Stathmin基因在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的 观察stathmin基因和蛋白质在喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)中的表达情况,探讨stathmin基因与喉鳞癌生物学行为的关系及临床意义,进一步认识喉鳞癌发生和发展的分子机制.方法选取2005年3月至2006年4月的38例喉鳞癌患者,术中从肿瘤中心部位取癌组织(实验组),在肿瘤边缘外1.0cm部位取癌旁正常组织(对照组).应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析38例患者的喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin基因mRNA的表达水平,冰冻切片免疫组织化学方法检测喉鳞癌组织和癌旁正常组织中stathmin蛋白的表达情况.结果 RT-PCR结果显示,stathmin基因mRNA在38例喉癌患者的喉癌组织和癌旁正常组织均呈阳性表达;经半定量分析,stathmin mRNA在喉癌组织中的表达水平明显高于在癌旁正常组织的表达水平(t=9.655,P＜0.05).免疫组织化学发现,stathmin蛋白在26例(26/38,68.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在13例(13/38,34.2%)患者的癌旁正常组织呈弱阳性表达;stathmin蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于在癌旁正常组织的阳性表达率(x2=8.901,P＜0.05).同时发现,stathmin mRNA的表达水平和stathmin蛋白的阳性表达率在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显高于Ⅰ期和Ⅱ期病例组(t=6.284,x2=5.810,P＜0.05),有颈部淋巴转移组明显高于无转移组(t=9.350,x2=6.923,P＜0.05).结论 stathmin基因和蛋白在喉鳞癌中的表达明显高于癌旁正常组织,在中晚期喉鳞癌中的表达明显高于早期喉鳞癌,并且与颈淋巴转移有关.stathmin基因与喉鳞癌的发生和发展均有密切关系,并可能与喉癌的预后有关.     

喉鳞状细胞癌中人类错配修复蛋白2与多药耐药蛋白表达及相关性

目的研究人类错配修复蛋白2（human muts homolog 2,hMSH2）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）中的表达及与多药耐药基因蛋白P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的相关性,两者表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化En-ViSion法检测喉鳞癌及声带息肉组织中hMSH2和P-gp的表达情况,同时检测hMSH2阳性表达和阴性表达组中P-gp的表达情况。结果 hMSH2蛋白在喉鳞癌组织中阳性表达率为59%,明显低于声带息肉90%（χ2=12.741,P〈0.05）,P-gp在喉鳞癌中阳性表达率为76%,显著高于声带息肉阳性表达率45%（χ2=13.260,P〈0.05）。hMSH2阳性的喉鳞癌中P-gp阳性率为69%,hMSH2阴性的喉鳞癌中P-gp阳性率为87%,差异有统计学意义（χ2=4.479,P〈0.05）。hMSH2表达与喉鳞癌分化程度、临床分期、淋巴结转移相关。P-gp表达与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移及T分级相关。结论 hMSH2与P-gp在喉鳞癌发生及恶性演进中起一定作用,hMSH2可能通过影响P-gp表达导致喉鳞癌多药耐药的产生。     

整合素αv亚基在喉和下咽鳞状细胞癌中表达及其与肿瘤血管发生的相关性

目的探讨整合素αv亚基在喉和下咽鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织中的表达及其临床意义，以及整合素αv亚基表达与肿瘤血管发生的相关性。方法设计制作喉和下咽鳞状细胞癌组织芯片，应用免疫组化技术在组织芯片上检测整合素αv亚基和CD105的表达，根据CD105表达计算肿瘤新生血管密度，分析整合素αv亚基表达与喉和下咽鳞癌侵袭转移的关系，以及整合素αv亚基表达与肿瘤新生血管密度的相关性。结果喉和下咽原发鳞癌组织中整合素αv亚基阳性表达率为68．0％（51／75），明显高于癌旁正常组织（10．3％，3／29，Х^2=28．68，P〈0．001）；淋巴转移癌中整合素αv亚基表达率达100．0％（20／20），明显高于原发癌（Х^2=12．69，P〈0．05）和癌旁正常组织（Х^2=38．77，P〈0．001）；有淋巴转移组表达率明显高于无淋巴转移组（Х^2=10．87，P〈0．001）；整合素αv亚基的表达与肿瘤新生血管密度有明显相关性，阳性表达组的肿瘤微血管密度明显高于弱阳性组（q=3．31，P〈0．05）和阴性组（q=6．61，P〈0．001）；整合素αv亚基的表达率按照肿瘤的原发部位、分化程度、浸润范围以及患者的年龄、性别分组，差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。结论整合素αv亚基的表达与喉和下咽鳞癌的淋巴转移关系密切，其过量表达可能通过诱发微血管形成而导致肿瘤发生侵袭和转移，整合素αv亚基有可能成为临床预测喉癌和下咽癌淋巴转移趋势的新型标记物。     

