淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠阴茎海绵体压力、平均动脉血压的影响及其作用机制的研究

目的 淫羊藿次苷Ⅱ是淫羊藿中提取分离的单体,为了解淫羊藿次苷Ⅱ对阴茎性功能障碍(ED)的疗效,通过体内试验观察其对阴茎海绵体压力和平均动脉血压的影响及作用机制.方法 麻醉下游离大鼠左侧颈总动脉和左侧阴茎海绵体,允别插管与电生理仪连接;游离左侧海绵体神经(CN),采用电生理仪刺激器连接双极电极刺激;检测不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ在刺激CN后对阴茎海绵体压力(ICP)和平均动脉血压(MAP)影响,淫羊藿苷、西地那非、罂粟碱作为对照组.同时观察可溶性环鸟苷酸(sGC)抑制剂H-[1,2,4]噁二唑[4,3.A]喹喔啉(ODQ)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N~ω硝基-L-精氨酸(LNNA)及一氧化氮生成抑制剂亚甲蓝(methylene blue,MB)对淫羊藿次苷Ⅱ(10~(-4)mol/L)诱发ICP/MAP变化的影响.结果 4组药物均剂量依赖性显著提高ICP(P<0.01),淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿苷和西地那非对MAP无显著影响(P>0.05),而罂粟碱浓度达10~(-4)mol/L后,即可显著降低MAP(P<0.01).在受试浓度下,LNNA、MB和ODQ可显著抑制淫羊藿次苷Ⅱ诱发的ICP变化(P<0.01),对两地那非诱发的ICP变化无影响(P>0.05).结论 淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿苷呈剂量依赖性地提高大鼠阴茎勃起功能(ICP),淫羊藿次苷Ⅱ效价强度为淫羊藿苷的2.44倍,对平均动脉血压没有显著影响,其机制可能与增强阴茎海绵体NO-cGMP通路的活性有关.     

淫羊藿苷减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及机制研究

目的 探讨淫羊藿苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响及其机制.方法 实验分为3组.实验组采用SD大鼠制备单侧肾脏缺血再灌注损伤模型,从术前2d开始至术后12d采用淫羊藿苷灌胃,剂量为100 mg·kg-1·d-1;对照组也采用模型大鼠,用溶剂灌胃;假手术组仅游离肾蒂,不用任何药物.检测术后14d内各组大鼠的体重和肾功能变化.术后24 h取大鼠肾组织,检测丙二醛和氧自由基代谢酶的水平.术后3d和14 l行肾组织病理学检查.结果 术后3、7、11和14d,实验组大鼠肌酐清除率均高于对照组(P＜0.01).术后3d,实验组大鼠肾小管损伤Paller评分低于对照组(P＜0.01).术后24 h,与对照组相比较,实验组丙二醛含量降低(P＜0.05),谷胱甘肽还原酶水平和还原型谷胱甘肽含量升高(P＜0.05),过氧化氢酶和双氧化物歧化酶水平升高(P＜0.05).结论 淫羊藿苷可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能是通过影响氧自由基代谢酶系统而减轻氧化应激损伤.     

雌性大鼠性唤起功能电生理模型建立

目的建立雌性大鼠性唤起阴道血流电生理研究模型,确定电生理学参数,研究发情周期不同阶段对模型阴道血流的影响。方法雌性Wistar大鼠30只,分为A组(n=10)和B组(n=20只)。A组大鼠以电流刺激盆神经阴道支(PNS),利用BIOPAC MPl00电生理仪测定不同频率电流刺激下,阴道血流变化(电压6V、脉冲间隔0．8ms,刺激持续时问30 s,刺激间歇期为5分钟,刺激频率设定为2．5Hz、5Hz、10 Hz和20Hz)。B组大鼠,通过阴道涂片确定发情周期不同阶段,PNS下测定阴道血流变化,比较发情周期不同阶段阴道血流差异。结果10Hz电流(6V、0．8ms、30s)PNS下,阴道血流反应较灵敏且对动脉血压没有影响,便于进行性唤起过程中阴道血流研究。固定参数PNS下(6V、0．8ms、30 s、10Hz),发情周期不同阶段雌性大鼠阴道血流峰值和曲线下面积未见明显变化(P＞0．05)。结论雌性大鼠可作为性唤起阴道血流电生理研究动物模型,确定10Hz、电压6V、脉冲间隔0．8ms、刺激持续时间30s为电刺激时的固定参数。大鼠性周期不同阶段PNS下大鼠阴道血流无明显差异,便于进行性唤起过程中雌性大鼠阴道血流研究。     

