胰岛素抵抗高血压大鼠血清瘦素与高血压相关性的研究

 目的 从血清瘦素浓度角度探讨高血压形成可能的机制.方法 用高果糖饲料喂养雄性SD大鼠建立胰岛素抵抗高血压大鼠模型,测定血压(SBP)、空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)和瘦素(LP),稳态模型(HOMA)评估胰岛素抵抗(IR),分析LP与上述参数的相关性.结果 高果糖组与对照组相比, SBP、FINS和LP升高,HOMA-IR降低.高果糖组LP与SBP、FINS和HOMA-IR呈显著正相关.结论 血清高瘦素水平与高血压有相关性,并可能参与高血压的形成.     

应用基因芯片筛查妊娠期高血压疾病相关基因初探

 目的 比较人正常妊娠胎盘组织及妊娠期高血压疾病胎盘组织基因表达的差异性,寻找PIH相关基因,以进一步探讨妊娠期高血压疾病的发病机制.方法 从正常妊娠胎盘和PIH胎盘中抽提mRNA,反转录后,分别用Cy3、Cy5荧光标记,获得两组胎盘来源的cDNA探针.cDNA探针与含8 190条人cDNA点样的BioDoor基因芯片杂交,结果由激光共聚焦扫描仪扫描,并用软件进行统计分析.结果 与正常妊娠胎盘表达的基因相比,PIH胎盘组织中有393条(4.79%)的基因表达发生了变化,其中197条基因在PIH时表达量降低,而196条基因在妊娠期高血压疾病时表达量增高.结论 基因芯片技术是研究PIH发病机制的一种新方法.     

代谢综合征大鼠模型的建立及其相关基因表达变化的研究

目的建立与人类代谢综合征(MS)相似的大鼠模型,并分析其相关基因的表达变化。方法雄性8周龄Wistar大鼠30只随机分为普通膳食对照组(NC组)和高脂高盐膳食组(MS组)。喂养期间对大鼠体重、血压、空腹血糖(FPG)、血脂、胰岛素水平等进行连续监测;24周喂养结束进行高胰岛素-正常血糖钳夹试验和腹腔注射糖耐量试验,检测颈动脉血压,测量内脏脂肪重量;取其白色脂肪(肠系膜)、棕色脂肪和骨骼肌组织,以RT-PCR法检测胰岛素敏感组织基因表达变化。结果MS组体重、内脏脂肪、血压、血浆甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)与NC组比较显著增加(P<0·05或P<0·01),且存在严重的胰岛素抵抗[GIR:1·26±0·82mg/(kg·min)vs7·03±1·68mg/(kg·min),P<0·01]和糖耐量减退,表现为典型的MS特征;胰岛素敏感组织基因检测结果显示,与NC组比较,MS组与糖脂代谢和能量代谢相关的23种基因的mRNA表达水平在白色脂肪(肠系膜)、棕色脂肪和骨骼肌组织中多数变化显著。结论长期高脂和高盐饮食喂养可诱导类似于人类MS的基本临床特征大鼠模型,其机制可能与高脂摄入导致大鼠胰岛素敏感组织的糖脂代谢和能量代谢相关基因的变化有关。     

