戊四氮致痫大鼠海马GSK-3β表达与苔藓纤维出芽关系研究

目的观察戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马各区糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)蛋白及其mRNA表达和苔藓纤维出芽(MFS)情况,探讨GSK-3β在癫痫发病机制中的作用。方法SD雄性成年大鼠120只,随机分为实验组和对照组;实验组分为PTZ第1次注射后3d、1w、2w、4w、6w共5个亚组,每亚组12只。对照组同样随机分为5个亚组,每亚组12只,与实验组各时间点对应。以上各亚组再分2个小组,每小组6只大鼠,分别进行(1)GSK-3β的免疫组化和原位杂交染色并测定其相应的光密度值;(2)Timm染色并评分。结果实验组大鼠海马各区GSK-3β蛋白及其mRNA表达在点燃过程中逐渐增多,点燃后表达逐渐下调到正常对照组水平,在点燃前后除6w组外GSK-3β表达与对照组相应时间点比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组CA3区在点燃前可见1~4级MFS,点燃后可见4~5级MFS;癫痫点燃过程中CA3区GSK-3β表达与MFS评分有线性正相关关系。结论GSK-3β在海马表达变化可能在苔藓纤维出芽的过程中起促进作用,从而促进癫痫的发生。     

尼莫地平对癫痫大鼠学习记忆及海马超微结构的影响

目的探讨尼莫地平(nimodipin,NIM)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃癫痫大鼠学习记忆能力及海马CA3区超微结构的影响。方法动物分为正常对照组、PTZ组和NIM PTZ组,采用PTZ慢性点燃癫痫模型,应用Morris水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆能力,电镜观察海马CA3区突触界面结构,并对突触活性参数量化分析。结果PTZ点燃癫痫大鼠存在学习记忆能力下降,其海马CA3区突触后致密物显著变薄、突触小泡显著减少、突触间隙显著增宽(P<0.05);尼莫地平能改善癫痫大鼠学习记忆障碍,与PTZ组比较,突触后致密物增厚、突触小泡增多、突触间隙变窄(P<0.05)。结论PTZ点燃癫痫大鼠存在空间学习记忆受损,可能与突触界面参数改变有关;NIM可以改善癫痫大鼠突触超微结构,提高学习记忆能力。     

雷公藤多甙对致痫大鼠学习记忆及海马Ng和PKC表达的影响

目的研究雷公藤多甙(TWP)在戊四氮(PTZ)所致癫痫大鼠学习记忆障碍中的干预作用及可能机制,探讨神经颗粒素(Ng)和蛋白激酶C(PKC)在癫痫大鼠海马组织中的表达的影响。方法通过水迷宫及Y迷宫筛选方式挑选学习记忆功能正常的SD大鼠90只,随机分为PTZ致痫组、TWP低剂量组(TWP1)、TWP高剂量组(TWP2)、正常对照组,采用戊四氮(PTZ)腹腔注射慢性点燃癫痫。用水迷宫和Y迷宫对4组大鼠进行学习记忆能力检测,运用实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附法分别检测其海马组织Ng和PKC基因mRNA及相应蛋白的表达水平。结果与PTZ组相比,TWP干预组大鼠在水迷宫中提高,其学习记忆能力接近NC组(P0.05);而4组逃避潜伏期差异无统计学意义(P0.05)。在Y迷宫TWP干预组错误反应次数比PTZ组明显减少(P0.05),其行为能力接近NC组(P0.05);但4组在全天总反应时间上的差异无统计学意义(P0.05)。经TWP干预后大鼠海马Ng和PKC基因mRNA及相应蛋白的表达上调,与PTZ组比较,差异具有统计学意义(P0.05),上调水平与NC组接近(P0.05);而TWP1和TWP2两组之间的差异无统计学意义(P0.05)。结论 TWP可有效改善PTZ所致癫痫大鼠的学习记忆能力,这与上调大鼠海马组织Ng及PKC表达水平密切相关。     

