五子衍宗丸和金匮肾气丸对动物生精功能影响的比较研究

目的：研究五子衍宗和金匮肾气两种经典补肾中药的作用机理。方法：利用白消安小鼠无精子症动物模型，给予两种中药单一和联合灌胃给药78天（2个生精周期），以造模后自然恢复、二甲基亚砜溶媒和正常动物为3种对照。结果：两种中药对睾丸生精能力影响的明显不同表现为，五子衍宗主要作用于睾丸的生精上皮细胞，金匮肾气主要作用于睾丸的间质细胞。结论：两种经典补肾中药均具有较强的、明确的促进生精功能恢复的作用。     

RNAi敲低小鼠睾丸雄激素结合蛋白SHBG对生精功能影响的研究

目的通过干扰小鼠睾丸雄激素结合蛋白(Sex hormone-binding globulin,SHBG)的表达,研究Shbg基因对雄性小鼠生精功能的影响。方法构建有效的Shbg基因干扰质粒,以Western Blot检测干扰效果,通过RNAi干扰小鼠睾丸Shbg基因的表达,研究干扰Shbg基因的表达对小鼠体内胎仔数和精子数量、精子活力、睾丸重量和体外受精率的影响。结果 RNAi干扰Shbg-mRNA的表达能使小鼠睾丸SHBG蛋白表达明显下调,SHBG蛋白表达下调使雄性小鼠自然交配后胎仔数降低,附睾精子的数量和体外受精率也明显下降。结论SHBG蛋白与雄性小鼠的生育力密切相关。     

菟仙海蚣胶囊对腺嘌呤致大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2、P53表达的影响

目的探讨菟仙海蚣胶囊对生精细胞损伤大鼠睾丸生精细胞凋亡及Bcl-2、P53表达的影响。方法建立腺嘌呤诱导致生精细胞损伤大鼠动物模型,用流式细胞仪检测菟仙海蚣胶囊对该模型大鼠生精细胞的凋亡率及Bcl-2、P53蛋白表达,同时检测大鼠睾丸、附睾指数及精子数量、精子活率。结果菟仙海蚣胶囊可明显抑制大鼠睾丸生精细胞凋亡,升高睾丸组织细胞Bcl-2的表达,降低P53的表达,提高附睾指数,增加精子数量和精子活率。结论菟仙海蚣胶囊治疗少精、弱精症的作用机理可能与抑制生精细胞凋亡、上调睾丸组织细胞Bcl-2的表达和下调野生型P53表达,并作用于附睾,提高附睾指数,促进精子发育成熟,增强其活力有关。     

电离辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤基因表达谱改变

目的 探讨电离辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤基因表达谱的改变.方法 1.75 Gy X射线每周1次,分4次照射BALB/c小鼠建立电离辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤模型,小鼠Mouse WG-6 v2.0全基因组表达谱微珠芯片筛选与正常小鼠胸腺差异表达基因,选取较重要的基因实时定量PCR验证.结果 共筛选出3 063个差异表达基因,其中上调基因1 591个,下调基因1 472个,涉及KEGG数据库145个通路,BioCarta数据库76个通路及GenMAPP数据库218个通路;实时定量PCR结果显示,电离辐射诱发的小鼠胸腺淋巴瘤Bcl11b、Ikzf1基因mRNA表达水平均有下调趋势.结论 电离辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤基因表达谱发生改变,涉及大量通路.     

农达对小鼠生精作用的影响

目的探讨农达(roundup,活性成分为草甘膦)对小鼠生精作用的影响。方法将24只成年SPF级雄性Balb/c小鼠随机分为阴性对照(蒸馏水)组和20、200、2 000 mg/kg农达染毒组,每组6只。采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为20 ml/kg,每天1次,连续染毒30 d。测定小鼠精子数量、精子活动率和血清中睾酮(T)浓度及睾丸生精细胞的凋亡情况。结果与阴性对照组相比,200、2 000 mg/kg农达染毒组小鼠精子数量减少、精子活动度降低;各剂量农达染毒组小鼠血清睾酮浓度均降低,而睾丸生精细胞的凋亡率均升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论在本实验染毒时间和剂量范围内,农达对雄性Balb/c小鼠的生精功能有一定的毒性作用。     

