碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶活性的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养人牙髓细胞迁移和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法:以组织块培养法体外获得人牙髓细胞,采用Transwell培养法和ALP活性检测法,观察10 ng/mL bFGF对体外培养人牙髓细胞迁移和分化能力的影响。结果:bFGF可显著诱导体外培养牙髓细胞迁移,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并能抑制细胞ALP活性(P<0.05),随着培养时间延长,该抑制作用更加显著(P<0.05)。结论:bFGF能促进牙髓细胞迁移,抑制ALP活性,在牙本质牙髓复合体修复中可能发挥重要作用。     

脂多糖对人牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:了解脂多糖(LPS)对人牙髓细胞的增殖和碱性磷酸酶活性的影响。方法:Ⅰ型胶原酶消化组织块法体外培养牙髓细胞,检测细胞表面LPS受体CD14(mCD14);流式细胞术观察不同浓度LPS(0.1μg/ml、1μg/ml和10μg/ml)对牙髓细胞细胞周期的影响,测定不同浓度LPS对牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响,采用χ2检验以及单因素方差分析对实验数据分别进行统计学分析。结果:人牙髓细胞不表达mCD14,LPS在浓度为0.1μg/ml、1μg/ml和10μg/ml时可以抑制牙髓细胞增殖(P<0.01)及碱性磷酸酶活性(P<0.05)。结论:LPS具有抑制牙髓细胞增殖及牙髓细胞分化的作用。     

氢氧化钙对牙髓碱性磷酸酶活性的作用

氢氧化钙可促进牙髓、牙本质修复,但作用机制不清楚。本文观察了氢氧化钙、氯化钙和氢氧化钡对提取的人牙髓组织ALP的体外水解作用和对牙髓细胞ALP活性的作用,结果显示,氢氧化钙可激活ALP的体外水解和牙髓细胞ALP活性,氯化钙对两种反应均表现抑制作用,氢氧化钡激活ALP的体外水解作用,但抑制牙髓细胞ALP活性。     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和胰岛素样生长因子(IGF)-1对人牙髓细胞碱性磷酸酶活性及矿化能力的影响。方法经10ng/mlbFGF(或)和100ng/mlIGF-1刺激4d后,在410nm波长,检测牙髓细胞的碱性磷酸酶活性值;经矿化液诱导后,采用VonKossa染色法检测不同组细胞的矿化能力。结果培养4d后,IGF-1组及bFGF加IGF-1组均高于对照组(P<0.05),而且bFGF加IGF-1组高于IGF-1组(P<0.05),而bFGF组吸光度值与对照组差异无显著性(P>0.05)。结论IGF-1可促进牙髓细胞向具有矿化能力的细胞分化,而bFGF可能起协同促进作用。     

牙周优势菌内毒素对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的：研究牙周优势菌牙龈卟啉菌、中间普氏菌、具核梭杆菌的内毒素对人牙周膜细胞（PDL细胞）增殖和碱性磷酸酶活性（ALP）的影响。方法：采用MTT比色试验及酶动力学方法，测定PDL细胞的增殖和ALP活性。结果：内毒素在10μg/mL、100μg/mL高浓度时，可显著抑制PDL细胞增殖，而在0.01μg/mL、0.1μg/mL低浓度时，则促进PDL细胞增殖；在10μg/mL、100μg/mL可呈浓度依赖性方式抑制PDL细胞ALP活性。结论：内毒素对牙周膜细胞的抑制作用主要和其浓度有关，不同来源内毒素差异并不显著；内毒素可能通过影响PDL细胞功能而影响牙周组织的代谢和修复过程。     

羟基磷灰石,氢氧化钙对鼠牙髓细胞碱性磷酶活性的影响

检测羟基磷灰石和氢氧化钙颗粒对鼠原代牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法：采用０．５％胰酶－０．１％ＥＤＴＡ消化法获取ＳＤ鼠原代牙髓细胞。细胞接种后，分别加入氢氧化钙和羟基磷灰石颗粒，在７ｄ或１４ｄ分别测定鼠原代牙髓细胞的碱性磷酸酶活性。     