戊四氮点燃癫痫大鼠空间学习记忆障碍及海马突触素表达减少的研究

目的:探讨戊四氮点燃癫痫对大鼠空间学习记忆的影响及可能的分子机制。方法:戊四氮(pentylenetet-razol,PTZ)点燃建立慢性癫痫(chronic epileptic,CEP)模型,Morris水迷宫进行行为学检测,western blot方法观察大鼠海马突触素(synaptophysin,P38)蛋白的表达变化。结果:水迷宫试验检测癫痫组大鼠空间学习记忆能力受损(P<0.05,P<0.01);western blot结果表明海马P38蛋白表达较对照组明显减少(P<0.05)。结论:戊四氮点燃癫痫大鼠伴有学习记忆功能减退,其海马P38蛋白的表达减少可能参与了空间学习记忆受损。     

戊四氮点燃癫癎大鼠空间学习记忆改变及海马NR2B表达

目的观察戊四氮点燃癫癎大鼠空间学习记忆功能变化及海马NMDA2型受体(NR2)B亚单位(NR2B)表达,探讨二者的关系及PTZ致癎大鼠认知障碍发生的分子机制。方法采用戊四氮(PTZ)慢性癫癎(CE)模型,Y-迷宫对两组大鼠进行行为学检测,免疫组织化学方法观察两组大鼠海马CA3区NR2B表达的变化,反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠海马NR2B mRNA的表达。结果癫癎组大鼠空间学习记忆能力受损;其海马CA3区NR2B阳性细胞较对照组明显减少(P<0.01),同时伴有海马NR2B mRNA表达下降(P<0.01)。结论戊四氮点燃癫癎大鼠空间学习记忆受损可能与海马神经元NR2B的表达减少有关。     

大鼠颞叶癫痫点燃后海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化

目的 探讨海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化与颞叶癫痫脑损伤的关系. 方法 将雄性Wistar大鼠随机分为3组:其中正常组6只,假手术对照组(Sham组)和海人酸(KA)颞叶癫痫点燃组(TLE组)各36只,后两组按点燃后6h、24h、3d、7d、14d、21d时间点各分为6小组,每小组6只.采用KA杏仁核点燃建立经典颞叶癫痫模型,应用原位杂交和免疫组织化学方法分别检测海马神经元zif268mRNA及其蛋白的表达.结果 TLE组zif268mRNA表达在总体上和点燃后远期21d海马CA1、CA3区和齿状同(DG)均高于Sham组(P＜0.05).TLE组Zif268蛋白表达在总体上和远期21d海马DG表达低于Sham组(P＜0.05).回归分析提示颞叶癫痫与海马zif268mRNA表达呈正相关(β=0.286,P＜0.001),与Zif268蛋白表达呈负相关(β=-0.153,P＜0.001).结论 颞叶癫痫大鼠海马zif268mRNA及其蛋白的时空表达变化可能参与颞叶癫痫发病及其脑损伤过程.     

丙戊酸钠对戊四氮致痫大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨丙戊酸钠(VAP)对戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 将48只成年Wistar大鼠随机平均分为正常对照(NC)组、PTZ组和VAP组,PTZ组和VAP组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTZ 35mg/(kg·d),直至达到点燃标准.点燃后,VAP组大鼠经腹腔注入VAP15mg/(kg·d),PTZ组大鼠经腹腔注入生理盐水,30min后,再腹腔注射PTZ诱发癫痫发作.应用免疫组化法检测大鼠海马神经元Fas、Caspase-3和Survivin的表达.结果 PTZ组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于VAP组和NC组(均P<0.01),Survivin阳性细胞数和光密度明显低于VAP组(P<0.01),但高于NC组(P<0.05);VAP组大鼠海马神经元Fas、Caspase-3阳性细胞数和光密度明显高于NC组(均P<0.05),Survivin阳性细胞数和光密度明显高于NC组(P<0.01).结论 癫痫发作可以导致大鼠海马神经元的凋亡,而丙戊酸钠有对抗癫痫发作导致细胞凋亡的作用,主要通过促进Survivin的表达和抑制Fas和Caspase-3的表达发挥作用.     

戊四氮致痫大鼠学习记忆改变及海马CA_1和CA_3区神经颗粒素的表达变化

目的 探讨戊四氮慢性点燃癫痫对大鼠学习记忆能力的影响及海马CA_1、CA_3区神经颗粒素(neu-rogranin,Ng)的表达变化.方法 采用戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)腹腔注射慢性点燃癫痫(chronic epileptic,CEP)模型,用Morris水迷宫和Y迷宫对大鼠进行学习记忆能力检测,运用免疫组织化学方法测定大鼠海马CA_1、CA_3区Ng的表达变化.结果 与对照组比较,慢性癫痫发作组大鼠在水迷宫中的逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01),在Y迷宫中的错误反应次数增多(P<0.05).在海马CA_1区Ng的免疫反应强度减弱(P<0.05),CA_3区两组比较差异无统计学意义.结论 戊四氮慢性点燃癫痫大鼠学习记忆能力受损,海马CA_1区Ng表达减少可能参与了这一过程.

