MGITTM 960快速培养系统在结核病诊断中的应用价值

目的评价Bac TTM/MGITTM 960快速培养系统在确诊和治疗结核病中的应用价值。方法采用MGITTM 960液体培养技术和L-J固体培养法分别对病例标本培养,比较二者的检测效能。结果 MGITTM 960培养阳性率为57.2%,高于L-J固体法的46.3%;BACTEC MGIT 960技术涂阳标本的MGITTM 960阳性检出时间为(8.75±1.53)d,低于L-J法的阳性检出时间(26.83±4.62)d,差异均有统计学意义(P0.05)。结论与传统改良罗氏固体培养法相比,MGITTM 960液体培养技术阳性检出时间明显缩短,并能提高涂阴患者的阳性检出率。     

BACTEC MGIT 960系统与改良罗氏培养基抗酸分枝杆菌药敏结果的评估

目的为了检测BACTEC MGIT960系统对抗酸性分枝杆菌药敏试验的可靠性，选择一线抗痨药（链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇）与传统改良罗氏（Liiwenstein-Jensen）培养基药敏试验进行比较。方法该系统药敏试验分枝杆菌生长指示管为底部包埋对培基内氧浓度高度敏感的荧光指示剂的改良Middle Brook 7H9增菌肉汤培养基。该系统药敏试验使用检测分枝杆菌药敏试剂盒．结果179株临床标本960系统与L-J法链霉素、异烟肼、利福平、乙胺丁醇药敏符合率为93．86％、97．77％、91．62％、94．97％，总符合率94．55％。结论BACTEC MGIT960是全自动非放射检测系统．分枝杆菌药敏试验平均6．7d（4～13d），较L-J方法早21．3d，是一种快速准确的方法。     

两种结核分枝杆菌培养法在结核小鼠感染模型实验中的应用对比

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法实验分为BACTEC MGIT 960培养组与L-J培养组,经尾静脉注射1.0×10~6 CFU/mL H37Rv菌液感染36只C57BL/6雌性小鼠,感染一周后18只小鼠采用利福平治疗四周,18只小鼠注射等量磷酸缓冲液(PBS)作为对照,用BACTEC MGIT 960快速培养与罗氏培养法对36只小鼠肺、脾及肝组织匀浆液进行培养。结果采用BACTEC MGIT 960培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织培养物的报阳时间分别为(187.11±10.20) h、(347.22±12.70) h、(276.39±13.09) h,对照组为(142.50±11.70) h、(251.67±16.63) h、(230.28±7.22) h,组间对比差异有显著性(P0.001);罗氏培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织荷菌量分别为(5.15±0.15) log_(10) CFU、(3.30±0.23) log_(10) CFU、(3.40±0.25) log_(10) CFU,对照组荷菌量分别为(5.90±0.25) log_(10) CFU、(3.88±0.31) log_(10) CFU、(4.15±0.30) log_(10) CFU,组间对比差异有显著性(P0.001)。结论采用BACTEC MGIT 960培养法和罗氏培养法进行荷菌量检测,其培养结果相符,但是前者检测出阳性结果时间平均缩短一半,并且区分度也较高,说明BACTEC MGIT 960培养法在动物模型的荷菌量检测中更有优势,可运用于结核感染动物模型中荷菌量的检测。     

MGIT 960和比例法对结核分枝杆菌药物敏感性试验的对比研究

目的评价BACTEC MGIT960检测8种抗结核药物耐药性的效果。方法用MGIT960对结核杆分枝杆菌临床分离菌株进行抗结核药物异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果用MGIT960法与L-J比例法对118株结核分枝杆菌临床分离株进行异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺的耐药性检测,两种方法的符合率分别为97.5%(115/118)、92.4%(109/118)、96.6%(114/118)、84.7%(100/118)、94.9%(112/118)、94.1%(111/118)、97.5%(115/118)、85.6%(101/118)。MGIT960完成一线/二线药物药敏试验的时间平均为8.9和8.3天,L-J法则分别为26.7天和26.1天,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病人的早期诊断和治疗。     

