阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将雄性Wistar大鼠54只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、阿米洛利组(A组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min3个时点处死6只大鼠,留取血浆和右肺组织,测定肺组织湿干质量比值(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,肺组织中细胞凋亡指数(AI)及血清丙二醛(MDA)含量,并进行肺组织病理学检查。结果再灌注期间IR组肺组织W/D、MPO活性、AI、血清MDA均升高,而预先给予阿米洛利干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的升高。肺组织病理学检查显示阿米洛利预先给药减轻肺缺血再灌注损伤。结论阿米洛利对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润及细胞凋亡有关。     

蒺藜总皂苷对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察蒺藜总皂苷(GSTT)对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能机制。方法:建立大鼠在体肺缺血再灌注模型,缺血45min,再灌120min,将雄性Wistar大鼠随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、GSTT小剂量组(L组)、GSTT大剂量组(H组),分别在再灌120min时,测定肺组织湿干质量比值(W/D),髓过氧化物酶(MPO)活性,血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)含量,并进行肺组织病理学检查;结果:IR组肺组织W/D、MPO活性、血清MDA升高,而血清SOD降低。预先给予GSTT干预后,L、H组均可以不同程度减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化。肺组织病理学检查显示GSTT预先给药可减轻肺缺血再灌注的损伤。结论:GSTT对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成和中性粒细胞浸润有关。     

胆红素在大鼠肺脏缺血再灌注损伤中的抗凋亡作用

目的探讨胆红素对实验性大鼠肺缺血再灌注损伤的抗凋亡作用。方法60只健康Wistar大鼠随机分为3组:手术对照(C)组,缺血再灌注(IR)组,胆红素干预(B)组。每组分别于夹闭缺血的45min,再灌注后30、60、120min4个时点处死大鼠,取血浆和右肺中叶,观察肺组织病理形态变化,测定肺组织干重/湿重(D/W),TUNEL法测定肺组织中细胞凋亡指数(AI)。结果①肺组织D/W:经缺血和再灌注后,IR组和B组的肺组织D/W都呈进行性下降(P<0.01);B组下降幅度明显小于IR组(P<0.05);②肺组织细胞AI的变化:与IR组相比,B组相同时点的肺组织细胞凋亡数显著减少(P<0.05);③肺组织病理变化:缺血再灌注后IR组肺组织损伤进行性加重,B组肺组织充血、水肿、炎性细胞浸润较IR组减轻。结论胆红素对于实验性大鼠肺脏缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与抗细胞凋亡有关。     

灯盏花素对大鼠肺缺血再灌注后氧化应激的影响及机制研究

目的研究灯盏花素对大鼠肺缺血再灌注损伤后氧化应激的影响,探讨其可能的作用机制。方法通过夹闭左肺门45 min的方法建立大鼠肺缺血再灌注损伤模型,术前30 min分别给予不同浓度灯盏花素(12.5、25、50 mg·kg~(-1))和舒血宁(4 mg·kg~(-1)),并设假手术组和模型组。再灌注2 h后测定肺组织湿/干重比(W/D),比色法测定肺组织中抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)]活性和血清中总抗氧化能力(T-AOC)水平、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量;Western blot法测定肺组织NF-κB蛋白表达,TUNEL染色法检测肺细胞凋亡。结果经灯盏花素干预能够显著降低肺缺血再灌注损伤大鼠肺组织W/D、减轻肺水肿,显著提高肺组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性和血清中T-AOC水平、降低血清中MPO活性和MDA含量,下调NF-κB蛋白表达、降低肺细胞凋亡指数(AI)、改善肺细胞凋亡状况,上述作用均具有一定剂量依赖性。结论灯盏花素可能通过抑制氧化应激反应而对肺缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。     