Abstract：

Objective To explore the effect of Pentylenetetrazole (PTZ)-kindled epilepsy on rats' learning and memory and the expression of neurogranin(Ng) in hippocampal CA_1 and CA_3. Methods Use chronic model of epilepsy induced by PTZ intraperitoneal injection. The ability of learning and memory were assessed by the Morris water maze and Y maze. The expression of Ng in hippocampal CA_1 and CA_3 was determined by immunocytochemical method respectively. Resuits The learning and memory ability of the epilepsy rats was impaired. Meanwhile,The immunological reaction of Ng for CEP group at CA_1 was weaker than NC group, but it made no difference at CA_3. Conclusion The impairment of learning and memory ability of the epilepsy rats might be related with the changes of Ng in hippocampal CA_1.     

盐酸美金刚对血管性痴呆大鼠疗效观察

目的 观察盐酸美金刚对血管性痴呆大鼠的疗效及作用机制.方法 80只健康Wistar大鼠(月龄12～14个月),体质量300～400 g,随机分为对照组、模型组、美金刚对照组及美金刚治疗组,每组20只.采用持久双侧颈总动脉结扎术造成血管性痴呆大鼠模型,美金刚对照组及美金刚治疗组于术后8周开始以美金刚(5 mg·kg-1)每天灌胃,对照组和模型组以同等量的0.5 g/L羧甲基纤维素钠灌胃,连续4周.采用Morris水迷宫衡量大鼠学习记忆水平;测定大鼠脑皮层、海马组织乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)活性的变化.结果 术后12周,与对照组相比,模型组大鼠的学习记忆能力明显下降(P<0.05);脑皮层、海马组织内AChE活性明显升高(P<0.05),ChAT活性明显降低(P<0.05),MDA活性明显升高(P<0.05),GSH活性明显降低(P<0.05);与模型组相比,美金刚治疗组大鼠的学习记忆能力明显提高(P<0.05);脑皮层、海马组织内AChE活性及ChAT活性差异无统计学意义(P>0.05)、MDA活性明显降低(P<0.05)、GSH活性明显升高(P<0.05).结论 盐酸美金刚对血管性痴呆大鼠的学习记忆能力有明显提高,作用机制是通过调节脑组织内MDA及GSH的活性来实现的,该实验研究为临床上血管性痴呆的治疗提供实验基础及理论依据.     

拉莫三嗪对癫痫大鼠学习记忆及神经细胞凋亡的影响研究

目的 观察拉莫三嗪(lamotrigine,LTG)对戊四氮(PTZ)所致慢性癫痫大鼠学习记忆及神经细胞凋亡的影响,为LTG改善认知功能提供理论依据.方法 成年健康SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和LTG干预组各10只,采用35mg/kg PTZ溶液经腹腔注射制备癫痫模型.4w后对大鼠进行空间学习能力检测,应用免疫组化染色及原位细胞凋亡检测脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达阳性细胞数及凋亡细胞数.结果 癫痫大鼠的学习记忆功能较正常大鼠明显下降(P＜0.05),LTG干预组海马区凋亡细胞明显减少(P＜0.01),Bcl-2蛋白阳性细胞数显著增加(P＜0.01),Bax蛋白阳性细胞数显著减少(P＜0.05).结论癫痫后大鼠的学习记忆功能受损,应用LTG可改善这一损害,可能与其能上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达有关.     

