闭塞性细支气管炎模型大鼠微小RNA差异表达谱分析

背景：目前对于气管移植后并发闭塞性细支气管炎尚无有效的治疗方法。miRNA分子水平机制的治疗策略在防治器官移植后并发症方面具有重要意义。 目的：分析大鼠原位气管移植模拟肺移植后发生闭塞性细支气管炎的微小RNA 表达谱变化。 方法：通过近交系大鼠原位气管移植,模拟建立肺移植闭塞性细支气管炎的动物模型并经病理学证实;通过微小RNA芯片筛选出供体移植气管闭塞性细支气管炎组织中显著差异表达的微小RNA,并选取差异表达显著的miR-146a、miR-155和miR-451进行相对定量研究,应用实时定量RT-PCR(RT-qPCR)法验证芯片结果的可靠性。 结果与结论：原位气管移植后4周经病理检查证实大鼠闭塞性细支气管炎模型成功建立。microarray检测获得29个与闭塞性细支气管炎相关的微小RNA,包括15个微小RNA表达显著上调,14个微小RNA表达显著下调,其中显著上调miR-146a、miR-155和显著下调miR-451的功能涉及免疫炎症反应等。提示微小RNA在肺移植后闭塞性细支气管炎病理进程中发挥着重要的调控作用。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

气管异位移植模型大鼠气管上皮细胞对闭塞性细支气管炎的影响

背景:目前很多实验已证明气管上皮细胞是引起这种慢性炎症的关键因素,气管上皮起到免疫应答的"靶器官"作用,可激活细胞免疫和体液免疫的应答。目的:探讨在大鼠气管异位移植中气管上皮细胞对闭塞性细支气管炎发生的影响。方法:建立大鼠去上皮组织的气管异位模型。将大鼠随机分4组:①上皮组:Wistar大鼠→SD大鼠,气管模型建立不需要消化气管上皮,直接灌入培养液。②去上皮组:Wistar大鼠→SD大鼠,没有上皮细胞的Wistar大鼠气管,将气管模型移植于SD大鼠的背部皮下。③对照组1:Wistar大鼠→Wistar大鼠,气管灌入生理盐水植入皮下。④对照组2:Wistar大鼠→Wistar大鼠,将去上皮组织的气管植于皮下。结果与结论:上皮组气管内发生了闭塞,闭塞率随着移植天数的增加而增加。去上皮组气管内没有堵塞。对照组管内没有闭塞。在大鼠气管异位移植模型中得到证实,气管上皮细胞在闭塞性细支气管炎的发生发展中起重要作用。     

大鼠原位肾脏移植模型的建立

背景：目前已有多种大鼠肾移植模型建模方式,但在移植时间、移植效果等方面都存在各种问题。 目的：探讨建立稳定、可靠的大鼠原位肾脏移植模型的方法。 方法：以SD大鼠为供体Wistar大鼠为受体行原位肾移植术。供体肾动脉、肾静脉在自制橡胶垫片上分别与受体的肾动脉、肾静脉端端吻合,供体输尿管膀胱瓣与受体膀胱吻合。将实验动物随机分为2组,对照组移植后每日腹腔内输注1 mL D-hanks液;环孢素A组移植后每日皮下注射环孢素A 15 mg/kg。记录大鼠生存时间并于移植后第3,5,10天测定血肌酐值,移植后第10天,光镜下观察移植肾病理改变。 结果与结论：大鼠原位肾脏移植成功率为85%。移植后第5,10天环孢素A组血清肌酐值显著低于对照组 (P < 0.05)。环孢素A组大鼠肾移植后存活天数明显长于对照组(P < 0.05),移植肾病理可见排斥明显减轻。提示该模型稳定性强、重复性好,具有较高的成功率。     