大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡及七氟醚对细胞凋亡及 NF-κBp65的影响

目的：探讨七氟醚预处理对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡的影响。方法24只Wister大鼠随机分为3组（n＝8）：假手术组,缺血再灌注组,七氟醚组,阻断肝门30 min后建立大鼠70％肝缺血再灌注模型。假手术组（ S组）仅游离肝门,但不阻断;肝缺血再灌注组（ IR组）采用阻断肝门30 min,再灌注1 h的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型;七氟醚预处理组（ SP组）吸入2．1％七氟醚30 min,停止吸入10 min后制备肝缺血再灌注模型。于再灌注1 h时处死动物,留取肺组织,测定湿／干重比（ W／D比）,采用比色法检测超氧化物歧化酶（ SOD）活性及丙二醛（ MDA）含量,采用原位末端转移酶法（ TUNEL）检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数（ AI）,采用Western blot法测定核蛋白NF-κBp65表达,光镜下观察肺组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和SP组再灌注各时点肺组织W／D比值、细胞凋亡指数（ AI）和NF-κB 活性水平及MDA含量均显著增高（均P＜0．05）;SOD活性显著降低（P＜0．05）;与IR组比较,SP组W／D比值、细胞凋亡指数（AI）、NF-κB表达水平与MDA含量显著降低（均P＜0．05）;而SOD活性显著增加（P＜0．05）;SP组肺组织损伤较IR组减轻。结论细胞凋亡可能在肝缺血再灌注肺损伤发生过程中具有重要意义;七氟醚对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡具有抑制作用,其作用机制可能通过降低肺组织NF-κB的活性,从而清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

中介素1-53对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察中介素1-53(IMD1-53)对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能的机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将健康雄性Wistar大鼠72只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、IMD1-53干预组(D组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min时处死8只大鼠,取血浆和右肺中叶,测定血清丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性;反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织IMD、降钙素受体样受体(CL)mRNA水平;放射免疫法测定血浆IMD1-53含量,并进行肺组织病理学检查。结果与正常对照组相比,再灌注期间IR组血浆MDA含量、肺组织MPO活性升高,肺组织IMD、CL基因表达水平及血浆中IMD1-53含量显著降低,而IMD1-53干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的变化,肺组织病理学检查显示肺缺血再灌注损伤程度也较IR组明显减轻。结论IMD1-53具有抗氧化作用,可抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润,减少脂质过氧化作用,对肺缺血再灌注损伤有保护作用。     

七氟烷对大鼠缺血再灌注后肺组织氧自由基的影响

目的通过建立在体大鼠肺缺血再灌注损伤模型,观察七氟烷对缺血再灌注后肺组织氧自由基(OFRs)表达的影响,探讨缺血再灌注后肺损伤和七氟烷肺保护的可能机制。方法选择96只雄性wistar大鼠,参照改良的Eppinger方法建立在体大鼠肺缺血再灌注损伤模型。共分4组,每组24只大鼠。C组:开胸游离左肺门,未行肺门阻断;IR组:阻断肺门45min后开放再灌注;Sev-C组:吸入1MAC七氟烷30min,游离肺门不阻断;Sev-IR组:吸入七氟烷30min后阻断左肺门45min,然后开放再灌注。每组包括3个时点:缺血阻断45min、再灌注60min、再灌注120min,每时点6只大鼠,另外再灌注120min时,各组另取6只大鼠行支气管灌洗。记录各时点MAP、SpO2,测定W/D、肺通透指数(LPI),生化法检测肺组织MDA、SOD和MPO含量。结果与C组和Sev-C组比较,IR组和Sev-IR组再灌注后W/D、LPI均上升(P<0.05),Sev-IR组W/D、LPI升高的程度低于IR组(P<0.05);IR组再灌注60min、120min肺组织MDA、MPO含量增加(P<0.05),SOD含量减少(P<0.05)。Sev-IR组MDA、MPO增加、SOD减少的程度都低于IR组(P<0.05)。结论肺缺血再灌注后血管通透性增加,再灌注后肺损伤的机制与OFRs产生过多有关,七氟烷预处理能抑制OFRs的生成,对再灌注后肺组织具有一定的保护作用。     