凋亡诱导因子在戊四氮致痫大鼠海马组织中的表达

目的研究凋亡诱导因子(AIF)mRNA在戊四氮(PTZ)点燃癫痫持续状态(SE)大鼠海马组织中的表达情况。方法通过腹腔注射戊四氮建立急性点燃大鼠模型,运用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)分析AIFmRNA在大鼠癫痫发作后的表达情况。结果癫痫发作后海马组织AIFmRNA的表达水平早期即出现升高(6h组与对照组相比,P<0.05),且持续较长一段时间(48h组与对照组相比,P<0.01)。结论AIF可能参与了戊四氮致痫大鼠海马神经元的凋亡过程。     

PTZ诱导孕鼠痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响

目的探讨母鼠孕期痫性发作对胎鼠海马中bax、bcl-2、capase-3表达的影响。方法将雌性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、盐水组(NS组)和癫痫组(PTZ组),采用戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)致痫模型,PTZ组大鼠每天给予腹腔下注射PTZ 35 mg/kg,点燃成功后将雌性SD大鼠与雄性SD大鼠合笼;发现阴栓记为孕0d,孕鼠继续孕前处理至孕20d。NS组腹腔注射相应剂量的生理盐水,NC组不做任何处理。Western Blot方法测定胎鼠海马组织中bax、bcl-2及caspase-3蛋白表达变化。结果 PTZ组胎鼠海马caspase-3蛋白(2.57±0.08)较NC组(0.53±0.13)明显升高(P<0.05);PTZ组胎鼠海马bax蛋白(3.24±0.32)较NC组(1.55±0.11)明显升高(P<0.05);PTZ组子鼠海马bcl-2表达水平(1.42±0.074)较NC组(2.45±0.07)明显降低(P<0.05)。结论孕期痫性发作使胎鼠海马促凋亡蛋白bax表达增加,抑凋亡蛋白bcl-2表达降低,凋亡执行蛋白caspase-3表达增加,推测孕期痫性发作可能使胚胎海马神经元凋亡增加。     

绿茶多酚对戊四氮致痫大鼠海马XIAP和Caspase-3表达的影响

目的 探讨绿茶多酚(Green tea polyphenols,GTPs)对癫痫大鼠海马中XIAP、caspase-3表达的影响.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NS组)、癫痫组(PTZ组)和绿茶多酚组(GTPs组).依据Racine分级标准观察各组动物行为学表现,用HE染色观察大鼠海马神经元损伤情况,Western Blot方法测定各组大鼠海马组织中XIAP及caspase-3蛋白表达变化.结果 PTZ组:大鼠海马XIAP表达水平(0.23±0.02)较NS组(0.47±0.05)明显降低(P＜0.05);caspase-3蛋白(0.63±0.12)较NS组(0.24±0.07)明显升高(P＜0.05).与PTZ组比较,GTPs组大鼠海马XIAP表达(0.53±0.10)显著升高(P＜0.05);caspase-3表达(0.30±0.09)显著降低(P＜0.05).结论 癫痫可导致海马组织中抗凋亡蛋白XIAP表达下降,凋亡执行蛋白caspase-3表达增加;而GTPs则能够上调XIAP表达,降低caspase-3的表达,推测GTPs可能通过抗凋亡途径来发挥癫痫后的神经保护作用.     

低频率电刺激通过调控Rho/ROCK/NF-κB途径对癫痫大鼠作用的研究

目的探究低频率电刺激(LFS)对癫痫的作用及其可能的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、癫痫模型组、假刺激组和LFS治疗组,每组15只。记录大鼠Racine评分和脑电图,Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色和尼氏染色检测大鼠海马CA1区病理学变化;TUNEL染色检测大鼠海马神经元细胞凋亡;ELISA检测大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平;Western blotting检测大鼠海马RhoA、ROCK1、ROCK2、p65、p-p65和凋亡相关基因蛋白表达;RT-PCR检测大鼠海马RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA表达。结果癫痫模型组大鼠出现了连续性棘波。癫痫模型组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较对照组升高,差异有统计学意义(P0.05)。癫痫模型组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量、Bcl-2蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义(P0.05)。LFS治疗组大鼠波峰下降。LFS治疗组大鼠的Racine评分;神经元细胞凋亡率;Bax、c-caspase3和p-p65/p65蛋白表达;RhoA、ROCK1和ROCK2 mRNA和蛋白表达;血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平较假刺激组降低,差异有统计学意义(P0.05)。LFS治疗组大鼠的空间学习记忆能力、神经元数量、尼氏体数量和Bcl-2蛋白表达较假刺激组升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 LFS可能通过抑制Rho/ROCK/NF-κB途径来抑制炎症产生,从而发挥抗癫痫作用。     