淫羊藿不同提取物对去势大鼠PINP、NTx影响的实验研究

目的通过PINP、NTx指标的变化研究淫羊藿抗骨质疏松的作用机制。方法采用去卵巢方法诱发大鼠骨质疏松模型,淫羊藿不同提取物进行灌胃,检测PINP、NTx等相关指标的变化,评价淫羊藿抗骨质疏松的疗效。结果与空白对照组相比,模型组E2、PINP含量明显降低(P0.001),NTx水平升高(P0.001);与模型组比较,淫羊藿不同提取物各剂量组均可提高去势大鼠E2水平(P0.05),提高PINP水平(P0.05),降低NTx水平(P0.05);淫羊藿水煎液各组PINP和NTx含量高于其他各组,差异具有统计学意义。结论淫羊藿具有雌激素样作用,淫羊藿不同提取物均可改善去势大鼠骨质疏松症。     

淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ通过BMP/Runx2/Osx信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组、抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅰ+抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅱ组及淫羊藿次苷Ⅱ+抑制剂组。通过茜素红染色,对各组促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价; ELISA法检测各组ALP活性、BGP、COL-Ⅰ、BMP2蛋白分泌量;RTReal-TimePCR法检测各组ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果茜素红染色结果表明,淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅱ组均可明显观察到大量的矿化结节的形成;ELISA实验结果表明,与空白对照组比较,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能明显促进ALP细胞活性及BGP、COL-Ⅰ、BMP-2蛋白分泌量,并且差异具有统计学意义(P0.05);两组药物作用强度均已达到阳性转化液组的80%以上。同时,淫羊藿次苷Ⅰ对ALP活性、 BGP蛋白表达均明显强于淫羊藿次苷Ⅱ,并且差异具有统计学意义(P0.05);对COL-Ⅰ、BMP-2的蛋白表达量,两者差异无统计学意义(P0.05)。RT-PCR实验结果表明,与空白对照组相比,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均可显著上调成骨相关转录因子ALP、BGP、RunX2,并进一步调节其下游基因Osterix的转录表达,差异具有统计学意义(P0.05);与阳性对照液组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对ALP、Osterix的mRNA表达无明显差异(P0.05);淫羊藿次苷Ⅰ与淫羊藿次苷Ⅱ组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对Osterix mRNA的表达明显强于淫羊藿次苷Ⅰ,并且差异具有统计学意义(P0.05)。对ALP、BGP、RunX2 mRNA的表达二者无显著性差异(P0.05)。结论淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ均能促进BMSCs定向成骨转化,其作用机制可能与激活BMP/Runx2/Osx信号通路有关。淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ作用差异可能与淫羊藿次苷Ⅰ在体内生物转化为淫羊藿次苷Ⅱ有关。     

双侧卵巢摘除对雌性大鼠阴道血流的影响研究

目的 观察雌性大鼠双侧卵巢摘除后,不同时间阴道血流动力学的变化和性激素变化情况,探讨双侧卵巢摘除大鼠作为女性性唤起功能障碍动物模型的可行性.方法 25只健康成年雌性wistar大鼠(200～250g)分为5组(5只/组),以假手术组作为正常对照组(A组),其余各组大鼠均行双侧卵巢摘除术,根据术后不同时间段即3、7、14、28d设为B、C、D、E组,分别于术后3、7、14、28d行盆神经阴道支电流刺激,了解阴道壁血流变化情况,并检测卵巢摘除后不同时间各组大鼠血液雌二醇和睾酮水平.结果 与假手术组比较,卵巢摘除7d后,大鼠阴道血流峰值和曲线下面积明显下降(P＜0.01),卵巢摘除28d后下降最明显(P≤0.001);卵巢摘除后C、D、E组血清雌二醇水平较A组明显低下(P＜0.01);各组雌性大鼠血清睾酮之间无明显差异(P＞0.05).结论 雌性大鼠双侧卵巢摘除后阴道壁血流减低,可作为女性性唤起功能障碍阴道充血功能障碍研究的动物模型,可能与雌二醇水平降低有关,有待于进一步研究.     

淫羊藿苷上调NRF2改善SHR大鼠勃起功能

目的:研究淫羊藿苷是否通过调节核因子类红细胞2-相关因子2(NRF2)通路改善自发性高血压大鼠(SHR)的勃起功能.方法:随机将10周龄健康雄性WKY大鼠(WKR)与雄性SHR大鼠分为4组(每组6只,共24只):WKY对照组、WKR+淫羊藿苷组[10 mg/(kg·d)灌胃]、SHR对照组,SHR+淫羊藿苷组[10 m...     

