BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的 建立体外分子水平β?鄄分泌酶（BACE1）抑制剂高通量筛选体系。方法 采用均相时间分辨荧光法（HTRF）,通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果 采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6 h、BACE1浓度为670 U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC₅₀小于10^-6 mol/L的化合物。结论 采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。     

杂环并五环三萜化合物的合成及糖原磷酸化酶抑制活性

目的： 对天然五环三萜进行结构修饰,寻找新型糖原代谢调控药物。方法： 以齐墩果酸和熊果酸为先导物,在其A环骈合吲哚环、喹喔啉环和吡嗪环,合成一系列含氮杂环衍生物,并采用兔肌肉糖原磷酸化酶筛选模型评价其活性。结果与结论： 合成了12个杂环衍生物,结构均经IR、¹H NMR、¹³C NMR和MS确证。除化合物12外,其余化合物均显现出糖原磷酸化酶抑制活性,IC₅₀在14～252 μmol/L范围内。其中,化合物15活性最好,其IC₅₀为14 μmol/L。     

吲哚啉类α1-肾上腺素受体拮抗剂的合成及生物活性

目的： 寻找新的α₁-肾上腺素受体（α₁-AR）拮抗剂。方法： 以西洛多辛为先导化合物,保留其药效基团吲哚啉母核,依据拼合原理,引入取代苯氧基烷基哌嗪基团,设计合成了12个5-［2-［4-(取代苯氧基烷基)-1-哌嗪基］丙基］吲哚啉类化合物。结果： 目标化合物结构经元素分析、红外光谱、质谱和核磁共振氢谱确证,初步药理实验结果表明,6个目标化合物的拮抗参数pA₂值大于7.50,具有较好的α₁-AR拮抗活性。结论： 5-［2-［4-(取代苯氧基烷基)-1-哌嗪基］丙基］吲哚啉类化合物是一类新型的具有潜在价值的α₁-AR拮抗剂。     

新型双吲哚取代1，4-二氢吡啶类钙离子拮抗剂的合成

目的设计合成一种新型结构1,4-二氢吡啶（1,4-DHP）钙离子通道拮抗剂：4-芳基-2,6-二吲哚基-3,5-二氰基-1,4-二氢吡啶。方法采用Hantzsch缩合反应,以芳香醛、3-氰乙酰基吲哚、醋酸铵为原料,微波辐射条件下三组分一锅法合成目标化合物。结果反应12～15min完成,产率76％～85％,所用产物均通过熔点（MP）、红外光谱（IR）和氢核磁共振谱（^1H NMR）等表征确认结构。结论本实验提供了一种新型1,4-DHP衍生物的合成方法,实现了对钙离子通道拈抗剂1,4-DHP的结构修饰,新化合物分子中含多个活性杂环骨架,具有潜在提高该类拮抗剂活性的意义。     

新型吲哚类衍生物的合成及体外免疫抑制活性的初步研究

目的:以土槿乙酸结构特征为模板,吲哚为母核合成类土槿乙酸化合物,以期得到有更高免疫抑制活性的吲哚类衍生物。方法:对5-醛基吲哚和5-羧基吲哚的1,3,5位进行改造。1位进行烷基化改造,3位通过维尔斯迈尔－哈克反应与醛胺缩合反应进行延长,5位通过克脑文格尔反应与缩合酰化反应进行延长,得到吲哚类衍生物。经氢谱和高分辨质谱对其进行结构表征。采用噻唑蓝（MTT）法检测目标化合物对小鼠T、B淋巴细胞增殖的抑制作用。结果:合成得到两个系列共7个化合物,所有的化合物都经过HR-ESI-MS和¹H-NMR验证,其中化合物5c对T细胞和B细胞有一定的增殖抑制活性,化合物9a,9b对B细胞有一定增殖抑制活性。结论:通过模拟土槿乙酸的两个长链结构合成了新的吲哚的类似物,发现了具有一定的免疫抑制活性的先导化合物。     

5H-苯并［b］咔唑类化合物的合成与肿瘤细胞增殖抑制活性

为了发现新型选择性拓扑异构酶Ⅱ抑制剂,以偏苯酸酐和吲哚为原料,合成了16个新的5H-苯并［b］咔唑类化合物。探讨了C-9位上了不同取代基对肿瘤细胞增殖抑制活性的影响。采用磺酰罗丹明B蛋白染色法检测了16个化合物对4种肿瘤细胞(SMMC-7721、S1、HCT116和HeLa)的增殖抑制活性。结果表明,其中4个化合物对4种不同的肿瘤细胞株具有明显的增殖抑制活性。其中化合物10e对4种肿瘤细胞株的抑制作用最为显著(IC₅₀分别为:5.06,4.50,5.29和6.32 μmol/L)。     

