临床常见沙门菌及其耐药性分析

[目的]了解淅东南沿海地区临床分离的常见沙门菌分布及耐药情况。[方法]采用ATB药敏反应和鉴定系统对395株甲型副伤寒沙门菌、9株伤寒沙门菌及1株猪霍乱沙门菌进行鉴定,对395株甲型副伤寒沙门菌进行药敏试验。[结果]405株沙门菌经鉴定,甲型副伤寒菌395株(97．5％)、伤寒沙门菌9株(2．2％)、猪霍乱沙门菌1株(0．25％)。其中2000年检出109株(26．9％),2001年检出38株(9．4％),2002年检出135株(33．3％),2003年检出115株(28．4％)。[结论]2000-2003年本市临床检出的沙门菌以甲型副伤寒沙门菌为主并呈散发流行。第3代头孢类抗生素仍是目前耐药性较低的药物。     

吴江市1997—2001年186株沙门菌的菌型鉴定

在肠杆菌科中沙门菌是一个重要菌属。该菌属分布面广,且可通过各种方式感染动物与人,常见的可使人引起伤寒、副伤寒、食物中毒及急性肠胃炎等病。为了了解我市沙门菌菌型的分布情况,进一步搞好卫生防疫工作,我们对1997～2001年检验工作中分离收集的186株沙门菌进行了血清分型鉴定,现将鉴定结果报告如下。     

沙门菌鞭毛抗原的变异及检测方法的初探

目的 了解沙门菌鞭毛抗原的变异及解决办法.方法 从我们1988-2006年共收集的35株沙门菌中选出发生H-O变异的菌株4株进行试验.结果 4株菌株用常规方法无法将沙门菌分到型.而用改进的试验方法可以鉴定到型,35株沙门菌检出4株H-O变异株,本次H-O变异率为11.4%. 结论 研究检测沙门菌H-O抗原的变异对追踪传染源、分析流行趋势有帮助.     

API20E、PCR方法在沙门菌鉴定中的应用

为了评价API 20E试条、PCR方法在沙门菌鉴定中的应用，本研究利用API 20E、PcR方法对54株疑似沙门菌进行鉴定，利用常规生化和血清学方法对鉴定结果进行确认。结果发现API20E、PCR方法与常规鉴定方法的结果一致，51株为沙门菌，3株非沙门菌（1株为柠檬酸杆菌，2株为河生肠杆菌）。API20E、PCR方法具有简便、特异、敏感的特点，可适用于沙门菌鉴定。     

沙门菌MALDI-TOF-MS标准菌库的建立及应用研究

目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)构建标准沙门菌株数据库。方法利用MALDI-TOF-MS对21株标准沙门菌进行质谱数据采集,建立标准菌株数据库。相关菌株质谱数据通过菌株在相同培养环境不同培养时间下所得质谱数据进行优化。通过血清型鉴定方法筛选出200株野生沙门菌,并利用自建数据库和现有数据库对200株野生沙门菌进行MALDI-TOF-MS检测,对自建数据库进行评价。结果 Bruker原有数据库、自建数据库及合并数据库对200株野生沙门菌鉴定,阳性率分别为87.5%、97.0%、97.5%。21株标准沙门菌株数据库按亲缘关系远近可分为3大类。主成分分析发现不同菌种之间质谱数据有一定的差异,个别菌种在不同培养条件下培养,质谱数据变化不明显。结论本研究建立的标准菌库对野生沙门菌的鉴定准确性高,适用于实际检测。研究结果丰富了已有的数据库,同时也为其他细菌菌库的建立提供了很好的借鉴。     

