局部亚低温对脑出血后水肿影响的实验研究

目的探讨局部亚低温对大鼠脑出血后水肿形成的影响及其可能机制。方法雄性Wistar大鼠230只随机分为:对照组;脑出血组;脑出血加局部亚低温组;凝血酶加局部亚低温组。应用Evans-Blue测定血脑屏障(BBB)通透性,应用干湿重法测定脑水含量。结果与对照组相比,大鼠注血后6h开始出现脑组织水含量和BBB通透性的增加,在72h达到高峰,然后逐渐消退。不同时程局部亚低温均可以显著降低脑出血后72h时脑组织水含量及BBB通透性(P<0.01),其中给以4h局部亚低温时,降低最明显。注射凝血酶6h后,脑组织水含量及BBB通透性显著增高(P<0.01),于24~48h达高峰,然后逐渐下降。凝血酶 局部亚低温组在各个时间点与凝血酶组相比,脑组织水含量及BBB通透性明显降低(P<0.01)。结论局部亚低温可能是通过抑制凝血酶的毒性作用来减轻脑出血后水肿的形成及血脑屏障的破坏。     

局部亚低温对大鼠脑出血后基质金属蛋白酶-9及血脑屏障通透性的影响

目的探讨局部亚低温对大鼠自体血注入法脑出血模型基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA及蛋白表达的影响以及局部亚低温减轻脑出血后水肿的可能机制。方法雄性Wistar大鼠240只,随机分为脑出血(ICH)组和脑出血加局部亚低温(ICH H)组。每组分为对照、脑出血后6h、24h、72h、5d、7d共6个亚组,ICH H组于注血后立即给以4h的局部亚低温治疗,各亚组分别进行血脑屏障(BBB)通透性、脑水含量的检测以及应用RT-PCR及Western印记对MMP-9进行测定。结果ICH组大鼠脑内注血后6h开始出现脑组织水含量(P<0.01)及BBB通透性(P<0.05)的显著增加,二者在72h达到高峰,然后逐渐消退,ICH组MMP-9蛋白表达量与脑含水量和血脑屏障通透性呈正相关(r=0.88和r=0.96),ICH组MMP-9 mRNA表达量也与脑含水量和血脑屏障通透性呈正相关(r=0.78和r=0.85)。ICH H组大鼠脑组织水含量、BBB通透性以及MMP-9蛋白的表达与ICH组各时间点相比较,明显降低,而MMP-9 mRNA的表达与ICH组相比仅有轻度下降。结论脑出血后MMP-9的变化与BBB通透性和脑水肿密切相关,局部亚低温可以抑制脑出血后MMP-9蛋白表达的增加以及脑水肿的形成。提示局部亚低温可能通过影响MMP-9的变化来抑制脑出血后的水肿形成。     

亚低温对脑出血后凝血酶受体Ⅰ表达影响的实验研究

目的观察亚低温对大鼠自体血注入法脑出血模型凝血酶受体(PAR-1)表达的影响,探讨亚低温减轻脑出血后脑水肿的可能机制。方法雄性SD大鼠108只,随机分为生理盐水组、脑出血组和脑出血 亚低温组。每组分为脑出血后24h、72h和7d共3个亚组。脑出血 亚低温组于注血后给予6h亚低温治疗。各组于注血后24h、72h和7d断头取脑组织,测定脑水含量(干湿重法),检测脑内血肿周围微血管壁上PAR-1的表达(免疫组化学法)。结果脑出血组血肿周围微血管壁上PAR-1的表达高于生理盐水组(P<0.05)。亚低温组血肿周围微血管壁上PAR-1的表达低于脑出血组(P<0.01)。同时,亚低温组脑水含量在各时间点与脑出血组比较明显下降(P<0.01)。结论脑出血后血肿周围微血管壁上PAR-1的表达增加,其变化与脑水肿的变化一致,说明PAR-1参与了脑出血后脑水肿的形成;亚低温可能通过抑制出血后微血管壁上PAR-1的表达来发挥其脑保护作用。     

