3种寒性中药对优甲乐所致甲亢模型动物的影响

目的:探索甲亢动物模型用于寒性中药药性的评价可行性。方法:采用优甲乐灌胃给药造热症模型大鼠,并分别灌胃给予韩星中药黄连、黄柏及黄芩水煎液15天。观察体征指标的变化,给药第14天采用呼吸仪测定耗氧量(VO2)、二氧化碳消耗量(VCO2)、产热量(H)及能量消耗量(EE)。采用酶联免疫法测定血浆TSH、TRH、c AMP、T4、5-HT、DA和17-OHCS含量,分光光度法测定丙酮酸含量。结果:模型组大鼠肛温及饮水量升高,并伴随体质量下降。模型组VO2、VCO2、H以及EE均高于空白组(P≤0.01)。黄连组和黄柏组大鼠的VO2、H及EE低于模型组(P≤0.05)。模型组血浆的T4、c AMP、DA、17-OHCS含量较空白组升高,但TSH和TRH并无统计学差异。黄连和黄芩组血浆T4含量较模型组降低(P≤0.01),黄连、黄柏和黄芩组血浆丙酮酸及c AMP含量较模型组降低(P≤0.01),黄连组血浆DA及17-OHCS含量较模型组降低(P≤0.05)。结论:优甲乐所致大鼠甲亢模型可作为热症模型可用于典型寒性中药药性的评价。     

真武汤对肾阳虚水肿大鼠模型的保护作用及对IL-17表达的影响

目的探讨真武汤对肾阳虚水肿大鼠模型的保护作用及其机制。方法每日腹腔注射3.75 mg/kg氢化可的松溶液,同时于第1、8日通过尾静脉注射阿霉素溶液,注射剂量分别为3.5、3 mg/kg,连续14 d,将造模成功的24只大鼠随机分为模型组、真武汤组(1.9 g/mL)、阳性药组(盐酸贝那普利,1.2 mg/mL),另设正常组。各组分别给予相应药物,正常组给予等体积0.9%氯化钠注射液,连续21 d。于造模第14日和给药第21日,测量大鼠体质量、尿量、尿蛋白含量;末次给药后,检测大鼠血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)水平;酶联免疫法检测环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、醛固酮(ALD)、白细胞介素-17(IL-17)水平;免疫组化法测定肾脏组织中IL-17的表达。结果造模后,与正常组比较,各组大鼠尿蛋白及尿量均显著升高(P<0.05或P<0.01),体质量增长缓慢(P<0.05或P<0.01),提示造模成功。给药后,与模型组比较,真武汤组和阳性药组体质量显著增长(P<0.05或P<0.01);真武汤组和阳性药组尿蛋白及尿量均显著下降(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠cAMP、cAMP/cGMP显著降低,cGMP显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,真武汤组cAMP、cAMP/cGMP显著升高,cGMP水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠Scr、BUN、ALD、IL-17含量均显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,真武汤组和阳性药组Scr、BUN、ALD、IL-17含量均显著下降(P<0.05或P<0.01);与正常组比较,模型组肾组织中IL-17在肾小管上表达显著,肾小球有少量表达,呈深棕色;与模型组比较,真武汤组和阳性药组肾组织中IL-17表达明显降低,弱阳性表达。结论真武汤对肾阳虚水肿有治疗功效且能明显改善肾功能,其机制可能与抑制IL-17介导的足细胞凋亡有关。     

