邻苯二甲酸二丁酯诱导氧化应激及抑制CYP17a1干扰睾酮合成

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致睾丸氧化损伤与睾酮合成途径的关系及可能的机制。方法 24只健康4周龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组(玉米油)及DBP低、中、高剂量组(80、200和500 mg/kg),每组6只,经灌胃染毒每日1次、连续染毒4周。染毒结束后称量动物体重及睾丸和附睾的重量,用生化方法检测睾丸匀浆中丙二醛(MDA)和活性氧自由基(ROS)的含量,抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶-1(GPx-1)的活性变化,类固醇合成酶3β-HSD1、17β-HSD3的活性,用放射免疫法测定外周血中睾酮、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾丸内的睾酮(T)、雄烯二酮(ASD)的水平,用real timeq PCR方法检测St AR、P450scc、3β-HSD1、17β-HSD3、CYP17a1 mRNA水平的表达变化。结果与对照组相比,高剂量组体重、睾丸重量明显减少(P<0.05);循环血LH、FSH增高(P<0.05),循环血及睾丸内睾酮、睾丸内ASD均降低(P<0.05);MDA和ROS的含量明显升高(P<0.05),SOD、CAT、GPx-1的活性及3β-HSD1的酶活性均明显降低(P<0.05);St AR、P450scc、3β-HSD1、CYP17a1 mRNA降低,17β-HSD3 mRNA升高(P<0.05)。中剂量组循环血LH、FSH增高(P<0.05),睾丸内T和ASD降低(P<0.05);ROS升高(P<0.05),GPx-1的活性降低(P<0.05);3β-HSD1酶活性减少(P<0.05);St AR、P450scc、CYP17a1 mRNA降低(P<0.05)。低剂量组所有指标未见有统计学意义的改变。结论 DBP暴露干扰了大鼠睾丸氧化/抗氧化平衡,降低了GPx-1活性,抑制CYP17a1基因的表达,降低睾丸ASD水平,最终抑制间质细胞内睾酮合成。CYP17a1降低是DBP干扰睾酮合成的毒性作用机制之一。     

妊娠期二月桂酸二丁基锡暴露对子代雄性大鼠生殖系统的影响

目的探讨妊娠期二月桂酸二丁基锡(DBTD)暴露对子代雄性大鼠性成熟后生殖系统的影响及其作用机制。方法将16只健康SPF级妊娠Wistar大鼠随机分为4组,分别为溶剂对照(玉米油)组和低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高剂量(30 mg/kg)DBTD染毒组,每组4只。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为5 ml/kg,自妊娠第12～20天连续染毒。仔鼠出生后第70天,每组随机抽取10只雄性大鼠,称重后处死,测定睾丸和附睾重量及其脏器系数、附睾精子数以及血清中黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾酮(T)以及睾丸组织中睾酮(T)的水平,并观察睾丸组织病理学改变。结果各剂量DBTD染毒组子代雄性大鼠体重、附睾重量及其脏器系数、血清中LH和FSH水平与溶剂对照组相比,差异均无统计学意义。与溶剂对照组比较,高剂量DBTD染毒组子代雄性大鼠睾丸重量及其脏器系数,中、高剂量DBTD染毒组子代雄性大鼠附睾精子数较高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。且随着DBTD染毒剂量的升高,子代雄性大鼠睾丸重量及其脏器系数以及附睾精子数均呈升高趋势。与溶剂对照组比较,高剂量DBTD染毒组子代雄性大鼠血清T水平和各剂量DBTD染毒组子代雄性大鼠睾丸T水平均较高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论在本实验染毒时间和剂量范围内,孕期DBTD染毒可干扰子代雄性大鼠体内T的合成和代谢,从而促进睾丸发育和精子形成。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯、氯氰菊酯单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)和氯氰菊酯(CYP)单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠生殖发育的不良影响。方法选择SPF级3周龄雄性SD大鼠24只,随机分为4组,分别为对照组(喂饲玉米油)、DEHP染毒组(500mg/kg)、CYP染毒组(80mg/kg);DEHP、CYP联合染毒组(DEHP 500mg/kg+CYP 80mg/kg),每组6只。采用经口灌胃方式染毒,每天1次,连续染毒30天。于末次染毒24小时后处死动物,测定大鼠体重、睾丸湿重,并计算睾丸系数;测定血清睾酮水平;制备睾丸病理组织切片,光镜观察其组织学改变,电镜观察生殖细胞超微结构;测定睾丸标志酶乳酸脱氢酶(LDH)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(ALP)和琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性。结果与对照组相比,DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸下降时间和包皮分离时间明显延迟,肛门生殖器间距明显缩短(P<0.05或0.01);DEHP单独染毒组睾丸重量及睾丸系数明显降低,血清睾酮水平显著下降(P<0.05),睾丸匀浆中ALP、ACP和LDH活性明显增高,SDH活性显著下降(P<0.01);DEHP、CYP单独及联合染毒组睾丸病理组织学、生殖细胞超微结构均可见明显异常。结论 DEHP、CYP单独及联合染毒对青春前期雄性大鼠均具有明显的生殖毒性作用,可引起生精细胞、支持细胞和间质细胞的变性、坏死及功能障碍,从而导致雄性生殖系统发育和功能的显著异常。其中,DEHP单独染毒呈现主效应,DEHP、CYP联合染毒对大鼠的生殖毒性未呈现明显交互影响。     

