模型毛囊的再生有明显的促进作用.     

TGF-β_1与α-SMA在小鼠肺纤维化模型中的表达及其相互关系

目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在小鼠肺纤维化模型中的表达,及其之间的相互关系。方法气管内灌注博莱霉素(7 mg/kg)制备肺纤维化模型,进行HE、Masson染色并采用免疫组织化学检测小鼠肺纤维化组织中TGF-β_1和α-SMA的表达。结果对照组中α-SMA表达于支气管和大血管周围的平滑肌细胞,模型组中α-SMA表达于支气管、大血管周围的平滑肌细胞及成纤维细胞灶,TGF-β_1表达于支气管、大血管周围的成纤维细胞、炎细胞以及成纤维细胞灶,与α-SMA表达相似。TGF-β_1和α-SMA均与小鼠肺纤维化程度均呈正相关(r=0.628、0.766,P0.01)。TGF-β_1与α-SMA呈正相关(rs=0.728,P0.01)。结论 TGF-β_1和α-SMA在肺间质纤维形成过程起到重要作用,并可能协同参与。     

补肾益精法对系统性硬皮病血管内皮间质转化的影响

目的:探讨补肾益精法中药复方对系统性硬皮病血管内皮细胞内皮间质转化(endothelial to mesenchymal transition,End MT)的影响及机制。方法:采用博莱霉素建立硬皮病小鼠模型,造模同时补肾益精方软皮汤2号方(中药复方)进行干预,4周后HE染色观察小鼠皮肤组织病理、免疫组化法检测α-SMA表达水平;体外构建TGF-β1诱导的血管内皮细胞End MT模型,用补肾益精法含药血清处理48 h后,采用细胞免疫荧光方法检测血管内皮细胞α-SMA表达,Western Blot方法检测血管内皮细胞CD31、FSP1、Snail-1表达水平。结果:HE染色结果显示,模型组小鼠皮肤纤维化区域中,胶原纤维明显增多、胶原间隙变窄、毛细血管明显少于正常皮肤组织;与模型组比较,中药复方组小鼠皮肤胶原纤维较少、间隙较宽、血管数量较多;免疫组化染色检测结果显示,模型组小鼠皮肤组织中血管内皮细胞α-SMA表达高于正常对照组,中药复方组α-SMA阳性表达明显减少。免疫荧光检测结果显示,经TGF-β1诱导成功建立End MT模型,End MT模型组细胞α-SMA高表达,内皮细胞发生间质转化,经含药血清处理后,α-SMA表达明显减少。Western Blot检测结果显示,End MT模型组中Snail-1、FSP1均明显高于对照血清组,CD31明显低于对照血清组;含药血清处理组Snail-1、FSP1表达明显低于End MT模型组,CD31表达高于End MT模型组(P0.05)。结论:补肾益精法对系统性硬皮病血管的保护作用,可能与通过某些途径拮抗Snail介导的End MT所参与的纤维增生性闭塞性血管损伤有关。     

成纤维细胞激活蛋白在小鼠肺纤维化模型中的表达

目的探讨成纤维细胞激活蛋白（FAP）在实验性小鼠肺纤维化组织中的表达,及其与α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）之间的相互关系。方法气管内滴入博莱霉素（7mg/kg）制备肺纤维化模型,采用免疫组化技术检测小鼠肺纤维化组织中FAP、α-SMA和TGF-β1的表达。结果正常肺组织无FAP表达;纤维化组FAP表达于细支气管和大血管周围的成纤维细胞,成纤维细胞灶中FAP、α-SMA和TGF-β1表达部位相似,但FAP比α-SMA的表达更广泛,比TGF-β1的表达更强。FAP、α-SMA和TGF-β1与小鼠肺纤维化程度均呈正相关（r值分别为0.795、0.766和0.628,P〈0.01）,且FAP与TGF-β1的表达呈正相关（r=0.706,P〈0.01）。结论 FAP特异性表达在小鼠肺纤维化组织的成纤维细胞灶中,与肺纤维化程度有关。FAP与TGF-β1可能在肺纤维化形成中起协同作用。     

阿维A对硬皮病小鼠的治疗作用及机制研究

目的 研究阿维A （acitretin）对系统性硬皮病（SSc）小鼠皮肤及肺部纤维化的治疗作用,并通过检测小鼠外周血Th 17/Treg相关因子白介素（IL）-17、IL-10、IL-6、转化生长因子（TGF）-β,水平,探讨阿维A治疗硬皮病可能的机制.方法 24只雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、硬皮病组和阿维A组,硬皮病组和阿维A组给予博莱霉素皮下注射4周,阿维A组同时每天给予6 mg/kg的阿维A灌胃4周.4周后取注射部位皮肤及肺部制作组织病理切片,观察小鼠皮肤厚度及皮肤/肺部炎症.酶联免疫吸附法（ELISA）检测小鼠血清IL-17、IL-10、IL-6、TGF-β1水平.结果 阿维A组皮肤厚度、皮肤炎症评分、肺部炎症评分均明显低于硬皮病组[（140.25 ±20.24） μm比（191.88±40.95）μm,（0.75±0.01）分比（2.00±0.76）分,（1.38±0.52）分比（2.00±0.92）分,P＜0.05].阿维A组血清IL-17、IL-6、IL-10均显著低于硬皮病组[（50.69±11.72）pg/mL比（66.89±16.62）pg/mL,（85.77±12.06）pg/mL比（118.68±22.62）pg/mL,（57.65±21.74）pg/mL比（131.07±22.52）pg/mL,P＜0.05].三组小鼠血清TGF-β1水平差异无统计学意义.结论 阿维A可显著改善硬皮病小鼠皮肤及肺部症状,其作用机制可能与影响Th17/Treg的平衡有关.     