内皮屏障抗原在实验性大鼠脑出血后的表达及其与血脑屏障通透性改变的关系

目的 探讨内皮屏障抗原(EBA)在脑出血(ICH)后血肿周围脑组织中的表达及其在ICH后血脑屏障(BBB)通透性改变中的作用.方法 利用立体定向技术向大鼠尾状核内注入50μl自体股动脉血建立ICH模型,用免疫组化法检测ICH后血肿周围EBA、纤维蛋白原的蛋白表达、Belayev法测定BBB通透性及干湿重法测定脑水含量的动态变化.结果 ICH后6hEBA表达开始减少,3d时最少,7d略有回升;纤维蛋白原表达、BBB通透性、脑水含量均于ICH后6h开始升高,3d达高峰,7d逐渐下降,ICH后EBA蛋白表达与脑水含量呈负相关(r=-0.840,P＜0.01),与EB含量负相关(r=-0.827,P ＜0.01),与纤维蛋白原表达呈负相关(r=-0.851,P＜0.01).结论 大鼠实验性ICH后EBA的表达减少,且与纤维蛋白原、BBB通透性及脑水含量增高具有明显的相关性.     

局部亚低温对大鼠脑出血后血肿周围脑组织白介素-1β表达的影响

目的 观察局部亚低温对脑出血大鼠血肿周围脑组织的形态学变化和对白介素(IL)-1β表达的影响.方法 72只Wistar大鼠随机分为假手术组和脑出血后6 h、24 h、48 h、72 h、7 d组,每组再分为常温亚组和亚低温亚组,每个亚组6只大鼠.采用自体不凝血注人大鼠尾状核制备脑出血模型.各亚低温亚组注血后实施亚低温治疗4 h,维持脑温在(33±0.5)℃.观察血肿周围组织的形态学改变和IL-1β表达的变化.结果 亚低温亚组各时间点脑组织水肿明显轻于常温亚组;神经元变性坏死、炎症反应及胶质细胞增生程度明显轻于常温亚组.脑出血后6 h血肿周围脑组织IL-1β开始表达,48 h达高峰,7 d时仍明显高于对照亚组(均P＜0.01).脑出血24 h～7 d亚低温亚组IL-1β表达水平较相应时点常温亚组显著降低(均P＜0.01).结论 亚低温治疗能明显抑制血肿周围IL-1β的过度表达,减轻血肿周围脑组织的炎症反应.     

MK-801通过抑制RhoA在出血性脑损伤机制的研究

目的观察大鼠脑出血后血肿周围Rho GTP酶(RhoA)的表达变化及地佐环平(dizo-cilpine,MK-801)对其表达的影响,探讨在脑出血后脑损伤中N-甲基-D-门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)与RhoA的相关性。方法 SD雄性大鼠随机分为生理盐水组、出血组和治疗组,采用鼠尾自体血注入尾状核法建立大鼠脑出血3d模型,治疗组用MK-801在脑出血模型前1h腹腔注射,分别用伊文思蓝(Evans blue,EB)测血脑屏障(blood brain barrier,BBB)通透性,干-湿重法测血肿周围脑组织含水量,Western blot法测定患侧RhoA在各组的表达量。结果 MK-801治疗组较脑出血BBB通透性明显降低(P<0.05),血肿周围脑水肿明显减轻(P<0.05),RhoA表达量明显较少(P<0.05)。结论 MK-801能减轻脑出血后脑水肿、血脑屏障的开放,揭示MK-801通过抑制RhoA的表达可能参与出血性脑损伤。     

NMDA受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤作用机制的研究

目的探讨N-甲基-D天冬氨酸受体(NMDA)受体NR2A亚单位在凝血酶诱导的大鼠脑出血后脑损伤中的作用机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为生理盐水对照组、凝血酶组、凝血酶+阿加曲班组,建立大鼠脑出血模型。造模后48h,采用伊文思蓝法检测血脑屏障(BBB)的通透性,干-湿重法测脑组织的含水量。采用Western-blot方法观察出血后各时间点(0h、0.5h、6h、24h、72h、120h)血肿周围脑组织NR2A分布及动态变化规律。结果 (1)阿加曲班可以明显改善大鼠脑出血BBB通透性(P<0.05),血肿周围脑水肿明显减轻(P<0.05)。(2)Western-blot结果显示,NR2A在6h时开始增加,72h达到高峰,在120h时基本恢复。阿加曲班可以明显减少NR2A在72h时的表达(P<0.05)。结论 (1)NR2A参与了凝血酶诱导的脑出血后脑损伤的病理生理过程。(2)凝血酶可能通过上调NR2A表达引起脑出血后脑组织的损伤。     