有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌基因表达谱的影响

目的:研究6周有氧跑台运动对胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)小鼠骨骼肌基因表达谱的影响.通过与安静对照组骨骼肌基因表达谱相比较,分析并筛选差异表达基因,为研究有氧运动防治IR的基因调控机制提供理论依据.方法:选用C57BL/6雄性小鼠80只,将其分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60).正常饮食组饲以基础饲料,模型组小鼠喂饲高脂饮食10周以建立IR模型.10周后,鉴定模型成立.将40只成模的IR小鼠随机分为安静对照组(HC,n=20)和运动组(HE,n=20).HE组进行6周、5天/周、1次/天、60分钟/次、强度为75%VO2max的跑台训练.6周训练结束后24小时,分别检测小鼠口服葡萄糖耐量(OGTT),空腹血清胰岛素(FIN)水平,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和游离脂肪酸(FFA);提取小鼠股四头肌总RNA,经过荧光标记后进行基因芯片杂交,利用芯片扫描仪记录荧光信号,并通过相关软件对所得数据进行统计分析.结果:6周有氧运动后,运动组OGTT曲线峰值出现时间点较安静组明显前移,且峰值下降,平台期消失;运动后HE组TC、TG、FFA与HC组相比分别降低24.30%、40.56%和35.36%,HDL上升30.47%.比较HC组与HE组基因表达谱,共筛选出264个差异表达基因,其中运动后表达上调基因215个,下调基因49个,这些基因编码的蛋白涉及多个细胞信号通路.其中MAPK信号通路中有6个基因表达有差异,表达上调的基因有MAPK1、HSPB1、GNG12、ECSIT和STK3;下调的基因为TRP53.结论:6周有氧运动能够明显改善IR小鼠糖脂代谢障碍.MAPK信号通路可能参与骨骼肌细胞对运动的适应性改变,以及骨骼肌细胞对胰岛素敏感性的增强,由此推测该信号通路可能与改善机体IR密切相关.     

基因芯片在同型半胱氨酸诱导动脉粥样硬化基因表达谱变化中的应用

目的　应用基因芯片技术研究同型半胱氨酸诱导动脉粥样硬化的基因表达谱变化。方法　选取 3例无冠心病传统危险因素的住院患者 ,其中 1例为血同型半胱氨酸正常的冠状动脉造影正常者 ,1例为血同型半胱氨酸正常的冠心病患者 ,1例为高同型半胱氨酸血症的冠心病患者。分离外周血淋巴细胞并抽提总RNA ,逆转录制备杂交探针 ,应用含有 115 2条基因的人类表达谱芯片进行差异表达谱分析。结果　高同型半胱氨酸血症的冠心病患者与血同型半胱氨酸正常的冠状动脉造影正常者比较差异表达的基因 177条 (组 1) ,高同型半胱氨酸血症的冠心病患者与血同型半胱氨酸正常的冠心病患者比较差异表达的基因有 15 1条 (组 3)。组 1与组 3基因芯片平行比较 ,两者共同的差异表达基因 4 8条 ,其中上调基因 2 3条 ,下调基因 2 5条。结论　在差异表达的基因中 ,有些是凋亡、信号转导、免疫、蛋白质合成及原癌基因等的相关基因 ,这些基因可能与同型半胱氨酸致动脉粥样硬化发生有关。应用基因芯片技术研究同型半胱氨酸诱导动脉粥样硬化差异表达谱 ,可能为动脉粥样硬化的发病机制研究提供新的思路     

内毒素休克大鼠早期肺组织基因表达谱的差异分析

目的 观察内毒素休克(endotoxic shock,ES)前后大鼠早期肺组织基因表达谱的差异,探讨急性肺损伤可能的分子机制.方法 20只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为正常对照组和LPS组,每组10只.尾静脉注射LPS 10 mg/kg制备ES大鼠模型(LPS组),6 h后测定大鼠动脉血氧分压(PaO2).提取大鼠肺组织RNA,利用Affymetrix RAT 230A大鼠全基因组芯片对大鼠肺组织基因表达谱进行检测,并用半定量RT-PCR技术对其中5条基因的表达水平进行验证.根据差异基因的类型结合ES的特点分析数据.结果 与正常对照组比较,LPS组大鼠PaO2显著下降(P＜0.05);按照显著差异基因的标准,在大鼠15 650条靶基因中,初步筛选出158条差异表达基因,其中上调基因117条,下调基因34条.根据基因的生物学功能,差异表达基因主要为:炎症相关基因、物质转运相关基因、转录调节相关基因、信号转导相关基因、应激反应相关基因、代谢相关基因、细胞凋亡相关基因、细胞黏附相关基因等.其中5条基因的RT-PCR验证结果与芯片分析结果相符.结论 ES大鼠损伤的肺组织中多种基因表达发生变化,其中炎症相关基因的差异表达最为突出.     

