肾综合征出血热患者特异性抗体及免疫复合物测定

为进一步了解ＨＦＲＳ患者发病过程中特异性抗体及其抗原特异性ＣＩＣ的形成和意义,平行测定了ＩｇＡ,ＩｇＥ,ＩｇＧ,ＩｇＭ抗体及上述４类抗原在血清中的水平（抗体几何平均滴度,ＧＭＴ）,并从临床分型（病情严重程度）等角度作了对比分析。同时应用抗ＮＰ、抗Ｇ２...     

上海地区肾综合征出血热尸检肾组织病毒检测

目的：研究上海地区肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）尸检病例肾脏组织中病毒ＲＮＡ及抗原的分布及定位，方法：用核酸原位分子杂交方法和细胞免疫组化方法，检测了１７例ＨＦＲＳ尸检肾组织中病毒，结果：１７例肾组织中１５例可检测到病毒ＲＮＡ及抗原，病毒ＲＮＡ主要位于肾组织血管壁，毛细血管内皮细胞脉冲有小球毛细血管内皮细胞，病毒抗原主要分布于肾间质管内皮细胞和血管壁中，部分位于肾曲管上皮细胞，以病毒包涵体样颗粒出现。     

检测肾综合征出血热循环免疫复合物酶联免疫测定（…

以肾综合征出血热患者血清中提取的γ球蛋白与ＨＦＲＳ病毒抗原形成的免疫复俣物为模型，抗人μ链和γ链单克隆抗体为包被抗体，辣根过氧化物酶标记的抗－ＨＦＲＳ病毒持异性ＭＡｂ为批示抗体，建立了检测ＨＦＲＳ特异性循环ＩＣ的ＥＬＩＳＡ捕促法，并初步用于ＨＦＲＳ急性期患者血清标本的检测。     

微斑免疫酶技术在检测肾综合征出血热病毒及其特异抗体中的应用

本文报道一种简便且快速的方法—微斑免疫酶技术(MPIPA),检测Vero-E6细胞培养的肾综合征出血热(HFRS)病毒及其特异抗体,并与免疫荧光技术(IFA),酶联免疫吸附技术(ELISA)进行比较。结果,本法用于检测HFRS患者血清IgG抗体和抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb),其敏感性介于ELISA和IFA之间;用于检测Vero—E6细胞培养的病毒,阳性结果比IFA和细胞病变(CPE)出现早。MPIPA具有简单,快速、敏感性高、特异性好,结果易判定诸优点,便于基层医疗单位推广应用,适合于临床HFRS血清标本的检测和血清流行病学调查。     

银强化滴金免疫法检测肾综合征出血热IgM的研究

目的 建立一种检测血清汉滩病毒抗体ＩｇＭ的方法。方法 将汉滩病毒抗原点于硝基纤维膜上,应用Φ１５ｎｍ的羊抗人ＩｇＭ金标抗体与血清标本中的汉滩病毒ＩｇＭ结合,再加银加强试剂,阳性者为棕黑色。结果 整个试验过程需要１０ｍｉｎ,用该法与ＥＬＩＳＡ法对比检测临床标本,结果有良好的一致性,总符合率为９８％。结论 银强化滴金免疫法操作简单,试剂稳定、安全、敏感、快速,适于基层。     

肾综合征出血热实验室诊断的进展

20世纪90年代,尤其最近5年肾综合征出血热的实验室诊断技术取了较大进展。本文从重组病毒抗原、PCR的临床应用与快速诊断三方面介绍其进展情况。     

肾综合征出血热病毒感染人胚肾细胞的免疫电镜观察

肾综合征出血热病毒感染人胚肾细胞的免疫电镜观察邵丽华马立宪李伯勤高青赵丽吕涛徐伟吕敏和吴世英肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒感染Ｖｅｒｏ细胞致其融合已见报道〔１〕。这对于揭示“病毒直接作用学说”具有重要的理论意义。本研究用免疫电镜技术（ＩＥＭ）观察了Ｈ...     

肾综合征出血热病毒宫内感染的临床研究

目的 研究肾综合征出血热(HFRS)病毒宫内感染情况及其对婴儿的影响。方法 对妊娠期感染HFRS病毒者，于其分娩时留取母血和脐带血进行抗—HFRS IgG检测，同时对顺产新生儿采取静脉血进行抗—HFRS IgM检测，并应用血凝抑制试验(HI)对HFRS病毒进行分型，另外对顺产的新生儿进行全面查体和定期随访观察。结果 母血抗—HFRS IgG均阳性，死胎的27例脐带血抗—HFRS IgG阳性23例，孕妇痊愈后自然分娩的12例中脐带血和静脉血有2例抗—HFRS IgG阳性，而抗—HFRS IgM阴性。并发现14例顺产新生儿生长发育全部正常。结论 HFRS病毒存在宫内感染，并易致死胎，但对顺产婴儿未发现致畸作用。     