4-苯基丁酸对大鼠脑出血模型脑水肿的作用及机制探讨

目的探讨4-苯基丁酸(PBA)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿的作用及机制。方法健康雄性SD大鼠,随机分为ICH组、PBA 100 mg·kg-1组、PBA 300 mg·kg-1组(均n=15)和假手术组(n=9),采用自体血脑内立体定向注射法建立大鼠ICH模型,不同剂量组PBA干预组于术后即刻每24 h腹腔注射相应剂量的PBA,评价术后不同时间点各组大鼠神经功能评分。各组大鼠均于术后72 h处死,干湿重法检测脑水肿情况,伊文思蓝法检测血脑屏障通透性变化,同时Western blot法检测血肿周围脑组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果 PBA 300 mg·kg-1组各时间点神经功能缺损显著低于ICH组(P0.05)。ICH后72 h,PBA 100 mg·kg-1组、PBA 300 mg·kg-1组脑组织含水量和伊文思蓝含量显著低于ICH组(P0.05);血肿周围组织中MMP-9表达也显著低于ICH组(P0.05)。结论 PBA能够改善大鼠ICH模型的神经功能缺损,减轻ICH后水肿和改善血脑屏障通透性,抑制血肿周围脑组织中MMP-9的表达是可能作用机制。     

亚低温治疗对脑缺血大鼠AQP4基因表达及血脑屏障通透性的影响

目的 观察亚低温治疗对脑缺血大鼠AQP4表达和血脑屏障通透性的变化的影响,探讨亚低温减轻缺血性脑水肿的可能机制.方法 线栓法制作脑缺血大鼠模型,实验分常温组、亚低温组和假手术组,分别在缺血后6h、24h、48h、72h用干湿重法测脑组织含水量,荧光法检测血脑屏障通透性的改变,原位杂交检测AQP4的表达变化.结果 假手术组脑组织含水量、血脑屏障通透性、AQP4表达无变化.缺血组脑组织含水量和血脑屏障通透性增加,AQP4表达上调,缺血48～72h变化最显著.相同时间点常温组脑组织含水量和血脑屏障通透性增加、AQP4的表达上调比亚低温组明显,两组之间的差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 亚低温条件下AQP4表达下调、血脑屏障通透性和脑水肿程度减轻.亚低温可能通过下调AQP4表达、减轻血脑屏障通透性,减轻缺血性脑水肿.     

大鼠脑出血后水通道蛋白4的表达与血脑屏障超微结构变化的相关性研究

目的观察脑出血后水通道蛋白4(AQP4)和血脑屏障(BBB)超微结构在脑水肿形成中的不同时间点的变化特征,探讨二者在脑水肿形成中的作用机制。方法采用自体非抗凝血注入尾状核制做脑出血模型,免疫组化法检测脑出血后血肿周围组织AQP4的表达,伊文思蓝检测BBB的通透性,干湿重法检测脑水肿含水量,电镜观察BBB超微结构的变化。结果与对照组相比较,脑出血组在脑出血后6h脑含水量、AQP4表达和伊文思蓝含量开始增加,差异有显著性(P<0.05),72h达到最高峰(P<0.05),之后开始下降,到第7天仍高于正常。AQP4表达与BBB通透性呈显著正相关(r=0.726,P<0.05);AQP4表达与脑含水量的变化规律也趋于一致(r=0.793,P<0.05)。BBB电镜观察:脑出血后6h脑微血管内皮细胞吞饮小泡增多、线粒体堆积。72h胶质细胞足突内线粒体逐渐肿胀、模糊,细胞充满大量空泡,基膜断裂。7d内皮细胞回缩,毛细血管基底膜形态开始恢复。结论脑出血后AQP4表达和BBB的通透性有显著相关性,提示脑出血后可能通过提高AQP4的表达水平,增加BBB的通透性,参与脑水肿的形成。     

