体外冲击波对兔膝关节炎软骨细胞丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的研究体外冲击波对兔膝骨关节炎对丝裂原活化蛋白激酶MAPK s(p38、JNK、ERKl/2)信号通路蛋白表达的影响,探讨体外冲击波促进膝关节软骨损伤修复和延缓退行性改变的分子机制。方法采用数字随机法将15只普通新西兰兔分为治疗组、模型组和对照组,每组5只。其中治疗组、模型组新西兰兔采用hunt法切断膝前交叉韧带和切除内侧半月板制作OA模型,对照组为正常兔子。治疗组于造模第7天开始给予体外冲击波治疗,能流密度1.5bar,冲击次数2 000次,每周一次,总疗程共4次。模型组和对照组不做任何治疗。各组兔于治疗后4周处死,,取股骨关节软骨,采用甲苯胺蓝染色进行关节软骨的组织学观察,并进行Mankin评分;Western blot法测定p38、JNK、ERKl/2磷酸化状态蛋白的表达。结果治疗组和模型组软骨组织Mankin评分较对照组明显增高(P<0.01),治疗结束后治疗组软骨组织Mankin评分较模型组下降(P<0.05)。治疗组和模型组磷酸化蛋白p38、JNK、ERK1/2的表达较对照组明显增高(P<0.01),而治疗后治疗组的磷酸化蛋白较模型组下降(P<0.05)。结论体外冲击波可以通过影响关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38、JNK、ERKl/2信号通路蛋白表达,进而调控下游相关因子,延缓关节软骨的退变。     

蛋白激酶C在乳腺癌组织中的表达

目的观察蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)同工酶在乳腺癌组织中的表达状况,探讨癌细胞信息传递的分子生物学机制。方法应用半定量RT-PCR检测了31例乳腺癌组织与12例癌旁正常乳腺组织中PKC-βΙmR-NA表达;应用Western blot检测以上组织中PKC-βΙ蛋白表达。结果乳腺癌组织中PKC-βΙmRNA与蛋白表达均高于癌旁正常乳腺组织(P<0.001)。结论乳腺癌组织中存在PKC-βΙ同工酶过度表达,它可能介导乳腺癌细胞分化的信号转导过程。     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与胚胎着床

胚胎着床是在诸多因素作用下,细胞内信号通路被激活,调控特定基因的表达,使胚胎滋养层和子宫内膜同步变化,从而使得发育正常的胚泡顺利植入子宫内膜的精密而复杂的过程.丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路是真核细胞调节增殖、分化、凋亡及细胞间功能同步化的基本信号通路.最近几年研究发现,MAPK通路在早期胚胎发育、子宫内膜蜕膜化、胚泡黏附、滋养层细胞增殖以及侵入子宫内膜过程中都起着重要作用.     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与精子活动力

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,激活后可参与调节细胞生长、发育、分化、凋亡等一系列生命活动.MAPK转导通路的一些组成部分,如细胞因子:白细胞介素6(IL-6)、成纤维细胞生长因子(FGF);蛋白激酶C(PKC);细胞外信号调节激酶(ERK)和p38及底物精子微管蛋白等直接或间接调节精子的活动力.MAPK信号通路的研究对探讨弱精子症发生的分子机制,寻求弱精子症新治疗途径有意义.     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路及其生物学功能

丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路广泛存在于哺乳动物细胞中，主要由MAPKKK、MAPKK和MAPK3类保守的蛋白激酶组成，与多种细胞反应（如细胞增殖、分化、转化及凋亡等）及机体多种生理病理过程（如脑发育、癌症及糖尿病等）密切相关。本文重点讨论了ERK1／2、JNK、p38及BMK1／ERK5通路的激活机制、下游底物及其生物学功能的研究进展。     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路与精子活动力

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)属于丝/苏氨酸蛋白激酶,激活后可参与调节细胞生长、发育、分化、凋亡等一系列生命活动。MAPK转导通路的一些组成部分,如细胞因子:白细胞介素6(IL-6)、成纤维细胞生长因子(FGF);蛋白激酶C(PKC);细胞外信号调节激酶(ERK)和p38及底物精子微管蛋白等直接或间接调节精子的活动力。MAPK信号通路的研究对探讨弱精子症发生的分子机制,寻求弱精子症新治疗途径有意义。     

