中性粒细胞凋亡与炎症反应

细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)是一普遍生命现象 ,在正常生理和疾病病理过程中普遍存在。近期的研究表明 ,中性粒细胞 (ＰＭＮ)凋亡障碍并导致炎症反应持续发展和加剧是全身性炎症反应综合征 (ＳＩＲＳ)的主要病理生理过程。因此 ,在炎症控制与治疗中 ,明确中性粒细胞凋亡在全身性炎症反应中的作用及其相关影响因素十分必要。1　细胞凋亡基本概念细胞死亡的模式主要有坏死和凋亡两种 ,后者是由基因控制的有序性细胞自主死亡方式。细胞凋亡是一个发生发展较快的动态过程 ,从凋亡小体形成到吞噬、降解过程的完成 ,需数分钟至数小时不等 ,依细…     

中性粒细胞自发性凋亡及槲皮素对其影响的研究

中性粒细胞是机体早期炎症反应中最重要的炎症细胞,它在炎症反应中处于核心位置。中性粒细胞具有快速地组成自发凋亡的内在生命特征。通过自发性凋亡这一机制,保持中性粒细胞的正常消亡,使其达到动态平衡和内环境稳定。有证据表明,炎症部位老化的中性粒细胞通过自发性凋亡的形式逐渐丧失其生物学功能,最终被周围吞噬细胞吞噬清除掉。然而,炎症细胞被清除的机制只要在时空、位置、强弱、速度、细胞／分子间相互作用等方面调控不当,则可能出现自身的炎症细胞对自身组织细胞的损伤。     

中性粒细胞凋亡的研究进展

中性粒细胞是机体内一种特殊的白细胞,它是机体抵御细菌、病毒和真菌感染等入侵因子的第一道防线。临床上的过度失控性炎性反应,其机制可能与中性粒细胞的凋亡异常导致的数量和功能上的改变密切相关。中性粒细胞凋亡维持中性粒细胞数量上的平衡和内环境的稳定。中性粒细胞凋亡在多种外界因素的作用下,受多基因调控、众多细胞因子参与、多条途径独立或交联而调控。     

老年肺心病急性加重期外周血中性粒细胞凋亡及地塞米松影响

目的 :检测老年肺心病 (ChronicPulmonaryHeartDisease,CPHD)急性加重期外周血中性粒细胞 (PMN)凋亡状况及地塞米松影响 ,探讨其意义。方法 :应用流式细胞仪分析 19例正常人和 2 8例老年CPHD患者PMN凋亡状及地塞米松的影响。结果 :老年CPHD患者PMN凋亡率 ,呼吸衰竭组 <非呼吸衰竭组 <正常对照组(P <0 .0 5 ) ,地塞米松不能影响老年CPHD患者外周PMN凋亡。结论 :PMN凋亡延迟在老年CPHD急性加重期具有重要意义 ,调控PMN凋亡将为防治老年CPHD开辟新的治疗途径 ,但从这个角度讲CPHD不宜常规应用糖皮质激素。     

重症急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡的实验研究

目的 研究重症急性胰腺炎（SAP）外周血中性粒细胞凋亡的动态变化。方法 采用胰胆管逆行注射4％牛磺胆酸钠建立大鼠SAP模型；观察血浆淀粉酶水平及胰腺病理评分；分离外周血中性粒细胞，TUNEL荧光标记法检测细胞凋亡。结果 SAP组血浆淀粉酶水平及胰腺病理评分均较假手术组（SO）明显升高（P〈0．05）。SAP组中性粒细胞凋亡率在观察期间呈进行性降低（P〈0．05）。结论 重症急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡明显延迟，在SAP的发病机制中具有重要作用。     

中性粒细胞凋亡信号转导途径的研究进展

中性粒细胞(paymorphonuclear neutrophil，PMN)是运动活泼、吞噬积极、胞浆内富含毒性颗粒的炎性细胞，在机体的非特异性免疫防御中起重要作用。临床上最常见的炎症性疾病，究其发生与发展的细胞、分子机制都与PMN密切相关。PMN的功能、数量和它的生命期限影响着炎症的发生、发展以及收敛。近年来的研究发现，以免疫反应增强为先导的过     