羊水干细胞诱导肾移植免疫耐受及对氧化应激的影响

背景：干细胞在器官移植中诱导免疫耐受、延长移植物的存活时间、减轻排斥反应的作用已成为国内外众多学者研究的热点。 目的：以供体羊水干细胞诱导异基因大鼠肾脏移植免疫耐受,探讨免疫耐受的形成机制。 方法：分离培养Wistar大鼠羊水干细胞。选择雄性近交系Wistar大鼠和SD大鼠分别作为肾移植的供、受体,共分4组：假手术组(健康纯系雄性SD大鼠)、同系肾移植组(健康纯系雄性SD大鼠作供受体)、对照组(异系移植组加生理盐水)和实验组(异系移植组加羊水干细胞输注)。建立肾移植模型后,实验组由阴茎静脉缓慢推注3×109 L-1羊水干细胞 1 mL,对照组则缓慢推注生理盐水1 mL。术后第5天检测血清中肌酐、尿素氮、白细胞介素2、干扰素γ水平及氧化应激指标,流式细胞术检测外周血CD4和CD8淋巴细胞百分比,观察移植肾的病理变化。 结果与结论：实验组大鼠血清中尿素氮、肌酐、白细胞介素2、干扰素γ及氧化应激指标和尿蛋白定量、外周血淋巴细胞亚群CD4+,CD8+百分比及CD4+/CD8+比值显著低于对照组,而肌酐清除率则显著高于对照组,肾脏病理损害程度明显轻于对照组。结果显示羊水干细胞可以诱导大鼠肾移植免疫耐受,同时还可以抑制氧化应激水平,改善肾功能,减轻肾损害。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

复合组织及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素10表达与大鼠喉移植急性排斥反应的相关性

背景：喉移植后致炎细胞因子(肿瘤坏死因子α、γ-干扰素等)和抗炎细胞因子(白细胞介素10、白细胞介素4等)之间的相互作用会发生哪些变化呢？ 目的：观察肿瘤坏死因子α、白细胞介素10在大鼠喉移植急性排斥反应期移植喉组织的不同部位和血清中的表达变化,评价其血清水平在预测急性排斥反应中的作用。 方法：进行Wistar→SD大鼠喉移植,移植后依照注射环孢霉素A剂量不同随机分为3组：0 mg组、5 mg组及10 mg组,以未进行喉移植的SD大鼠为正常对照组。 结果与结论：各组移植后第3,7,11天肿瘤坏死因子α、白细胞介素10血清浓度的变化与移植后各相应时间点黏膜上皮及黏膜下层组织中其表达水平的变化均呈正相关。提示,供体喉的高抗原性主要集中于喉的黏膜上皮层及黏膜下层组织;血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素10的浓度可以作为预测喉移植术后急性排斥反应的指标。     

预输注RelB shRNA慢病毒修饰树突细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

背景：肝移植后的排斥反应是威胁患者和移植物长期存活的主要原因。诱导受者产生特异性免疫耐受是解决排斥反应的理想措施。 目的：探讨RNAi RelB树突状细胞预输注诱导大鼠肝移植特异性免疫耐受的可能性。 方法：将近交系雄性清洁级DA(RT1a)大鼠和近交系雄性SPF级Lewis(RT11)大鼠分别作为供、受体,行原位肝移植手术。术前随机配对分为4组：①对照组,受体鼠移植前不做预输注。②治疗组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠RNAi RelB树突状细胞(5×106)。③未成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠未成熟树突状细胞(5×106)。④成熟树突状细胞组：受体鼠移植前7 d静脉输注供体大鼠成熟树突状细胞(5×106)。 结果与结论：与对照组、未成熟树突状细胞组以及成熟树突状细胞组相比,治疗组移植肝的平均生存时间显著延长。移植后第7天,治疗组天冬氨酸转氨酶,总胆红素水平低于对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组(P < 0.01),移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组天冬氨酸转氨酶,总胆红素均有轻微下降,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。移植后第7天,与治疗组比较,对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平升高(P < 0.01),而白细胞介素4、白细胞介素10下降(P < 0.01);移植后第14天治疗组、未成熟树突状细胞组γ-干扰素、白细胞介素2水平均有下降,白细胞介素4、白细胞介素10水平均有升高,两组比较差异仍有显著性意义(P < 0.01)。对照组、成熟树突状细胞组、未成熟树突状细胞组移植后第7天排斥活动指数为8.0-9.0。未成熟树突状细胞组第14天肝细胞、内皮细胞坏死及汇管区炎性细胞浸润进一步增多。治疗组移植后第7天排斥活动指数为6.0-8.0,第14天时排斥活动指数为4.0-5.0。结果提示RNAi RelB树突状细胞预输注可以减轻移植肝排斥程度,延长移植肝生存时间,这是通过间接途径实现的,其机制可能与T细胞的调节和无能有关。     