应用基因表达谱芯片技术研究膦甲酸钠处Jurkat细胞后的差异表达基因

目的 筛选膦甲酸钠处理人T淋巴细胞系Jurkat细胞后的差异表达基因。方法 应用基因表达谱芯片技术对膦甲酸钠处理的Jurkat细胞和以生理盐水处理的相同细胞的mRNA进行检测。结果 Jurkat细胞经膦甲酸钠处理后,所检测的1152条目的基因中,有94条产生差异表达,其中38条基因表达增强,56条基因表达降低。结论 应用基因表达谱芯片成功筛选了膦甲酸钠处理淋巴细胞后差异表达基因,为进一步阐明膦甲酸钠的免疫调节机制及深人了解膦甲酸钠用于治疗病毒性肝炎的药理作用机制提供依据。     

大鼠臂丛神经损伤后萎缩骨骼肌基因表达谱的变化

目的：研究大鼠臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩肌肉中基因表达谱的变化，探寻与去神经肌萎缩有密切关系的基因。方法：应用臂丛神经损伤后骨骼肌萎缩的大鼠模型（鼠数＝6），右侧上肢萎缩肌肉为实验组，左侧正常肌肉为对照组。荧光逆转录标记mRNA，采用鼠基因表达谱芯片检测正常肌肉与萎缩肌肉基因表达谱，并对比分析检测结果。结果；臂丛神经损伤后萎缩骨骼肌基因表达有差异的共148组，其中17组上调，131组下调。结论：在臂丛神经损伤的萎缩的骨骼肌中，与细胞凋亡相关基因的表达发生改变，促使细胞凋亡。一些与线粒体相关的基因表达的改变提示萎缩肌肉中线粒体的功能发生异常，糖、蛋白质和脂肪代谢关键酶基因表达的下调导致肌细胞内能量代谢严重障碍。     

+Gz重复暴露大鼠脑应激基因表达谱的cDNA微阵列研究

目的 用cDNA微阵列技术研究 Gz重复暴露大鼠脑应激基因表达谱,探讨 Gz引起脑损伤的分子机制。方法 Wistar大鼠随机分成对照组和 Gz重复处理组,对照组大鼠G值为 1 Gz．实验组大鼠在动物离心机上经历了3次 10 Gz／1 min(两次间隔30min)作用,于暴露后6h处死大鼠取脑。分别从 Gz处理组和对照组大鼠脑中提取总RNA,用α-^32P dATP逆转录标记作为探针。将合成的2种cDNA探针分别与具有207个濡激基因的cDNA微阵列杂交,灰度扫描后分析两者表达谱差异。结果 有15个应激基因在 Gz处理组表达升高。结论 Gz重复暴露可引起脑组织中多个基因表达变化,这些基因的表达变化是脑损伤在基因水平上的表现,而cDAN微阵列是一种筛选差异表达基因的快速有效方法。     

有氧运动对胰岛素抵抗小鼠骨骼肌脂代谢相关基因表达的影响

目的:采用基因芯片技术研究6周有氧跑台运动对胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)小鼠骨骼肌脂代谢相关基因表达的影响,从基因水平探究有氧运动防治IR在骨骼肌脂质代谢方面的调控机制。方法:4周龄雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为正常饮食组(NC,n=20)和IR模型组(n=60),正常饮食组饲以基础饲料,IR组小鼠喂饲高脂饮食10周以建立IR模型。随机筛选40只成模IR小鼠再次随机分为安静对照组(HC,n=20)和运动组(HE,n=20)。对HE组小鼠施以6周、75%最大摄氧量(VO2max)强度跑台训练。实验结束后分别检测小鼠口服葡萄糖耐量(OGTT),空腹血清胰岛素(FINs)水平,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和游离脂肪酸(FFA);并对小鼠骨骼肌组织进行基因芯片分析,对比HE与HC两组差异表达显著的基因。结果:经过6周有氧运动,HE组小鼠平均体重(BW)、FIN及血脂水平较HC组显著降低;OGTT曲线显著改善;经筛选骨骼肌基因芯片结果发现,与脂代谢相关的差异表达基因有3个,其中MAPK9和Acsl4表达显著上调,Rxr表达显著下调。结论:6周有氧运动明显改善IR小鼠脂质代谢紊乱症状。HE组小鼠骨骼肌脂代谢相关基因MAPK9、Acsl4和Rxr表达显著变化,推测这些基因可能在运动增强骨骼肌细胞脂质代谢、改善机体IR症状方面起着关键作用。     

