CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭中作用

目的：探讨CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞在HBV感染所致慢加急性肝衰竭发病过程中的表达。方法：采用流式细胞仪检测36例慢加急性肝衰竭患者、38例慢性乙型肝炎患者、40例无症状乙肝病毒携带者及40例健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平,并追踪慢加急性肝衰竭组患者转归,评价好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞百分率差异。结果：慢加急性肝衰竭组、慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组及健康对照组外周血CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞分别为（5．14±1．03）％、（9．86±1．72）％、（7．93±1．67）％及（7．06±1．61）％,慢加急肝衰竭组外周血Treg细胞百分率显著低于慢性乙型肝炎组、无症状乙肝病毒携带组和健康对照组（P〈0．01）。慢性乙型肝炎组外周血Treg百分率明显高于慢加急肝衰竭组及健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）,而无症状乙肝病毒携带组与健康对照组外周血Treg百分率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。各组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞的百分率与患者血清HBVDNA呈正相关。慢加急性肝衰竭好转组与未恢复组CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：慢加急性肝衰竭患者发病可能与CD4^＋CD25^＋Foxp^3＋Treg细胞表达过低有关,Treg细胞表达水平不能预示慢加急性肝衰竭患者预后。     

正常妊娠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞和雌二醇水平变化的研究

目的 探讨外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平在正常妊娠整个过程中的变化.方法 采用三色荧光标记流式细胞术检测正常非妊娠健康女性(对照组),早早孕组、早孕组、中孕组、晚孕组各35例妇女外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率;采用电化学发光酶免分析技术分别检测以上各对象外周血雌二醇水平.结果 对照组和早早孕组外周血雌二醇水平明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05);对照组和早早孕组外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05),晚孕组略低于中孕组,但无统计学意义(P＞0.05).结论 正常妊娠过程孕8周左右之后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平均呈现明显升高,并且随孕周增大而升高,正常的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和外周血雌二醇水平在维持正常妊娠过程中发挥重要作用.     

新生儿败血症时外周血CD4~＋CD25~＋CD127~（low/-）调节性T细胞的变化及其临床意义

目的探讨新生儿败血症时外周血CD4＋CD25＋CD127low/-调节性T细胞（Treg细胞）的水平及其意义。方法用流式细胞仪检测26名正常足月新生儿（正常足月儿组）、14例单纯早产儿（单纯早产儿组）及21例新生儿败血症患儿（败血症组）外周血中CD4＋CD25＋CD127low/-Treg细胞的水平。结果正常足月儿组与单纯早产儿组差异无统计学意义（P〉0.05）;败血症组与正常足月儿组、单纯早产儿组比较均显著升高（均P〈0.01）。结论外周血中Treg细胞的相对增加可能在新生儿败血症发生后淋巴细胞应答无能及免疫抑制中发挥作用。     

黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4IFN-γIL-10的影响

目的探讨黄芪对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞及IL-4、IFN-γI、L-10的影响。方法将BALB/c小鼠30只随机分为对照组、哮喘组和黄芪组。以卵蛋白（OVA）致敏激发法制备小鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ、IL-10及血清中IL-10的含量;流式细胞术（FCM）、反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测小鼠脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及FoxP3 mRNA表达情况。结果哮喘组小鼠BALF中IL-4含量明显高于对照组（P〈0.01）而低于黄芪组（P〈0.01）。与对照组相比,哮喘组小鼠BALF中IFN-γI、L-10、血清中IL-10含量及脾脏中CD4＋CD25＋调节性T细胞数量、FoxP3 mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）;而黄芪组的上述改变较哮喘组显著增加（P〈0.05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞参与了支气管哮喘的发病过程,黄芪可通过上调CD4^＋CD25^＋调节性T细胞、FoxP3 mRNA的表达及增加IL-10含量减轻哮喘炎症。     

非小细胞肺癌外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞分析

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节T细胞（Treg）占CD4^＋T细胞的比例变化,探讨其临床意义。方法采用流式细胞仪检测32例非小细胞肺癌患者和15例正常健康者（对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例。结果健康对照纽外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（0．54±0．51）％;NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞比例为（1．40±0．98）％。两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论NSCLC患者外周血CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例明显升高,提示与肺癌免l癌逃逸有美。     

CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Treg细胞的表达水平,探讨COPD患者体内免疫功能的状态及Treg细胞在疾病进展中的临床意义。方法选择AECOPD和COPD稳定期患者各30例,20例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪进行检测外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞、CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例。SPSS17．0软件进行统计学分析处理。结果AECOPD组和COPD组外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例分别为（9．52±0．95）％和（9．72±0．97）％均低于对照组（10．22±1．10）％,差异无统计学意义（F=2．48,P=0．093）。3组间CD4＋CD25＋CD127^（low/-）Treg细胞比例差异有统计学意义（F=13．57,P=0．0）,AECO．PD组（4．50±0．83）％显著低于COPD稳定期（5．22±0．64）％和对照组（5．61±0．67）％,而COPD稳定期较对照组降低,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COPD患者外周血中CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞降低,存在免疫内环境的失衡,Treg细胞可能参与了COPD的发病和急性加重过程。     

IVF-ET超促排卵及妊娠状态CD4^＋CD25^＋Treg、CD152的表达

目的研究超排及妊娠对CD4^＋CD25^＋Treg、CTLA-4（CD152）的影响,并比较妊娠结局CD4^＋CD25^＋Treg细胞及CTLA-4（CD152）水平。方法采用流式细胞仪检测对照组卵泡期、黄体期及研究组卵泡期、黄体期、HCG日CD4^＋CD25^＋Treg／CD4^＋．CTLA-4（CD152）,CD4^＋百分数,并检测研究组不同妊娠结局CD4^＋CD25^＋reg／CD4^＋百分数。结果对照组与研究组的卵泡期CD4^＋CD25/CD4^＋百分数比较,其差异无统计学意义。对照组与研究组黄卵泡期CD4^＋CD25^＋CD152^＋／CD4^＋CD25^＋百分数之间相比较,二者差异无统计学意义（P〉0．05）,研究组卵泡期与HCGCD4^＋CD25＋CD152^＋／CD4^＋CD25^＋百分数之间比较,二者差异无统计学意义（P＞0．05）,三者相比,差异无统计学意义（P〉0．05）。未妊娠组与生化妊娠组相比差异无统计学意义（p〉0.05）。临床妊娠组卵泡期、黄体期的百分数明显升高。E2与CD4^＋CD25^＋／CD4^＋之间并无相关关系。生化妊娠与临床妊娠的CD4^＋CD25^＋／CD4^＋作回归关系分析二者之间存在相关关系。结论①超排中多个卵泡同步发育所致的高雌孕激素水在无外来抗原植入的情况下不能刺激CD4^＋CD25^＋Treg的增殖及CTLA-4（CD152）表达增高。②妊娠外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞数量上的高低与妊娠结局有相关关系,CD4^＋CD25^＋Treg细胞在妊娠免役耐受中有重要作用。     

牙周炎不同时期牙龈组织中CD4＋CD25＋T细胞表达变化研究

目的：观察处于牙周炎发生不同时期的牙龈组织的中CD4＋CD25＋Treg比例变化，探讨CD4＋CD25＋Treg在牙周炎发生时的免疫调节作用。方法选择35只成年SPF级Wistar大鼠，丝线结扎加高糖饮食建立大鼠牙周炎发生的动物模型，获得类似牙周炎自然病程的连续组织标本，病理切片确定病损，分别获取第2、4、8、12周的大鼠牙龈组织，术前未结扎组对照。以流式细胞仪检测不同时段牙周病损和外周血中CD4＋CD25＋Treg的比例变化。结果建立了Wistar大鼠牙周炎发生的动物模型，病理切片确定了牙周病损的存在。结果显示伴随牙周炎发生的牙槽骨的吸收逐渐增多。流式细胞仪结果显示结扎后第2、4、8、12周牙龈中CD4＋CD25＋Treg占CD4＋T细胞的比例为9.11%、13.32%、15.16%，11.06%。与术前存在显著性差异。结论牙周炎发生时牙龈病变中CD4＋CD25＋Treg自逐渐升高，稳定期回落，牙周炎发生发展规律一致。从而证实CD4＋CD25＋Treg细胞参与介导了牙周炎发生的免疫调控     