美金刚联合丰富环境对快速衰老小鼠海马脑源性神经营养因子、酪氨酸蛋白激酶受体B表达及学习记忆能力的影响

目的 探讨美金刚联合丰富环境对快速衰老小鼠(SAMP8)海马脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸蛋白激酶受体B(TrkB)表达及学习记忆能力的影响.方法 24只雄性SAMP8小鼠随机分为对照组、丰富环境治疗组(丰富环境组)、美金刚治疗组(美金刚组)和美金刚联合丰富环境组(联合治疗组),每组6只小鼠.治疗8周后,采用Morris水迷宫试验检测小鼠空间学习记忆能力,免疫印记法和实时定量PCR法检测小鼠海马组织中BDNF、TrkB的表达水平.结果 与对照组比较,丰富环境组、美金刚组小鼠在试验第3d起寻找到平台的潜伏期明显缩短,联合治疗组小鼠在试验第2d起的逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05 ～0.01);且联合治疗组小鼠在试验第4d时的逃避潜伏期明显短于丰富环境组和美金刚组(均P＜0.05).与对照组比较,其余3组小鼠穿越平台次数明显增多(P ＜0.05 ～0.01);且联合治疗组小鼠穿越平台次数明显多于丰富环境组和美金刚组(均P＜0.01).与对照组比较,其余3组小鼠海马BDNF mRNA、BDNF蛋白和TrkB蛋白的表达均明显升高(P ＜0.05～0.01),其中联合治疗组明显高于丰富环境组与美金刚组(P＜0.05～0.01).各组小鼠海马TrkB mRNA表达的差异无统计学意义.结论 美金刚和丰富环境治疗能够有效地改善SAMP8小鼠学习记忆能力并增加海马BDNF和TrkB的表达,二者联合治疗时效果更显著.     

盐酸美金刚对血管性痴呆大鼠海马CA1区BDNF及ERK表达的影响

目的 探讨盐酸美金刚对血管性痴呆大鼠海马神经元脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠48只随机分为假手术组、模型组、盐酸美金刚组各16只,采用结扎双侧颈总动脉方法制备动物模型,用盐酸美金刚溶液灌胃,Y-型迷宫测试学习记忆能力,HE染色观察大鼠海马神经元的形态学变化,兔疫组化染色检测BDNF及ERK的表达变化.结果 盐酸美金刚组大鼠的学习记忆成绩优于模型组,但不及假手术组,差异均有统计学意义(P＜0.01);BDNF表达较模型组与假手术组均明显增高(P＜0.01) ; ERK表达较模型组明显增高,却低于假手术组,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 盐酸美金刚有可能通过增加VD大鼠脑内BDNF含量,保护海马神经元,增加ERK含量,改善学习记忆能力.     

虾青素对致痫大鼠学习记忆能力的影响及机制探讨

目的观察虾青素(ASX)对杏仁核电点燃癫痫大鼠模型学习记忆能力的改善作用,并检测海马氧化应激和凋亡指标以探讨其作用机制。方法选取雄性成年SD大鼠,随机分为:对照组、癫痫组、高剂量ASX组(30mg·kg~(-1))、低剂量ASX组(15mg·kg~(-1))4组,每组15只。对照组仅给予电极植入,其余3组制备杏仁核慢性电点燃癫痫模型。ASX干预组分别于每天电刺激前1h给予ASX腹腔注射。在最后1次电刺激24h后行Morris水迷宫实验观察致痫大鼠学习记忆能力,检测各组大鼠海马组织中氧化应激参数的含量及凋亡参数蛋白表达水平。结果①Morris水迷宫实验:定位航行实验的1～5d,低剂量和高剂量ASX组的逃避潜伏期较癫痫组均明显缩短(~均P0.05),在空间探索实验中,低剂量和高剂量ASX组穿越平台次数较癫痫组均明显增多(~均P0.05);②海马氧化应激参数:低剂量和高剂量ASX组与癫痫组比较,丙二醛(MDA)含量均明显降低(~均P0.05),而谷胱甘肽(GSH)均明显升高(~均P0.05);③海马凋亡参数:低剂量和高剂量ASX组与癫痫组比较,Bcl-2蛋白表达水平均明显升高(~均P0.05),而Bax蛋白表达水平均明显降低(~均P0.05)。结论 ASX能够明显改善致痫大鼠的学习记忆能力,其机制与抗氧化及抗凋亡作用有关。     

