KGDS血栓靶向超声造影剂的制备及其初步评价

目的：探讨制备靶向结合活化血小板的脂质超声造影剂的新方法,评价制备的靶向超声造影剂体外与血栓靶向结合的能力。方法：首先合成荧光标记的,能与血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa受体特异性结合的赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸多肽-棕榈酸化合物（KGDS-Palm）。采用“超声-高速剪切”法,以带荧光FITC的KGDS-Palm为主要原料之一,制备靶向脂质超声造影剂。马尔文公司粒径测定仪检测微泡大小及分布;Coulter计数仪分析浓度;荧光显微镜下观察KGDS多肽与微泡的结合情况;流式细胞仪评价多肽与微泡的结合效率;观察靶向微泡在体外的稳定性;采用体外血栓模型,检测靶向微泡与血栓靶向结合的特异性。结果：KGDS靶向超声造影剂呈淡黄色混悬液,微泡浓度约为1.5×109/mL,平均粒径为1.5 μm,98%的微泡小于5 μm。荧光显微镜显示靶向超声造影剂表面呈明亮的绿色荧光;流式细胞仪检测KGDS结合效率为90.04%;体外4 ℃保存48 h后微泡浓度及粒径无显著改变;体外靶向及其拮抗实验证实,靶向超声造影剂与血栓特异性结合。结论：采用“超声-高速剪切法”制备靶向超声造影剂,方法简单易行,有利于靶向造影剂的制备及纯化;KGDS靶向超声造影剂稳定性好、靶向结合特异性强。     

靶向MAdCAM-1超声造影剂的制备及其体外寻靶实验研究

目的:制备适用于炎症性肠病超声诊断并靶向MAdCAM-1的长循环脂膜超声造影剂,并鉴定其物理性状及体外寻靶能力?方法:采用超声破碎法制备长循环脂膜超声微泡,通过“生物素-亲和素”法桥接超声微泡与抗MAdCAM-1单克隆抗体(MECA-367)?对制备出的靶向微泡造影剂进行物理性状检测;通过光镜和激光共聚焦显微镜观察该靶向造影剂对TNF-α诱导的炎症性肠病细胞模型的结合能力?同法制备携同型对照抗体IgG2a微泡作对照?结果:制备的靶向超声微泡形态好且粒径较均匀,平均粒径(464.5 ± 85.7)nm,Zeta电位(-19.3 ± 2.5)mV?SVEC4-10细胞MAdCAM-1的表达与TNF-α刺激时间成正相关?并且,当TNF-α浓度达到20 ng/ml时,MAdCAM-1的表达达到峰值?体外寻靶试验表明,该靶向造影剂较多并牢固地黏附到表达MAdCAM-1的细胞周围;携IgG2a的同型对照组未见明显结合?结论:成功制备出桥连MECA-367的靶向长循环脂膜超声造影剂,该造影剂在体外对高表达MAdCAM-1的炎性细胞模型有较强的特异性亲和力;TNF-α诱导SVEC4-10细胞建立炎症性肠病细胞模型的方法简便易行?     

血小板受体特异性微泡造影剂靶向粘附血栓的实验研究

目的构建能够靶向血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa受体的特异性脂质微泡，观察其对微血栓、体外人工血栓的粘附效应。方法用RGDS(Arg-Gly-Asp-Ser)耦联的方法构建靶向微泡，观察其对血小板聚集形成的微血栓的粘附效应。另在体外制作人工血栓模型，在二维超声下观察微泡造影剂对声学信号的影响。结果血小板聚集后加入经构建的靶向微泡，最后粘附在血小板微血栓周围；而加入普通微泡的对照孔则未见这种粘附效应。体外血栓模型中，未加微泡的血栓超声图像周围边界模糊，加入靶向微泡后血栓图像边界明显增强。结论血小板受体特异性靶向微泡对血栓有明显的趋附作用．并且能够增强血栓的超声信噪比。对血栓的临床诊断和治疗有潜在的意义。     

血小板受体特异性微泡造影剂靶向粘附血栓的实验研究

目的 构建能够靶向血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa受体的特异性脂质微泡,观察其对微血栓、体外人工血栓的粘附效应。方法 用RGDS(Arg-Gly-Asp-Ser)耦联的方法构建靶向微泡,观察其对血小板聚集形成的微血栓的粘附效应。另在体外制作人工血栓模型,在二维超声下观察微泡造影剂对声学信号的影响。结果 血小板聚集后加入经构建的靶向微泡,最后粘附在血小板微血栓周围;而加入普通微泡的对照孔则未见这种粘附效应。体外血栓模型中,未加微泡的血栓超声图像周围边界模糊,加入靶向微泡后血栓图像边界明显增强。结论 血小板受体特异性靶向微泡对血栓有明显的趋附作用,并且能够增强血栓的超声信噪比。对血栓的临床诊断和治疗有潜在的意义。     