MGIT960联合快速药敏在结核分枝杆菌药物敏感性检测中的应用

目的评价结核分枝杆菌快速培养及快速药物敏感试验在结核病诊治中的指导意义。方法应用MGIT 960液体快速培养方法及美国临床和实验室标准协会(clinical and laboratory standards institute,CLSI)推荐的M24-A(CLSI M24-A)微量肉汤稀释法对结核分枝杆菌临床分离菌株进行快速培养及快速药物敏感试验。结果对540株结核分枝杆菌临床分离菌株进行快速培养及快速药物敏感试验,耐药结果检出的平均时间为40.4天,40天获得药物敏感试验结果的比例达50.37%。快速药敏组平均报告天数比常规罗氏药敏试验平均报告天数缩短近18天,差异有统计学意义(t=9.137,P0.05)。对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、左氧氟沙星、莫西沙星、环丙沙星、克拉霉素、利福布丁和利奈唑胺等药物低浓度耐药和高浓度耐药比例差异均有统计学意义(P0.05)。结论河北地区结核耐药形势依旧严峻,通过缩短结核分枝杆菌培养及药物敏感性试验的时间,使得药物敏感试验结果更加快速、准确,使得病人得到更加快速准确的治疗方案,及时地服务于临床。     

应用BACTECMGIT960分枝杆菌检测系统对301例患者的分析

目的：应用BACTECMGIT960全自动分枝杆菌检测技术对301例患者在肺结核临床诊断和药敏试验的应用结果。方法：用BACTECMGIT960对不同种类标本进行分离及药敏试验。结果：BACTECMGIT960全自动分枝杆菌检测仪初代分离标本阳性。结核分枝杆菌在MGIT培养管中呈絮状沉淀生长,阳性报告时间平均为8．9天,药敏结果报告时间平均为7．9天,各类标本总阳性率为28．2％,其中痰标本阳性率为31．8％。结论：BACTECMGIT960与改良罗氏培养基法比,大大缩短了分枝杆菌的检测时间,适用于除血液以外的各类标本。因阳性率高便于尽早发现耐药菌株。20世纪70年代束,世界上第一个全自动分枝杆菌培养鉴定仪BACTEC460TB研制成功,使快速分离结核分枝杆菌成为现实．     

结核分枝杆菌的实验室检测方法学评价及耐药分析

目的对结核分枝杆菌的实验室检测方法学评价及耐药性进行分析探讨,为今后的临床工作,提供可参考依据。方法选择2015年1月至2017年6月间,我院收治的疑似结核病患者1221例的标本3663份作为研究对象,对其展开涂片镜检、罗氏固体培养、MGIT960液体培养等3种实验室检测,并对检测结果进行统计分析,同时展开药敏分析。结果通过对比发现,涂片镜检所需时间最短(P0.05),但是其检测阳性率最低(P0.05);罗氏固体培养阳性检测时间最长,阳性率高于涂片镜检法(P0.05),低于MGIT960液体培养(P0.05);MGIT960液体培养阳性所需时间较涂片镜检法长(P0.05),较罗氏固体培养法短(P0.05),阳性率最高(P0.05)。结核分支杆菌对吡嗪酰胺具有较高的耐药性。结论在对结核分支杆菌进行实验室检测的过程中,MGIT960液体培养所需时间相对较短,阳性率最高,在今后的实验室检测中,值得对其给予足够重视。结核分支杆菌对常用抗结核药物存在一定耐药性,值得关注。     