内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响

目的：研究具核梭杆菌的内毒素（ＬＰＳ）对重组人成骨蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法：采用噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术。结果：在较低浓度ＬＰＳ作用时,可协同增加ｒｈＯＰ－１对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性,但对骨钙素（ＢＧＰ）无明显影响,而高浓度ＬＰＳ则起抑制作用。结论：提示适度的ＬＰＳ在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。     

人牙龈和牙周韧带成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究—细胞形态，生长曲线及碱性磷酸酶活性测定

目的：建立人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外培养模型并对其生物学特性作初步探讨。方法．;采用组织块法常规条件下分别进行牙龈和牙周韧带成纤维细胞的培养,通过光镜,透射电镜,生长曲线及碱性磷酸酶测定等手段对其部分生物学特性进行研究。结果：两种培养的原代及传代细胞在光镜下细胞排列及结构无明显判别,传代培养时牙龄纤维细胞有接触抑制现象,而牙周韧带成纤维细胞则可呈复层生长,牙周韧带成纤维细胞排列方向性较明显,生长曲线表明牙周韧带成纤维细胞增殖活性高于牙龄成纤维细胞;碱性磷酸酶活性测定及染色法显示两者有明显的判别。结论：体外培养的两种细胞在形态及排列上相似,但百细胞亚型的组成上存在差异。     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙髓细胞生物学活性的影响

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)生物学活性的影响.方法:常规组织块培养法获得HDPCs,采用四唑盐比色(MTT)法、ALP活性检测法观察不同浓度bFGF(0.1、1、10、100 μg/L)对体外培养的HDPC粘附性、伸展性以及ALP活性的影响.结果:不同浓度bFGF均可提高HDPCs粘附性和伸展性,与对照组相比P＜0.05;不同浓度bFGF与HDPCs共同培养一定时间后,均能显著抑制其ALP活性(P＜0.05);并且浓度越高,抑制作用出现的时间越早,100 μg/L组在培养第1天时与对照组相比P＜0.05.结论:0.1 ～ 100 μg/L范围内不同浓度bFGF均能促进HDPCs的粘附性和伸展性,并可抑制HDPCs的ALP活性.     

表皮生长因子对人牙髓细胞增殖的影响

目的：探讨表皮生长因子（ＥＧＦ）对人牙髓细胞增殖的效应。方法：采用体外细胞培养技术和噻唑蓝（ＭＴＴ）法,观察不同尝试ＥＧＦ对处于没生长阶段的人牙髓细胞的影响。结果：在牙髓细胞生长早期,０．１－１ｎｇ／ｍｌ的ＥＧＦ可显著促进其增殖,并呈浓度依赖关系,１ｎｇ／ｍｌ浓度的促增殖效应达高峰;在细胞生长旺盛期,０．１－５ｎｇ／ｍｌ的ＥＧＦ可显著促进其增殖,同样呈浓度依赖关系,５ｎｇ／ｍｌＥＧＦ的促增殖效应达     

人成釉细胞瘤细胞的体外培养研究

目的 建立较稳定的人成釉细胞瘤细胞体外培养体系。方法 取成釉细胞瘤新鲜组织,应用DMEM培养基对成釉细胞瘤细胞进行原代组织块培养、传代培养及细胞纯化,并行超微结构观察及角蛋白、波形蛋白免疫组化标记。结果 细胞可连续传4代,成活50～60天;细胞多边形,呈铺路石状排列;电镜下见细胞间桥粒和胞内束状张力丝等上皮特征性超微结构;免疫组化标记:角蛋白阳性,波形蛋白阴性。结论 在此培养体系中,可成功地进行人成釉细胞瘤细胞体外连续培养。     