亚低温可促进脑出血大鼠内源性神经干细胞的增殖*

背景：亚低温对脑出血后脑组织保护作用的研究多集中在减轻脑水肿方面,对神经干细胞的增殖是否有促进作用研究很少。 目的：观察亚低温对脑出血大鼠血肿周围、侧脑室旁神经干细胞增殖的影响。 方法：采用自体血注入尾状核制作Wistar大鼠脑出血模型,亚低温组于制作模型后给予局部亚低温4 h,对照组给予常温处理。 结果与结论：脑出血后1,3,7,14 d,亚低温组Longa 5分制法评分低于对照组(P < 0.05)。免疫组织化学方法检测亚低温组各时间点血肿周边及侧脑室旁组织的BrdU阳性细胞数明显多于对照组(P < 0.05)。初步提示亚低温处理可以促进干细胞内源性增殖,对脑出血有保护作用。     

Mild hypothermia effects on matrix metalloproteinase-9 expression in the perihematomal region of rats following experimental intracerebral hemorrhage**☆

BACKGROUND： Matrix metalloproteinase-9 （MMP-9） expression increases with intracerebral hemorrhage, and participates in the pathophysiological processes of secondary brain injury after intracerebral hemorrhage.
OBJECTIVE： To investigate the effects of mild hypothermia on MMP-9 expression and brain edema in the perihematomal region of experimental intracerebral hemorrhage rats.
DESIGN, TIME AND SETTING： The randomized, controlled experiment was performed at the Central Laboratory of Shandong Provincial Hospital between May and September 2007.
MATERIALS： Seventy-two, Wistar, male rats, 12-weeks old, were used for this study. Rabbit anti-MMP-9 primary antibody was purchased from Boster, China.
METHODS： Wistar rats were equally and randomly divided into normothermia and mild hypothermia groups. The two groups each comprised control, 6-hour intracerebral hemorrhage, 24-hour intracerebral hemorrhage, 48-hour intracerebral hemorrhage, 72-hour intracerebral hemorrhage, and l-week intracerebral hemorrhage subgroups, with six rats in each subgroup. Rat models of intracerebral hemorrhage were established by injecting 100 μL of autologous blood into the rat caudate nucleus. Rats in the mild hypothermia group received four hours of local mild hypothermia immediately following the injection. lntracerebral temperature was maintained at （33 ± 0.5） ℃. Subsequently, intracerebral temperature was spontaneously recovered at 25 ℃. Rats in the control subgroup were not injected with autologous blood and received only with intracerebral hemorrhage.
MAIN OUTCOME MEASURES： Brain water content and MMP-9 expression surrounding the hematoma region. RESULTS： MMP-9 expression increased at 6 hours, and brain edema reached a peak at 48 hours after intracerebral hemorrhage. MMP-9 expression was significantly decreased in the mild hypothermia group compared with the normothermia group at each time point （P 〈 0.05）.
CONCLUSION： Mild hypothermia can significantly inhibit MMP-9 overexpression and reliev     

Mild hypothermia effects on matrix metalloproteinase-9 expression in the perihematomal region of rats following experimental intracerebral hemorrhage

BACKGROUND:Matrix metalloproteinase-9(MMP-9)expression increases with intracerebral hemorrhage,and participates in the pathophysiological processes of secondary brain injury after intracerebral hemorrhage.OBJECTIVE:To investigate the effects of mild hypothermia on MMP-9 expression and brain edema in the perihematomal region of experimental intracerebral hemorrhage rats.DESIGN,TIME AND SETTING:The randomized,controlled experiment was performed at the Central Laboratory of Shandong Provincial Hospital between May and September 2007.MATERIALS:Seventy-two,Wistar,male rats,12-weeks old,were used for this study.Rabbit anti-MMP-9 primary antibody was purchased from Boster,China.METHODS:Wistar rats were equally and randomly divided into normothermia and mild hypothermia groups.The two groups each comprised control,6-hour intracerebral hemorrhage,24-hour intracerebral hemorrhage,48-hour intracerebral hemorrhage,72-hour intracerebral hemorrhage,and 1-week intracerebral hemorrhage subgroups,with six rats in each subgroup.Rat models of intracerebral hemorrhage were established by irtjecting 100 μL of autologous blood into the rat caudate nucleus.Rats in the mild hypothermia group received four hours of local mild hypothermia immediately following the injection.Intracerebral temperature was maintained at(33±0.5)℃.Subsequently,intracerebral temperature was spontaneously recovered at 25℃.Rats in the control subgroup were not injected with autologous blood and received only with intracerebral hemorrhage.MAIN OUTCOME MEASURES:Brain water content and MMP-9 expression surrounding the hematoma region.RESULTS:MMP-9 expression increased at 6 hours,and brain edema reached a peak at 48 hours after intracerebral hemorrhage.MMP-9 expression was significantly decreased in the mild hypothermia group compared with the normothermia group at each time point (P<0.05).CONCLUSION:Mild hypothermia can significantly inhibit MMP-9 overexpression and relieve brain edema following intracerebral hemorrhage.     