限食对小鼠附睾脂肪垫胰岛素信号通路基因表达的影响

目的:研究限食对脂肪组织胰岛素信号通路基因表达的影响。方法:清洁级C57BL/6雄性小鼠(2月龄)24只,随机分成自由摄食组和限食组(摄食量为自由摄食组的60%),限食3个月后,称量附睾脂肪垫重量,采用美国SuperArray公司的基因芯片检测附睾脂肪垫胰岛素信号通路基因的表达,采用Real Time PCR验证了其中两个差异表达基因NPY和AKT3。结果:限食可显著减少附睾脂肪垫重量;限食可分别上调20条和下调11条附睾脂肪垫胰岛素信号通路基因表达,芯片和Real Time PCR的结果基本一致。结论:限食对脂肪组织胰岛素信号通路基因表达调控可能是限食生物学效应的重要分子基础。     

金匮肾气丸及微营养素对衰老小鼠雄激素影响

目的探讨金匮肾气丸与微营养素合用对衰老小鼠雄激素水平及抗氧化作用的影响。方法用D-半乳糖制造衰老模型小鼠,给予金匮肾气丸和微营养素,观察血中睾酮、组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果金匮肾气丸低、高剂量组及微营养素联合组血清睾酮水平分别为(1.826±0.069),(1.842±0.082),(1.883±1.080)和(2.005±0.120)ng/mL;明显高于模型对照组(P0.05或P0.01);与模型对照组比较,血液和心、肝、脑、肺组织中GSH-Px和SOD水平亦有明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论金匮肾气丸具有明显升高血睾酮、血和组织GSH-Px和SOD水平作用,与微营养素合用效果更佳。     

乙烯利对雄性小鼠的生殖毒性

将40只雄性小鼠随机分为阴性对照组(0 mg/kg)和乙烯利低剂量(85mg/kg)、中剂量(170 mg/kg)、高剂量(340 mg/kg)组,小鼠经口染毒14 d,于首次给药第28 d后用颈椎脱臼法处死,观察乙烯利对小鼠精子质量的影响及睾丸组织的病理学改变,用流式细胞术(FCM)对小鼠睾丸生精细胞细胞周期进行分析。结果显示,与阴性对照组相比,中、高剂量组小鼠体重明显减少(P0.05),高剂量组精囊腺重量和精子计数明显减少(P0.05);各剂量组精子活动率均低于阴性对照组(P0.05),精子畸形率均高于阴性对照组(P0.05);中、高剂量组小鼠睾丸组织病理学检查可见明显异常;中、高剂量组生精细胞周期进程受到阻滞。提示乙烯利对雄性小鼠产生了一定的生殖毒作用,并能阻滞小鼠生精细胞的细胞周期进程。     

不同阻滞阶段非梗阻性无精子症的生物信息学分析

目的：利用生物信息学筛选不同阻滞阶段非梗阻性无精子症（NOA）相关的调控因子及其调控途径,为后续的功能研究提供依据。方法：从GEO（Gene Expression Omnibus）数据库中获得GSE45885的基因表达谱矩阵,筛选其中的正常样本以及不同阻滞阶段NOA样本,包括4例正常生精样本和20例NOA患者样本,20例NOA患者中有2例患者处于减数分裂前期阻滞阶段（PRE）,7例处于减数分裂期阻滞阶段（MEI）,11例处于减数分裂后期阻滞阶段（POST）。将正常生精样本设置为对照组（CON）,使用GEO2R在线工具鉴定正常生精样本与不同阻滞阶段NOA样本之间的差异基因,对GEO芯片中不同阻滞阶段的NOA数据整合归一化并进行矫正后取交集。对差异表达的基因以及其靶基因进行GO（Gene Ontology）和KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）富集分析,获取关键通路;基于在线工具（STRING）构建蛋白质相互作用（PPI）网络图。然后利用Cytoscape中的CytoHubba插件对枢纽基因进行筛选。结果：在PRE中筛选出463个上调基因,12个下调基因;在MEI和POST中分别发现2个和3个下调基因,无上调基因。PRE中上调基因通过一些重要途径,如精子发生、精子细胞发育、精子的运动、纤毛运动和微管形成等功能来调控生精过程。在上述的3个阻滞阶段NOA中筛选出2个共同差异基因,均为微小RNA（miRNA）,2个miRNA有58个共同靶基因。利用在线生物信息学工具STRING成功构建PRE中上调基因的PPI网络图,并使用Cytoscape筛选出网络中前10个枢纽基因,包括DNAI1、DNAI2、PGK2、ROPN1L、ARMC4、DRC1、DNAAF3、CABYR、ZMYND10和CCDC65。结论：识别枢纽基因和共同差异基因及其通路为后续研究NOA的发生机制提供了有价值的参考,DRC1、ARMC4、MIR15A和MIR509-3可作为后续NOA发病机制研究的潜在靶点。     