新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂的设计、合成及活性研究

目的 设计合成新型2-吲哚酮类c-Met激酶抑制剂.方法 以c-Met激酶抑制剂SU11274为先导化合物,利用生物电子等排原理设计出系列2-吲哚酮类衍生物.以2-吲哚酮为起始原料,先后经历与氯磺酸的氯磺酰化、与3的磺酰胺化、与6a~6h,7a~7h和4a~4b的缩合反应制得目标产物10a~10r,并测定它们对c-Met激酶和MCF-7细胞增殖的抑制活性.结果与结论 成功合成了设计的18个2-吲哚酮类化合物,产物结构经1H NMR和ESI-MS确证.部分化合物显示出一定的c-Met激酶和MCF-7细胞增殖抑制活性.对目标产物进行了初步构效关系分析,为该类化合物进一步的结构优化奠定了基础.     

岩五加中具有抗癌转移活性的吲哚类生物碱的分离

[目的] 对岩五加（Tetrastigma obtectum）全植株进行植物化学研究,分离出2种新的吲哚类生物碱。[方法] 通过有机波谱解析鉴定结构,并以人乳腺癌细胞系MDA-MB-231为模型进行抗癌转移活性筛选。[结果] 分离得到2种新的吲哚类生物碱,分别为崖爬藤碱A（1）和崖爬藤碱B（2）。[结论] 在以人乳腺癌细胞系MDA-MB-231为模型进行抗癌转移活性筛选过程中,化合物1和2显示出阳性抗癌转移作用。     

2-芳基咪唑并［1，2-a］吡啶-3-乙酰胺衍生物的合成与抗焦虑活性研究

目的 寻找水溶性较好、抗焦虑活性较强的新型化合物。方法 设计合成2-芳基咪唑并［1,2-a］吡啶-3-乙酰胺类化合物,通过体外苯二氮卓受体竞争结合实验及小鼠高架迷宫行为实验,评价化合物的体内外抗焦虑活性,分析化合物的构效关系。结果与结论 共合成28个新型化合物,通过¹H-NMR和 MS确证其结构,其中I8和I10水溶性良好。苯二氮受体竞争结合实验结果表明,化合物Ⅰ₁、Ⅰ₈、Ⅰ₁₀ 、Ⅰ₁₃ 、Ⅰ₁₉ 与苯二氮卓受体的亲和力与阳性对照药物Ro5-4864相当,在浓度为100 nmol/L时,其对放射性配体与受体结合的抑制率分别为87%、89%、85%、89%和76%,而Ro5-4864为82%。对水溶性及活性均较好的化合物Ⅰ₈和Ⅰ₁₀ 进行小鼠抗焦虑活性评价结果表明,其具有明显的体内抗焦虑作用。     

抗心律失常药物的研究Ⅱ．2－乙基－3－［4－2－羟基－3－胺丙氧基］苯甲酰］吲哚嗪类化合物的合成及其抗心律失常活性

以吲哚嗪类化合物Ｂｕｔｏｐｒｏｚｉｎｅ为先导物，结合β－受体阻断剂的结构特点，设计合成了９个吲哚嗪类化合物，其化学结构经红外光谱、核磁共振、质谱和元素分析证实。对抗氯仿诱发小鼠室颤结果表明，化合物Ⅱ２、Ⅱ６具有明显的抗心律失常活性。     

齐墩果酸和去氧胆酸衍生物合成及抗血管生成活性研究

目的合成齐墩果酸、去氧胆酸-丙酮基衍生物并评价2者对新生血管生成的影响。方法以丙酮/K2CO3作为反应体系,利用溴代川芎嗪分别与齐墩果酸和去氧胆酸发生亲核取代反应,得到齐墩果酸和去氧胆酸衍生物。采用鸡胚绒毛尿囊膜模型(chorioallantoic membrane,CAM)对其进行在体新生血管活性评价。结果产物结构经1H-NMR、13C-NMR及IR确证为齐墩果酸乙酰甲酯和和去氧胆酸乙酰甲酯;二者作用于CAM模型后,新生血管的数目均比空白组减少。结论在丙酮/K2CO3/溴代川芎嗪反应体系中,得到齐墩果酸和去氧胆酸-丙酮基衍生物;经CAM模型测试发现去氧胆酸-丙酮基衍生物对新生血管具有较好抑制活性。     

羊心脏浦肯野纤维膜钠泵活动的测量

采用细胞内Na⁺选择电极方法,先以不同频率电刺激驱动羊心脏浦肯野纤维标本,使细胞内Na⁺活度(aⁱN+a)上升到不同高度,在停搏即刻测量Na⁺逐出速率(d(a_Naⁱ)/dt)。进而将所测得d(a_Naⁱ)/dt值相对于各时刻a_Naⁱ作相关曲线(SP-IS:Sodium Pump-Internal Sodium),比较其斜率可以了解膜钠泵活动的相对强弱。这种方法可以较迅速、简便地在生理状态下反复测算膜钠泵活动速率。进而用外差法找到相关曲线与纵坐标交点(Na_ia⁺),它反应了静息态时Na⁺内流速率。还观察了pH值变化、高或低K⁺,高或低Ca²⁺及Mn²⁺、异丙基肾上腺素等对膜钠泵活动速率的影响。     