MALDI-TOF MS用于沙门菌食源性疾病暴发同源性分析初步研究

目的 评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术用于沙门菌食源性疾病暴发同源性分析的效果，为沙门菌暴发疫情处置提供技术支持。方法 收集长沙市近年5起食源性疾病暴发事件相关的42株沙门菌，进行生化鉴定和血清学分型并对其进行脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)分型分析。应用MALDI-TOF MS技术采集42株沙门菌质谱数据构建主要谱图后进行质谱鉴定，并对42株沙门菌进行相关距离聚类同源分析，再对不同事件的相关沙门菌分4次分别进行不加参考菌株和加入参考菌株的聚类同源分析，并与PFGE聚类分析结果进行比较。结果 29份食品中分离出5株沙门菌，62份病人标本中分离出37株沙门菌，42株沙门菌的质谱鉴定结果和生化鉴定结果符合率为100%,血清学鉴定分为3个血清型，肠炎沙门菌22株，布伦登卢普沙门菌17株，鼠伤寒沙门菌3株。PFGE将5次事件的沙门菌分成了4个内...     

广州市芳村区食品从业人员沙门菌带菌状况分析

目的了解广州市芳村区食品从业人员沙门菌带菌状况和菌型分布。方法1999~2004年采用国标常规细菌鉴定的方法对芳村区食品从业人员进行沙门菌带菌状况调查。结果1999~2004年从芳村区食品从业人员的89 286份肛拭子标本中共分离出沙门菌233株,带菌率为0.26%。233株沙门菌经血清学鉴定分为8个血清群,63个血清型。血清群以B群最多,共99株,占42.49%;其次是C2群,56株,占24.03%。血清型以德尔卑为最多,共37株;其次是阿贡纳,31株。结论广州市芳村区食品从业人员沙门菌带菌状况不容忽视,有关部门应加强监督监测,对带菌者加强管理,切实做好芳村区肠道传染病防治工作。     

荧光定量PCR方法在沙门菌鉴定中的应用

[目的 ]　用taqman技术建立沙门菌荧光定量聚合酶链反应 (PCR)检测方法 ,尝试快速、准确地鉴定沙门菌。　 [方法 ]　根据沙门菌GenBankAccessionNOU2 5 3 5 2基因序列 ,设计并合成引物和荧光标记探针。将PCR扩增的沙门菌基因片段克隆导入载体 ,构建的重组质粒经筛选、鉴定后 ,作为阳性模板 ,用于标准曲线的制定。利用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)技术进行各类菌株的定性鉴定。　 [结果 ]　应用重组质粒制作的定量曲线 ,其循环阈值与模板浓度的对数值具有良好的线性关系 ,相关系数为 0 .999。检测各类菌株 ,其中沙门菌 41株、H抗原丢失的沙门菌 16株均阳性 ;非沙门菌 10 9株均阴性。　 [结论 ]　建立了鉴定沙门菌的荧光定量PCR方法 ,该方法简便、快速、准确 ,有很好的应用前景和研究价值     

肠炎沙门菌质粒与沙门菌疾病关系的研究

本文就沙门菌耐药质粒和毒力质粒与沙门菌引起的食物中毒和医院内感染关系进行探讨 ,以求为预防和控制沙门菌病提供依据。1.调查对象与方法 :①三起食物中毒事件总计 5 7例病例 ,中毒病例均有食酱牛肉史。从病例粪便和剩余酱牛肉中分离出 8株菌 ,经过鉴定均为肠炎沙门菌 ,血清学鉴定为 1,9,12 :g ,m :- ,编号为 31～ 38。②院内感染 :哈尔滨市儿童医院 1年内多起院内感染病例 ,患儿年龄 2月龄～ 14岁 ,平均年龄 4 .5岁 ,对腹泻患儿的 2 17份粪便标本进行细菌分离 ,分离出 2 8株肠炎沙门菌 ,编号为 1～ 2 8。③质粒提取与质粒消除 :采用碱性…     

安宁市2018年-2019年沙门菌血清型和耐药分析

目的 了解安宁市2018年-2019年的沙门菌血清型及耐药情况,为疾病防治提供科学依据.方法 收集了200株沙门菌,依据现行有效的检测方法和试剂盒相关要求进行分离鉴定及耐药检测.结果 200株沙门菌中,有143株来自腹泻患者,可分为7个群,21个血清型,其中鼠伤寒沙门菌最多,其次是肠炎沙门菌;57株来自食品,可分为6个...     