短期重复暴露邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对雄性大鼠睾丸脂质过氧化水平的影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)短期重复暴露对雄性大鼠生殖毒性及睾丸脂质过氧化水平的影响。方法将初断乳清洁级Wistar雄性大鼠40只按体重随机分为DEHP低、中、高剂量组[DEHP的染毒剂量分别为10、100、1 000 mg/(kg.d)]和溶剂对照组(玉米油),每组10只。采用灌胃方式进行染毒,连续染毒30 d。测定睾丸组织中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,蛋白定量采用酚试剂法。结果染毒第4周,DEHP高剂量染毒组体重、睾丸质量及其脏器系数低于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。DEHP中、高剂量染毒组睾丸组织中MDA含量高于溶剂对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且MDA含量随着DEHP染毒剂量的增加而升高。DEHP高剂量染毒组睾丸组织中GSH含量、SOD和GSH-Px活力低于溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且SOD和GSH-Px活力均随着DEHP染毒剂量的增加而降低。结论DEHP短期重复暴露对初断乳大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用。DEHP及其代谢产...     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯宫内暴露对子代大鼠睾丸发育及铜锌微量元素的影响

取雌性Wistar大鼠从妊娠日起用10、100、500mg/(kg.d)邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)连续灌胃染毒至孕19d。测定睾丸脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平,超氧化物歧化酶(SOD)活力,睾丸组织中铜、锌微量元素含量。随着DEHP剂量的增加,500mg/(kg.d)DEHP染毒组子代大鼠睾丸中的MDA含量增加,SOD活力降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。500mg/(kg.d)DEHP染毒组的锌元素含量与对照组相比,显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);而铜含量在各组间差别不明显。提示DEHP胚胎期暴露对子代雄性大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用,可增加大鼠睾丸组织的脂质过氧化水平,同时会干扰生殖系统锌元素的代谢。这是DEHP致子代雄性大鼠生殖发育毒性的可能机制之一。 更多还原     