淫羊藿苷对模拟高原环境下雄性大鼠生殖系统损伤的保护作用研究

目的 研究淫羊藿苷对模拟高原环境下雄性大鼠生殖系统损伤的保护作用,并初步探讨相关作用机制。方法 选取30只12周龄雄性Wistar大鼠,随机分为平原对照组、高原模型组以及淫羊藿苷实验组,每组10只。平原对照组饲养于本院动物实验中心(海拔1 400 m),高原模型组以及淫羊藿苷实验组置入模拟海拔高度6 000 m高原环境动物实验舱;淫羊藿苷实验组给予100 mg/kg淫羊藿苷悬浊液于每日上午9时舱内灌胃,其余两组给予等体积生理盐水灌胃。模拟高原环境干预满30 d后麻醉取材,睾丸组织称重后一侧多聚甲醛固定用于进行苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠睾丸组织形态学改变,一侧破碎匀浆处理用于检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)氧化应激指标检测;附睾尾制备成精子悬液,检测精子质量。取大鼠血清检测睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)等激素水平。结果 (1)高原模型组与淫羊藿苷实验组的体重增长显著低于平原对照组(P<0.05),且高原模型组睾丸指数显著低于平原对照组与淫羊藿苷实验组(P<0.05)。(2)HE染色结果示,高原模型组睾丸组织生精小管内各级生精细胞排列不...     

淫羊藿对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响

目的 观察淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响.方法 健康SD大鼠32只,雌雄各半,随机分为4组:空白组、模型组、淫羊藿高剂量组、淫羊藿低剂量组,每组8只.后3组采用臀肌注射醋酸泼尼松龙注射液制备激素性股骨头坏死模型,造模的同时淫羊藿高、低剂量组分别给予含生药浓度1.5、0.9 g/L的淫羊藿提取液10 ml/kg,模型组及空白组给予同等剂量的生理盐水,共6周.结果 经灌胃6周后,淫羊藿高剂量组和低剂量组全血高切黏度为(5.55±0.60)、(5.85±0.66) ms/s;血浆黏度为(1.88±0.10)、(1.93 ±0.17) ms/s;高于空白组相应指标[(4.48±0.56)、(1.64±0.11) ms/s,P＜0.05],淫羊藿高剂量组全血高切黏度、血浆黏度低于模型组相应指标[(6.66±0.65)、(2.11±0.21) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组全血低切黏度、红细胞压积分别为(9.96±0.68)、(0.48±0.05)ms/s,均低于模型组[(12.21±1.11)、(0.60±0.07)ms/s,P＜0.05],且淫羊藿高剂量组低于淫羊藿低剂最组[(10.97±0.67)、(0.57±0.05) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组和空白组骨密度高于淫羊藿低剂量组和模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高剂量淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死的作用机制可能与降低血液流变学的各项指标、保证组织有效灌注、改善股骨头的局部微循环,并能够抑制破骨细胞活性、促进体外成骨细胞的增殖和分化成熟、增强骨质密度有关.     