机械牵张对人成骨细胞ALP活性及I型胶原表达的影响

目的　观察机械张力对成骨细胞碱性磷酸酶 (ALP)活性和I型胶原基因表达的影响。方法　通过Flexercell细胞体外拉伸力学装置对人成骨细胞MG 6 3进行牵张加载实验 ,用生化方法和RT PCR反应检测细胞受张力刺激 6、12、2 4和 4 8h后的ALP活性和I型胶原mRNA的表达变化。结果　机械张力能明显增强MG 6 3细胞的ALP活性。I型胶原mRNA的表达在张力作用后 6～ 12h减弱 ,2 4h后表达升高 ,4 8h最高。结论　机械张力不仅能促进成骨细胞ALP的分泌活性 ,而且还能对成骨细胞胶原合成产生影响。     

1,25-二羟维生素D3对MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3(1,25-dihydroxyvitamin D3,1,25-(OH)2D3)对成牙本质细胞系MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的影响.方法:细胞培养,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法.结果:1,25-(OH)2D3明显抑制MDPC-23细胞增殖,而促进MDPC-23细胞内碱性磷酸酶活性,呈一定的剂量和时间依赖性.结论:1,25-(OH)2D3可调节成牙本质细胞增殖和ALP活性,在成牙本质细胞增殖和矿化过程中可能发挥重要的作用.     

1,25-二羟维生素D_3对MDPC-23细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 :探讨 1 ,2 5 二羟维生素D3 (1 ,2 5 dihydroxyvitaminD3 ,1 ,2 5 (OH) 2 D3 )对成牙本质细胞系MDPC 2 3细胞增殖和碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase,ALP)活性的影响。方法 :细胞培养 ,MTT比色测定法和碱性磷酸酶活性测定法。结果 :1 ,2 5 (OH) 2 D3 明显抑制MDPC 2 3细胞增殖 ,而促进MDPC 2 3细胞内碱性磷酸酶活性 ,呈一定的剂量和时间依赖性。结论 :1 ,2 5 (OH) 2 D3 可调节成牙本质细胞增殖和ALP活性 ,在成牙本质细胞增殖和矿化过程中可能发挥重要的作用     

脂质体介导反义hTR基因转染对腺样囊性癌细胞系SAcc83的影响

目的 检测SAcc83细胞系端粒酶活性并观察人端粒酶模板hTR封闭后细胞生长行为的改变及与凋亡的关系。方法TRAP-PCR-ELISA法检测SAcc83细胞系端粒酶活性,脂质体介导真核表达载体PBBS212-ahTR转染SAcc83,PCNA免疫组化染色以证实其增殖活性改变,TUNEL法及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果转染反义hTR后SAcc83细胞增殖能力明显下降,群体倍增时间延长,转染细胞约30天后死亡。各项凋亡检测均证明细胞凋亡的存在。结论hTR反义基因通过封闭端粒酶模板RNA抑制了端粒酶活性,并可能通过某种途径激活细胞的凋亡程序,这为以端粒酶为靶子治疗恶性肿瘤提供了方向。     

短脉冲激光作用下离体牙牙石气化行为的初步探索

目的：本文对高强功率密度的矩形Nd：YAG激光短脉冲辐照作用下离体牙的牙石气化行为进行了实验研究。方法：借助于电子分析天平对牙石气化量的测定，实验探讨了激光参数的变化对牙石气化行为的影响。同时利用光学显微镜及高速动态摄影技术记录整个实验过程。结果：①功率密度小于4000MW／m^2时不发生牙石气化现象。②激光辐照50次后开始发生牙石气化。③本文得到了牙石气化后形成的孔穴状况图片。结论：①存在发生牙石气化现象的跨界激光辐照通量。②牙石的气化速率与牙石的成分有关。③激光去除牙石后的孔穴外形均匀，清洁，有利于临床治疗。     

EFFECT OF BETAMETHASONE ON THE PULP AFTER TOPICAL APPLICATION TO THE DENTIN OF RAT TEETH: VASCULAR ASPECTS OF THE INFLAMMATION

Objective:

This study investigated the pulpal effect of topically applied betamethasone to the dentin of rat molars in the vascular phase of inflammation.