异位气管移植模型中上皮细胞的增殖与凋亡

背景：异位气管移植中上皮细胞的变化过程尚不清楚,有研究表明在上皮增殖同时伴随有不可逆的细胞死亡,并且气道上皮再生与死亡发生在移植气道闭塞之前。 目的：观察异位鼠气管移植过程中气道上皮细胞的增殖与凋亡情况。 方法：将异体BALB/c小鼠气管植入BALB/c小鼠颈背部皮下,移植后不注射环孢素A。将BALB/c小鼠气管植入C57BL/6小鼠颈背部皮下,一组不注射环孢素A,另一组全程腹腔注射环孢素A。移植后第3,7,14,21,30天苏木精-伊红染色评价气道上皮的完整性、黏膜下炎症细胞浸润和纤维组织增生情况;测定移植气管中BrdU标记指数及TUNEL阳性细胞数。 结果与结论：受体BALB/c小鼠移植后第3天气道上皮细胞轻度损伤丢失,第7~21天,气道上皮逐渐恢复正常,第30天,气道上皮接近正常上皮;BrdU标记指数变化范围为3%~5%;TUNEL阳性细胞数基本无变化。受体C57BL/6小鼠移植后第3天,气道上皮轻度损伤,第7~21天,气管上皮脱落、坏死,开始出现纤维增殖并逐渐加重,第30天时,上皮细胞完全消失,管腔被纤维组织填塞,接近闭塞;移植后第14天,BrdU标记指数达到最高,未注射环孢素A组高于注射环孢素A组(P=0.000),移植后第21,30天,标记指数明显降低;移植后第21天,未注射环孢素A组TUNEL阳性细胞数达到最大值,注射环孢素A组于移植后第14天达最大值。说明异位气管移植上皮增殖同时伴随有不可逆的细胞凋亡,环孢素A可以减轻闭塞性细支气管炎的发病程度,但并不能阻止其发生。     

环孢素A对小鼠气管移植模型中气管上皮细胞的影响

背景：气管上皮的再生及完整性对预防肺移植后闭塞性细支气管炎起着最为关键的作用。 目的：观察环孢素A对小鼠气管异位移植模型中移植气管上皮细胞增殖的影响。 方法：将BALB/c小鼠气管异位移植到C57BL/6小鼠颈背部皮下,建立异位气管移植模型,将受体小鼠随机分组：实验组腹腔注射环孢素A 25 mg/(kg•d),对照组不注射环孢素A。 结果与结论：移植气管病理检查显示,环孢素A具有延缓上皮细胞剥离、减少淋巴细胞浸润以及延缓纤维化过程的作用,但最终仍无法阻止移植物管腔闭塞的发生。上皮细胞定量分析显示,环孢素A可以延缓上皮纤毛细胞下降幅度,延缓上皮细胞增殖高峰期,加快上皮细胞凋亡高峰期。细胞因子检测显示,环孢素A对白细胞介素4分泌具有促进作用,对干扰素γ分泌具有早期促进,中晚期抑制作用。     