基因芯片技术对非结核分枝杆菌肺病的诊断价值

目的 探讨基因芯片法对非结核分枝杆菌（NTM）肺病的诊断价值。方法 选择河南省胸科医院2020年9月至2021年3月收治的高度疑似肺结核患者200例进行回顾性分析。200例患者均行荧光支气管镜,同时采取管镜下灌洗液标本,对灌洗液标本进行基因芯片检测。以MGIT 960液体培养[对硝基苯甲酸（PNB）]为参照,分析基因芯片方法对NTM检测的敏感度、特异度和检测结果。结果 200例患者中,基因芯片法鉴定出NTM阳性22例（11.0%）,结核分枝杆菌复合群（MTC）阳性154例（77.0%）,MTC阴性24例（12.0%）。其中22例NTM中,11例胞内分枝杆菌病（50.0%）,9例脓肿分枝杆菌病（40.9%）,1例堪萨斯分枝杆菌（4.5%）,1例鸟分枝杆菌（4.5%）;MGIT960液体培养（PNB）培养出NTM 23例（11.5%）,MTC 152例（76.0%）,阴性25例（12.5%）。以MGIT 960液体培养试验结果为参考标准,基因芯片法检测出NTM的敏感度为86.9%(20/23),特异度为98.9%(175/177),两者有较高一致性。而基因芯片可以分出菌型,所用时间更短。结...     

BACTEC MGIT 960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用

目的 探讨 BACTEC MGIT 960系统、分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法 对31例脊柱结核标本分别应用 BACTEC MGIT 960及罗氏培养基培养,对所得分离株行IS986扩增及16S rRNA PCR-SSCP分析进行菌种鉴定,并与常规方法对照。结果 BACTEC MGIT 960系统、罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87％、61.29％,两者平均报告时间分别为11.3d、26.7d;分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论BACTEC MGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。     

探讨结核杆菌药敏试验方法的改进

目的　探讨两种不同方法对结核杆菌药敏试验的优点互补。方法　以BACTEC法 7H12B培养基培养阳性60例临床结核分枝杆菌 ,经分别进行BACTEC法和改良罗氏法 (L J法 )的药敏 (INH、SM、RFP、EMB)试验 ,观察其耐药性。结果　① 7H12B液体培养基中结核分枝杆菌菌液GI值 5 0 0～ 90 0时 ,1ml相当于 1mg结核分枝杆菌湿重的活菌 (菌数10 6-7)。②取 7H12B培养基的菌液接种于L J药敏培养基 ,其结果与BACTEC法相比 ,无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　药敏试验选择L J法较好 ,可弥补BACTEC通常只有 4种药敏的不足 ,与L J法药敏方法比较 ,可提前报告 10～ 2 0d。     

BACTECMGIT960培养及分子菌种鉴定技术在脊柱结构诊断中的应用

目的 探讨BACTECMGIT960系统，分子菌种鉴定技术在脊柱结核诊断中的应用价值。方法 对31例脊柱结核标本分别应用BACTECMGIT960及罗氏培养基培养，对所得分离株行IS986扩增及16SrRNAPCR-SSCP分析进行菌种鉴定，并与常规方法对照。结果 BACTECMGIT960系统，罗氏培养法分支杆菌培养阳性率分别为83.87%,61.29%，两者平均报告时间分别为11.3d,26.7d；分子菌种鉴定结果与常规方法一致。结论 BACTECMGIT960系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法，快速培养与分子菌种鉴定联合应用可能是目前结核病临床细菌学诊断的较佳策略。     

利用BACTEC 960分枝杆菌分析系统对分枝杆菌进行快速菌型鉴定方法的研究

目的:探索一种快速的分枝杆菌菌型鉴定方法。方法:用BACTEC 960分枝杆菌系统(960)和传统的改良罗氏培养基法(L-J法),对分枝杆菌标准菌株及临床分离菌株,同时进行菌型鉴定的对照研究,确定本法进行菌型鉴定的最佳药物浓度及具体优势。结果:本法进行快速菌型鉴定所需药物浓度为:噻吩-2-羧基肼(TCH)5.0μg/mL,对硝基苯甲酸(PNB)500μg/mL。进行快速菌型鉴定所需时间平均为6.7天,较L-J法平均提前23.3天。结论:本法明显缩短了分枝杆菌进行菌型鉴定的时间,为临床对分枝杆菌感染的菌型提供快速的诊断依据,并及时指导临床用药。     