056 丝裂原活化蛋白激酶信号通路及其生物学功能

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路广泛存在于哺乳动物细胞中,主要由MAPKKK、MAPKK和MAPK 3类保守的蛋白激酶组成,与多种细胞反应(如细胞增殖、分化、转化及凋亡等)及机体多种生理病理过程(如脑发育、癌症及糖尿病等)密切相关.本文重点讨论了ERK1/2、JNK、p38及BMK1/ERK5通路的激活机制、下游底物及其生物学功能的研究进展.     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症是育龄妇女常见病。异位内膜的侵袭性种植是一个多因素参与的复杂过程,涉及多条信号转导通路,其中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路起了非常重要的作用。异位内膜细胞在局部生长存活并随激素变化发生出血、炎症、免疫等反应。MAPK通路在促异位内膜间质细胞增殖,促炎症因子生成和促血管生成方面均起到显著作用。同时MAPK通路诱导辅助性T(Th)细胞发生Th1/Th2漂移,使异位内膜细胞发生免疫逃逸继而种植生长。     

丝裂原活化蛋白激酶信号通路与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症是育龄妇女常见病。异位内膜的侵袭性种植是一个多因素参与的复杂过程,涉及多条信号转导通路,其中丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路起了非常重要的作用。异位内膜细胞在局部生长存活并随激素变化发生出血、炎症、免疫等反应。MAPK通路在促异位内膜间质细胞增殖,促炎症因子生成和促血管生成方面均起到显著作用。同时MAPK 通路诱导辅助性T（Th）细胞发生Th1/Th2 漂移,使异位内膜细胞发生免疫逃逸继而种植生长。     

氯化镉对大鼠肾上皮细胞丝裂原活化蛋白激酶表达及其磷酸化的影响

目的 探讨氯化镉染毒大鼠正常肾上皮(normal rat kidney epithelial,NRK)细胞对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达及其磷酸化水平的影响.方法 应用不同剂量(0、1、5、10、20、40 μmol/L)氯化镉染毒NRK细胞24 h和同一剂量氯化镉(10 μmol/L)于不同时间(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 h)染毒NRK肾细胞.采用蛋白免疫印迹法检测氯化镉染毒后NRK细胞中MAPK表达水平,并用磷酸化抗体检测MAPK磷酸化水平.结果 不同氯化镉剂量和不同染毒时间染毒NRK细胞,发现MAPK表达无明显改变,但MAPK磷酸化蛋白表达量较对照组升高.氯化镉浓度在10 μmol/L时p-ERK1/2表达明显,表达量为1. 00±0.06;20 μmol/L和40 μmol/L剂量组表达量分别为2.58±0.11、2.76±0.23,比10 μmol/L组高1.58倍和1.76倍,差异有统计学意义(F=827.70,P＜0.01);氯化镉浓度为20 μmol/L(2.47±0.20)和40 μmol/L(3.73±0.25)时p-p38MAPK表达量比对照组(1.00±0.02)高1.47倍和2.73倍,差异有统计学意义(F=280.06,P＜0.01).p-ERK1/2和p-p38MAPK表达量与氯化镉浓度存在剂量-效应关系(p-ERK1/2相关系数为r=0.919,t=4.69,P=0.009;p-p38MAPK相关系数为r=0.945,t=5.79,P=0.004).MAPK磷酸化蛋白表达水平也与染毒时间相关,p-ERK1/2在染毒1 h(1.26±0.11)时表达明显,染毒4 h(1.51±0.07)和8 h(3.53±0.23)时表达量是对照组(1.00±0.02)的1.5倍和3.5倍,差异有统计学意义(F=427.82,P＜0.001);p-p38MAPK在染毒1 h(1.31±0.07)时表达也明显增加,染毒4 h(3.53±0.32)和8 h(4.41±0.38)时表达水平是对照组(1.00±0.03)的3.5倍和4.4倍,差异有统计学意义(F=280.06,P＜0.001).结论 氯化镉染毒NRK细胞可引起MAPK蛋白磷酸化水平明显升高,可能与MAPK的激活有关.     