L-精氨酸对果糖喂养大鼠血压及胰岛素抵抗影响的实验研究

 目的探讨L-精氨酸是否能够防止大鼠胰岛素敏感性的下降及血压的升高.方法本研究通过观察L-精氨酸(L-Arg)对果糖喂养胰岛素抵抗大鼠血压、胰岛素抵抗的影响,5～6周龄的雄性SD大鼠,适应性喂养1周后随机分为4组.果糖组(FFR)喂以60%的高果糖饲料,对照组(Contro1)喂以热量相同的普通饲料,果糖+I-精氨酸(FFR+L-Arg)组给予高果糖饲料喂养的同时饮水中加入L-精氨酸(浓度2.25%),L-精氨酸(L-Arg)组给予普通饲料喂养的同时饮水中加入L-精氨酸.每周鼠尾测血压1次、每两周断尾取血查血清胰岛素(FINS)、血糖(FSG);6周后处死大鼠,腹主动脉取血,测定血清胰岛素(FINS)、血糖(FBG)、血三酰甘油(TG).结果高果糖喂养6周后大鼠出现高胰岛素、高三酰甘油血症并伴有血压的升高;FFR+L-Arg组FINS、TG均较FFR组明显降低;FFR+L-Arg组在整个实验过程中血压不出现升高.结论高果糖喂养可以使正常SD大鼠出现胰岛素抵抗并伴有血压升高、血脂代谢紊乱;而L-精氨酸可以改善胰岛素抵抗及血脂代谢紊乱,并防止大鼠出现血压升高.     

病灶清除联合中医辨证治疗慢性骨髓炎的临床观察

目的探讨治疗慢性骨髓炎的有效新方法。方法对17例慢性骨髓炎患者,采用西医的病灶清除,全身应用敏感抗生素;中医口服祛邪扶正,补气养血益肾之中药,外用活血,祛腐生新之中药治疗。结果17例全部临床愈合。结论病灶清除联合中医辨证治疗慢性骨髓炎疗效好。     

大鼠运动性低血睾酮与肾阳虚模型骨骼肌α-actin基因表达的比较研究

为探讨运动性低血睾酮与肾阳虚对骨骼肌α－ａｃｔｉｎ基因表达的影响是否相同，以长期大强度、较长时间游泳造成运动性低血睾酮，以０．５％腺嘌呤喂饲大鼠造成肾阳虚，并就两种状态下大鼠骨骼肌α－ａｃｔｉｎ基因的表达进行了探讨。结果表明：两种状态均出现血清睾酮浓度的下降，肾阳虚状态下的下降幅度远较运动性低血睾酮明显，运动性低血睾酮大鼠骨骼肌α－ａｃｔｉｎ基因表达与正常相比差异不大，而肾阳虚大鼠该基因表达则明显受抑。基于这些结果，可以认为两种状态在性腺轴功能紊乱方面存在一定的相同之处，但程度不同；肾阳虚通过抑制骨骼肌收缩蛋白基因表达可能影响大鼠骨骼肌的功能，运动性低血睾酮大鼠骨骼肌则未出现这种变化。可以推论：运动性低血睾酮是与本研究采用的肾阳虚模型差异很大的状态，在用治疗肾阳虚中药纠正运动性低血睾酮时应该慎用。     