亚低温对大鼠脑缺血再灌注后炎性反应的影响

目的：观察亚低温的不同时程对大鼠脑缺血再灌注后炎性反应的影响。方法：24只SD大鼠随机分为4组：常温组，亚低温1／2h组，亚低温1h组和亚低温3h组。每组各6只大鼠。参照Zea Longa的方法建立脑缺血再灌注动物模型，于再灌注24h断头取脑，行HE染色，观察脑组织中自细胞浸润及神经细胞的变化情况。结果：常温组在缺血梗死灶周围区可见白细胞浸润明显及深染受损的神经元；随亚低温时间的延长，白细胞浸润逐渐减少，神经元亦表现为淡染的轻度损伤。结论：亚低温可抑制脑缺血再灌注后的白细胞浸润，具有神经保护作用。     

亚低温对大鼠弥漫性脑损伤后海马CA1区Apaf-1蛋白表达和学习记忆功能的影响

目的 探讨亚低温对大鼠弥漫性脑损伤(DBI)后海马CA1区Apaf-1蛋白表达及大鼠学习记忆功能的影响.方法 选择雄性Wistar大鼠48只,按照完全随机数字表法分为正常组、假手术组、脑损伤组和亚低温组,每组12只.正常组不做任何处理;假手术组仅给予麻醉及头皮切开、缝合,但不致伤;脑损伤组和亚低温组根据Marmarou方法制作DBI模型,亚低温组大鼠损伤后用冰毯及冰袋物理降温,使大鼠肛温在15 min内控制至30.0～31.0℃,维持2 h.14 d后比较各组大鼠Morris水迷宫实验成绩,同时比较各组大鼠海马CA1区Apaf-1蛋白的表达.结果 正常组、假手术组、脑损伤组和亚低温组大鼠搜索安全岛的次数分别为(10.1±1.9)次、(10.3±1.8)次、(3.8±2.3)次和(6.9±1.1)次,差异有统计学意义(P<0.05).脑损伤组及亚低温组海马CA1区Apaf-1蛋白含量高于正常组及假手术组,其中脑损伤组Apaf-1蛋白含量明显高于亚低温组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 亚低温可能通过抑制神经细胞凋亡对脑组织产生保护作用,从而改善大鼠脑损伤后学习记忆障碍.

Abstract：

Objective To investigate the influence of mild hypothermia on the apoptotic protease activating factor-1 (Apaf-1) protein expression in the hippocampal CA1 area and learning and memory functions of rats after diffuse brain injury (DBI). Methods Forty-eight male Wistar rats were equally randomized into normal group, sham-operated group, brain injury group and mild hypothermia treatment group (n=12). Rats in the normal group did not receive any treatment; rats in the sham-operated group only received anesthesia, and incision and suture of scalp; rats in the brain injury group and mild hypothermia treatment group were induced the DBI models according to Marmarou method; and rats in the mild hypothermia treatment group were performed hypothermia with ice blanket and ice bag to control the rectal temperature within 30.0-31.0 ℃ for 2 h. After DBI for 2 weeks, the times of searching refuge platform and the protein expression of Apaf-1 were compared among the 4 groups. Results The times of searching refuge platform in the normal group, sham operated group, brain injury group and mild hypothermia treatment group were (10.1 ±1.9), (10.3±1.8), (3.8±2.3) and (6.9±1.1), respectively,with significant differences between each 2 groups (P<0.05). The protein expression of Apaf-1 in the brain injury group and mild hypothermia treatment group was obviously higher than that in the other groups (P<0.05), and significantly lower protein expression of Apaf-1 in the mild hypothermia rats was noted as compared with that in the brain injury rats (P<0.05). Conclusion Mild hypothermia might play a protective role by inhibiting neuronal apoptosis for rats with DBI through the Apaf-1 pathway,which can improve learning and memory abilities.     