磷脂酶A2激活倡导中性粒细胞凋亡

目的 探讨磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活性的变化对中性粒细胞凋亡的影响。方法 采用光镜、电镜、ＤＮＡ电泳和ＦＡＣＳ等方法，分析了磷脂酶Ａ２内外源性激活剂和掏剂对大鼠中性粒细胞凋亡影响。结果 脂多糖（ＬＰＳ１μｇ／ｍｌ）和钙离子载体（Ａ２３１８７１μｍｏｌ／Ｌ）等ＰＬＡ２激动剂分别在共同培养６ｈ和１２ｈ之内促进中性粒细胞凋亡，而ＰＬＡ２阻断剂４－溴苯甲酰溴甲烷（ｐ－ＢＰＢ０．０１～１ｍｍｏｌ／Ｌ）可明显     

磷脂酶A2激活介导中性粒细胞凋亡

探讨磷脂酶A2 (PLA2 )活性的变化对中性粒细胞凋亡的影响。方法 :采用光镜、电镜、DNA电泳和FACS等方法 ,分析了磷脂酶A2 内外源性激活剂和抑制剂对大鼠中性粒细胞凋亡的影响。结果 :脂多糖 (LPS1μg/ml)和钙离子载体 (A2 31871μmol/L)等PLA2 激动剂分别在共同培养 6h和 12h之内促进中性粒细胞凋亡 ,而PLA2 阻断剂 4 溴苯甲酰溴甲烷 (p BPB 0 .0 1～ 1mmol/L)可明显减弱上述激动剂的促凋亡作用。但另一种PLA2 非特异性抑制剂氯喹和血小板激活因子受体拮抗剂SR2 74 17A则无上述相同的作用。结论 :结果表明PLA2 激活可促进中性粒细胞凋亡过程 ,但该过程可能同PLA2 的代谢产物血小板激活因子的直接作用无关。     

中性粒细胞凋亡与急性呼吸窘迫综合征

急性呼吸窘迫综合征 (ａｄｕｌｔｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｉｓｔｒｅｓｓｓｙｎｄｒｏｍｅ ,ＡＲＤＳ)始因多样 ,且互不相关 ,但引起的肺损伤却完全一致。尽管近年来对急性肺损伤支持治疗有了长足的进步 ,但ＡＲＤＳ的发生未见减少[1 ] 。中性粒细胞 (ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｏｎｕｃｌｅａｒｎｅｕｔｒｏ ｐｈｉｌｓ ,ＰＭＮ)是ＡＲＤＳ发生、发展的关键细胞[2 ] ,ＰＭＮ如何消散在一定程度上决定着ＡＲＤＳ患者的转归。从细胞动力学和分子生物学角度探讨ＰＭＮ与ＡＲＤＳ的关系是近年来研究的热点之一。细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)不仅在…     

内毒素急性肺损伤与中性粒细胞凋亡研究现状

内毒素（endotoxin）是革兰阴性菌细胞壁的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）成分,细菌死后细胞壁崩解时释出。内毒素可诱导肺泡巨噬细胞和上皮细胞产生多种细胞因子、趋化因子和激活中性粒细胞（polymorphonucler neutrophil,PMN）并使其向损伤部位聚集,导致急性肺损伤（acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（acute respira-tory distress syndrome,ARDS）。现有资料表明PMN凋亡延迟在急性肺损伤的发生过程中起到重要作用,了解PMN凋亡调控有利于调节机体炎症反应,可为ALI开辟新的治疗路径。     