白芍总苷对硬皮病小鼠的治疗作用及机制研究

目的 通过给予硬皮病小鼠白芍总苷干预治疗,观察小鼠皮肤硬化的改善情况,探讨白芍总苷对硬皮病小鼠的治疗作用及可能机制.方法 将BALB/c小鼠随机分为A、B、C3组,分别给予皮下注射磷酸盐缓冲液(A组),博来霉素( B、C组).4周后,取皮损做病理切片、HE染色,检测羟脯氨酸含量,验证硬皮病模型是否成功.之后,A、B组以生理盐水灌胃,C组白芍总苷灌胃;4周后,检测皮损处羟脯氨酸、TGF-β1和Smad7的表达.结果 1)B、C组注射4周后,注射区皮肤明显硬化、脱毛.组织病理、HE染色及羟脯氨酸含量检测,证实硬皮病模型成功建立.2)实验8周后,组织HE染色提示: B组真皮层明显增厚,胶原纤维明显增多增粗,排列致密;C组较B组,其真皮层变薄,胶原纤维减少,排列疏松;羟脯氨酸含量比较:C组(313.556±40.660)明显低于B组(419.850±52.530),差异有统计学意义(P<0.05);而C组(313.556±40.660)稍高于A组(296.909±31.356),差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化法测定TGF-β1和P-Smad7的变化:在A组小鼠皮损组织中,均呈弱阳性表达,在B、C组小鼠均呈强阳性表达;B组(1 198.080±376.234,763.500±287.640)的表达均高于A组(275.333±76.255,157.070±49.282)(P <0.05);C组中TGF-β1(836.571±313.656)明显低于B组(1 198.080±376.234),而C组中P-Smad7(1 337.494±405.052)明显高于B组(763.500±287.640),差异有统计学意义(P<0.05).结论 1)在BALB/c小鼠背部皮下注射博来霉素建立硬皮病模型的方法切实可行;2)白芍总苷可以有效缓解硬皮病皮肤硬化程度,其机制之一可能是通过上调Samd7的表达、抑制TGF-β1的表达,从而减轻皮肤的纤维化.     

活性氧簇诱导硬皮病小鼠模型时效性的基础研究

目的应用活性氧簇(ROS)成分次氯酸(HCl O)构建硬皮病小鼠动物模型,观察其皮肤纤维化和肺间质病变发生的时效特点。方法 36只6周龄雌性Balb/c小鼠随机平均分至造模组和对照组。造模组随机分3组,每组6只,分别予小鼠背部中央区皮肤皮下注射HCl O 300μl,每日1次,分别持续4、5和6周;对照组随机分3组,每组6只,注射等量PBS,1次/日,分别持续4、5和6周。注射时间结束2周后处死小鼠,取注射部位周围、腹部皮肤及小鼠肺组织进行HE染色和Masson染色,镜下观察和测定各组皮肤厚度、胶原纤维含量,新鲜皮肤组织测定羟脯氨酸含量。结果 3组对照组(4、5、6周)小鼠背部和腹部皮肤均未出现表真皮层增厚和弹性降低,3组间皮肤厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,连续注射4周HCl O的造模组小鼠背部均出现弥漫增厚,弹性降低,真皮层明显增厚,腹部皮肤真皮层有所增厚;连续注射6周HCl O的小鼠皮肤厚度较4周显著增加(P<0.05),胶原纤维增粗更加明显,并伴有纤维断裂,真皮层炎性细胞浸润,真皮血管壁增厚甚至闭塞。与对照组相比,连续注射4周的造模组小鼠未见明显肺间质病变,而6周造模肺组织出现肺泡间隔增厚,其间成纤维细胞增生,小血管壁增厚等纤维化表现。3组对照组(4、5、6周)小鼠之间背部皮肤的Masson染色胶原纤维组织化学指数比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,造模组背部皮肤的Masson染色胶原纤维组织化学指数升高,(P<0.05),且6周造模组的表达水平高于4周造模组,(P<0.05)。3组对照组(4、5、6周)小鼠之间背部皮肤的羟脯氨酸含量比较,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,造模组背部皮肤的羟脯氨酸含量升高(P<0.05),且6周造模组的表达水平高于4周造模组,(P<0.05)。结论ROS构建的硬皮病小鼠动物模型随诱导时间的延长可出现注射区域外皮肤弥漫纤维化和硬皮病肺间质病变,该模型更加符合硬皮病皮肤和肺部病理改变特点。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。      

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率