喉鳞状细胞癌中P53和PTEN蛋白的表达及临床意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌中P53、PTEN蛋白的表达及其与临床特征的关系。方法 采用免疫组化技术检测66例喉鳞癌组织和36例喉黏膜慢性炎症组织中P53、PTEN蛋白的表达。结果 P53、PTEN蛋白在66例喉鳞癌组织和36例喉黏膜慢性炎症组织中表达均存在统计学意义（P〈0．05）。66例喉鳞癌组织中，P53蛋白的表达水平在Ⅲ～Ⅳ期组高于Ⅰ～Ⅱ组（P〈0．05），淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0．05）；PTEN蛋白的表达水平Ⅰ～Ⅱ期组高于Ⅲ～Ⅳ期组（P〈0．05），高分化癌组高于中低分化癌组（P〈0．05），无淋巴结转移者高于有转移者（P〈0．05）。喉鳞癌组织中P53、PTEN蛋白两者表达有相关性（P〈0．05）。结论 PTEN蛋白的表达对预测喉鳞癌的预后有一定参考价值。     

喉鳞状细胞癌Paxillin表达的临床意义

目的 探讨喉鳞状细胞癌Paxillin蛋白表达的临床意义。方法 运用免疫组化S-P法检测石蜡包埋喉鳞癌标本74例，以及癌旁正常组织70例，癌旁轻度、中度、重度不典型增生黏膜上皮组织65、69、72例，分析比较Paxillin蛋白表达水平与患者各类临床资料的相关性及其临床意义。结果 喉鳞癌组织Paxillin阳性率明显高于正常组织标本（P〈0．05），不同分化程度癌组织的Paxillin阳性率也存在显著性差异，低分化者阳性率明显高于高和中分化组（P=0．001），伴有颈部淋巴结转移者阳性率明显高于无转移者（P=0．000），而且临床Ⅳ期病例阳性率又明显高于其他各期患者（P=0．000）。结论 Paxillin的阳性表达水平与喉鳞状细胞癌的分化程度、颈淋巴结转移、临床分期有明显相关性，对其病理过程具有一定影响。     

E-cadherin and Smad4在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨E-cadherin（E-钙黏蛋白）、Smad4（家族成员4）在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法分析E-cadherin、Smad4在喉鳞状细胞癌和癌旁正常黏膜中的表达情况,并结合临床病理参数分析两者的临床意义。结果 E-cadherin蛋白和Smad4蛋白在喉鳞癌组织的表达明显低于癌旁正常喉黏膜组织（P〈0.01）。E-cadherin、Smad4表达的改变与喉鳞癌淋巴结转移有关,同时E-cadherin表达变化与喉鳞癌分化程度有关（P〈0.01）;E-cadherin、Smad4在喉癌中低表达呈正相关趋势（P〈0.05）。结论 E-cadherin、Smad4蛋白的低表达可促进喉癌的发生、发展,可能在喉癌分化、浸润、转移的过程中发挥重要作用。     