局部亚低温对脑缺血再灌注治疗时间的影响

目的观察有效再灌注时间窗内实施局部亚低温对不同时间点血管再通(再灌注)的影响,并探讨其机制。方法将150只雄性大鼠随机分为大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)24h组10只;常温再灌注组50只;MCAO 2h进行亚低温再灌注组50只;MCAO 3h进行亚低温再灌注组40只。动物均于再灌注24h后处死,但MCAO 24h组大脑中动脉闭塞24h后直接处死。采用TTC染色观察梗死体积,用干-湿质量法测定脑含水量,用原位末端标记(TUNEL)观察神经细胞凋亡的变化,采用免疫组化法检测大鼠模型的Bcl-2、Bax及水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)的表达。结果 MCAO 24h组的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、及Bcl-2、Bax、AQP4的表达相比较,常温组2～3h有统计学差异(P<0.01),4～6h没有统计学差异(P>0.05);MCAO 2h亚低温再灌注组2～5h有统计学差异(P<0.01),6h没有统计学差异(P>0.05);MCAO 3h亚低温再灌注组3～4h有统计学差异(P<0.01),5～6h没有统计学差异(P>0.05)。亚低温再灌注组各时相点的梗死体积、脑含水量、TUNEL阳性细胞数、Bax、AQP4的表达均显著低于相应常温组,Bcl-2的表达显著高于常温组(P<0.01,P<0.05)。结论实施局部亚低温可延长再灌注治疗时间窗,而且亚低温开始时间越早,其延长时间窗的效果就越显著。这为解决在时间窗内就诊的患者因检查等错过再灌注治疗这一临床难题的解决提供了重要的实验室依据。其机制可能与抑制半暗带细胞的凋亡和改善微循环有关。     

亚低温对脑缺血大鼠脑组织富含脯氨酸的Akt底物40与磷酸化的富含脯氨酸的Akt底物40表达的影响及其脑保护作用的研究

目的研究亚低温对脑缺血大鼠富含脯氨酸的Akt底物40(PRAS40)与磷酸化的PRAS40(pPRAS40)表达的影响及其脑保护作用。方法 56只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血组和脑缺血亚低温治疗组(亚低温组),后两组又分为缺血3 h、6 h、12 h、24 h、72 h、7 d亚组,每个亚组4只大鼠。用线栓法制作大鼠局灶脑缺血模型。亚低温组于缺血后30 min实施脑部亚低温(32~33℃)并持续4 h。在相应时间点行神经功能缺损评分,用免疫组化染色检测PRAS40及p-PRAS40的表达。结果脑缺血大鼠PRAS40和p-PRAS40的表达呈时间依赖性变化。PRAS40在缺血12 h开始减少,至缺血72 h表达最低,亚低温组12h、24 h、72 h、7 d亚组与脑缺血组的差异有统计学意义(均P0.05);p-PRAS40在缺血3 h开始减少,至缺血24 h表达最低,亚低温组3 h、6 h、12 h、24 h、72 h亚组与脑缺血组的差异有统计学意义(均P0.05)。神经功能缺损评分比较,亚低温组各亚组均明显低于脑缺血组(均P0.05)。结论脑缺血大鼠PRAS40和pPRAS40表达减少;亚低温能延缓其表达减少。亚低温能明显减轻脑缺血所致的神经功能缺损。     

亚低温对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及Bcl—2、Bax的影响

目的 研究不同时程的亚低温对大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型的神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响。方法 利用MCAO模型,缺血3小时后再灌注。缺血后即刻分别进行不同时程（0．5、1、3小时）的亚低温治疗,再灌注后24小时取脑切片作TUNEL染色及Bcl-2、Bax免疫组化染色。结果 （1）亚低温1、3小时组的凋亡细胞、Bax细胞数与对照组比较均明显降低（P＜0．05,P＜0．01）。（2）亚低温3小时组的Bcl－2细胞阳性率与对照组相比明显增加（P＜0．05）。（3）凋亡细胞阳性率与Bcl-2／Bax比值呈负相关关系（r＝－0．9759,P＜0．01）。结论 缺血性脑损伤的病理过程与细胞凋亡有关,Bcl-2／Bax比值能决定细胞凋亡的发生。亚低温能增强Bcl－2并降低Bax基因的表达,有抑制细胞凋亡的作用,是保护缺血神经元的重要方法之一。