骨髓间充质干细胞移植修复慢性阻塞性肺病气道损伤

背景：间充质干细胞能够分化为肺实质细胞并参与肺部损伤的修复,为间充质干细胞在慢性阻塞性肺病中的应用提供了新的方法。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植对大鼠慢性阻塞性肺病气道损伤的修复作用。 方法：将24只雌性大鼠随机分为4组：①骨髓间充质干细胞移植组(12只)：采用熏烟+脂多糖法建立慢性阻塞性肺病大鼠模型,于造模后第1天经尾静脉输注1 mL CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞。②骨髓间充质干细胞对照组(4只)：在第1天和第14天经气管注入生理盐水300 μL,经尾静脉输注1 mL CM-Dil标记的骨髓间充质干细胞。③慢性阻塞性肺病模型组(4只)：采用熏烟+脂多糖法建立慢性阻塞性肺病大鼠模型,于造模后第1天经尾静脉输注1 mL PBS。④健康对照组(4只)：在第1天和第14天经气管注入生理盐水300 μL,经尾静脉输注1 mL PBS。在各组大鼠注射骨髓间充质干细胞后的第1,7,15,30天,进行病理学和血清学检测。 结果与结论：①苏木精-伊红染色结果显示：骨髓间充质干细胞移植组大鼠肺气肿和气道病变较慢性阻塞性肺病模型组轻,但较骨髓间充质干细胞对照组和健康对照组严重。②移植后第1天,骨髓间充质干细胞移植组外周血白细胞总数和中性粒细胞比例高于骨髓间充质干细胞对照组和健康对照组(P < 0.05),随着时间延长,骨髓间充质干细胞移植组白细胞总数和中性粒细胞比例不断降低。③移植后第1天,骨髓间充质干细胞移植组外周血白细胞介素10水平低于骨髓间充质干细胞对照组和健康对照组(P < 0.05),肿瘤坏死因子α和粒细胞集落刺激因子水平高于骨髓间充质干细胞对照组和健康对照组(P < 0.05)。随着移植时间的延长,骨髓间充质干细胞移植组外周血肿瘤坏死因子α水平不断降低,白细胞介素10水平不断升高,粒细胞集落刺激因子水平先升高再降低,其中第7天水平最高。④CM-Dil染色联合免疫组化检测提示,部分 CM-Dil阳性细胞同时CC16表达阳性。结果显示经尾静脉注射骨髓间充质干细胞能够改善慢性阻塞性肺病大鼠的肺部病理损伤,通过分化为气管黏膜上皮细胞以及参与免疫调节对气道进行修复。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

青蒿琥酯对大鼠小肠移植急性排斥反应的作用

背景：随着强效、特异免疫抑制剂的问世,小肠移植的成活率有了一定程度的提高。但这些免疫抑制剂的不良反应及昂贵的治疗费用,让很多患者难以承受。所以,选择有免疫抑制作用的中药在临床上应用是很有意义的。青蒿琥酯有免疫抑制作用,可以减轻小肠移植急性排斥反应,提高小肠移植的成功率。目的：观察青蒿琥酯在大鼠小肠移植急性排斥反应中的作用及其机制。方法：选用封闭群SD大鼠和Wistar大鼠建立同种异基因小肠移植模型,随机分为3组：①同基因移植组(SD→SD)。②异基因移植组(Wistar→SD)。③异基因移植+青蒿琥酯治疗组(Wistar→SD+青蒿琥酯60 mg/(kg•d),腹腔注射)。结果与结论：同基因移植组大鼠存活均超过10 d,并于第10天全部处死。异基因移植组大鼠平均存活(6.73±0.58) d,治疗组大鼠平均存活(8.50±0.74) d,两组间比较差异有显著性意义(P < 0.01)。病理组织学检查显示同基因移植组标本无明显排斥征象,异基因移植组标本在术后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应,治疗组部分标本有轻度排斥表现,但出现较晚、程度较轻。ELISA法检测显示异基因移植组血清白细胞介素2、γ-干扰素表达水平在术后均显著高于其他2组(P < 0.01),治疗组血清白细胞介素2表达水平与同基因移植组比较亦有升高,但差异无显著性意义(P > 0.05),治疗组血清γ-干扰素表达水平高于同基因移植组(P < 0.05)。结果可见青蒿琥酯对大鼠小肠移植急性排斥反应有抑制作用,其作用机制可能与抑制白细胞介素2、γ-干扰素等细胞因子的分泌表达有关。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

Reproduction of the obliterative bronchiolitis lesion after heterotopic transplantation of mouse airways.