乙型肝炎患者CD4＋CD25＋调节性T细胞检测及意义

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在乙型肝炎患者发病机制中的作用。方法利用免疫荧光法检测20例携带者、10例慢性乙型肝炎、5例慢性重症乙型肝炎患者的CD4＋CD25＋调节性T细胞水平,分析与HBV基因型的关系。结果（1）重型乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（2．52±0．94）％,较慢性乙型肝炎组的（5．25±2．17）％差异有统计学意义（P〈0．05）,比乙肝病毒携带者组及健康对照组则差异有统计学意义（P均〈0．01）;（2）慢性乙型肝炎组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率与无症状乙肝病毒携带者组及健康对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0．05）;（3）乙肝病毒携带者组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（8．51±2．82）％,与健康对照组的（8．51±2．82）％比较差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）HBV基因型C型组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的百分率为（6．42±2．36）％,较HBV基因型B型组的（7．64±2．87）％稍为下降,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞能抑制T细胞对乙肝病毒的免疫反应,从而抑制乙型肝炎的发生;CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平与病情轻重有一定的关系。     

外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4、hCMV-IgM与动脉粥样硬化型急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化的关系

目的探讨外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4、人巨细胞病毒(hCMV)-IgM与动脉粥样硬化型急性脑梗死(As-ACI)患者颈动脉粥样硬化的关系。 方法选取89例As-ACI患者(脑梗死组),另选取健康体检者43例(对照组)。根据颈内动脉超声结果将As-ACI患者分为内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组。比较各组外周血CD4＋CD25＋Treg细胞水平、单个核细胞TLR4表达水平、hCMV-IgM抗体阳性率和内膜中膜厚度(IMT)。分析As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素,分析CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4与IMT的相关性及其对颈动脉狭窄的预测价值。 结果脑梗死组CD4＋CD25＋Treg细胞、HDLC水平低于对照组,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、TC、TG、LDLC、hs-CRP水平、IMT高于对照组(P＜0.05)。内膜正常组、内膜增厚组、斑块组、狭窄组CD4＋CD25＋Treg细胞水平依次降低,TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性率、IMT依次增高(P＜0.05)。CD4＋CD25＋Treg细胞水平与IMT呈负相关,TLR4表达与IMT呈正相关(P＜0.05)。高血压、CD4＋CD25＋Treg表达、TLR4表达、hCMV-IgM抗体阳性是As-ACI患者颈动脉狭窄的危险因素(P＜0.05)。CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4表达水平联合检测的预测价值高于单独检测(P＜0.05)。 结论外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4、hCMV-IgM抗体阳性率与As-ACI患者颈动脉粥样硬化进展有关,外周血CD4＋CD25＋Treg细胞、TLR4联合可以较好预测病变过程。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

过继性转移TGF-β诱导CD4＋CD25＋调节性T细胞对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响

目的观察过继性转移转化生长因子-β（TGF-β）诱导生成CD4＋CD25＋调节性T细胞对自然流产模型小鼠胚胎丢失率的影响。方法从正常妊娠CBA/J孕鼠脾脏中分选CD4＋CD25-T细胞,体外经TGF-β诱导转化为CD4＋CD25＋调节性T细胞,流式细胞仪检测其对自身反应性T细胞增殖的抑制作用。实验小鼠随机分为正常妊娠组和自然流产模型组,后者根据干预方式的不同分为空白组（自然流产模型未干预）、CD4＋CD25＋T细胞组（自然流产模型过继性转移天然CD4＋CD25＋调节性T细胞）、TGF-β诱导CD4＋CD25＋T细胞组（自然流产模型过继性转移TGF-β诱导CD4＋CD25＋调节性T细胞）和对照组（自然流产模型注射CD4＋CD25-T细胞）。于孕第14日采集血样后处死小鼠。ELISA法检测血清白介素-10（IL-10）、TGF-β1和γ干扰素（IFN-γ）水平,Western blotting和Real-time PCR检测蜕膜组织Foxp3 mRNA和蛋白的表达。计算各组孕鼠胚胎丢失率。结果与空白组和对照组比较,天然CD4＋CD25＋T细胞组和TGF-β诱导CD4＋CD25＋T细胞组血清IL-10、TGF-β1水平升高,IFN-γ水平降低;蜕膜组织中Foxp3 mRNA和蛋白的表达上调;胚胎丢失率显著降低（P〈0.05）。结论向自然流产模型小鼠过继性转移TGF-β诱导生成CD4＋CD25＋调节性T细胞,可诱导小鼠体内Th1/Th2免疫反应向Th2优势偏移,降低胚胎丢失率。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对哮喘大鼠免疫功能影响