Xpert MTB/RIF对初治涂阴肺结核支气管肺泡灌洗液检测的研究

目的 探讨Xpert MTB/RIF检测支气管肺泡灌洗液对初治涂阴肺结核的早期快速诊断价值。方法 对南通市第六人民医院2015年6月—2018年1月连续三次痰涂片阴性的疑似初治肺结核住院患者332例,在抗结核治疗前行支气管镜检查,收集支气管肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid,BALF）,行结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF检测,比较三种方法的阳性率,并分别以培养阳性及临床诊断为标准,计算Xpert MTB/RIF诊断涂阴肺结核的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果 共有279例初治涂阴肺结核和53例非肺结核患者入组,279例初治涂阴肺结核的BALF检测结核分枝杆菌涂片、BACTEC MGIT960快速培养及Xpert MTB/RIF阳性率分别为2.51%、25.81%及50.90%,Xpert MTB/RIF阳性率明显高于涂片法及培养法,差异有统计学意义。以MGIT960培养阳性为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为98.61%（71/72),特异度为100%（53/53）;阳性预测值为100.00%（71/71）,阴性预测值98.15%（53/54)。以临床诊断为标准,Xpert MTB/RIF诊断初治涂阴肺结核的敏感度为50.9%（142/279),特异度为100%（53/53）。阳性预测值为100%（142/142）,阴性预测值27.89%（53/190)。以DST 结果为金标准,Xpert MTB/RIF 检测利福平耐药的敏感度、特异度分别为 87.5％,98.44％,Xpert MTB/RIF与 DST两种方法检测利福平耐药的一致率达到 97.22％。且检测完成时间仅需2 h。结论 BALF中Xpert MTB/RIF检测敏感度、特异度均较高且能判断是否对利福平耐药,对初治涂阴肺结核有较大的早期快速诊断价值。     

痰中结核分枝杆菌利福平耐药性检测的研究

目的以比例法为检测标准,了解应用噬菌体生物扩增技术（PhaB法）检测结核分枝杆菌利福平耐药性应用价值。方法选择涂片阳性和涂阴培阳病人标本,利用PhaB法对结核分枝杆菌利福平的耐药性进行直接和培养后检测。结果156例标本中,112例抗酸染色（＋）以上,44例（＋）以下及涂阴培阳。PhaB法对（＋）以上和（＋）以下及涂阴培阳的痰标本检测结核分枝杆菌的敏感性、特异性、符合率分别为82．61％、96．63％、93．75％和80．00％、100．00％、95．46％。结论噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌对利福平的耐药性具有较高的敏感性和特异性,与比例法符合率高。     

GeneXpert Mtb/RIF检测技术在临床耐药结核病诊断中的应用价值

目的 评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术在临床耐药结核病诊断中的应用效果。方法 收取240例结核病住院患者的晨痰样本分别进行痰涂片镜检、MGIT960液体培养及GeneXpert Mtb/RIF快速检测,对于MGIT960液体培养与GeneXpert同为阳性的样本进一步进行MGIT960药敏检测。以MGIT960液体法作为金标准,评估GeneXpert Mtb/RIF检测技术的敏感性和特异性以及Kappa值。结果 224例有效样本中涂片镜检阳性检测率为26.8%,MGIT960液体培养阳性检出率为45.1%,GeneXpert检测阳性检出率为46.9%;以MGIT960液体培养作为金标准,涂片镜检法的敏感度为59.4%,特异度为75.0%,GeneXpert检测法敏感度为91.1%,特异度为92.4%;以MGIT960药敏检测为金标准,GeneXpert检测法与之相比两种方法的一致性为96.7%,敏感度为92.3%,特异度为98.5%。结论 GeneXpert Mtb/RIF检测技术是一个敏感、特异和快速有效方法,有利于结核病的早期诊断。     