Obliterative bronchiolitis, characterized histopathologically by airway inflammation and occlusion of small airways by vascularized fibrous tissue, constitutes an important threat to the long-term survival of lung and heart-lung transplant recipients. The pathogenesis of obliterative bronchiolitis is poorly understood, and successful preventative or treatment strategies are not available. We sought to develop a preclinical model system of obliterative bronchiolitis by transplanting murine airway grafts, consisting of tracheas and main bronchi, into the subcutaneous tissue of allogeneically mismatched recipient animals. By 10 days after transplantation, allografts demonstrated subepithelial and/or peritracheal inflammation, epithelial necrosis, and early fibroproliferation. Grafts harvested 21 days after transplantation demonstrated fibroproliferation in the airway wall or lumen in nine of 10 allografts versus 0 of 10 isografts (P = 0.0001). In addition, abnormal epithelium (ie, nonciliated cuboidal, squamous, or absent) was seen in all allografts, while nine of nine isografts demonstrated normal respiratory epithelium (P = 0.0003). Although differences exist between this model and the chronic rejection process in human lung transplant recipients, these findings reproduce the characteristic features of obliterative bronchiolitis and demonstrate that this lesion can result from allograft rejection. This model will be useful for studying the pathogenesis, prevention, and treatment of obliterative bronchiolitis after lung transplantation.     

p53基因转移至移植心脏的安全性

背景：课题组前期实验表明野生型p53基因具有抑制移植心脏冠状动脉内膜增厚的作用。 目的：研究腺病毒介导的野生型p53基因转移至移植心脏的安全性。 方法：以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,在取出供心后,经供心冠状动脉分别注射携带野生型p53基因的重组腺病毒液、携带β-半乳糖酐酶基因的重组腺病毒液和生理盐水800 µL,4 ℃静置30 min后进行心脏移植。 结果与结论：移植后 5 d,重组腺病毒液组的供心冠状动脉组织可见野生型P53蛋白的表达。移植后28 d,未见受体大鼠血液生化学指标异常和重要脏器的病理性改变,RT-PCR扩增未见腺病毒E1A区产物。说明在心脏移植中,将腺病毒介导的野生型p53基因转移至移植心脏是安全的。     

A human-mouse chimeric model of obliterative bronchiolitis after lung transplantation

Obliterative bronchiolitis is a frequent, morbid, and usually refractory complication of lung transplantation. Mechanistic study of obliterative bronchiolitis would be aided by development of a relevant model that uses human immune effector cells and airway targets. Our objective was to develop a murine chimera model that mimics obliterative bronchiolitis of lung allograft recipients in human airways in vivo. Human peripheral blood mononuclear cells were adoptively transferred to immunodeficient mice lacking activity of T, B, and NK cells, with and without concurrent transplantations of human small airways dissected from allogeneic cadaveric lungs. Chimerism with human T cells occurred in the majority of recipient animals. The chimeric T cells became highly activated, rapidly infiltrated into the small human airway grafts, and caused obliterative bronchiolitis. In contrast, airways implanted into control mice that did not also receive human peripheral blood mononuclear cell transfers remained intact. In vitro proliferation assays indicated that the chimeric T cells had enhanced specific proliferative responses to donor airway alloantigens. This model confirms the critical role of T cells in development of obliterative bronchiolitis among human lung allograft recipients and provides a novel and easily implemented mechanism for detailed, reductionist in vivo studies of human T-cell responses to allogeneic human small airways.     

No gender difference in development of obliterative airway disease in rat tracheal allografts

The aim of this study was to test whether donor and recipient gender influence the development of obliterative airway disease in an established rat model of human bronchiolitis obliterans. Rat tracheas were transplanted from male and female Brown-Norway donors into male and female Lewis recipients. Grafts were harvested at days 7, 14 and 21 for morphometric studies and molecular analysis by real-time PCR. At each time point, both epithelial injury and the extent of luminal occlusion of the tracheal allografts were similar between the groups. Furthermore, intragraft mRNA expression for transforming growth factor (TGF)-beta1, interleukin (IL)-2 and interferon (INF)-gamma did not differ between the groups. Our data suggest that gender has no impact on the development of obliterative airway disease in this transplant model.     