基于寒热证模型大鼠研究五倍子发酵百药煎的药性变化和归属

研究五倍子与百药煎对寒、热证模型大鼠的影响,揭示五倍子发酵为百药煎的药性变化和归属。建立左甲状腺素钠片灌胃给药诱导大鼠热证模型和冰水刺激诱导大鼠寒证模型,分别灌胃给予五倍子和百药煎不同剂量水煎液15 d,观察记录体征指标的变化,测定大鼠肝脏中丙酮酸(PA)含量和ATP酶活力,血清中大鼠多巴胺(DA)、甲状腺激素(T4)、磷酸腺苷(cAMP)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、17-羟皮质类固醇(17-OHCS)、促甲状腺激素释放激素(TRH)和促甲状腺激素(TSH)含量。结果热证模型组大鼠肛温、饮食饮水量及体质量升高,模型组cAMP,NE,17-OHCS,TRH,PA含量显著升高(P0. 05),TSH,Na-K ATPase,Ca-Mg ATPase含量较空白组极显著升高(P0. 01),5-HT含量较空白组显著降低(P0. 05);五倍子高剂量(WG)及百药煎高剂量组(BG) T4,DA,NE,TSH,TRH,cAMP,17-OHCS含量极显著降低(P0. 01),PA,Ca-Mg ATPase较模型组含量显著降低(P0. 05),且五倍子高剂量组(WG)含量低于百药煎高剂量组,但无显著性差异;五倍子高剂量组及百药煎高剂量组大鼠血清5-HT含量较模型组均升高,且五倍子高剂量组含量高于百药煎高剂量组,但无显著性差异;热证模型组大鼠各脏器指数与空白组比较未出现明显改变,给药组大鼠脏器指数与模型组比较,未见显著性差异。寒证模型组、五倍子组和百药煎组大鼠均出现肛温、饮食饮水量及体质量降低,DA,T4,cAMP,NE,17-OHCS,TRH,TSH,PA,Na-K ATPase,CaMg ATPase含量较空白组均显著降低(P0. 05),5-HT含量较空白组均显著升高(P0. 05),心、肺、肾脏指数较空白组显著升高(P0. 05)。五倍子和百药煎均能明显改善左甲状腺素钠所致的热症模型大鼠症状,且五倍子的效果优于百药煎,但均不能改善冰水刺激引起的寒证模型大鼠症状,提示五倍子与百药煎药性同为寒凉,但百药煎寒性弱于五倍子,发酵炮制的百药煎寒性缓和,结合临床应用药性归属"微寒"比"平"更为准确。     

10味温中散寒药对胃实寒证大鼠交感神经-肾上腺机能的影响

目的:观察干姜等10味温中散寒药对胃实寒证大鼠尿17-OHCS与CAs以及血清ACTH、D-β-H的影响,探讨其对胃实寒证大鼠交感神经-肾上腺系统机能的影响,揭示10味药的温热药性本质。方法:除空白组外,其余动物灌服知母冰水液建立胃实寒证模型。造模成功后分为模型组、阳性组、干姜等10个温中散寒药组以及石膏、黄连2个反性药对照组,给药3次后检测尿液17-OHCS及CAs含量和血清ACTH、D-β-H含量。结果:模型组大鼠尿液中17-OHCS、CAs、血清中ACTH、D-β-H含量均降低,各治疗组大鼠均显著升高。结论:10味温中散寒药有提高胃实寒证大鼠交感神经-肾上腺机能的作用,通过增强机体交感神经-肾上腺机能而呈现其温热药性。     

加味桃核承气汤对Aβ损伤大鼠外周血T细胞亚群和IL-6的影响

目的观察加味桃核承气汤对β-淀粉样蛋白(Aβ)损伤大鼠脑外周血T细胞亚群和IL-6的影响。方法 SD大鼠36只随机分为4组(每组9只),空白对照组(利用立体定位仪将PBS注射到大鼠双侧海马)、痴呆组、中药组和西药组(后三组注射Aβ1-42全长肽)。造模7 d后,中药组以灌胃法(ig)给予加味桃核承气汤20 ml(20 mg.kg-1)治疗,西药组ig给予尼莫地平20 ml(15 mg.kg-1)治疗,同时空白对照组和痴呆组给予同样体积的生理盐水,1次/d,连续21 d。采用流式细胞仪测定四组大鼠外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞相对数及CD4+/CD8+比例;用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-6含量,以上指标各组间进行统计学比较。结果与空白对照组相比,Aβ损伤痴呆大鼠外周血CD4+T淋巴细胞所占比例显著增高(P<0.01),CD8+T淋巴细胞降低(P<0.05),CD4+/CD8+增高(P<0.01),IL-6含量显著增高(P<0.01);而痴呆大鼠应用加味桃核承气汤治疗后,CD4+T淋巴细胞减少,CD4+/CD8+降低,IL-6水平降低,三组指标与痴呆组相比均存在显著差异(P<0.05);而且中药治疗组与应用Ca离子阻断剂尼莫地平西药治疗结果相似,两者无统计学差异(P>0.05)。结论加味桃核承气汤能纠正T淋巴细胞亚群比率失调、降低血清IL-6含量,从而发挥其抗老年性痴呆的作用。     