运用线性探针技术快速检测耐多糖结核分枝杆菌的效果评价

目的 评估线性探针技术快速检测耐多药结核分枝杆菌的效果。方法 选取317例结核分枝杆菌分离株分别进行MGIT960液体药物敏感性试验和线性探针快速检测,以液体法作为金标准,探讨线性探针检测技术的敏感性和特异性以及Kappa值。结果 317株结核分枝杆菌复合群样本分别进行MGIT960液体药物敏感性试验和线性探针快速检测,其中液体法利福平(RFP)耐药率为5.5%,异烟肼耐药率为11.5%,耐多药(MDR)患者检出率为4.7%;线性探针快速检测法利福平(RFP)耐药率为7.4%,异烟肼耐药率为11.7%,MDR检出率为5.7%。以液体法为金标准,线性探针检测技术检测利福平和异烟肼的敏感性和特异性分别为94.3％、97.7％和86.3％、98.0％。结论 线性探针检测技术是一个敏感、特异和快速的诊断MDR的有效方法。     

GeneXpert MTB/RIF在检测系统性自身免疫病合并肺结核患者中的应用

目的 评价GeneXpert MTB/RIF系统在诊断系统性自身免疫病（SAD）合并肺结核（MTB）患者中的应用价值。方法 对临床诊断和影像学检查确诊的350例系统性自身免疫病合并肺结核患者和50例系统性自身免疫病非结核对照组患者的痰标本进行GeneXpert MTB/RIF检测,评价GeneXpert MTB/RIF诊断性能,并与结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法等比较,判断优劣以及半定量检测结核菌的效能。以结核菌液体药敏法为标准,分析GeneXpert MTB/RIF检测利福平耐药的敏感度和特异度。结果 GeneXpert MTB/RIF、结核菌培养、T-SPOT法、抗酸涂片染色法4种方法检测的灵敏度分别为95.14%、84.00%、89.71%和56.86%,特异度分别为100.00%,92.00%,84.00%,100.00%。GeneXpert MTB/RIF系统灵敏度与T-SPOT比较差异无统计学意义（χ² =4.21,P>0.05）,高于抗酸涂片染色法（χ² =36.60,P<0.05）。GeneXpert MTB/RIF检测利福平(RIF)耐药性的灵敏度为86.00%,特异度为90.56%。结论 GeneXpert MTB/RIF与传统的MGIT960液体培养、T-SPOT法和抗酸涂片染色法等联合,可显著提高合并肺结核系统性自身免疫病结核病的检出率。     

Evaluation of Microscopic observation drug susceptibility (MODS) assay as a rapid,sensitive and inexpensive test for detection of tuberculosis and multidrug resistant tuberculosis

BackgroundMicroscopic observation drug susceptibility (MODS) assay has been suggested as a low cost method for rapid, accurate detection of tuberculosis (TB) and multidrug resistant tuberculosis (MDR-TB).MethodsA total of 2424 samples collected from 1063 eligible patients of suspected pulmonary or extrapulmonary TB were subjected to MODS assay. Performance of MODS was compared with culture and drug susceptibility testing (DST) by conventional solid Lowenstein–Jensen (LJ) media or liquid Mycobacteria Growth Indicator Tube (MGIT) culture.ResultsWhen compared to reference gold standard of positivity in either solid or liquid reference culture, the MODS assay had sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value of 91.3%, 98.2%, 96.0% and 95.9% respectively. MODS took a median time of 10.3 days to culture positivity as compared to 13.8 days using MGIT and 30.5 days using LJ culture. Culture and DST being concurrent in MODS, the median turnaround time for DST was the same as that for culture i.e. 10.3 days. The overall median turn around time for culture positivity and DST using manual MGIT and LJ medium was 23.6 days and 61.2 days respectively. The concordance between MODS culture and the reference susceptibility method was 97.7% for rifampicin, 95.6% for isoniazid, 98.5% for rifampicin and isoniazid. The cost of performing a single MODS assay was INR 200.ConclusionMODS is a rapid and sensitive, yet simple and inexpensive test that may be helpful to enhance diagnostic accuracy, and case detection of TB and MDR-TB in resource constrained settings.