XPO4、MAP2K4及ZIC1在子宫内膜癌组织表达及其对子宫内膜癌患者预后评估价值

目的探讨输出蛋白(XPO)4、丝裂原活化蛋白激酶(MAP2K)4及小脑锌指结构蛋白(ZIC)1在子宫内膜癌(EC)组织中的表达及其对EC患者的预后评估价值。 方法选择2017年6月至2018年6月,无锡市妇幼保健院、复旦大学附属中山医院青浦分院收治的147例EC患者为研究对象。采用免疫组化染色法检测患者EC组织及癌旁正常组织XPO4、MAP2K4、ZIC1表达水平。采用χ²检验,对患者EC组织及癌旁正常组织XPO4、MAP2K4、ZIC1阳性率,以及不同临床病理特征患者EC组织XPO4、MAP2K4、ZIC1阳性率进行比较。采用Two-stage检验,对EC组织XPO4、MAP2K4、ZIC1呈阳性与呈阴性患者的3年总体生存(OS)率进行比较。本研究遵循的程序经过无锡市妇幼保健院、复旦大学附属中山医院青浦分院伦理委员会批准(审批文号：20160803、20160502)。 结果①本组患者EC组织XPO4、MAP2K4阳性率分别为34.7%(51/147)、38.1%(56/147),显著低于癌旁正常组织的66.7%(98/147)与72.8%(107/147),并且差异均有统计学意义(χ²＝30.060、35.812,P<0.001)。本组患者EC组织ZIC1阳性率为72.1%(106/147),显著高于癌旁正常组织的40.1%(59/147),并且差异亦有统计学意义(χ²＝30.512、P<0.001)。②不同年龄、EC直径及绝经与否患者的EC组织XPO4、MAP2K4、ZIC1阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同国际妇产科联盟(FIGO)临床分期、组织病理学分级、子宫肌层侵犯程度及淋巴结转移与否患者EC组织XPO4、MAP2K4、ZIC1阳性率分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。③本组EC组织XPO4、MAP2K4呈阴性患者的3年OS率分别为42.7%、38.5%,均显著低于XPO4、MAP2K4呈阳性者的68.6%、71.4%,并且差异均有统计学意义(χ²＝8.960、P＝0.003,χ²＝15.077、P<0.001)。EC组织ZIC1呈阳性患者3年OS率为35.8%,显著低于ZIC1呈阴性者的68.3%,并且差异亦有统计学意义(χ²＝12.579、P<0.001)。 结论在EC组织中,XPO4、MAP2K4呈低表达,而ZIC1则呈高表达。XPO4、MAP2K4、ZIC1表达水平与患者组织病理学分级、淋巴结转移、FIGO临床分期、子宫肌层侵犯及3年OS率显著相关,其在评估EC患者发病、进展及预后中具有一定价值。     

MAP2K4、SUMO-1、BRCA1在年轻子宫内膜癌患者中的表达分析

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶4(MAP 2K4)、小类泛素化修饰蛋白1(SUMO-1)、乳腺癌易感基因1(BRCA1)在年轻子宫内膜癌患者中表达变化。方法选取2005年11月至2014年3月复旦大学附属妇产科医院80例年轻子宫内膜癌(EC)患者为EC组,80例子宫内膜非典型增生患者为非典型增生组、80例子宫内膜正常患者为正常组。对比3组患者组织中MAP2K4、SUMO-1、BRCA1表达,分析MAP2K4、SUMO-1、BRCA1表达与EC组患者临床病理参数、5年生存率关系。结果 EC组子宫内膜组织中MAP2K4、BRCA1表达低于非典型增生组、正常组,SUMO-1表达高于非典型增生组、正常组(χ^2值分别为64.73、60.67、64.52,均P <0.05);临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、组织分化程度为中低分化、肌层浸润深度≥1/2、有淋巴结转移的EC组患者MAP2K4、BRCA1表达低于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、组织分化程度为高分化、肌层浸润深度<1/2、无淋巴结转移患者,SUMO-1表达高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、组织分化程度为高分化、肌层浸润深度<1/2、无淋巴结转移患者(χ^2值分别为6.67、4.98、4.98、7.87、5.22、6.88、5.79、6.26、4.51、5.13、7.13、5.94,均P <0.05);MAP2K4、BRCA1在EC组织中阳性表达者5年生存率高于阴性表达者,SUMO-1阳性表达者5年生存率低于阴性表达者(χ^2值分别为5.79、4.39、6.35,均P <0.05)。结论 MAP2K4、BRCA1在年轻EC患者中呈低表达,SUMO-1呈高表达,且其表达与患者临床病理参数及生存率密切相关。     