多重PCR法鉴定伤寒沙门菌的研究

目的建立多重PCR方法鉴定伤寒沙门菌,为临床确诊及现场流行病学调查提供快速准确的实验室技术支持。方法根据沙门菌菌体抗原A/D1群基因、鞭毛抗原基因(fliC-Hd)及伤寒沙门菌Vi抗原基因片段(Vi)设计引物,建立多重PCR体系并进行反应条件优化。选择15株不同血清型沙门菌及18株非沙门菌菌株,对所建立体系的特异性进行检测,并将该体系应用于浙江省分离的50株实际样本的检测。结果建立并优化了伤寒沙门菌检测的多重PCR体系,优化后25μl PCR体系包括100μM dNTPs、2.5 U Taq DNA聚合酶、引物各0.2μM、模板5μl;PCR条件为94℃变性1 min,56℃退火1 min,72℃延伸1 min,共循环35次。该体系具有高特异性,可准确快速鉴定伤寒血清型沙门菌,同时也可区分A群及D群血清群的沙门菌,并能检测鞭毛抗原为Hd及毒力基因Vi阳性的沙门菌,对实际样本检测符合率达100.00%。结论多重PCR可准确鉴定伤寒沙门菌,能作为传统血清学分型的辅助方法用于伤寒沙门菌的鉴定。     

能力验证过程中一株双相亚利桑那亚种沙门菌的鉴定

目的参加2018年全国食源性疾病监测沙门菌检测的能力验证,正确的完成此次考核。方法对3株来自4份模拟粪便样本的可疑沙门菌在系统生化鉴定的基础上,应用PCR方法进行分子检测、飞行质谱法确证、血清凝集及药敏试验。结果 VETEK系统生化鉴定2株为肠炎沙门氏菌,另外1株为双相亚利桑那亚种肠道沙门菌。26种抗生素的MIC药敏试验显示肠炎沙门氏菌对26种抗生素均为敏感。双相亚利桑那亚种沙门菌除对链霉素耐药外,其余均为敏感。结论 4份考核样本中3份为沙门菌阳性,分离鉴定出的一株菌为双相亚利桑那亚种沙门菌,此菌不常见,易漏检,证明沙门菌的检测能力能满足食源性疾病监测的要求。     

沙门菌鉴定卡的研究与开发

目的:研究沙门菌快速简易的鉴定方法,并开发出具有应用价值的沙门菌鉴定卡。方法:应用硫化氢琼脂(H2S)、赖氨酸琼脂(LDC)、TTC琼脂(M)、甘露醇琼脂(MAN)、β-半乳糖苷琼脂(ONPG)、蔗糖琼脂(SAC),作为沙门菌鉴定的系列生化制备成鉴定卡。对22株标准菌种和72株本室分离的菌种进行鉴定,并进行了样品检测菌株的鉴定。结果:鉴定卡对菌种的鉴定表明沙门菌在鉴定模式之内;非沙门菌在鉴定模式以外,符合率达100%;样品检测表明鉴定卡和常规法结果一致,符合率也达100%。结论:该鉴定卡敏感性高、特异性强,而且操作简便,鉴定快速。     

生鲜肉中肠炎沙门菌分子生物学特征分析

目的了解生鲜肉类中肠炎沙门菌耐药性及基因变异情况。方法药敏试验采用K-B法,用碱裂解法提取细菌的质粒DNA,采用肠杆菌重复基因间隔重复共有序列（ERIC-PCR）技术对10株肠炎沙门菌进行基因分析,运用NTSYS-PC2.0软件进行同源性比较,聚类分析。结果药敏呈现出多重耐药;基因谱系与聚类分析可将菌株分为3大类,扩增片段长度为250bp～2000bp,在85%的同源度上可分为A、B、C等3个型,其中A型2株,B型6株,C型2株。结论生鲜肉中肠炎沙门菌耐药情况比较普遍,10株肠炎沙门菌基因变异较小,ERIC-PCR技术是分析、鉴定肠炎沙门菌,追溯食物中肠炎沙门菌的有用和可行的工具。     