低剂量辐射诱导小鼠生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应

目的研究低剂量X射线照射诱导小鼠睾丸生精细胞凋亡及p53基因表达的适应性反应。方法通过不连续泛影葡胺密度梯度离心法分离睾丸组织不同种类生精细胞，采用碘化丙啶荧光探针标记细胞，流式细胞术检测各类生精细胞凋亡，免疫组化法观察生精细胞p53蛋白表达。结果当1．0、2．0或3．0Gy（攻击剂量，D2）照射前6h给予75mGy（诱导剂量，D1）预照射时明显减轻D2对精原细胞和精母细胞的凋亡损伤作用，而对精子细胞和精子影响不明显。当D2照射前6h给予D1预照射时明最减少精原细胞和精母细胞p53基因表达阳性率，而对精子细胞和精子影响不明显。结论低剂量X射线照射可选择性诱导小鼠睾丸精原细胞和精母细胞凋亡的适应性反应，并与D1和D2间隔时间及D2剂量有关。同时，可诱导精原细胞和精母细胞p53基因表达的适应性反应，推测其在低剂量辐射诱导生精细胞凋亡适应性反应分子机制中起重要的调控作用。     

基因芯片检测与苯中毒相关的信号传导通路中基因的差异表达

目的检测苯中毒信号转导相关基因的表达，探讨苯引起的血液系统损害的发病机理。方法应用含4265条信号转导基因的cDNA芯片检测7例苯中毒患者和7例无苯接触的正常人的外周血白细胞基因表达谱，观察其在基因表达谱上的差异。进行了基因表达谱聚类分析。结果在4265条基因中，存在明显差异表达的基因176条。至少在六张芯片结果中有显著性表达上调的基因35个，主要包括有PTPRC、STAT4、IFITM1等。至少在5张芯片结果中有显著性表达下调的基因45个，主要包括有ARHB、PPP3CB、CDC37等。结论微矩阵基因芯片在检测苯中毒信号转导相关基因的改变时．具有快速、高通量、高灵敏度等特点．细胞信号转导的障碍在苯中毒发病中起一定的作用。     

cDNA微阵列检测苯中毒细胞增殖与周期调控基因差异表达

目的 通过基因表达谱研究寻找苯中毒发病机制中细胞增殖与周期调控基因差异表达。方法应用含338条免疫相关基因的cDNA芯片检测7例苯中毒患者和7例正常人的外周血白细胞基因表达谱，观察其在基因表达谱上的差异。进行了基因表达谱聚类分析和比较；筛选有统计学意义的差异表达的基因。结果所有芯片中出现差异表达的基因共有44条，其中表达上调的基因17个，主要包括有IFIM1、CDKN1B、RBL2、GSPT1、FOX01A等：表达下调的基因17个，有CDC37、MDM4、EV15、SKP2等基因；表达不一致的基因6个。聚类分析揭示40条基因的基因表达谱特征存在关联。结论通过有统计学意义的差异表达的苯中毒相关基因，推测细胞增殖与细胞周期调控可能在苯中毒发病中起重要作用。     

西黄丸对H22荷瘤小鼠Bcl-2基因mRNA表达的影响

[目的]研究西黄丸对H22荷瘤小鼠肿瘤组织中bcl-2基因mRNA表达的影响。[方法]采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肿瘤组织中bcl-2基因mRNA在给药10d前后的表达差异。[结果]西黄丸可下调H22荷瘤小鼠瘤组织中凋亡相关基因bcl-2基因mRNA的表达。[结论]西黄丸可通过诱导肿瘤细胞凋亡而实现抑瘤作用,为传统中成药在临床上治疗肿瘤提供进一步的理论依据。     