携抗VEGFR2抗体PLGA靶向超声造影剂的制备及体外寻靶实验

目的 制备携抗血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）抗体聚乳酸羟基乙酸（PLGA）靶向超声造影剂,并考察其体外寻靶能力与超声显像性能。方法 通过改进的双乳化溶剂挥发法制备高分子材料PLGA纳米粒子,利用扫描电子显微镜对其一般特性进行表征,并进一步用碳二亚胺法将造影剂与抗VEGFR2抗体耦联制备靶向超声造影剂,使用激光共聚焦扫描显微镜对其体外寻靶能力进行初步评估,使用高频超声诊断仪观察体外显像效果。结果 PLGA超声造影剂粒子呈规则球形、大小均一、分散性好;在体外寻靶实验中,携抗VEGFR2抗体PLGA靶向造影剂能够较多并牢固的聚集到血管肉瘤内皮细胞（SVR）表面;体外超声成像实验中,携抗VEGFR2抗体PLGA靶向超声造影剂呈点状细密高回声,后方回声无衰减。结论 本研究成功制备携抗VEGFR2抗体PLGA靶向超声造影剂,能够在体外与VEGFR2高表达的血管肉瘤内皮细胞特异性靶向结合,且体外超声显像效果良好。     

超声造影剂在血管靶向方面的研究进展

超声造影剂在血管性病变的诊断和治疗领域的应用日益广泛，其在血栓、动脉粥样硬化斑块以及肿瘤血管的靶向显影和治疗方面具有十分诱人的前景。本文就此进行综述。     

胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂的制备及体外评价

目的 制备一种胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂(T-UCA)并评价其体外靶向性效果。 方法 合成高分子聚合物PLGA-PEG-NHS并利用核磁共振氢谱检测;用乳化挥发法制备包裹全氟溴辛烷(PFOB)的PLGA纳米造影剂后连接Hedgehog抗体;BCA法测定抗体的连接率;透射电镜观察其形态,动态光散射法测定其粒径、电位;采用气相色谱-质谱法测定纳米造影剂的包封率及载药量;利用透析法测定纳米造影剂的体外释放特性;在人胰腺癌细胞株SW1990和CFPAC-1上,利用荧光显微镜和流式细胞仪定性和定量验证其体外靶向能力。 结果 所制得胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂平均粒径为198.9nm,zeta电位为-31.8mV,包封率(63.7?Ee3.9%),载药量(14.3?Ee0.9%),48小时释药量为85.3%;体外细胞实验显示靶向造影剂与高表达Hedgehog抗原的SW1990细胞大量结合,而靶向造影剂与不表达Hedgehog抗原的CFPAC-1细胞未见特异性结合。 结论 本研究通过乳化挥发法成功制备了胰腺癌靶向的纳米级超声造影剂,其各项表征符合要求,并能特异性靶向Hedgehog高表达的胰腺癌细胞,有望成为胰腺癌诊断的超声造影剂。     

靶向微泡超声造影剂的研究进展

近年来随着超声技术的不断发展,超声造影在临床诊断和治疗方面都展现出了巨大的潜力,尤其在肿瘤诊疗方面,以超声靶向微泡造影剂为基础的超声靶向转运系统显露出显著的优势。常规的给药途径使化疗药物杀死肿瘤细胞的同时,     

靶向超声造影剂在冠心病中的应用

靶向超声造影剂在超声分子成像技术中占有重要的地位,也为冠心病的诊断和治疗提供了新的思路。本文将针对靶向超声造影剂的原理、发展及其在冠心病诊治中的应用做一综述。     

人前列腺癌靶向超声造影剂的制备及其体外实验研究

目的制备人前列腺细胞癌靶向超声造影剂,并对其进行鉴定,探讨其体外寻靶能力.方法静电吸附法制备免疫脂质体微泡造影剂;免疫荧光染色试验证明抗体与脂质体微泡的结合,普通光镜和荧光显微下观察微泡与前列腺癌细胞的结合情况,探讨靶向脂质体微泡对癌细胞的体外寻靶能力;同时以普通微泡作为对照.结果免疫脂质体微泡的荧光免疫染色试验为阳性;体外寻靶试验显示携带PSM(C-15)抗体的靶向脂质体微泡能较好地粘附于癌细胞周边;而对照组未见微泡与靶细胞的结合.结论采用静电吸附法成功制备了具有良好免疫活性的的人前列腺癌靶向脂质体造影剂,该造影剂在体外能高效特异性地与人前列腺癌细胞结合.     

共聚物微泡造影剂的制备与体外二次谐波特性研究

目的 用PLLA-PEG-PLLA共聚物为外壳材料制备微泡造影剂,建立体外声学性质测定装置和方法.方法 用开环聚合方法合成三嵌段共聚物;用双乳化法制备空心造影剂微泡;使用光学显微镜和扫描电镜观察形貌;测定微泡的粒径分布;体外测试微泡的二次谐波特性.结果 获得一系列在生理盐水中分散性很好的空心微泡,在低机械指数下呈现很好的二次谐波增强信号增强.结论 以共聚物PLLA-PEG-PLLA为外壳材料,采用双乳化法得到的空心微泡可以用作为超声造影剂.     