番茄红素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的研究番茄红素对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用,并考察其作用机制。方法取120只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、舒血宁注射液(4 mg/kg)组以及番茄红素5、10、20 mg/kg组,每组20只。除假手术组外采用夹闭左肺门45 min后松夹的方法制备大鼠肺缺血再灌注损伤模型。再灌注2 h后,分别测定各组大鼠肺组织湿质量/干质量比值;通过苏木精–尹红(HE)染色观察肺组织病理学改变;原位末端标记(TUNEL)法观察肺组织细胞凋亡并计算凋亡指数(AI);检测血清中丙二醛(MDA)含量和髓过氧化物酶(MPO)活性;测定肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果与模型组比较,番茄红素10、20 mg/kg组肺组织湿质量/干质量比值显著降低(P0.05、0.01),肺组织病变显著改善,肺组织细胞凋亡状况明显改善;血清中MDA含量和MPO活性显著降低(P0.05、0.01),肺组织中SOD、CAT活性显著升高(P0.05、0.01)。其中番茄红素20 mg/kg组对肺缺血再灌注损伤大鼠肺组织病变改善最为显著、细胞凋亡状况改善以及凋亡指数降低效果最为显著,对血清中MDA含量和MPO活性显著降低效果更加显著、肺组织中GSH-Px活性显著升高(P0.01)。结论番茄红素能够有效降低肺组织湿质量/干质量比值,改善肺组织病变,抑制肺组织细胞凋亡、降低凋亡指数,提示番茄红素对大鼠肺缺血再灌注损伤具有剂量相关性的保护作用,其作用机制可能与番茄红素能够有效改善机体抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤有关。     

JNK在缺血后处理减轻再灌注损伤肺细胞凋亡中的作用

目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(JNK)在缺血后处理(IPO)减轻缺血/再灌注损伤大鼠肺细胞凋亡中的作用.方法:雄性SD大鼠随机分成5组(n=8),即对照组(C组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)、肺缺.血/再灌注+缺血后处理组(IPO组)、缺血后处理+溶剂对照组(PPCES溶液)(P组)、缺血后处理+ SP600125组(SP组).分别于再灌注2h颈动脉取血、留取左肺组织,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO),检测肺组织湿/干重比(W/D)和总肺含水量(TLW);光电镜观察肺组织形态学结构改变,并进行肺组织损伤定量评估(IQA);原位末端标记法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI).结果:与C组相比,I/R组血清SOD活性显著降低,MDA含量、MPO活力显著升高(P均＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著升高(P＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构发生明显损伤;IPO组、P组、SP组与I/R组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P ＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构损伤情况有所改善;P组与IPO组比较各项指标均无明显差异(P均＞0.05);SP组与IPO组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构未见明显损伤.结论:I/R导致大鼠肺组织过度氧化应激,激活JNK,肺内中性粒细胞聚集,导致肺组织结构严重破坏,细胞大量凋亡;IPO可以减轻氧化应激,抑制JNK通路的激活,从而改善其结构破坏和细胞凋亡.     

七氟醚对肺缺血-再灌注损伤兔的保护作用

目的探讨七氟醚对兔肺缺血 再灌注损伤的保护作用及可能机制。方法96只日本大耳白兔，随机分为4组（n=24）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）、七氟醚缺血 再灌注组（Sev IR组）和七氟醚组（Sev S）。IR组、Sev IR组参照Eppinger方法建立肺缺血再灌注模型，Sev IR 组 吸入肺泡最小有效浓度（MAC）七氟醚30 min后行缺血 再灌注，Sev S组吸入1MAC七氟醚30 min后不进行缺血再灌注。分别在缺血45 min、再灌注60，120 min处死兔，行动脉血气分析，测定肺组织湿干重比（W/D）、TNFα、IL 1β和IL 10的含量以及MPO的活性、支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞分类计数、肺通透性指数及肺组织病理学检查。结果再灌注后IR组和Sev IR组的肺组织W/D、TNFα、IL 1β的含量以及MPO的活性、肺通透性指数、BALF中白细胞数、中性粒细胞数均高于S组(P＜0.01)， Sev IR组减弱上述指标的升高(P＜0.05)；IR组和Sev IR组IL 10低于S组(P＜0.01)，而Sev IR组IL 10的含量明显高于IR组(P＜0.05)。病理学检查显示七氟醚预先给药减弱肺组织缺血 再灌注损伤的程度。结论七氟醚对肺缺血 再灌注损伤兔有保护作用，其机制可能与其抑制TNF α、IL 1β释放，升高IL 10的水平，抑制PMN的浸润有关。     