一株罕见发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌鉴定与探讨

目的:对一株从冻贻贝中分离的沙门菌进行鉴定与探讨。方法:结合传统生化反应、荧光定量PCR检测、16S rDNA检测以及血清学分型鉴定方法。结果:该菌生化反应及PCR反应符合沙门菌属,经16S rD-NA鉴定为肠道沙门菌,血清学抗原式为9,46:e,h:1,2。结论:该菌是一株罕见的发酵蔗糖的贝坎道夫沙门菌(S.Bergedorf)。该菌为国内首次报道检出。     

河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分子流行特征研究

目的 了解河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株的分布及其分子学特征。方法 对我省监测到的历史鼠伤寒沙门菌进行血清学复核，使用双重PCR法鉴定第2相鞭毛缺失菌株并对其进行脉冲场凝胶电泳分析。结果1 576株沙门菌中有401株鼠伤寒沙门菌，经双重PCR方法鉴定出113株鼠伤寒沙门菌单相变异株，分别占沙门菌和鼠伤寒沙门菌的7.17%和28.18%,其中79.64%(90例)来源于<2岁的婴幼儿。113株鼠伤寒沙门菌单相变异株经XbaⅠ酶切后，共分为88种带型，各带型包含菌株数为1～5株，带型相似度在58%～100%，带型无明显的地域、时间聚集特征。结论 河南省腹泻患者中鼠伤寒沙门菌单相变异株检出率较高，且人群分布不均，分子分型表现出较大的多样性，没有形成较大规模的流行。     

吡咯烷酮酶试验在沙门菌鉴定中的应用

〔目的〕探讨吡咯烷酮酶 (PYR)试验在鉴定沙门菌中的价值。〔方法〕将实验菌株作常规生化反应 ,血清学凝集 , 噬菌体裂解等试验进行鉴定 ,并同时做PYR试验 ,观察其结果。〔结果〕14 8株沙门菌全部PYR试验阴性 ,3 2株枸橼酸杆菌全部为阳性。〔结论〕PYR试验可作为鉴别沙门菌与枸橼酸杆菌一种有价值的试验 ,对其它肠杆菌科细菌也有一定的鉴别意义。     

1株沙门样大肠埃希菌的分离与鉴定

目的对1株与沙门菌抗血清发生交叉凝集的肠道菌分离株进行鉴定。方法分别通过生化培养、抗血清凝集试验与16S rRNA序列比对分析,对该菌株进行鉴定。结果该菌株的分离培养、生化代谢特征均与大肠埃希菌一致,但能与沙门菌属多型、群特异性抗血清发生凝集,与大肠埃希菌抗血清无凝集反应。序列分析结果表明,该菌株16S rRNA与大肠埃希菌一致,与沙门菌属存在明显差异。结论本实验分离获得1株具有沙门菌血清凝集特征的大肠埃希菌。     

2010年食物中毒及散发腹泻患者沙门菌PFGE分子分型研究

目的 研究2010年沙门菌食物中毒及散发腹泻患者沙门菌分离株的分子分型.方法 将从中毒事件患者和剩余食物及散发腹泻患者分离到的18株沙门菌进一步鉴定培养,用限制性内切酶Xba l消化酶切后进行脉冲场凝胶电泳,运用Bionumerics5.1聚类分析.结果 指纹图谱聚类显示18株沙门菌分为多个分子型,同起食物中毒分离到的沙门菌有相同的指纹图谱;来自两个散发腹泻患者的分离株图谱也一致.结论 脉冲场凝胶电泳可有效应用于食物中毒溯源分析及沙门菌分子流行病学研究.     

一株田纳西沙门菌的检验报告

目的对1株环境涂抹样中分离出的沙门菌进行研究。方法对待检沙门菌进行生化鉴定、血清学分型及药敏试验。结果该菌生化反应符合沙门菌生化特征,其抗原式为6,7：Z29：-;药敏试验显示对所用抗生素均敏感。结论待检菌鉴定为田纳西沙门菌,为成都市首次检出该菌,提示在今后工作中应对不常见血清型的沙门氏菌给予更多关注。