结核杆菌耐热抗原对A549细胞分泌SP-B和凋亡的影响

目的 探讨结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)刺激诱导人肺腺癌细胞系(A549)细胞后对其肺泡表面活性物质相关蛋白B(SP-B)的分泌和凋亡的影响.方法 用不同浓度的Mtb-HAg分别刺激诱导A549细胞,相同条件分别培养24、48 h,同时设置空白对照组(对照组1和对照组2)和阳性对照组[脂多糖(LPS)组和姜黄素组].运用ELISA法检测对照组1、LPS组和实验组1(2、3μg/ml Mtb-HAg分别诱导A549细胞培养24 h和48 h)培养上清液中的SP-B表达量;使用实时荧光定量PCR法检测对照组1、LPS组和实验组1中基因SFTPB的相对表达量;采用流式细胞技术检测对照组2、姜黄素组和实验组2(2、3 μg/ml Mtb-HAg分别诱导A549细胞培养24 h)中A549细胞的凋亡率.结果 刺激诱导相同时间,实验组1的SP-B表达量低于对照组1,差异有统计学意义(P ＜0.05);相同浓度刺激诱导随时间的延长,实验组1中SP-B表达量降低的不显著.相同培养时间,随着Mtb-HAg浓度的增加实验组1表达SP-B的基因SFTPB的相对表达量显著低于对照组1,差异有统计学意义(P＜0.05);而在相同有效刺激浓度下,其相对表达量随作用时间变化不显著.姜黄素组和实验组2中的A549细胞凋亡率显著高于对照组2(P ＜0.05).结论 Mtb-HAg对A549细胞表达SP-B的抑制作用明显,并能诱导A549细胞发生凋亡.     

38kDa抗原用于肺结核血清学诊断的meta分析

目的系统评价38kDa抗原对肺结核的诊断价值并作meta分析。方法制定原始文献的纳入、排除标准及检索策略,检索Pubmed,EMBASE,BIOSIS,WebofScience以及维普、万方、中国知网（日期：1990年1月01日-2009年11月30日。纳入的文献采用QUADAS进行质量评价,用MetaDisc1．4软件进行meta分析。结果符合标准的共有26个研究,备研究间存在畀质性,但不存在阈值效应。合并后的诊断优势比为29．48195％C1（14．43～60．26）1,敏感度为O．53195％CI（0．51-0．55）],特异度为O．94195％CI（0．93～0．95）],阳性似然比为14．22195％CI（6．77—29．89）】,阴性似然比为0．51195％CI（0．45～0．57）]。SROC曲线的AUC面积为0．730,Q＊指数为0．667。结论血清38kDa诊断肺结核的效能中等,不能取代痰涂片检查。     

ino1反义寡核苷酸对结核分枝杆菌的抑制作用

目的选取合适的靶点，探讨利用反义技术抑制结核杆菌的新方法。方法选取分枝杆菌ino1基因为靶基因，设计并合成3段反义寡核苷酸，将不同浓度的反义寡核苷酸加入细菌的培养液中，观察ino1的mRNA表达情况，结核杆菌分枝硫醇的水平以及结核杆菌的生长情况。结果当反义寡核苷酸的浓度达到20μmol/L时，可以特异性地抑制ino1的表达，此浓度水平时ino1 mRNA的量和对照组的比值为0.67，40μmol/L时的比值则为0.45。分枝硫醇的合成以及分枝杆菌的生长也相应地受到抑制。反义寡核苷酸的浓度为20μmol/L时，分枝杆菌浓度的对数值下降1.3，40μmol/L时下降1.7。结论利用反义技术抑制分枝杆菌是完全可行的，并且ino1可以作为反义寡核苷酸的靶基因。     

结核分枝杆菌19 kDa脂蛋白诱导THP-1细胞凋亡的研究

目的：观察结核分枝杆菌19 kDa脂蛋白（Mtb P19）对THP-1细胞凋亡的影响。方法：从培养的结核杆菌H37Ra制备Mtb P19,以5、10、20μg/ml Mtb P19作用于佛波醇酯（PMA）分化的THP-1细胞,37℃、5%CO2孵箱孵育4 h。Wright-Giemsa染色观察细胞形态变化;AnnexinV-FITC染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：终浓度为5μg/ml的Mtb P19即可诱导THP-1细胞凋亡,且凋亡率随Mtb P19作用浓度的升高而增加（P〈0.01）;Wright-Giemsa染色镜下可见部分细胞体积变小、圆缩,核固缩,核断裂。结论：结核分枝杆菌P19以剂量依赖方式诱导THP-1细胞凋亡。     

结核分枝杆菌PstS1-U1融合抗原的表达、纯化及其免疫活性测定

目的 为获得一种适于本地结核病临床诊断用抗原,将结核分枝杆菌38×103抗原--即磷酸盐传送蛋白1(phosphate transport system protein l,PstS1)和尿蛋白1(urine protein 1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性.方法 用基因拼接法将结核分枝杆菌编码PstS1和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物.用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核患者血清对纯化产物的抗原活性进行测定.结果 成功构建了原核表达质粒,对表达产物进行亲和层析纯化,获得相对分子质量为57×103的目的蛋白.经Western blot检测融合抗原能够与活动性肺结核患者血清中的抗体发生结合.结论 本研究表达并纯化出PstS1-U1融合抗原,为进一步的应用奠定基础.     