Caspase-9在戊四氮所致癫痫持续状态大鼠神经元中的表达及重组人红细胞生成素的影响

目的观察重组人红细胞生成素(r Hu EPO)对戊四氮(PTZ)点燃的癫痫持续状态(SE)的SD大鼠海马神经元的影响,应用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002,观察门冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)的变化情况,为r Hu EPO在癫痫诊疗中提供实验室依据。方法采用PTZ点燃大鼠SE模型,将大鼠随机分为正常对照组(生理盐水,NS)、PTZ组(PTZ+NS)、r Hu EPO组(PTZ+r Hu EPO)、LY294002组(PTZ+LY294002+r Hu EPO)、二甲基亚砜(DMSO)对照组(PTZ+DMSO+r Hu EPO),检测各组大鼠行为学和脑电图(EEG)的改变;TUNEL法检测海马神经细胞的凋亡情况;免疫组织化学法观察磷酸化蛋白激酶B(p-PKB/p-Akt)、Caspase-9的表达;反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠海马Caspase-9m RNA的表达,Western blot方法检测各组大鼠海马Akt、p-Akt、Caspase-9蛋白的表达。结果r Hu EPO可以下调Caspase-9的表达,发挥神经保护作用;加入PI3K抑制剂LY294002,海马Caspase-9蛋白、Caspase-9m RNA的表达较r Hu EPO组增加,减弱了r Hu EPO的保护作用(P0.05)。结论 r Hu EPO在癫痫持续状态所致损伤中具有神经保护作用,应用PI3K/Akt抑制剂进一步佐证了该作用可能是通过了PI3K/Akt信号通路,通过对线粒体凋亡途径的相关调控因子Caspase-9的表达进行调控,发挥抗凋亡、促存活的神经保护作用。     

钙调神经磷酸酶对阿尔茨海默病大鼠模型海马区PSD-95及Homer、Shank基因各亚型表达的影响

目的探讨钙调神经磷酸酶(Calcineurin,Ca N)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠模型海马区PSD-95及Homer、Shank基因各亚型表达的影响及其作用机制。方法采用Aβ1-42海马注射建立AD大鼠模型,并用他克莫司(FK506)干预,以Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,并用实时定量PCR(RealTime PCR)检测大鼠海马区PSD-95及Homer、Shank各亚型的mRNA表达情况。结果与对照组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显减退(P<0.01),PSD-95、Homer1b、Shank1、Shank3的mRNA表达均下调,而Homer1a的mRNA表达上调(P<0.05)。FK506干预后,与模型组比较,学习记忆能力显著改善(P<0.01),同时PSD-95、Homer1b、Shank1、Shank3的mRNA表达均上调(P<0.05),而Homer1a的mRNA表达下调(P<0.01)。Shank2的mRNA表达在三组中均未见显著性差异(P>0.05)。结论抑制Ca N激活可明显增高海马区突触相关蛋白在基因的表达水平,从而影响突触的功能和可塑性,这可能是其改善AD症状的作用机制之一。     

姜黄素对Aβ诱导的AD大鼠海马CRMP-2表达的影响

目的探讨姜黄素对Aβ诱导的老年痴呆大鼠认知功能和海马CRMP-2的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、AD对照组和姜黄素给药组。Aβ1-40微量注射至大鼠右侧海马制作AD大鼠模型。Morris水迷宫试验测定大鼠学习记忆能力。RT-PCR检测海马内CRMP-2mRNA的表达,Western blotting方法检测海马内CRMP-2和p-CRMP-2蛋白表达,免疫组织化学方法检测海马内轴突蛋白表达。结果姜黄素干预后AD大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05)。与空白对照组相比,AD对照组大鼠海马区CRMP-2表达显著降低(P<0.05),轴突蛋白NFP-200阳性纤维排列紊乱,不规则,纤维数目显著减少(P<0.05);而在姜黄素组大鼠海马区可见CRMP-2表达升高,p-CRMP-2表达降低,而轴突蛋白表达明显增加(P<0.01)。结论姜黄素能够改善Aβ1-40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,其机制可能与姜黄素提高CRMP-2的表达并抑制CRMP-2的磷酸化从而促进轴突再生有关。