中药对大鼠急性骨骼肌拉伤后骨骼肌α-actinmRNA表达的影响

本研究建立了急性骨骼肌拉伤的动物实验模型 ,观察了不同治疗措施对拉伤后动物骨骼肌α -actinmRNA表达的影响。结果表明 :(1)急性拉伤后即刻 ,动物骨骼肌α-actinmRNA表达量显著增高 ,伤后第 1天、第 2天保持显著性高水平 ,至第 5天恢复至正常水平 ,但第 14天又显著增高 ;(2 )舒筋活血类中药抑制骨骼肌拉伤后α -actinmRNA表达的第 2次升高。研究提示 ,舒筋活血类中药能更有效地促进急性骨骼肌拉伤后α -actinmRNA表达的恢复。     

游离脂肪酸对大鼠胰岛细胞Leptin受体的影响

目的　探讨游离脂肪酸是否会影响胰岛细胞Leptin受体的基因和蛋白表达及酪氨酸磷酸化 ,进而导致胰岛素抵抗及葡萄糖代谢的异常。方法　分离、培养新生SD大鼠胰岛细胞 ,分别与软脂酸 (0 2 5mmol/L)或油酸(0 12 5mmol/L)孵育 12、2 4、36h ,提取蛋白后用Western印迹法检测Leptin受体(OB R)的蛋白水平 ,用RT PCR检测胰岛细胞内OB RRNA含量的变化 ,用免疫沉淀法检测OB R的酪氨酸磷酸化程度。结果　软脂酸和油酸孵育后大鼠胰岛细胞OB R的蛋白表达水平在孵育 2 4、36h后均下调 (P <0 0 5 ) ;Leptin受体的RNA水平和酪氨酸磷酸化程度在各个时间点均下调 (P <0 0 5 )。结论　游离脂肪酸可对OB R的基因和蛋白表达水平及磷酸化程度产生一定的抑制作用 ,这种抑制作用可能是游离脂肪酸导致胰岛素抵抗的因素之一     

理气扶正中药消除运动性疲劳过程中骨骼肌α-肌动蛋白基因的表达

为了探讨运动性疲劳过程中理气扶正中药作用的分子机理以及寻求安全有效的消除运动性疲劳的中药复方制剂，设计了强化训练导致疲劳的大鼠模型，用定量反转录聚合酶链式反应（ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＲＴＰＣＲ）方法，研究了疲劳恢复过程中，大鼠骨骼肌α－肌动蛋白（ａ－ａｃｔｉｎ）基因表达的变化。结果表明：所有运动施药组的表达均高于安静对照组，且强化训练恢复２４小时组（Ｅ－２４）、强化训练恢复４８小时组（Ｅ－４８）显著高于安静对照组。强化训练施药组较相应的强化训练非施药组均无明显差异。结果提示理气扶正中药在大鼠运动性疲劳恢复过程中对骨髓肌α－肌动蛋白基因表达的作用具有时效性。     

用mRNA差异显示法筛选和鉴定反复高GZ暴露大鼠脑损伤相关基因

目的 筛选和鉴定反复高Ｇｚ暴露大鼠脑损伤相关基因。方法 １６只ＳＤ大鼠随机分为对照组、＋Ｇｚ重复暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ４组,每组４只。对照组大鼠Ｇ值为＋１Ｇｚ,实验组大鼠在动物离心机上经历了３次＋１４Ｇｚ／４５ｓ（两次间间隔３０ｍｉｎ）作用。分别于暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ处死大鼠取脑,提取总ＲＮＡ。取对照组和＋Ｇｚ暴露后６ｈ组大鼠脑总ＲＮＡ,用ｍＲＮＡ差异显示（ＤＤＰＣＲ）的方法,筛选＋Ｇｚ暴露大鼠脑差异表达基因。用３组锚定引物和６组随机引物作不同组合进行ＰＣＲ扩增。用Ｓｌｏｔ ｂｌｏｔ方法分析差异表达基因在对照组和＋Ｇｚ暴露后３０ｍｉｎ、６ｈ和２４ｈ组大鼠脑中表达情况。结果 获得的差异表达片段,经斑点杂交进一步筛选,克隆了３个强阳性片段,并进行序列分析,与Ｇｅｎｅｂａｎｋ等数据库进行同源比较,没     