90 d饮水砷暴露对雄性大鼠生殖系统的毒性作用

目的研究90 d饮水砷暴露对大鼠生殖系统的毒性作用。方法将48只SPF Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照组(蒸馏水)、低(50μg/L)、中(150μg/L)、高(450μg/L)剂量组,每组12只,采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒90 d后,处死各组大鼠,解剖取材,称量大鼠睾丸和附睾重量,计算脏器系数;取睾丸,HE染色后光学显微镜下观察大鼠睾丸的组织学变化;采用免疫组织化学染色的方法检测大鼠睾丸组织TGF-β_1的表达。结果与对照组比较,各剂量组大鼠睾丸和附睾脏器系数差异无统计学意义;组织学结果显示,与对照组相比,高剂量染毒组对大鼠睾丸产生一定程度的损伤作用;免疫组化结果显示,各剂量组睾丸组织中TGF-β_1蛋白阳性表达均高于对照组,并且随砷暴露剂量升高,睾丸组织中TGF-β_1蛋白阳性表达增多。结论长期慢性饮水砷染毒引起睾丸组织中TGF-β_1表达增多及雄性大鼠睾丸组织一定程度的损伤。     

三氯异氰尿酸对雄性大鼠生殖系统的影响

目的 观察三氯异氰尿酸(TCCA)长期暴露对SD雄性大鼠生殖系统的影响.方法 选取4～5周龄、体重41.3～55.0g雄性SD大鼠270只,按照每天0、0.71、2.29、7.59 mg/kg剂量水平经口饲养TCCA 12个月和24个月后,检查生殖系统各个脏器病理改变,采用LUCCA病理图像分析软件测量大鼠睾丸平均曲细精管直径(MSTD).结果TCCA染毒12个月,高剂量组睾丸曲细精管直径变小;染毒24个月,低、中、高剂量组睾丸、附睾重量和脏器系数与对照组相比均降低,中、高剂量组睾丸精子生成障碍、曲细精管萎缩和睾丸萎缩、附睾内无精子的发生率与对照组相比明显升高.结论 在2.29、7.59mg/kg的剂量水平时,TCCA的长期染毒能导致大鼠睾丸重量减轻、萎缩及精子生成障碍,TCCA对雄性SD大鼠睾丸具有明显的毒性作用.     

苯并咪唑对大鼠生精功能和睾丸酶活力的影响

目的探讨苯并咪唑对雄性大鼠生精功能和睾丸酶活力的影响。方法将40只清洁级 Wistar 雄性大鼠随机分为低(20mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)苯并咪唑剂量组和溶剂对照组,每组10只,各组经口灌胃染毒,灌胃量为0.01 ml/g,对照组给予等量的蒸馏水和吐温80溶液,每天1次,连续80 d。染毒结束后,立即取睾丸和附睾观察其形态,测定各组大鼠体重以及睾丸和附睾重量,并计算睾丸和附睾的脏器系数;测定附睾尾精子数量和精子活动率以及睾丸标志酶的活力。结果对照组和低剂量组大鼠睾丸和附睾呈粉红色,体积大,光滑饱满。高、中剂量组大鼠睾丸和附睾呈紫红色,体积小,萎缩明显。高、中剂量组大鼠睾丸和附睾的脏器系数、精子数量和精子活动率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。高、中剂量组酸性磷酸酶(ACP)和山梨醇脱氢酶(SDH)活力均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或 P<0.01);且 ACP 和 SDH 活力随着染毒剂量的增加而降低。高剂量组乳酸脱氢酶(LDH)活力低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同组别间葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)活力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论苯并咪唑可影响雄性大鼠生精功能,这可能是由于苯并咪唑影响了睾丸组织能量代谢酶导致未成熟生精细胞脱落。     

邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯联合染毒对雄性大鼠精子生成的影响

目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(di-n-butyl phthalate,DBP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对雄性大鼠精子生成的联合毒性作用.方法 将32只健康清洁级成年SD雄性大鼠按体重随机分为4组,分别为阴性对照组(玉米油)、DBP染毒组(1/20 LD50,1.0 g/kg)、DEHP染毒组(1/20 LD50,1.7 g/kg)和DBP+DEHP染毒组(1.0g/kg DBP+1.7 g/kg DEHP),每组8只.采用灌胃方式进行染毒,每天1次,每周5 d,连续染毒8周.末次染毒24 h后,测量大鼠体重、睾丸和附睾及肝脏脏器湿重,测定精子参数(精子数量、精子活动率及精子畸形率),并观察睾丸及附睾组织形态学改变.结果 DBP和DEHP联合染毒对大鼠体重增长无交互作用(P＞0.05);对睾丸和附睾及肝脏脏器系数存在交互影响,使睾丸和附睾的脏器系数明显降低,肝脏的脏器系数明显升高,表现为协同作用;对精子计数、精子活动率及精子畸形率存在交互影响,使精子数量和存活率明显降低,畸形率明显升高,表现为协同作用.光镜下可见DBP和DEHP联合染毒可引起曲细精管外形不规则、萎缩变性,间质增宽,生精上皮退化变性,甚至几乎消失,生精细胞耗竭,基底部仅有少量的支持细胞且细胞肿胀、变性,出现空泡样改变,基膜尚完整;附睾上皮受损且变薄,间质增宽,管腔内几乎不见成熟精子.结论 DBP和DEHP联合染毒对雄性大鼠具有明显的生殖毒性作用,可严重影响精子生成数量和质量,且对附睾有一定的毒作用.     

饮用水有机提取物对大鼠肝脏CYP1A2与CYP2E1酶活性及蛋白表达的影响

[目的]探讨饮用水有机提取物对大鼠肝脏代谢酶CYP1A2与CYP2E1酶活性及蛋白表达的影响,为当地饮用水有机物污染的安全性评价及肝脏毒性机制的阐明提供依据。[方法]采用固相萃取法提取水样中有机污染物,40只SD大鼠随机分成4组,分别为对照组(玉米油)和低、中、高3个染毒组[剂量分别为5、20、80 L/(kg·d)],经口灌胃亚慢性染毒(12周)。荧光分光光度法和活性比色法分别测定CYP1A2与CYP2E1酶活性。采用Western blot法检测CYP1A2、CYP2E1的蛋白质表达水平。[结果]与对照组相比,高剂量组的CYP1A2酶活性明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);CYP2E1酶活性在中、高剂量组均明显升高(P<0.05)。随着染毒剂量的增加,CYP1A2的蛋白表达量在高剂量组升高(P<0.05);与对照组相比,CYP2E1的蛋白表达量在中、高剂量组均增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]该地较高剂量的饮用水有机提取物可上调CYP1A2及CYP2E1的蛋白质表达,从而诱导CYP1A2和CYP2E1酶活性的增强。此可能为饮用水有机提取物肝脏毒性的重要机制之一。     

氯乙烯影响雄性大鼠睾酮水平研究

目的探讨氯乙烯对雄性大鼠睾酮水平的影响和可能的机理。方法每组6只,4组雄性SD大鼠腹腔注射染毒28d,剂量分别为0、10、100和1000mg/kg.d。应用酶联免疫吸附法测定大鼠血清和睾丸组织中睾酮(testosterone,T)的水平,用荧光定量PCR测定睾丸组织中睾酮合成的限速酶P450胆固醇侧链裂解酶(P450cholesterol side-chain cleavage enzyme,P450scc)和类固醇激素合成急性调节蛋白(steroidogenetic acute regulatory protein,StAR)的mRNA水平。结果染毒28d后,相比对照组,100和1000mg/kg.d剂量组血清和睾丸中的睾酮水平明显下降,并有明显的剂量-反应关系;两者StAR mRNA表达水平显著下降;1000mg/kg.d剂量组的P450scc mRNA表达水平亦明显下降。结论氯乙烯对雄性大鼠血清和睾丸中的睾酮水平有影响,睾丸中StAR和P450scc mRNA水平的下调可能是其机制之一。     