卡托普利后处理对再灌注损伤鼠肺血管紧张

目的探讨卡托普利后处理对大鼠肺缺血—再灌注时肺血管内皮血管紧张素转换酶(ACE)mRNA表达的影响,分析其可能的作用机制。方法实验大鼠24只,随机分为假手术组(Sham组,n=8只)、缺血—再灌注组(I/R组,n=8只)和卡托普利后处理组(CAP组,n=8只)。I/R组阻断左肺门1 h后,恢复通气再灌注1 h。Sham组开胸游离左肺门,通气及灌注2 h。CAP组于再灌注前20 min腹腔注射卡托普利(10 mg.kg-1)行药物后处理,恢复通气再灌注1 h。留取静脉血及左侧肺组织,分别测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量、ACE mRNA的表达量及静脉血中ET-1的含量,测肺湿/干重比(W/D)及光镜下观察肺组织病理变化。结果 CAP组肺组织MPO、MDA的含量及ACE mRNA的表达量、血清ET-1含量及肺W/D明显低于I/R组(P0.05);CAP组肺组织中SOD含量明显高于I/R组(P0.05);CAP组肺组织形态学损伤较I/R组明显减轻。结论卡托普利后处理可以明显减轻鼠肺缺血再灌注损伤,其机制可能与其抑制缺血再灌注损伤鼠肺组织中ACE mRNA的表达有关。     

阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤中血红素加氧酶-1的影响

目的观察阿霉素对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)中血红素加氧酶-1(HO-1)的影响。方法32只雄性Wistar大鼠随机分成4组:手术对照组(C)、阿霉素组(ADM)、缺血再灌注组(IR)、阿霉素+缺血再灌注组(ADM-IR)。复制大鼠单侧肺缺血再灌注损伤模型,观察肺组织病理形态变化,对比观察各组肺干湿质量比(D/W)、肺泡损伤数(IAR)、HO-1活性、HO-1蛋白的表达。结果IR组与ADM-IR组D/W、IAR均比C组与ADM组高(P<0.01),但ADM-IR组显著低于IR组(P<0.01),C组与ADM组之间差异无统计学意义(P>0.05);与C组相比,ADM组、IR组与ADM-IR组HO-1活性、HO-1蛋白表达增加(P<0.01),ADM-IR组上升更加显著(P<0.01)。结论阿霉素能增加HO-1的活性,上调HO-1蛋白的表达,可能通过HO-1的抗氧化作用减轻肺缺血再灌注损伤;小剂量阿霉素对大鼠肺脏未造成明显损害。     

前列腺素E_1在大鼠肺缺血再灌注损伤中的作用研究

目的:探讨前列腺素E1在肺缺血再灌注损伤(IRI)中的作用。方法:取SD大鼠60只,随机均分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组(I/R组)和前列腺素E1(PGE1)高、中、低剂量组(20、10、5μg·kg-1);假手术组和I/R组给予0.5mL生理盐水尾静脉注射,其余各组给予相应药物;给药1h后建立肺IRI模型,再灌注6h后处死大鼠提取标本。检测各组肺组织湿/干重比(W/D)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)、核因子-κB(NF-κB)水平。结果:与正常对照组和假手术组比较,I/R组W/D、MDA、MPO和NF-κB水平显著升高(P<0.05);与I/R组比较,PGE1中、高剂量组肺W/D、MDA、MPO和NF-κB水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:PGE1可能通过抑制氧化应激和调节炎症反应对肺IRI产生保护作用。     