利用基因表达系列分析数据库进行数字化基因差异显示筛选胃癌相关基因

目的对肿瘤基因组解剖计划获得的海量数据进行充分数据挖掘,筛选胃癌差异表达基因。方法采用数字化基因差异显示技术对肿瘤基因组解剖计划数据库中的4个胃癌和2个正常胃组织文库共300,783条基因表达系列分析数据进行了分析。结果筛选出差异表达的已知基因136个,其中胃癌中表达上调的有54个,下调82个,EST序列65条,其中上调24条,下调41,虚拟Northern和数字化显示对筛选出的差异表达基因PTMA构建了全身正常组织和肿瘤组织的基因表达图谱。结论充分利用生物信息学工具可以快速有效地筛选肿瘤差异表达基因,指导后续分子生物学实验研究。筛选出来的差异表达基因通过验证,有望成为新的胃癌分子靶标。     

cDNA微阵列结合聚类分析探讨苯中毒免疫相关基因表达谱的改变

目的通过基因表达谱研究寻找苯中毒发病机制中参与苯中毒免疫调控通路的苯中毒免疫相关基因。方法应用含2779条免疫相关基因的cDNA芯片检测7例苯中毒患者和7例正常人的外周血白细胞基因表达谱，观察其在基因表达谱上的差异。进行了基因表达谱聚类分析和比较；筛选有统计学意义的差异表达的免疫相关基因。结果存在差异表达的基因共有38条。在2张以上芯片结果中表达上调的基因10个，主要包括有CD59、TRA@、MCP等。在2张以上芯片结果中表达下调的基因14个，有HLA—DMB、HLA—DQA1、HLA—DPB1、ITGB2、PFC等基因。聚类分析揭示38条基因的基因表达谱特征存在关联。结论通过有统计学意义的差异表达的苯中毒免疫相关基因，推测免疫调控通路在苯中毒发病中可能扮演重要角色。基因芯片技术是分析不同研究对象之间基因差异表达的有效手段。     

Comparative study on intermittent versus continuous use of a contraceptive pill administered by vaginal route

A multicenter, international, randomized, comparative trial was conducted to assess the acceptability, efficacy and safety of two different schedules of a contraceptive pill, containing 250 μg levonorgestrel and 50 μg ethinyl estradiol, administered by the vaginal route. One schedule of daily administration for 21 days with a seven-day interruption to allow withdrawal bleeding was compared to daily administration without interruption for bleeding. A total of 900 women were recruited in three countries, Brazil, Egypt and China; 7,090 women-months of vaginal pill use were recorded (3,364 using the pills intermittently and 3,726 continuously). Four undesired pregnancies occurred, one in Egypt and three in China, all four in women using the pills intermittently. There was a statistically significant difference (p = 0.486) in pregnancy rate between the two groups. There were no other significant differences in discontinuation rates despite marked differences in bleeding patterns, amenorrhea predominating in the continuous use group. Hemoglobin levels increased significantly in the two groups but hematocrit was significantly higher in the continuous use group.     

Once-a-month contraceptive pills in China: a review of available evidence

OBJECTIVE: A review of evidence was conducted to assess the safety, effectiveness and continuation of once-a-month contraceptive pills. METHODS: Papers were identified by electronic searches in Chinese and international databases and manual searches of Chinese journals and index of family planning literature. Data on pharmacokinetics, clinical performance and laboratory examinations were extracted from 17 papers of mixed quality on pills containing quinestrol 3 mg and norgestrel 12 mg (Quin-Ng) or levonorgestrel 6 mg (Quin-Lng) used by women in China. RESULTS: Quin-Lng pills gave steady-state serum levels of ethinylestradiol between 0.20-0.25 and 0.15 ng/mL. The 1-year perfect use pregnancy rate was 1.1 per 100 women-years. Nausea and increased leukorrhea were common; bleeding control was good. Hypertension developed in 5.8% of Quin-Ng pill users during the first year of use. For Quin-Ng and Quin-Lng once-a-month pills, 1 year continuation rates were 73.6 and 82.1 per 100, respectively. CONCLUSIONS: Lack of good quality data prevents confident assessment of the safety and efficacy of once-a-month pills. Short-term safety information indicates a high incidence of bothersome side effects and hypertension. The high monthly estrogen and progestogen doses raise questions about the safety of the once-a-month pills.     

简述六神丸老药新用

六神丸是我国著名的传统中药,具有燥湿解毒消肿之功。近年来,在临床实践中发现六神丸有许多新用途。六神丸可治疗冠心病、溃疡性结肠炎、带状疱疹、支气管哮喘、联合用药治疗急性肾炎等。