目的:观察CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对CD4+CD25-T细胞增殖和Th1/Th2细胞因子分泌的影响,探讨其在哮喘气道炎症中的作用机制。方法:将哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞分别与卵白蛋白(OVA)免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞和哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞联合培养,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测量细胞增殖情况,ELISA检测细胞IL-4、IL-5和IFN-γ含量。结果:OVA耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞能抑制CD4+CD25-T细胞增殖和Th2细胞因子分泌(P<0.05);哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞可明显抑制IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论:OVA免疫耐受大鼠CD4+CD25+Treg细胞可能通过抑制哮喘大鼠CD4+CD25-T细胞增殖和影响Th1/Th2平衡发挥作用,哮喘大鼠CD4+CD25+Treg细胞存在功能异常,可能与哮喘的发病有关。     

原因不明性复发性流产淋巴细胞免疫治疗的剂量及疗效研究

目的：探讨原因不明性复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）患者再次妊娠结局及治疗前后患者外周血调节性T细胞水平的变化。方法对165例URSA患者进行主动免疫治疗,观察患者治疗后再次妊娠结局。同时检测和分析治疗前后患者外周血的CD4＋CD25＋Tr水平。将试验过程中供体血浆析出较少致使分离得到的淋巴细胞较少的患者37例作为低剂量组,较多者84例作为高剂量组。结果165例患者中,再次妊娠121例,仍在治疗中44例。再次妊娠的患者中成功分娩87例,再次发生早期流产14例,继续妊娠20例,主动免疫治疗成功率88.5%。其中低剂量组成功分娩29例,再次早期流产8例,主动免疫治疗成功率（72.4%）显著低于高剂量组（92.3%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。所有患者治疗后CD4＋CD25brightT表达水平均显著高于治疗前（P＜0.05）;妊娠成功患者外周血CD4＋CD25＋Tr及CD4＋CD25brightT均较妊娠失败者显著升高（P＜0.05）。结论主动免疫治疗对 URSA 患者有效,治疗时应注射高剂量淋巴细胞,主动免疫治疗可显著提高患者 CD4＋CD25brightT 的表达水平, CD4＋CD25brightT可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素。     

糖尿病合并肺部感染血CD4＋CD25＋调节性T细胞的变化及意义

目的 探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在糖尿病合并肺部感染患者免疫机制中的作用.方法 20例糖尿病合并肺部感染患者,于治疗前（DM-P组）及治愈后（DM组）分别用流式细胞仪检测血CD4＋、CD4＋CD25＋,计算CD4＋CD25＋/CD4＋比值,并与20例肺部感染患者（肺部感染组）、30例健康体检者（健康对照组）比较.结果 DM-P组及肺部感染组CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及比值均显著高于健康对照组（P＜0.01）,DM-P组及DM组CD4＋CD25＋调节性T细胞数量及比值显著少于肺部感染组（P＜0.05）.结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞比例减少可能与糖尿病合并肺部感染者存在免疫缺陷、致炎及抗炎失衡、感染难治愈有关.     

TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖动力学研究

目的：探讨转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）诱导的新生儿脐带血CD8^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性。方法：新生儿脐带血单个核细胞经羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein diacetate,succinimidyl ester,CFSE）标记后,加入TGF-β1,同时用CD3mAb激活和IL-2培养扩增。培养第4、6、8天收集细胞,用流式细胞术检测活化增殖后的CD4^＋CD25^＋、CD8^＋T细胞增殖动力学变化。结果：培养后第6、8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞增殖指数分别为11.52、23.04,高于对照组CD4^＋CD25^＋T细胞（6.68,10.46）及实验组CD8^＋T细胞（4.23,5.43）。培养后第8天,实验组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为52.74%,在各代中以第8代所占比例最高,而对照组CD4^＋CD25^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为36.26%;实验组CD8^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为13.54%,在各代中所占比例最高的为第2代,而对照组CD4^＋T细胞第8代到第10代所占的比例为29.44%。结论：TGF-β1诱导的新生儿脐带血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞增殖活性明显强于CD8^＋T细胞。