结核分枝杆菌感染控制在结核病预防中的作用分析

目的 探讨和分析结核分枝杆菌感染控制在结核病预防中的临床应用价值。方法 选择2014年6月～2016年6月期间医院所分离的168株结核分枝杆菌作为临床研究对象,并分别对本研究中结核分枝杆菌的来源情况和耐药情况进行统计和分析,并由此制定相应的感染控制措施。结果 168株结核分枝杆菌来源于痰液132株,占78.57%(132/168);胸腹水21株,占12.50%(21/168);血液9株,占5.36%(9/168);尿液6株,占3.57%(6/168)。168株结核分枝杆菌对抗结核药物均敏感的101株,占率60.12%(101/168),对抗结核药物耐药的67株,占率39.88%(67/168)。结核分枝杆菌对异烟肼32.74%(55/168)、利福平30.36%(51/168)单药耐药的比率,以及对异烟肼+利福平24.40%(41/168)耐多药的比率均呈现出较高的耐药率,耐药率均处于20%以上。结论 加强对结核分枝杆菌来源及耐药情况的监测,并采取针对性的控制措施对于结核病的预防意义深远而重大。     

结核杆菌特异性抗原对结核病诊断价值研究

目的从人血清提取结核杆菌早期分泌性抗原靶6、培养滤液蛋白、结核杆菌分泌蛋白38KD进行标测,探讨结核病诊断新方法。方法选择我院2007年1月～2008年1月间住院肺结核病人和健康查体者,应用结核分枝杆菌相关性抗原ESAT-6、CFP10、38KD检测试剂盒测定血清结核菌抗原水平,同时对所有入选者均行结核菌培养。结果活动性肺结核患者血清中检测到结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-6、CFP10、38KD的阳性率高,与健康对照组有统计学差异（P〈0．005）;结核分枝杆菌抗原可区分结核感染和非感染,与结核菌素试验比较有显著的统计学差异（P〈0．001）。结论血清结核杆菌特异性抗原能够作为诊断结核病的依据,对鉴别活动性肺结核、非活动性肺结核、非结核病具有重要的价值。     

Mycobacterium tuberculosis latency-associated antigen Rv1733c SLP improves the accuracy of differential diagnosis of active tuberculosis and latent tuberculosis infection

Background: Differential diagnosis of active tuberculosis (ATB) and latent tuberculosis infection (LTBI) has been a challenge for clinicians in high TB burden countries. The purpose of this study was to improve the accuracy of differential diagnosis of ATB and LTBI by using fluorescent immunospot (FluoroSpot) assay to detect specific Th1 cell immune responses. The novelmycobacterium tuberculosis (MTB) latency-associated antigens Rv1733c and synthetic long peptides derived from Rv1733c (Rv1733c S...     

结核分枝杆菌MPT64抗原对巨噬细胞凋亡的抑制作用

目的探讨结核分枝杆菌MPT64抗原对RAW264.7巨噬细胞的影响及相关机制。方法将MPT64基因在大肠杆菌中表达、纯化,获得的纯化蛋白用于后续实验。将用佛波醇酯(PMA)分化的RAW264.7巨噬细胞分为对照组、卡介菌纯蛋白衍生物(BCGPPD)诱导组、BCG-PPD+MPT64共同作用组,分别给予相应的处理。孵育16 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,用ELISA试剂盒检测培养细胞上清的细胞因子TNF-α及IL-10水平。结果 BCG-PPD可以诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡,BCG-PPD+MPT64组的细胞凋亡水平低于BCG-PPD组(P<0.05)。细胞因子上清检测结果表明,与对照组相比,BCG-PPD作用组的TNF-α水平升高(P<0.01),而IL-10水平无明显变化;与BCG-PPD组相比,BCG-PPD+MPT64共同孵育组的IL-10水平升高(P<0.01),而TNF-α水平无明显变化。结论 MPT64抗原可能是一种毒力因子,能够抑制BCG-PPD诱导的巨噬细胞凋亡,该作用可能是通过提高IL-10水平来实现的。