青钱柳对阴虚型2型糖尿病大鼠内分泌-免疫-环核苷酸系统的影响

目的:探讨青钱柳对阴虚型2型糖尿病大鼠内分泌、免疫功能及环核苷酸的影响。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为空白组7只和造模组53只。其中空白组给予普通饲料,造模组给予高脂饲料喂养8周。第9周,以0.2mg/kg的剂量皮下注射甲状腺素溶液1周。第10周,以30mg/kg的剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素,并于72h后选择空腹血糖>11.1mmol/L的成模大鼠随机分为模型组,知柏地黄丸组,CPE低、中、高剂量组,每组7只;空白组和模型组给予无菌水,知柏地黄丸组给予知柏地黄丸混悬液(0.3g/kg),CPE低、中、高剂量组分别给予青钱柳叶水提取物(CPE)0.25、0.5、1g/kg。连续给药4周,给药期间检测空腹血糖(FBG),给药结束后,检测糖环磷酸腺苷、内分泌免疫等代谢指标。结果:与模型组比较,CPE低、高剂量组大鼠T3、T4含量显著下降(P<0.01,P<0.05);CPE低、中剂量组大鼠C4含量显著升高(P<0.01);CPE高剂量组大鼠T、C3含量显著升高(P<0.01,P<0.05);CPE中、高剂量组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α、E2含量显著下降(P<0.05,P<0.01),IgG、IgM含量显著升高(P<0.05,P<0.01);CPE低、中、高剂量组大鼠COR含量显著升高(P<0.01,P<0.05),rT3、TP、ALB、UA、cAMP、cGMP的含量显著下降(P<0.01,P<0.05)。结论:CPE可调节阴虚型2型糖尿病大鼠的能量代谢异常,缓解内分泌激素紊乱,调节免疫物质的分泌和环核苷酸代谢。     

桃核承气汤及其拆方组对蓄血症大鼠模型“瘀热”相关指标的影响

目的:观察桃核承气汤及其拆方组对蓄血症大鼠模型"瘀热"相关指标的影响。方法:间隔24 h两次大鼠尾静脉注射内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)50μg.kg-1造模。第1次尾静脉注射后0.5,12 h,第2次尾静脉注射后0.5 h灌胃给药。给药组剂量全方组10 g.kg-1,调胃组5.7 g.kg-1,调桃组8.6 g.kg-1,调桂组7.1 g.kg-1,桃桂组4.3 g.kg-1。模型对照组,空白对照组给相应剂量生理盐水。末次注射后2 h取血,检测血清中组织纤溶酶原激活物(tissue type plasminogenactivator,t-PA),纤溶酶原激活物抑制剂-1(plasminogen activator inhibitor,PAI-1),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),丙二醛(malondialdehyde,MDA),一氧化氮(nitric oxide,NO)及血浆中内皮素-1(endothelin-1,ET-1),6-酮-前列腺素-1α(6-keto-prostaglandin F1α,6-keto-F1α),血栓烷素B2(thromboxane B2,TXB2)。结果:全方组,调胃组,调桂组,调桃组能上调SOD(P<0.01),下调MDA(P<0.01)。全方组,调胃组,调桂组能下调PAI-1及t-PA/PAI-1(P<0.01)。调胃组,调桂组还能上调t-PA(P<0.01)。桃桂组对SOD,MDA及PAI-1干预作用小,与全方组比较有差异(P<0.01)。各给药组均能升高大鼠血浆中TXB2,降低6-Keto-PGF1α/TXB2,降低NO。结论:桃核承气汤对"瘀热"指标均有积极的干预作用。各拆方组中,调胃组处于核心地位,对"瘀热"指标作用均比较好。调桂组对反映"瘀"的指标干预作用好于全方组。桃桂组在调解"瘀热"指标中表现均最差。     