Intensity and Amount of Physical Activity in Relation to Insulin Sensitivity: The Insulin Resistance Atherosclerosis Study

Context.— Exercise training is associated with improved insulin sensitivity (S_I), but the potential impact of habitual, nonvigorous activity is uncertain. Objective.— To determine whether habitual, nonvigorous physical activity, as well as vigorous and overall activity, is associated with better S_I. Design.— A multicultural epidemiologic study. Setting.— The Insulin Resistance Atherosclerosis Study, conducted in Oakland, Calif; Los Angeles, Calif; the San Luis Valley, Colo; and San Antonio, Tex. Participants.— A total of 1467 men and women of African American, Hispanic, and non-Hispanic white ethnicity, aged 40 to 69 years, with glucose tolerance ranging from normal to mild non–insulin-dependent diabetes mellitus. Main Outcome Measure.— Insulin sensitivity as measured by an intravenous glucose tolerance test. Results.— The mean S_I for individuals who participated in vigorous activity 5 or more times per week was 1.59 min^-1·µU^-1·mL^-1·10^-4 (95% confidence interval [CI], 1.39-1.79) compared with 0.90 (95% CI, 0.83-0.97) for those who rarely or never participated in vigorous activity, after adjusting for potential confounders (P<.001). When habitual physical activity (estimated energy expenditure [EEE]) was assessed by 1-year recall of activities, the correlation coefficient between S_I and total EEE was 0.14 (P<.001). After adjustment for confounders, vigorous and nonvigorous levels of EEE (metabolic equivalent levels 6.0 and <6.0, respectively) were each positively and independently associated with S_I (P.01 for each). The association was attenuated after adjustment for the potential mediators, body mass index (a measure of weight in kilograms divided by the square of the height in meters), and waist-to-hip ratio. Results were similar for subgroups of sex, ethnicity, and diabetes. Conclusions.— Increased participation in nonvigorous as well as overall and vigorous physical activity was associated with significantly higher S_I. These findings lend further support to current public health recommendations for increased moderate-intensity physical activity on most days.      

Effects of arotinoid acid on induction of apoptosis and differentiation and telomerase activity and cell cycle in the HL-60 cell line

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｒｏｔｉｎｏｉｄａｃｉｄ(Ｒｏ13 7410 )ｏｎｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｏｆｌｅｕｋｅｍｉａＨＬ 60ｃｅｌｌｌｉｎｅａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｏｆＲＡ Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＨＬ 60ｃｅｌｌｓｗａｓａｓｓｅｓｓｅｄｂｙｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙａｎｄｂｙＮＢＴｒｅｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｒｙｐａｎｂｌｕｅｅｘｃｌｕｓｉｏｎｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒ…     

胆碱能抗炎通路对内毒素复合油酸致大鼠急性肺损伤的影响

目的研究胆碱能抗炎通路(cholinergic anti-inflammatory pathway,CAP)对内毒素复合油酸2次打击致大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的影响及其可能的作用机制。方法 24只雄性Wistar大鼠,体质量250±20g。按数字表法将大鼠随机分为4组,每组6只。①对照组(control group,C组):腹腔注射生理盐水10 mL.kg-1;②急性肺损伤(ALI)组:腹腔注射1%内毒素(lipopolysaccharide,LPS)10 mg.kg-1,30 min后静脉注射油酸(oleic acid,OA)0.15 mL.kg-1;③电刺激(stimulation,ST)组:右颈迷走神经干连接刺激电极,以5 V、2 ms、1 Hz强度持续刺激神经10 min,腹腔注射1%LPS 10 mg.kg-1,再持续刺激神经10 min,20min后静脉注射OA 0.15 mL.kg-1;④他克林(tetrahydroaminoacridine,THA)组:静脉注射胆碱酯酶抑制剂THA 1.5 mg.kg-1,10min后行急性肺损伤操作。各组动物均于130 min后从颈总动脉采血1 mL行血气分析,处死动物采集标本,分别检测肺组织Toll-样受体-2(Toll-like receptor-2,TLR2)和TLR4 mRNA、核转录因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65、血清白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肺组织髓过氧化物酶(mycloperoxidase,MPO)含量和肺组织湿质量-干质量比(wet weight/dry weight,W/D),HE染色观察左肺组织病理学改变。结果 ALI组与C组比较,pH和动脉氧分压(partial pressure of oxygen,PaO2)均显著下降,二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO2)显著升高;肺泡破坏严重,有大量组织液渗出;肺组织W/D及MPO活性均显著增高;肺组织NF-κB p65蛋白表达明显增强;血清IL-6浓度显著升高;与C组相比,其余3个实验组肺组织TLR2和TLR4mRNA表达均显著增加,组间比较差异无统计学意义;ST组和THA组与ALI组比较,pH和PaO2均显著升高,PaCO2显著下降;肺组织病理改变明显改善;肺组织W/D及MPO活性均显著降低;肺组织NF-κB p65蛋白表达及血清IL-6浓度显著下降。结论电刺激迷走神经或者静脉注射他克林可通过激活CAP,减轻LPS复合油酸2次打击致大鼠ALI时的炎性反应;其可能的机制是抑制NF-κB途径活化,在转录前水平发挥抗炎作用,但是不影响ALI时TLR2和TLR4mRNA的活化。     