红芪减方不同组分促周围神经再生作用的初探

目的 观察淫羊藿苷和按红芪减方由淫羊藿苷、红芪多糖、地龙水提液组成的混药对大鼠周围神经再生的促进作用.方法 制备浓度为0.005 g/mL的淫羊藿苷溶液和浓度约等于1 g(原药材)/mL的由淫羊藿苷、红芪多糖、地龙水提液组成的混药.取体重为(200±10)g的雄性SD大鼠20只,随机分为4组(n=5),分别为假手术组(A组)、模型组(B组)、淫羊藿苷组(C组)和混药组(D组).A组仪暴露左侧坐骨神经后缝合皮肤,不钳夹神经:B、C和D组以钳夹左侧坐骨神经的方式制备大鼠周围神经损伤模型:右侧不作任何处理.于次日开始每日定时灌胃给药,A组和B组给予生理盐水;C组给予淫羊藿苷溶液,D组给予混药,均为2 mL/d.给药后观察大鼠一般情况,给药后第21天检测神经功能指数、坐骨神经传导速度和有髓坐骨神经纤维形态及数量.结果 术后各组大鼠存活至实验完成,一般状况良好.第21天,A、B、C及D组大鼠体重分别为(366.94±14.0)、(370.14±16.3)、(373.3±19.6)及(374.0±11.4)g,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).坐骨神经功能指数测定A组与D组、B组与C组间差异无统计学意义(P＞0.05),余各组间差异有统计学意义(P＜0.05);胫神经功能指数,A组与B、C、D组间差异有统计学意义(P＜0.05),B组与C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05);腓总神经功能指数,A组与C、D组间、B组与C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).A、B、C和D组坐骨神经传导速度分别为(45.0±2.9)、(8.0±2.6)、(13.4±6.8)及(19.6±9.3)m/s,B组与C组间差异无统计学意义(P＞0.05),A组与B、C、D组间,B组与D组间差异有统计学意义(P＜0.05).锇酸染色观察B、C、D组的再生有髓坐骨神经纤维较A组细;B、C、D组再生有髓坐骨神经纤维数分别为A组的93.3%±35.6%、90.6%±37.1%和115.4%±40.6%,各组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 淫羊藿苷和混药具有良好的安全性,混药促周围神经再生作用较淫羊藿苷显著,提示应整体研究红芪减方,以期发现有效部位或多个化合物以固定配比组成的有效成分群.     

膝关节后交叉韧带断裂治疗临床分析

目的 对35例膝关节后交叉韧带断裂治疗进行临床分析,重点探讨了有关交叉韧带断裂的治疗问题。方法 经明确诊断后,分析采用胫骨附着处撕脱骨折复位固定手术治疗26例、早期髌韧带中1／3移植重建3例、单纯长腿石膏固定6例。结果 本组病例全部进行随访,随访时间13个月－5年,胫骨附着处撕脱骨折复位固定及髋韧带中1／3移植重建29例为优良、单纯长腿石膏固定6例为差。结论 后交叉韧带断裂后应该及时给予手术修复;膝后外侧手术入路,操作简单,暴露充分;少于3个月的陈旧性病例仍适应手术治疗。     

不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效分析

目的：探讨不同方法重建指尖离断静脉回流的疗效。方法：2008年3月-2013年2月收治指尖离断患者80例,38例吻合指侧方静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1或1：2或2：2,平均1：2;22例吻合指腹静脉重建回流,术中吻合动静脉比例1：1;20例未吻合静脉,术中仅吻合1条动脉,行侧切口或甲床放血。观察各组治疗效果。结果：吻合指侧方静脉组手指全部成活,无一例发生回流障碍;吻合指腹静脉组19例发生静脉危象,其中4例手指坏死;未吻合静脉组20例均发生回流障碍,其中6例手指坏死。58例获随访,随访时间6~28个月。吻合指侧方静脉组32例,指尖外形佳、指腹饱满;吻合指腹静脉组14例,指体轻度萎缩,指甲生长不平整;未吻合静脉组12例,指体萎缩明显。吻合指侧方静脉组指甲生长近平整,长度长于其他两组[（14.4±3.2）mm比（12.5±2.3）mm和（12.2±2.2）mm],远侧指间关节活动度大于其他两组[（63±5）°比（48±3）°和（45±7）°],两点分辨觉小于其他两组[（4.6±0.4）mm比（7.1±1.2）mm和（7.3±0.6）mm],感觉级别高于其他两组[S（3.45±0.39）级比S（2.57±0.42）级和S（2.55±0.49）级],差异均具有显著性（P〈0.05）。吻合指腹静脉组和未吻合静脉组在指甲长度、运动和感觉方面差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：吻合指侧方静脉能有效解决指尖再植静脉回流问题,可避免回流障碍,成活率高,促进指甲生长,可恢复 DIPJ 活动度及感觉。     

胫骨干骨折的手术治疗对策

目的：明确不同固定器械在胫骨干不同骨折类型固定中的特点，以指导临床应用。方法：68例胫骨干骨折，行加压钢板螺钉、交锁髓内钉、单侧外固定架固定后，作临床疗效分析。结果：加压钢板固定组42例，感染5例，骨不连1例，平均愈合时间3．8个月；交锁髓内钉固定组13例，无感染及骨不连，平均愈合时间5．4个月；单侧外固定架组13例，骨不连1例，踝关节背伸受限3例，平均愈合时间4．5个月。结论：胫骨骨折交锁髓内钉固定并发症少，功能恢复好，适用范围广，但要注意及时进行动力加压。加压钢板及外固定架固定应选择各自的最佳适应证，以达到理想的疗效。