喉鳞状细胞癌与端粒酶亚单位表达

目的 检测喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）相关组织中端粒酶亚单位（端粒酶逆转录酶、端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分hTR）mRNA的表达,研究不同的端粒酶亚单位的表达与喉鳞癌发生的关系。方法 对34例喉鳞癌病例,采用逆转录聚合酶链（RT-PCR）技术检测上述三种端粒酶亚单位在喉癌组织、对应的癌旁组织和转移淋巴结中的mRNA表达。结果 喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中端粒酶逆转录酶mRNA的阳性率分别为88．2％（30／34）、5．9％（2／34）和90．0％（9／10）,三种组织的阳性率间存在显著性差异（P〈0．05）,喉癌组织和转移淋巴结组织的阳性率显著高于癌旁组织（P〈0．05）。端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分mRNA在喉癌组织、对应癌旁组织和转移淋巴结中的阳性率均为100％。结论 本研究结果提示端粒酶依赖途径是喉鳞癌发生的方式之一。与端粒酶相关蛋白1和端粒酶RNA组分比较,端粒酶逆转录酶表达的上调在端粒酶依赖途径的喉鳞癌的发生中占有更重要的地位。     

SHIP2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨含SH2结构域的Ⅱ型5’肌醇磷酸酶2（SH2 domain containing 5’-inosi-tol phosphatase-2,SHIP 2）蛋白在喉鳞状细胞癌（喉鳞癌）组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法应用免疫组织化学技术检测SHIP2蛋白在54例喉鳞癌组织及16例喉癌旁黏膜组织中的表达。结果 SHIP2蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高,其表达与喉鳞癌T分期、临床分期、转移及复发密切相关（P〈0.05）;生存分析表明SHIP2高表达组与低表达组患者5年无瘤生存率分别为19.2%和64.3%,5年总生存率分别为26.9%和85.7%,两组差异均有统计学意义（P〈0.05）。多因素分析示SHIP2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素。结论 SHIP 2蛋白可能在喉鳞癌的发生、发展中发挥了重要作用,且具有预后评估价值。     

喉癌中Fas、FasL和Fas相关死亡结构域蛋白的表达及其意义

目的研究细胞凋亡调控因子Fas、FasL和Fas相关死亡结构域蛋白（Fas-associated death domain protein,FADD）基因在喉癌中的表达及其意义。方法免疫组化法检测喉癌及癌旁组织中Fas、FasL和FADD表达。结果喉癌组织中Fas、FADD阳性表达率显著低于癌旁组织,FasL阳性表达率显著高于癌旁组织（P〈0.05）;高分化鳞状细胞癌（简称鳞癌）Fas阳性表达率显著高于中低分化鳞癌（P〈0.05）,高分化鳞癌FasL阳性表达率显著低于中低分化鳞癌（P〈0.05）;FADD阳性表达率与肿瘤有无淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。Fas与FADD蛋白表达之间呈显著正相关（r=0.43,P〈0.05）。结论检测喉癌组织中Fas、FasL、FADD表达对评价喉癌的恶性程度、预后及治疗有重要意义。     

AKT和HK2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义

摘要：目的探讨丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶AKT(the serine/threonine kinase, also known as protein kinase B, PKB)、己糖激酶2（hexokinase 2, HK2）在喉鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达，分析其与喉癌发病诸病理因素间的相互关系。方法采用免疫组化Streptavidian perosidase(SP)法检测30例喉癌患者的癌组织中AKT和HK2蛋白的表达情况，同期选取其癌旁组织作为对照。结果AKT、HK2蛋白在喉癌组织中高表达，与肿瘤的分化程度和有无淋巴结转移密切相关，差异具有统计学意义（P＜0.05）；AKT、HK2蛋白的阳性表达与患者的年龄、肿瘤发生部位以及临床分期无关（P＞0.05）；喉鳞癌组织中AKT与HK2的表达呈正相关（r=0.424,P=0.019）。结论喉鳞癌组织中AKT、HK2蛋白高表达与肿瘤的侵袭和转移密切相关，可提示预后不良。     

凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与p53、Bcl-2表达的相关性研究

目的　探讨凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达及其与p53和Bcl-2表达的关系,探讨Livin在LSCC 中的作用机制。方法　收集LSCC标本42例,声带息肉组织20例,采用免疫组织化学SP法检测LSCC组织和声带息肉组织中Livin、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果　LSCC中Livin表达阳性率为71.4%（30/42）,显著高于声带息肉组织（χ 2=27.679,P <0.01）。临床分期Ⅲ+Ⅳ期Livin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期（χ 2=7.087,P <0.01）;有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（χ 2=5.458,P <0.05）。Livin蛋白的表达与p53蛋白表达呈正相关（r =0.665,P <0.05）,与Bcl-2蛋白表达呈正相关（r =0.657,P <0.05）。结论　Livin在LSCC组织中异常表达,有望成为LSCC诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因p53与Bcl-2基因的异常表达在喉癌癌变中起协调作用。     