肌苷衍生物的碱基核糖化研究

目的研究N1-核糖肌苷衍生物的合成反应。方法用丙叉保护肌苷2′,3′-OH,单甲氧基三苯甲基保护5′-OH,在碳酸钾、18-冠醚-6作用下与2,3,5-O-三苄基-1-溴代核糖反应。结果反应得到N1-核糖肌苷衍生物。结论用酰基做保护基易发生酰基重排反应,改用丙叉保护肌苷2′,3′-OH,再用单甲氧基三苯甲基保护5′-OH与2,3,5-O-三苄基-1-溴代核糖在碳酸钾18-冠醚-6作用下得到目的物N1-(2,3,5-O-三苄基-D-核糖)-2′,3′-O-异亚丙基-5′-O-单甲氧基三苯甲基肌苷。     

Assessing glycemia in diabetes using self-monitoring blood glucose and hemoglobin A1c

Context  With the increasing prevalence of diabetes, successful management of blood glucose control is increasingly important. Current approaches to assessing glycemia include the use of self-monitoring of blood glucose (SMBG) and hemoglobin A_1c (HbA_1c). Objectives  To assess the evidence underlying the use of these 2 modalities, to evaluate confounders and sources of error in each test, to describe upcoming developments, and to reach evidence-based conclusions on their optimal use. Data Sources, Study Selection, and Data Extraction  Reports identified from MEDLINE searches (1976-2005) using relevant terms were selected for quality and relevance to the stated questions. Particular attention was paid to larger cohort studies, clinical trials, meta-analyses, and established recommendations. Data Synthesis  If used properly SMBG gives an acceptably accurate reflection of immediate plasma glucose levels. Study results vary, but in general, the evidence supports a positive effect of regular SMBG for improving glycemia, particularly in individuals treated with insulin. The best timing of SMBG and its frequency are controversial issues, but the clinical recommendation is for regular monitoring with frequency depending on the treatment and the instability of glycemia. In the relatively near term, SMBG could gradually be replaced by continuous glucose monitoring. HbA_1c measures long-term glycemic control, reflecting a time-weighted mean over the previous 3 to 4 months. There are a number of physiologic and methodologic confounders that can affect HbA_1c, but standardization of assays has been well established. The main value of HbA_1c is its use as a predictor of diabetic complications and the proven effect of improved control of HbA_1c on complication risk. A reasonable target value for HbA_1c is less than 7%. A new method for measuring HbA_1c may cause significant changes in the recommended levels, the numbers reported, and even the name of the test. Conclusion  Assessing glycemia in diabetes can be a challenge, but approaches are available that promote successful management of blood glucose and may thereby lead to a significant reduction in morbidity and mortality related to diabetes.      

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的兔软骨细胞合成蛋白多糖的影响

观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对体外培养兔关节软骨细胞合成蛋白多糖的影响 ,旨在为临床软骨损伤的修复寻找理论依据。取新西兰幼兔关节软骨组织 ,经消化后将其以细胞密度 2× 1 0 4 /mL接种 ,当细胞融合生长时 ,培养瓶随机分 2组 ,为细胞换液 ,第 1组的培养液同前 ,第 2组的培养液中含有bFGF 1 0 μg/L ,2h后 ,在培养液中加入Na2 35SO4 ,使其含量为 1 85 0MBq/L ,继续培养 1d后测量软骨细胞摄取35SO4 2 - 的量 ,并在电镜和光镜下观测蛋白多糖的形态。结果 :培养基中含有bFGF和缺乏bFGF生长的软骨细胞对35SO4 2 - 的摄取量有明显差异 (两者均P <0 .0 1 )。在光镜和电镜下均可以看到生长在含有bFGF培养液中的单层软骨细胞分泌的蛋白多糖较未加bFGF培养出单层软骨细胞分泌的蛋白多糖多。由此提示bFGF可促进软骨细胞合成蛋白多糖