山莨菪碱抗肺缺血再灌注损伤作用的实验研究

目的　探讨山莨菪碱 (6 5 4 - 2 )抗兔肺缺血再灌注损伤作用及其机制。方法　在建立兔单肺原位缺血再灌注损伤模型上 ,观察山莨菪碱对肺组织湿 /干比值 (W /D)、丙二醛 (MDA)、肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性和肺毛细血管通透性 (LPI)作用和肺组织光镜、电镜形态学变化肺组织损伤 (LTD)程度。结果　缺血 90min、再灌注 12 0min后 ,肺组织的W /D、LPI、MDA、MPO活性、LTD程度减少 ,6 5 4— 2可使肺组织病理损伤明显减轻。结论　山莨菪碱具有抗肺缺血再灌注损伤作用 ,其作用机制可能与抑制中性粒细胞在肺内聚集 ,减轻氧自由基造成的肺损伤有关。     

川芎嗪联合丹参酮ⅡA对缺血再灌注大鼠肺损伤的保护作用研究

目的:研究川芎嗪联合丹参酮ⅡA对缺血再灌注大鼠肺损伤的保护作用。方法:实验分为空白对照(等容生理盐水)、假手术(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水)、地塞米松(5mg.kg-1)和川芎嗪+丹参酮ⅡA高、中、低剂量(40+12、20+6、10+3mg.kg-1)组。于肺缺血前3d灌胃给药,每天1次。测定大鼠血浆丙二醛(MDA)含量、肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)活性、湿重/干重比值(W/D)和肺通透指数。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血浆MDA含量显著增加(P<0.01),肺匀浆MPO活性显著增强(P<0.01),W/D、肺通透指数显著增加(P<0.01)。与模型组比较,川芎嗪+丹参酮ⅡA高、中剂量组大鼠血浆MDA含量显著减少(P<0.01或P<0.05),肺匀浆MPO活性显著减弱(P<0.01或P<0.05),W/D、肺通透指数显著减小(P<0.01或P<0.05)。结论:川芎嗪+丹参酮ⅡA联合用药对肺缺血再灌注大鼠有一定的保护作用,其机制与降低过氧化物代谢产物、减少中性粒细胞生成、增加肺和毛细血管的通透性有关。     

硫酸锌诱导金属硫蛋白减轻再灌注肺细胞凋亡的实验研究

目的：观察硫酸锌诱导金属硫蛋白对再灌注肺细胞凋亡的影响。方法：健康雄性SD大鼠24只,随机分为对照组（C组）、模型组（I/R组）和研究组（M组）。对比观察各组肺组织中金属硫蛋白的含量,血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、髓过氧化物酶（MPO）活力及含量变化,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化及RT-PCR法检测肺组织中Bax、Bcl-2蛋白和基因的表达,透射电镜观察肺组织超微结构的改变。结果：I/R组与C组相比,肺组织中金属硫蛋白的含量显著下降,MDA含量、MPO活力明显升高,SOD活力明显下降（P〈0.05或P〈0.01）,肺组织原位细胞凋亡检测显示I/R组凋亡指数（AI）39.03±3.46显著高于C组2.88±0.34,Bcl-2/Bax比值在蛋白和基因水平明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,肺组织超微结构发生异常改变;金属硫蛋白组与I/R组相比肺组织中金属硫蛋白的含量显著升高（P〈0.01）,MDA含量、MPO活力明显下降,SOD活力明显升高（P〈0.05或P〈0.01）,AI为15.50±1.02显著低于I/R组,并能明显升高Bcl-2/Bax比值及改善肺组织超微结构。结论：金属硫蛋白通过减轻脂质过氧化反应及中性粒细胞聚集,降低Bax/Bcl-2比值,使肺组织细胞凋亡减少,从而有效地减轻肺缺血/再灌注损伤。