脂质体制备中超声参数的研究

目的 研究通过逆向蒸发法制备脂质体时,超声参数对脂质体性质的影响.方法 逆向蒸发法制备脂质体,设置超声输入功率分别为20％～40％,磷脂含量分别为10、15和20 mmol/L,总超声时间为20 min,探针到达液面深度分别为10mm和15mm,粒径分析仪检测粒径.结果 脂质体磷脂含量对超声后粒径影响不大,超声输入功率在20％～40％范围时,随着超声输入功率增强,脂质体粒径变小,分散度降低,输入功率高得到的脂质体分散更均匀,峰值更窄.结论 通过调节超声的各参数,可以达到控制脂质体粒径的目的.最佳的参数为:探针深度为15mm,超声功率为40％,超声时间为20 min.     

超声造影剂制备的初步实验研究

①目的试制非离子型表面活性剂为包膜的超声造影剂,观察其基本的物理特征。方法以非离子型表面活性剂司班80和吐温80为材料,利用超声空化法,对超声造影剂的制备进行初步的实验研究。结果司班80与吐温80按5：1比例配制,产生的微气泡粒径均值为3.74μm,浓度达109/mL数量级。结论非离子型表面活性剂为材料制备的超声造影剂,微泡粒径和浓度均符合造影剂要求。     

可携基因超声造影剂的制备及其体内外显影效果

目的 制备一种新型的超声造影剂,研究其理化性质及体内、外显影效果.方法 选用体内可降解的两种脂质体二软脂酰卵磷脂(DPPC)和1,2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷(DOTAP),采用薄膜分散法制备超声造影剂,观察其外观和形态及粒径分布.以声诺维超声造影剂、PBS和水合液作为对照组,比较其基因携带能力.采用体内、外显影实验,观察自制超声造影剂的显影效果和时间.结果 光学显微镜下显示,自制超声造影剂形态规则,呈球形,大小均一,平均粒径为6.969 μm.自制超声造影剂与声诺维超声造影剂相比有较好的基因携带能力,而声诺维超声造影剂与PBS及水合液的携基因能力无明显差异.体外超声显影显示,自制超声造影剂在Skeletal muscular模式下显影时间为18 min,造影模式下显影时间为14 min,两种模式下管内均表现为强回声,有很好的影像增强效果;体内超声显影(造影模式)显示,大鼠尾静脉注射造影剂后1 s时下腔静脉开始显影,3 s时腹主动脉中下段开始显影,内均可见强回声充填.结论 脂质体包裹的微泡理化性质稳定,具有较好的基因携带能力,体内外显影效果较好,有望成为一种新型的可携带基因和药物的超声造影剂.     

可携基因超声造影剂的制备及其体内外显影效果

目的制备一种新型的超声造影剂,研究其理化性质及体内、外显影效果。方法选用体内可降解的两种脂质体二软脂酰卵磷脂（DPPC）和1,2-二油烯氧基-3-三甲氨基丙烷（DOTAP）,采用薄膜分散法制备超声造影剂,观察其外观和形态及粒径分布。以声诺维超声造影剂、PBS和水合液作为对照组,比较其基因携带能力。采用体内、外显影实验,观察自制超声造影剂的显影效果和时间。结果光学显微镜下显示,自制超声造影剂形态规则,呈球形,大小均一,平均粒径为6.969μm。自制超声造影剂与声诺维超声造影剂相比有较好的基因携带能力,而声诺维超声造影剂与PBS及水合液的携基因能力无明显差异。体外超声显影显示,自制超声造影剂在Skeletalmuscular模式下显影时间为18min,造影模式下显影时间为14min,两种模式下管内均表现为强回声,有很好的影像增强效果;体内超声显影（造影模式）显示,大鼠尾静脉注射造影剂后1s时下腔静脉开始显影,3s时腹主动脉中下段开始显影,内均可见强回声充填。结论脂质体包裹的微泡理化性质稳定,具有较好的基因携带能力,体内外显影效果较好,有望成为一种新型的可携带基因和药物的超声造影剂。     

蛇床子素脂质体凝胶剂的制备及其体外透皮试验的初步研究

目的 制备蛇床子素脂质体凝胶剂,并对其体外渗透量及皮肤贮库效应进行考察.方法 采用薄膜分散法制备蛇床子素脂质体,再以卡波姆-940为基质制备脂质体凝胶剂;采用Franz扩散池法进行体外透皮试验,以高效液相色谱法测定蛇床子素的累积渗透量,通过药物的透皮给药吸收来评价蛇床子素脂质体凝胶剂的性能.结果 蛇床子素脂质体凝胶剂的渗透行为符合Higuchi方程,其中24 h的皮肤累积渗透量达到172.95 μg/em2,贮库后的皮肤累积渗透量达到210.19 μμg/cm2.结论 蛇床子素脂质体凝胶剂可透过皮肤被吸收,具有长效缓释作用,为研制蛇床子素的新型透皮制剂奠定了基础.