Material and Methods:

Deep cavities were prepared on the occlusal face of the maxillary right and left 1st molars with non-refrigerated inverted-cone steel burs at low speed. Three groups were formed: Group I was composed of right 1st molars; Group II was composed of left 1st molars that received the application of a drop of betamethasone on dentin surface for 5 min; and Group III (control) was composed of right 2nd molars that received no cavity preparation or betamethasone application. Changes in the vascular characteristics of the pulp tissue were checked by calculating the pulp vascular area in relation to its total area and the number of blood vessels per unit area. Data were subjected to ANOVA and Tukey''s test (α=0.05).

Results:

Group I presented a significantly larger number of vessels (p<0.05) than Group II. Regarding the vascular/total area ratio (%), Group I presented statistically significantly higher values (p=0.01) than Groups II and III.

Conclusion:

Betamethasone applied on the dentin of rat teeth proved to reduce the vascular phase of pulp inflammation regarding vessel diameter and number of blood vessels.     

EFFECT OF CARBAMIDE PEROXIDE-BASED BLEACHING AGENTS CONTAINING FLUORIDE OR CALCIUM ON TENSILE STRENGTH OF HUMAN ENAMEL

Objective:

The aim of this study was to evaluate the effects of carbamide peroxide-based bleaching agents (CPG) containing fluoride (CF) or calcium (CCa) on the ultimate tensile strength of enamel (UTS).

Method:

A "cube-like" resin composite structure was built-up on the occlusal surface of twenty-two sound third molars to facilitate specimen preparation for the micro-tensile test. The restored teeth were serially sectioned in buccal-lingual direction in slices with approximate 0.7 mm thickness. Each slice was trimmed with a fine diamond bur to reduce the buccal, internal slope enamel of the cusps to a dumb-bell shape with a cross-sectional area at the "neck" of less than 0.5 mm². The samples were randomly divided into 12 groups (n=11). The control groups were not submitted to the bleaching regimen. Specimens were treated with 10% CPG gel or with 10% CPG formulations containing CF (0.2% and 0.5%) or CCa (0.05% and 0.2%). Bleached groups received the application of the 10% CPGs for 6 hours/day at 37° C, during 14 consecutive days and were stored in artificial saliva (AS) or 100% relative humidity (RH) among each application. After bleaching, specimens were tested with the microtensile method at 0.5 mm/min. Data were analyzed by two-way ANOVA and Tukey test (5%).

Results:

No significant difference was observed between groups stored in AS or RH. Specimens treated with CF or CCa presented similar UTS as unbleached control groups.

Conclusion:

Either 10% CPG formulations containing CF or CCa can preserve the UTS after bleaching regimen.     

涎腺腺样囊性癌细胞株p16基因缺失、突变及表达意义

目的　研究 p16基因在涎腺腺样囊性癌细胞株中的缺失和突变等结构变化及其表达之间的关系。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)和 PCR-单链构象多态性 (SSCP)对涎腺腺样囊性癌细胞株 ACC- 2和高转移细胞克隆 ACC- M进行 p16基因缺失、突变的检测 ,应用免疫组化方法检测 p16基因在细胞株中的蛋白表达。结果　涎腺腺样囊性癌细胞株 ACC- 2检测 p16基因阳性 ,高转移细胞克隆 ACC- M缺失 ,两个细胞克隆均无点突变 ,ACC- 2的p16蛋白表达阳性 ,而 ACC- M蛋白表达阴性。结论　 p16基因在高转移涎腺腺样囊性癌克隆中的缺失 ,表明 p16基因在涎腺腺样囊性癌的演进和转移中具有抑癌作用。