BUB1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中BUB1蛋白的表达及临床意义。方法：采用免疫组织化学EliVision二步法检测55例LSCC组织和30例癌旁正常黏膜组织中BUB1蛋白的表达,并分析其与LSCC临床病理特征的关系。结果：BUB1蛋白在LSCC组织中的阳性表达率为50．9％（28／55）,低于癌旁正常黏膜组织83．3%（25／30）,两者比较差异有统计学意义（P〈0．01）;BUBl蛋白的表达与LSCC分化程度及淋巴结转移有相关性（均P〈0．05）,而与患者性别、年龄、吸烟、肿瘤原发部位、T分期及临床分期无相关性（均P〉0．05）。结论：BUBl蛋白的低表达与LSCC的发生、发展有关,BUB1可能作为预测LSCC转移及预后的生物学指标之一。     

Dickkopf-1和GATA-6在喉癌中的表达及意义

目的：研究Dickkopf-1和GATA-6蛋白在喉癌组织中的表达,探讨二者在喉癌发生、发展中的作用及二者的相关性。方法：应用免疫组织化学方法（SP法）检测48例喉癌组织及48例相应癌旁组织、20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织中Dickkopf-1和GATA-6蛋白的表达情况。结果：①Dickkopf-1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁组织和正常喉部黏膜组织（P〈0.05）;②GATA-6蛋白在喉癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常喉部黏膜组织（P〈0.05）;③Dickkopf-1和GATA-6蛋白在喉癌组织中的表达与喉癌淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性（P〈0.05）;④喉癌组织中Dickkopf-1蛋白表达和GATA-6蛋白表达呈负相关（r=-0.490,P〈0.01）。结论：Dickkopf-1和GATA-6蛋白的表达与喉癌的发生、发展有关。     

喉鳞状细胞癌中细胞周期蛋白E和p27异常表达的临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）中细胞周期蛋白E（CyclinE）和p27蛋白的表达情况及其临床意义,旨在寻找影响LSCC患者预后的新指标。方法：采用免疫组织化学ElivisionTM法检测160例LSCC和20例正常喉黏膜组织（NLT）中CyclinE和p27的表达情况;统计分析CyclinE和p27蛋白之间及其二者与LSCC患者临床病理因素和总体生存期之间的关系。结果：LSCC组织中CyclinE和p27阳性率分别为62．50％（100／160）和41．25％（66／160）,NLT中CyclinE和p27阳性率分别为35％（7／20）和70％（14／20）（P〈0．05）;CyclinE和p27与LSCC患者淋巴结转移和PTNM分期有关（P〈0．05）,与年龄、性别及肿瘤直径、部位和分化程度无关（P〉0．05）;CyclinE和p27呈显著负相关,r=-0．767（P％0．05）;Cox多因素分析显示淋巴结转移、PTNM分期、CyclinE和p27是影响LSCC患者预后的独立危险因素。Kaplan-Meier生存分析显示LSCC患者的总体生存率为36．9％（P〈0．05）;CyclinE阳性组患者5年生存率为8％,阴性组为80％（P〈O．05）;而p27蛋白阳性组患者5年生存率为77．27％,阴性组为5．32％（P〈O．05）。结论：CyclinE基因的激活同时伴有p27基因的失活可能是LSCC发生发展和侵袭转移的分子基础,联合检测CyclinE和p27对判断LSCC患者预后有重要意义。     

增殖诱导配体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的 观察增殖诱导配体（APRIL）在喉鳞癌（LSCC）中的表达。方法 采用免疫组织化学SABC法检测150例喉鳞癌患者中癌旁喉黏膜组织、癌组织中是否有APRIL的表达及APRIL的表达量与临床指标之间的关系。结果 APRIL在癌旁喉黏膜组织及癌组织中的阳性表达率分别为6.7%（10/150）、89.3%（134/150）,在喉鳞癌不同的TNM分期中随着分期的增进APRIL的表达量逐渐增加且差异有统计学意义（P<0.05）,APRIL的表达量与TNM分期相关（P<0.05）。结论 APRIL蛋白在喉鳞癌中高表达,且在不同TNM分期之间差异有统计学意义。     