六味地黄丸对肾阴虚大鼠肺肾组织水通道蛋白1表达的影响

目的:观察六味地黄丸对肾阴虚大鼠肺、肾组织水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(10只)、甲状腺素组(30只),采用甲状腺素混悬液灌胃复制肾阴虚大鼠模型4周,造模成功后将模型组大鼠随机分为3组:甲状腺素组、六味地黄丸低剂量组和六味地黄丸高剂量组,每组10只,给药组给予相应剂量六味地黄丸混悬液灌胃4周,观察记录各组大鼠体质量、饮水量和尿量等一般症状体征;末次给药后,实时荧光定量PCR检测大鼠肺、肾组织中AQP1 mRNA的表达,Western Blot测定肺、肾组织AQP1蛋白的表达。结果:与对照组比较,甲状腺素组大鼠体质量显著降低(P<0.01),饮水量明显增多(P<0.01),尿量显著减少(P<0.01);肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白表达显著高于对照组(P<0.01);给予六味地黄丸干预后肾阴虚大鼠的一般症状体征得到显著改善,肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.01)。结论:六味地黄丸可有效纠正肾阴虚大鼠水液代谢紊乱,其机制可能与下调肺、肾组织中AQP1 mRNA和蛋白表达有关。     

调胃承气汤对肠源性脓毒症大鼠血液流变学指标和凝血功能的影响

目的观察调胃承气汤通过对肠源性脓毒症大鼠血液流变学指标及凝血功能的影响,探讨其对肠黏膜屏障功能的改善作用。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、GOS模型组、乌司他丁组、调胃承气汤(TWCQT)高、低剂量组,每组8只。术后2 h、10 h和24 h按照相应剂量分别进行灌胃给药,TWCQT高剂量组与低剂量组相应浓度灌胃调胃承气汤,假手术组与GOS模型组大鼠灌胃0.9%氯化钠注射液,乌司他丁组腹腔注射乌司他丁。最后一次给药0.5 h后结束实验,检测大鼠全血黏度、红细胞聚集指数和血浆黏度;检测大鼠血清中活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)与凝血酶时间(TT);检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和D乳酸(D-LA)的含量;电镜下观察各组小肠组织超微结构。结果与假手术组相比,GOS模型组大鼠全血黏度、红细胞聚集指数与血浆黏度显著升高(P 0.01)。与GOS模型组相比,乌司他丁组、TWCQT高剂量与低剂量组大鼠全血黏度、红细胞聚集指数与血浆黏度显著降低(P 0.01);与假手术组相比,GOS模型组大鼠血清中APTT、PT与TT显著延长(P 0.01)。与GOS模型组相比,乌司他丁组、TWCQT高剂量与低剂量组大鼠血清中APTT、PT与TT明显缩短(P 0.01);与假手术组相比,模型组血清中TNF-α和D-LA含量显著提高(P 0.01);与GOS模型组相比,乌司他丁组、TWCQT高剂量与低剂量组血清中TNF-α和D-LA含量显著降低(P 0.01);与假手术组相比,GOS模型组小肠黏膜组织微绒毛断裂脱落、线粒体断裂、内质网扩张与紧密连接结构破坏严重。与GOS模型组相比,乌司他丁组、TWCQT高剂量与低剂量组小肠黏膜组织微绒毛无断裂脱落、线粒体无严重肿胀、内质网无变形,紧密连接结构相对完整。结论调胃承气汤能有效地改善肠黏膜结构屏障功能,这种改善作用的机制可能是调胃承气汤能通过对肠源性脓毒症大鼠血液流变学指标和凝血功能的影响,减少炎症反应的损伤作用。     

莪术油有效成分联合金丝桃苷抗紫外辐射作用研究

目的:研究莪术油有效成分以及联合金丝桃苷对3T3细胞紫外辐射损伤的保护作用。方法:建立3T3细胞紫外辐射模型,采用流式细胞术检测莪术油有效成分(莪术醇和吉马酮)以及联合金丝桃苷作用前后细胞内活性氧浓度的变化,检测胞质匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量变化。结果:流式细胞术检测结果显示,与UVB组比较,各给药组的活性氧含量显著降低(P<0.01),其中以联合给药组最为显著(P<0.01)。抗氧化指标检测结果显示,与UVB组比较,吉马酮组、莪术醇组以及三者联合给药组的SOD、CAT和GSH-Px活性均显著升高(P<0.01),而MDA含量显著降低(P<0.01)。金丝桃苷组的SOD活性显著升高(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),而CAT和GSH-Px活性无显著性差异(P>0.05)。联合给药组的SOD活性升高最为显著(P<0.01),而CAT、GSH-Px酶活性和MDA含量差异不显著。结论:莪术油有效成分能提高SOD、CAT、GSH-Px等酶活性,降低活性氧和MDA含量。联合金丝桃苷能进一步降低活性氧的生成,提高SOD活性,对UVB辐射造成的细胞损伤具有协同保护作用。