汉坦病毒和肾综合征出血热的研究与防治

由汉坦病毒引起的肾综合征出血热 (HFRS)是我国重要的病毒性传染病 ,和其他病毒性疾病相比 ,汉坦病毒及其相关疾病在我国存在着一些明显特点 :①我国HFRS疫区广泛 ,以省为单位 ,疫区的人口在 12亿以上 ,病例数占全世界的 90 %以上。②我国在汉坦病毒的研究和防治上有着很好的基础 ,做出了非常重要的贡献 ,如在汉坦病毒的形态学研究、流行病学研究、临床治疗和疫苗研究开发等方面均在世界占有重要地位。③经过各国科学家的努力 ,汉坦病毒及其相关疾病的研究取得了很大进展 ,但仍有许多未明了的问题尚待解决。④HFRS主要发生在中国 ,汉坦…     

免疫酶斑点法检测汉坦病毒抗原的研究

目的 建立一种新的诊断肾综合征出血热(HFRS)的实验手段。方法 采用R22株、陈株和湖北株3种汉坦病毒接种家兔，制备兔抗汉坦病毒多克隆抗体(抗HTV-IgG)。然后采用混合的3种抗体进行免疫酶斑点法实验(IEDA)，检测患者血清和尿液中的汉坦病毒抗原。同时采用间接免疫荧光法(IFA)检测患者血清中抗汉坦病毒-IgM作对照。结果 经用相关分析，IEDA与IFA检测的结果高度相关。血中汉坦病毒抗原检出率为73．68％，尿中为65．00％。发病5d内，血中检出率为94．34％，尿中检出率为83．33％。5病日内的早期诊断率前者明显高于后者。结论 IEDA与IFA相比，阳性率比后者有较大提高，特别是5病日内的早期阳性率的提高明显，值得用于临床HFRS的早期诊断。     

北京市肾综合征出血热聚集疫情分析

目的 描述分析北京市一起肾综合征出血热聚集性疫情,探讨低发病率地区聚集性疫情的流行病学特征.方法 2007-2014年肾综合征出血热病例数据来源于中国疾病预防控制信息系统中现住址为北京市的病例.疫情数据来源于流行病学调查和疫情防控记录.病例血清汉坦病毒抗原和抗体检测采用ELISA法.啮齿类动物使用夹夜法捕捉,其血清汉坦病毒抗原抗体使用间接免疫荧光方法检测.结果 2007-2014年北京市平均每年报告肾综合征出血热病例18例,年发病率在0.09/105-0.16/105.聚集疫情共涉及2名实验室确诊病例和1名无症状感染者.病例临床症状相对较轻,居住地灭鼠前鼠密度为10.0％,灭鼠后密度为1.3％.家鼠肺标本汉坦病毒抗体阳性率为12.5％(1/8),宠物鼠中未检出汉坦病毒.结论 北京市仍存在发生肾综合征出血热聚集疫情的可能,这起涉及3名感染者的疫情为“城中村”家鼠传播.     

广西家鼠型肾综合征出血热病毒的发现和鉴定

目的 从广西各地捕获的鼠肺标本检测汉坦病毒并鉴定其型别.方法 结合广西鼠疫监测采集啮齿类宿主动物,用ELISA法检测鼠肺标本,对汉坦病毒抗原阳性标本通过RT-PCR法扩增部分M片段上的核苷酸序列并测序,将扩增片段的核苷酸序列与已知病毒序列进行比对并分型.结果 在306份鼠肺标本中检测到1株SEO型的出血热病毒,阳性标本为广西沿海地区钦州市捕获的褐家鼠.结论 在广西沿海地区检测到SEO型汉坦病毒,其流行病学意义有待进一步研究.     

Toxic epidermal necrolysis with ocular involvement following vaccination for hemorrhagic fever with renal syndrome

We report a case of toxic epidermal necrolysis with ocular involvement following vaccination for hemorrhagic fever with renal syndrome. A healthy 20-year-old male soldier presented with confluent purpuric and erythematous dusky red macules evolving to flaccid blister and epidermal detachment on the whole body with conjunctival injection. The patient had no antecedent medical or surgical conditions except for two doses of hemorrhagic fever with renal syndrome vaccination. With supportive care, skin lesions were improved. Ophthalmic examinations revealed conjunctival injection with epithelial defects in both eyes. Ocular complications were resolved after amniotic membrane transplantation. Toxic epidermal necrolysis may be considered as a possible complication of hemorrhagic fever with renal syndrome vaccination.     