乳腺癌组织中核心结合因子基因的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的探讨乳腺癌组织中核心结合因子(RunX2)基因的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年1月-2017年6月温州市人民医院肿瘤外科手术切除且经病理首次确诊为乳腺癌的女性组织标本56例(研究组)和48例女性癌旁组织标本(对照组),采用免疫组化检测方法 (IHC)检测两组RunX2基因的表达情况,并分析RunX2与乳腺癌患者临床病理参数的关系,所有患者均随访至2018年2月,统计随访期间患者生存率。结果乳腺癌组织RunX2蛋白高度表达率与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P0. 05)。RunX2蛋白表达与年龄、肿瘤直径、病理分型无关(P0. 05),与分化程度、临床分期、淋巴结转移、分子分型有关(P0. 05)。RunX2蛋白高表达患者3年生存率高于RunX2蛋白低表达患者,差异有统计学意义(P0. 05)。结论乳腺癌组织中RunX2表达上调,且与乳腺癌侵袭生物行为和预后相关,核心结合因子可能参与了乳腺癌的发生和发展。     

BMP-2在卵巢癌中的表达及对卵巢癌患者预后的影响

目的:检测BMP-2及其受体BMPRⅠA、BMPRⅠB和BMPRⅡ在上皮性卵巢癌中的表达并分析其对卵巢癌患者预后的影响。方法:应用免疫组化方法检测BMP-2及其受体BMPRⅠA、BMPRⅠB和BMPRⅡ在100例上皮性卵巢癌组织中的表达水平并通过病例随访分析其对卵巢癌患者术后5年存活率和生存时间的影响。结果:①BMP-2及其受体BMPRⅠA、BM-PRⅠB、BMPRⅡ的蛋白阳性染色主要集中在卵巢癌细胞胞浆中。②BMP-2、BMPRⅠB、BMPRⅡ阳性表达的上皮性卵巢癌患者术后5年存活率明显高于阴性表达者,且其术后平均存活时间明显长于阴性表达者。而BMPRⅠA与卵巢癌患者的术后5年存活率和平均生存时间无关。结论:BMP-2、BMPRⅠB和BMPRⅡ在上皮性卵巢癌组织中表达减弱或缺失可能预示着卵巢癌患者预后较差。     

乳腺癌组织ACBD3蛋白表达及其对增殖和预后影响

目的乳腺癌作为女性最常见的恶性肿瘤已成为女性肿瘤的第二致死原因,寻找特异性的分子标记物有助于研究乳腺癌发生发展,对于目前乳腺癌防治的基础研究有重要意义。本研究旨在探讨乳腺癌组织ACBD3 (Acyl-CoA-binding domain-containing protein 3)蛋白表达及其对乳腺癌增殖、转移和预后影响。方法应用蛋白质印迹法检测正常乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞系中ACBD3表达。收集1998-03-01-2016-06-30南阳医学高等专科学校第一附属医院手术切除的321例乳腺癌患者石蜡包埋切片组织,采用免疫组化染色技术检测乳腺癌组织中ACBD3蛋白表达水平,患者临床病例分析和随访资料为基础,采用Kaplan-Meier法分析ACBD3高表达与乳腺癌预后的关系;采用免疫组化染色技术检测高表达和低表达ACBD3蛋白的乳腺癌组织中Ki-67和E-cadherin表达水平,分析ACBD3表达与乳腺癌增殖和转移的相关性。结果 ACBD3蛋白在乳腺癌细胞系中的表达相对于正常乳腺细胞均为高表达,P<0.001。乳腺癌组织中ACBD3高表达患者5年生存率为66%,低于ACBD3低表达患者的98%,差异有统计学意义,P<0.001。将临床分期、T分期、N分期等与乳腺癌预后相关的指标和ACBD3纳入Cox比例风险模型分析,ACBD3表达水平的相对危险系数为1.191,P=0.008,表明ACBD3强阳性表达的患者预后差。乳腺癌组织ACBD3高表达的173例患者中,Ki-67表达也高的有99例,E-cadherin表达下降的有139例;ACBD3低表达的148例患者中,Ki-67表达也低的有125例,E-cadherin表达升高的有89例。ACBD3表达与Ki-67表达呈正相关,χ~2=58.824,P<0.001;ACBD3表达与E-cadherin表达呈负相关,χ~2=55.305,P<0.001。结论 ACBD3在乳腺癌组织中表达升高,与乳腺癌增殖和转移正相关,有助于评估乳腺癌的病情进展与预后。     