成纤维细胞生长因子2型受体在喉癌中的表达及临床意义

目的　探讨成纤维细胞生长因子2型受体（fibroblast growth factor 2,FGFR2）在喉癌中的表达及临床意义。方法　应用免疫组织化学（SP法）检测FGFR2蛋 白在40例喉癌组织、15例癌旁组织和8例正常喉黏膜中的表达情况。应用流式细胞术的方法定量检测40例喉癌组织、13例癌旁组织和5例正常喉黏膜组织中FGFR2的含量。结果　喉癌组织、癌旁组织及正常喉黏膜中FGFR2蛋白的表达强度呈下降趋势,差异有统计学意义（H =11.4573,P <0.01）。FGFR2蛋白在喉癌组织、癌旁组织及正常黏膜中的表达量分别为1.8776±0.1683、1.1815±0.2710和1.0100±0.1341,差异有统计学意义（F =93.1797,P =0.0000）。喉癌组织中FGFR2蛋白的表达量明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织,而癌旁组织与正常喉黏膜相比无显著性差异。喉癌组织中FGFR2蛋白表达与病理分级有关,而与其临床分期、淋巴结转移、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别均无关。结论　FGFR2蛋白在喉癌中的发生、发展有一定的相关性。     

EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨沉默促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular re-ceptor,EphA2)与促血管生成因子(VEGF)蛋白在喉鳞状细胞癌(喉鳞癌)组织中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学技术检测EphA2、VEGF蛋白在69例喉鳞癌组织及15例癌旁黏膜组织中的表达,分析二者表达水平与临床病理特征的关系。结果 EphA2和VEGF蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率均高于癌旁黏膜组织(P均<0.05),EphA2蛋白表达尚与肿瘤原发部位相关(P<0.05),且EphA2和VEGF蛋白表达均与喉鳞癌患者的临床分期(P均<0.05)及转移(P均<0.05)密切相关,而二者表达与患者年龄、性别、组织学分级均无明显相关(P均>0.05)。喉鳞癌组织中EphA2及VEGF蛋白表达存在正相关性(P<0.05)。生存分析结果显示EphA2及VEGF蛋白表达水平与患者5年总生存率密切相关(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型进一步显示,淋巴结有无转移及EphA2蛋白表达水平为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论 EphA2与VEGF蛋白在喉鳞癌组织中表达均上调,提示二者可能存在相互作用,共同在喉鳞癌的发生、发展中起作用。     

内皮抑制素和血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子-2在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨内皮抑制素（endostatin）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子-2（fibroblast growth factor basic-2，FGF-2）在喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织中的表达和临床意义。方法采用流式细胞术检测50例喉鳞癌、40例癌旁组织、10例正常组织中Endostatin、VEGF及FGF-2的表达。结果Endostatin、VEGF、FGF-2在喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率与癌旁组织和正常喉黏膜组织相比差异有统计学意义（P值均〈0．05）；喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率均高于癌旁组织及正常喉黏膜组织，癌旁组织与正常喉黏膜组织之间的表达量及阳性表达率差异无统计学意义（P值均〉0．05）。Endostatin、VEGF、FGF-2在喉鳞癌组织中的表达量及阳性表达率与淋巴结及临床分期有关，与临床分型、患者年龄及性别无关。结论Endostatin、VEGF及FGF-2与喉鳞癌的发生、发展密切相关，并可能影响预后。     

喉鳞状细胞癌中Snail mRNA表达及临床意义

目的 探讨Snail mRNA在人喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达及与临床病理特征的关系,并探讨它在喉癌发生、发展中的作用及其临床应用价值.方法 应用原位分子杂交方法检测Snail mRNA在60例喉癌、30例喉不典型增生和20例喉慢性炎症组织中的表达.结果 60例喉癌组织中Snail mRNA的阳性表达率为70%...