肾综合征出血热CD178 +T淋巴细胞本质的临床研究

目的探讨肾综合征出血热(hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome,HFRS)患者CD178 T淋巴细胞的本质及其在致病过程中的作用。方法应用流式细胞仪(flowcytometry,FCM)对56份HFRS患者外周血标本进行检测,分析CD178在HFRS淋巴细胞亚群和活化淋巴细胞中的表达及其动态变化。结果HFRS发热期和多尿期CD4 CD178 及CD8 CD178 T淋巴细胞与对照组比较明显增加,差异具有统计学意义。HFRS发热期和多尿期CD178在CD4 HLADR T淋巴细胞群及CD8 HLADR T淋巴细胞群表达均明显增高,与正常对照组比较,差异具有统计学意义;而发热期与多尿期之间比较,差异无统计学意义。结论HFRS的发病过程中CD178表达于活化CD4 淋巴细胞亚群,主要表达于CD8 T细胞亚群,且病程早期和后期均有高表达。推测在发病早期细胞毒T细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)通过CD178介导的细胞调亡清除病毒感染的靶细胞,在疾病末期则通过清除活化的抗原特异性T细胞,维持机体免疫自身的稳定。     

用重组汉坦病毒NP、GP检测急性期HFRS患者血清中特异性IgG、IgM、IgA抗体

目的 探讨肾综合征出血热(HFRS)患者急性期IgA、IgG、IgM抗体的变化规律。方法 使用套式RT-PCR检测此次病毒感染情况。用杆状病毒表达的汉坦病毒重组核蛋白(rNP)和糖蛋白(rGP)为抗原，使用ELISA方法检测了14例急性期肾综合征出血热患者的6l份系列血清中的IgA、IgG、IgM抗体。结果 14例肾综合征出血热患者中，ll例患者的血清用RT-PCR检出家鼠型汉坦病毒核酸。几乎所有肾综合征出血热患者早期即有IgA、IgM、IgG抗体的迅速升高，抗rNP抗体滴度明显高于rGP。3种抗rNP抗体中早期IgG上升趋势最为显著，IgM与IgA次之，IgM与IgA上升趋势相近，但IgA的滴度明显高于IgM。抗rGP抗体中XgA变化最显著，IgG次之。IgM发病2周内总的变化趋势不明显，但是发病l周内滴度上升趋势明显，而发病第2周内则呈下降趋势。其中l例RT-PCR阳性的患者，早期IgM未测出，IgA的滴度却较高。l例重度患者，抗糖蛋白IgG、IgM和IgA抗体滴度均低于其他患者，且整个急性期一直维持较低水平。结论 肾综合征出血热急性期IgA、IgG、lgM变化具有明显的规律，抗糖蛋白和核蛋白抗体病患规律不同，检测IgM的同时检测IgA，可以提高诊断的准确性。     

肾综合征出血热患者体内可溶型和膜型 TNF-α,FasL,TRAIL表达水平的研究

目的观察HFRS患者体内可溶型和膜型凋亡诱导配体的水平,探讨凋亡诱导配体与HFRS免疫病理损伤的关系.方法应用夹心ELISA方法检测了HFRS患者血浆中TNF-α、sFasL和sTRAIL的水平,同时利用流式细胞术检测了膜型凋亡诱导配体在HFRS患者PBMC上的表达.结果膜型凋亡诱导配体在健康对照的PBMC上几乎不表达,HFRS患者PBMC上TNF表达率为(0.90±0.05)%;FasL 的表达率为(19.83±6.40)%;TRAIL的表达率为 (15.79±4.73)%.HFRS患者急性期血浆中的TNF(77.69±21.11)pg/mL、 sFasL(40.69±6.75) pg/mL 和 sTRAIL(19.04±5.54) pg/mL水平分别是健康对照的4.8倍(16.26±14.09) pg/mL、6.0倍(6.76±1.01) pg/mL和1.8倍(10.72±1.41) pg/mL.结论 HFRS患者体内高表达的凋亡诱导配体可能与HTNV感染所致的免疫病理损伤有关.     

HFRS患者汉滩病毒核蛋白特异性T细胞克隆及其靶细胞的建立

目的　建立肾综合征出血热 (HFRS)患者汉滩病毒 (HTNV)核衣壳蛋白 (NP)特异性CTL克隆 ,为HTNVNPT细胞表位鉴定及HFRS患者T细胞免疫功能研究奠定基础。方法　采用Fi coll密度梯度离心法分离HFRS患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,用灭活HTNV和IL 2体外刺激 ,有限稀释法建立T细胞克隆 ,流式细胞术鉴定克隆表型。并用EB病毒 (EBV)转化B淋巴细胞 ,建立B淋巴母细胞样细胞系 (B LCL) ,以含HTNVS基因的重组痘苗病毒感染B LCL作靶细胞 ,以CTL克隆作效应细胞进行细胞毒杀伤试验 ,测定T细胞克隆的抗原特异性。结果　T细胞克隆能特异性识别表达NP的B LCL。在 5名患者中 ,3名有较高的杀伤率 ,并自 2名患者建立了 5株HTNV特异性CTL克隆 ,其表型为CD8 均大于 6 0 %。结论　成功建立了HFRS患者HTNVNP特异性CTL克隆及其靶细胞。NP是HFRS患者HTNV特异性CTL应答的主要靶抗原之一。