乳腺癌抑癌基因DPC4蛋白的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌DPC4(Smad4)蛋白的表达及临床意义。方法:应用免疫组化SP法,对80例乳腺癌及20例癌周腺叶进行检测,并结合临床资料进行研究。结果:乳腺癌DPC4(Smad4)蛋白的表达阳性率为75%(60/80),20例癌周腺叶内DPC4(Smad4)蛋白均呈强阳性表达,两者比较差异有显著性意义(P<0.05)。DPC4蛋白在乳腺癌的表达与患者年龄、发生部位无关(P>0.05),而与临床分期、淋巴结转移、病理分级、肿物大小有相关性(P<0.01)。结论:DPC4(Smad4)蛋白的表达与乳腺癌的发生发展密切相关,对预后的判断有参考价值。     

结肠癌转移相关基因1蛋白在乳腺癌中的表达及其预后价值

目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)蛋白在乳腺癌组织中的表达水平及其与患者预后的关系。方法选取2008年1月-2011年6月该院随访资料完整的乳腺癌病理标本80份和癌旁乳腺组织标本30份为研究对象,应用免疫组织化学方法检测其MACC1蛋白的表达情况,分析MACC1表达与各临床病理特征及生存预后之间的关系。结果MACC1蛋白在乳腺癌组织中的表达率(57.5%)高于在癌旁正常乳腺组织中的表达率(6.7%),差异有统计学意义(P0.05)。MACC1蛋白的表达与乳腺癌病灶直径、淋巴结转移及临床病理分期密切相关(P0.05)。随访病例中位无复发生存时间(RFS)为31个月,中位生存时间(OS)为57个月。单因素生存分析显示,MACC1低表达者中位RFS和OS长于髙表达者,差异有统计学意义(P0.05)。多因素生存分析显示,淋巴结转移数目、MACC1的表达均是影响乳腺癌复发转移和死亡的独立危险因素(P0.05)。结论 MACC1高表达患者预后较差,MACC1可能是乳腺癌的不良预后因素,且可能促进了乳腺癌的发展。     

ARHI基因在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨ARHI基因在乳腺癌组织中的表达及意义.方法:收集临床80例乳腺癌患者癌组织、40例癌旁乳腺组织和20例正常乳腺组织,采用免疫组织化学法和RT-PCR法检测ARHI基因在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织及正常组织中的表达.结果:与正常组织和癌旁组织相比较,ARHI蛋白和ARHImRNA水平在乳腺癌组织中的表达均明显降低(P＜0.01),并且两者随组织病理分级的升高而降低(P＜0.05),有淋巴结转移的低于无淋巴结转移者(P＜0.05),但在不同组织学类型中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论:ARHI基因表达的下调,说明ARHI在乳腺癌的发生、发展中具有重要作用,并为乳腺癌的诊断和预后提供依据.     

环氧化酶-2在乳腺癌组织的表达研究

目的:观察环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在乳腺癌组织与癌旁组织中的表达,并研究其与乳腺癌预后的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测98例乳腺癌组织及20例癌旁组织中COX-2的表达。结果:98例乳腺癌组织中COX-2阳性表达率为69.38%,20例癌旁组织中COX-2阳性率为15.00%,二者之间差异有显著性(P<0.05)。单因素分析中,COX-2的表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、TNM分期、雌孕激素受体、腋窝淋巴结状态均无明显相关性。在Cox比例风险回归模型中,病理学分期、雌激素受体、P185阳性为影响乳腺癌病人预后的独立因素(RR=16.619、0.377、2.952)。COX-2阳性组5年生存率为80.90%,阴性组为93.30%,二者相比较差异无显著性(Log-Rank检验,P=0.34)。结论:COX-2可能参与乳腺癌的发生、发展全程,但不能作为判定乳腺癌预后的独立因素。     

eIF4E和4EBPS在乳腺癌中的表达及意义

目的 分析eIF4E和4EBPS在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测45例乳腺癌及癌旁正常组织中eIF4E和4EBPS的表达.结果 eIF4E在正常乳腺组织中的阳性表达率为22.22％,在乳腺癌组织中阳性表达率为84.44％,差异具有统计学意义(P＜0.05).eIF4E表达与乳腺癌的淋巴结转移具有明显关系(P＜0.05).在正常乳腺组织中,4EBPS的阳性表达率约为95.60％,而在乳腺癌组织中其阳性率约为31.10％左右,差异有统计学意义(P＜0.05).4EBPS表达与乳腺癌淋巴结转移无关(P＞0.05).eIF4E与4EBPS表达呈负相关关系(r=-0.434,P＜0.05).结论 eIF4E和4EBPS在乳腺癌组织中的异常表达可能与乳腺癌的发生有关.eIF4E的异常表达可能与乳腺癌的转移有关.