孕期及哺乳期邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯经口染毒对雄性仔鼠生殖发育的影响

目的观察邻苯二甲酸二(2-乙基已基)酯(DEHP)对雄性仔鼠的生殖发育毒性作用。方法采用围生期毒性试验的研究方法,将清洁级SD大鼠随机分为阴性对照组(玉米油)和4个DEHP染毒组(125、250、500、1000mg/kg),采用宫内及哺乳期[受孕后第2天～仔鼠出生后第21天(PND21)]经口灌胃的方式染毒。记录比较雄性仔鼠肛殖距、不同发育阶段雄性仔鼠体重、睾丸、附睾重量、仔鼠出生后第50天(PND50)附睾尾精子总数、精子活率及精子畸形数。结果 125～500mg/kg组不同发育阶段仔鼠体重随染毒剂量增加而增加,500mg/kg组PND21体重与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01),1000mg/kg组体重均低于同发育阶段对照组,PND21体重与对照组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。1000mg/kg组不同发育阶段仔鼠睾丸重量明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01),附睾重量与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。仔鼠出生后4天肛殖距不同程度缩短,除125mg/kg组外,其余各剂量组与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。PND50雄性仔鼠精子总数、精子活率均不同程度降低,精子畸形率不同程度增高,1000mg/kg组与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论母鼠孕期及哺乳期暴露DEHP可影响雄性仔鼠生长、生殖发育。     

CYP2E1在大蒜油拮抗正己烷神经损伤中的作用

目的 研究CYP2E1在大蒜油(garlic oil,GO)阻止正己烷(n-hexane)致大鼠周围神经损伤的作用及其机制.方法 雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常对照组、GO对照组、正己烷模型组、GO低剂量加正己烷组和高剂量加正己烷组(n=10).模型组及GO低、高剂量组大鼠分别给予2000 mg/kg正己烷灌胃;GO低、高剂量组大鼠在正己烷灌胃前1h分别给予40、80 mg/kg GO灌胃,GO对照组给予80 mg/kg,每周6次,持续10周.每2周测步态评分,监测大鼠周围神经损伤情况.于第10周末,断头处死大鼠,检测肝组织中CYP2E1表达及活力的改变,以及血清中2,5-己二酮(2,5-HD)含量的变化.结果 与正常对照组相比,GO对照组大鼠肝脏中CYP2E1含量及活力分别下降83.1％和48.3％,且差异均有统计学意义(P＜0.01);与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中CYP2E1含量及活力分别升高122.5％和72.2％,且差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比,GO低、高剂量组大鼠肝脏中CYP2E1含量分别降低32.9％和39.1％,且CYP2E1活力分别降低27.4％和44.5％,差异均有统计学意义(P＜0.01);与模型组相比,GO低、高剂量组大鼠血清中2,5-HD含量分别下降47.7％和78.7％,且差异均有统计学意义(P＜0.01).各组步态评分显示,模型组及GO低、高剂量组均明显高于对照组,但GO低、高剂量组低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 GO能够有效拮抗正己烷的外周神经损伤,其机制可能与肝脏中CYP2E1含量及活力降低,使正己烷代谢为2,5-HD减少有关.     

青春期前邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯暴露对雌性大鼠生殖发育及过氧化物酶体增殖剂激活受体的影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)暴露对青春期前雌性大鼠性发育及生殖内分泌功能的影响及其可能机制。方法将40只健康3周龄雌性SD大鼠,随机分成对照组(玉米油)和3个实验组,每组10只。实验组按50、150、500mg/kg DEHP经口灌胃,连续染毒28天。观察阴道开口、乳房发育、第一次发情周期的日龄及体重,于末次染毒24小时后进行阴道涂片,确定动情间期,处死动物。Real-time PCR测定卵巢组织相关基因表达水平;ELISA法检测血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P4)及睾酮(T)水平;通过病理学观察卵巢组织的变化;免疫组织化学法测定卵巢组织中PPARγ的表达。结果 500mg/kg组阴道开口日龄提前,150、500mg/kg组阴道开口时体重增加(P<0.05);150、500mg/kg组芳香化酶(P450Arom)mRNA表达与对照组比较,显著下降;各剂量组与对照组相比,T水平明显下降,150、500mg/kg组FSH、E2水平明显减少,而LH水平明显升高(P<0.05);150、500mg/kg组闭锁卵泡明显增多、黄体数目明显减少;150、500mg/kg组卵泡颗粒细胞和黄体颗粒细胞中PPARγ阳性光密度相对量明显高于对照组及50mg/kg组(P<0.05)。结论青春期前DEHP暴露对雌性大鼠性发育及生殖内分泌功能产生影响,其作用机制可能与激活PPARs有关。     