咖啡酸、阿魏酸对醋酸去氧皮质酮—盐高血压大鼠内皮素—1作用的研究

用咖啡酸、阿魏酸对ＤＯＣＡ盐高血压大鼠内皮素１ 作用的进行了研究。结果表明：（１） 咖啡酸与阿魏酸能使得ＤＯＣＡ盐高血压大鼠的血压明显降低,与未加处置的阳性对照组相比,收缩压值的降低有明显差异;（２） 咖啡酸与阿魏酸能明显抑制ＤＯＣＡ盐高血压大鼠主动脉血管和心脏的组织增生;（３） 咖啡酸与阿魏酸能降低ＤＯＣＡ盐高血压大鼠血浆ＥＴ１ 浓度,与阳性对照组相比,除咖啡酸１００ｍｇ／ｋｇ 剂量组外,其余剂量组血浆ＥＴ１ 浓度的降低有显著性意义;（４） 三个剂量组的咖啡酸、阿魏酸可使得ＤＯＣＡ盐高血压大鼠的心脏、肾脏和主动脉血管ＥＴ１ｍ ＲＮＡ 的表达增加;（５） 三个剂量组的咖啡酸、阿魏酸均能抑制ＤＯＣＡ盐高血压大鼠心脏、肾脏和胸主动脉血管ｃｆｏｓ、热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０） 基因的表达。本研究结果提示：咖啡酸与阿魏酸能通过对ＥＴ１ 的作用而产生对ＤＯＣＡ盐高血压大鼠降压、血管和心脏组织增生、原癌基因表达等生物效应。     

Microvascular function in viable myocardium after chronic infarction does not influence fractional flow reserve measurements.

Fractional flow reserve (FFR) is an index of coronary stenosis severity. FFR is the ratio of hyperemic myocardial flow in the stenotic area to maximal flow in that same territory without stenosis and can be measured with a pressure wire. In patients with prior infarction, measuring FFR in infarct-related arteries may be different for 2 reasons: a smaller mass of viable myocardium depending on the stenotic infarct-related artery and greater microvascular resistance in the infarcted area than in the reference area. When microvascular resistance does not differ between the infarcted and the reference areas, FFR should equal relative flow reserve (RFR). RFR is the ratio of myocardial blood flow in the stenotic area to blood flow in a normally perfused reference area, at maximal hyperemia. H(2)(15)O PET measures myocardial flow within only the viable areas of an infarct and can be used to measure RFR. The present study assessed in patients with chronic myocardial infarction whether microvascular resistance in the infarct is different from that in the reference area. Therefore, the correlation between FFR and RFR using H(2)(15)O PET was studied. METHODS: In the catheterization laboratory, FFR was measured in the infarct-related artery and a reference coronary artery. The H(2)(15)O PET study and FFR measurements were performed on the same day in 22 patients. RESULTS: In 27 patients, the mean interval between the PET study and infarction was 3.3 y. Most patients had an anterior infarction, and the mean ejection fraction was 44%. The mean FFR and RFR values were 0.75 +/- 0.16 and 0.74 +/- 0.18, respectively. A significant correlation (r = 0.81; P < 0.0001) was found between FFR and RFR. The linear regression line was close to the line of identity. CONCLUSION: In patients with chronic myocardial infarction and a reduced ejection fraction, a good correlation was found between FFR measurements in the infarct-related artery and RFR. Because the linear regression line between FFR and RFR was close to the line of identity, one can conclude that microvascular resistance in the viable myocardium does not differ from that in the reference area.