The effects of subacute inhalation of di (2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) on the testes of prepubertal Wistar rats

In animal studies using oral dosing for short periods, di (2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) is well known for its reproductive toxicity, especially for its testicular toxicity. However, extending the period of DEHP exposure in prepubertal rats resulted in significant increases in testosterone. This suggests that the reproductive effect of DEHP might be associated with the timing and the term of exposure. Moreover, the route of exposure may induce differences in its effect because tissue levels of metabolites of DEHP after inhalation are thought to be different from those after oral administration. We researched the effects of inhalation of DEHP on testes of prepubertal rats. Our results showed that inhalation of DEHP by 4-wk-old male Wistar rats at doses of 5 or 25 mg/m(3), 6 h per day, for 4 and 8 wk significantly increased the concentration of plasma testosterone and weight of seminal vesicles. However, the concentration of luteinizing hormone (LH), follicular stimulating hormone (FSH) and the expression of mRNAs of androgen biosynthesis enzyme, cytochrome P450 cholesterol side-chain-cleavage enzyme (P450scc), 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase (3beta-HSD), cytochrome P450 17alpha-hydroxylase/17, 20 lyase (CYP17) and aromatase (CYP19) did not change. Rats with precocious testes did not increase in any of the DEHP groups. We also found that the estimated effective dose in this study was less than those reported in previous studies which used oral dosing. Our study showed that inhaled DEHP increased plasma testosterone concentrations in prepubertal rats and suggested that their effects were more sensitive to inhalation of DEHP than oral dosing.     

邻苯二甲酸二丁酯宫内和哺乳期染毒对F_1代雄性大鼠的生殖发育毒性

目的　观察邻苯二甲酸二丁酯 (DBP)对F1代仔鼠的发育状况及性成熟期雄性仔鼠生殖系统损害情况 ,并期望得到现有文献中缺如的DBP对F1代仔鼠生殖发育毒性的最大无作用剂量 (NOAEL)。方法　选择在宫内暴露期和哺乳期 (受孕第 2天至仔鼠 2 1天断奶 ) ,通过灌胃方式给母鼠染毒 (DBP终浓度分别为 0、5 0、2 5 0和 5 0 0mg (kg·d) ,观察对仔鼠的影响。结果　DBP对母鼠无明显影响 ,中高剂量组 [2 5 0、5 0 0mg (kg·d) ]对F1代雄性仔鼠的出生体重、每窝活产数、体重增长及雄性仔鼠肛殖距有明显影响 ,对性成熟期雄性仔鼠生殖系统损害尤为严重 ,可观察到小睾丸、附睾发育不全甚至缺失、睾丸未降等现象 ,附睾尾精子参数和睾丸精子头计数及附睾、肝、肾、前列腺的脏器系数明显降低 ,而与激素合成相关的垂体系数却略有上升。低剂量组未观察到有害影响。结论　雄性生殖系统是DBP作用的主要靶器官 ,幼年敏感期所受的损害部分不可逆 ,并得到DBP经口染毒对F1代仔鼠生殖发育毒性的NOAEL为 5 0mg (kg·d)。据此 ,进一步提出DBP经口摄入的参考剂量 (RfD)为 5 0 0 μg (kg·d)。     

CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症易感性的研究

目的:探讨P450酶系的CYP19和CYP1B1基因多态性与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)发病的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术(PCR-RFLP)和等位基因特异性PCR技术(AS-PCR)对100例ICP患者和100例正常对照孕妇CYP19基因第3外显子Rsal酶切多态和CYP1B1基因外显子3密码子432(C-G)多态性进行分析。结果:①对照组CYP19的基因型AA、AG、GG频率分别为30.0%、50.0%、20.0%,ICP组分别为38.0%、45.0%、17.0%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因A、G频率分别为55.0%、45.0%,ICP组分别为60.5%、39.5%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.05)。②对照组CYP1B1的基因型CC、CG频率分别为80.0%、20.0%,ICP组分别为70.0%、30.0%,两组均无突变纯合子(GG),两组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组等位基因C、G频率分别为90%、10%,ICP组分别为85%、15%,两组比较差异也无统计学意义(P>0.0S)。结论:CYP19外显子3基因多态性和CYP1B1外显子3密码子432基因多态性与ICP发病无关。     

2,3,7,8-四氯二苯并二噁(口英)对大鼠肝脏芳烃受体和细胞色素P4501A1 mRNA的诱导

目的　研究 2 ,3,7,8 四氯二苯并二口恶 口英 (TCDD)对于SD大鼠肝脏CYP1A1,芳烃受体(AHR)mRNA的诱导 ,探讨其毒作用机制。方法　 30只雌性SD大鼠随机分为对照组和 5个染毒组 ,每组 5只 ,染毒剂量为 0 .0 1、0 .10、1.0 0、10 .0 0、5 0 .0 0 μgTCDD/kg体重 ,用腹腔注射的方式一次染毒 ,2 4h后 ,用RT PCR方法测定肝脏中CYP1A1、AHRmRNA的诱导情况。结果　除 0 .0 1μgTCDD/kg体重外 ,各染毒组AHR和CYP1A1mRNA表达均有所增加 ,其中 ,AHRmRNA在 5 0 μgTCDD/kg体重组明显增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,CYP1A1mRNA在除 0 .0 1μgTCDD/kg体重组外的各染毒组明显增加 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,且染毒剂量与AHR、CYP1A1mRNA诱导之间存在剂量 -效应关系。结论　染毒后 2 4h ,TCDD能诱导SD大鼠肝脏AHR、CYP1A1基因表达 ,CYP1A1基因比AHR基因更容易被诱导。     

CYP1B1基因敲除对成年小鼠肝脏脂肪代谢的影响及可能机制

目的探讨CYP1B1对高脂膳食诱导的成年小鼠脂肪代谢的作用。方法 CYP1B1基因敲除(KO)和野生型(WT)雄性成年C57/BL小鼠(6 w龄)各16只,给予低脂(LFD,30%)、高脂肪(HFD,60%)饲料共6 w。小鼠处死后取血清、附睾脂肪和肝脏组织检测相应的生化和分子生物学指标。结果 6 w高脂膳食后,KO小鼠能量摄入总量稍高于WT小鼠,但其体重增量和附睾脂肪组织重量均显著低于WT小鼠;WT小鼠脂肪细胞直径明显大于KO小鼠,且血糖、血清及肝脏组织中甘油三酯(TG)水平亦明显高于KO小鼠;肝脏组织RT-PCR结果显示,CYP1B1基因敲除后,启动脂肪形成的核因子及脂肪合成相关基因如CD36、SREBP1c、SCD1等表达下降,而调控脂肪氧化分解的基因如CPT-1α,UCP-2表达显著上升;蛋白印迹结果显示,CYP1B1基因敲除增强腺苷-磷酸激酶(AMPK)的磷酸化。结论 CYP1B1基因敲除对成年小鼠营养性肥胖的保护作用可能与AMPK磷酸化增强并调控肝脏中脂肪代谢相关基因的表达有关。