Mechanism of Immune Hyporesponsiveness Induced by Recipient-derived Immature Dendritic Cells in Rat Liver Transplantation

Objective: The use of donor-derived immature dendritic cells (imDC) has become a promising approach to induce immune tolerance or immune hyporesponsiveness. However, donor-derived imDC needs to be harvested for a few days and transfused into the recipient in 5-10 days before transplantation, which is practically impossible in a clinical setting where donor organs are mainly harvested from cadavers. Moreover, donor-derived imDC might be cleared by allogeneic reaction offsetting induced immune tolerance or immune hyporesponsiveness. In our study, we further explored the underlying mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC by transfusing these imDC into rats in 1 day before liver transplantation. This paper is to study the mechanism of immune hyporesponsiveness induced by donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC and its protection of liver grafts in rats. Methods: 40 SD rats (donor) and 40 male Wistar rats (recipient) were randomly divided into 4 groups: control, cyclosporine A(CsA), mature DC (mDC), and imDC; with 10 SD rats and 10 Wistar rats for each group. Animal models of acute graft rejection were established with these rats. Corresponding treatments were given before or after transplantation. In the control group, Wistar rats received no treatment other than liver transplantation. In the CsA group, Wistar rats underwent liver transplantation plus CsA treatment (10 mg/kg·d) in the starting day 2 after transplantation. For the mDC group, recipient-derived mDC(1×106/rat) were infused intravenously via the dorsal vein of the penis to recipient rats. For the imDC group, imDC (1×106/rat) were injected into recipient rats via the dorsal vein of the penis. In each group, 5 recipients were executed at 10 days after transplantation; the remaining five recipients were kept for the observation of survival time. Blood samples were collected for the measurement of ALT and TBIL; IL-2, IFN-γ, IL-4 and IL-10 and levels were measured with double-antibody sandwich ELISA. Liver tissue was harvested for HE staining and the observation of histological features. Acute rejection was evaluated with Banff classification. Expression levels of Fas-L/Fas in the grafts were detected by immunohistochemical staining; and western blot was used to detect the expression level of Scurfin. Results: The median survival times (MST) of the liver allografts in the CsA and imDC group were significantly longer than those in the control or mDC group (P<0.05). The serum levels of ALT and TBIL in the control and mDC groups were significantly higher than those of the CsA or imDC group(P<0.05). Compared with the CsA and imDC group, the levels of IL-2 and IFN-γ were higher but the levels of IL-4 and IL-10 were lower than those of the control and mDC groups(P<0.01). Slight or no rejection reaction was found in the CsA and imDC groups (P<0.05). The expression level of Scurfin protein in CD4+ CD25+ T cells of the imDC group was significantly higher than that of three other groups(P<0.05). Conclusion: Donor-antigen-unloaded recipient-derived imDC is an effective treatment in inducing immune hyporesponsiveness by blocking indirect recognition in rat liver transplantation model. Survival span was significantly prolonged by its protective effect. The mechanism of immune hyporesponsiveness induced by imDC transfusion may involve the preprocesses of T cell apoptosis induction, immune tolerance or hyporesponsiveness in T cells, induction of the shift in THl/TH2 balance, selection activation of Th2 subset, or induction of regulatory T cell.     

减体积肝移植模型大鼠肝脏能量差异蛋白的表达

背景：目前,蛋白质组学是一项比较成熟的科研技术,已经在肝移植基础研究领域中初步得到应用,但在大鼠减体积肝移植相关研究中的应用未曾报道。 目的：应用蛋白质组学相关技术探讨大鼠减体积肝移植后与肝脏能量代谢蛋白相关的差异蛋白。 方法：肝移植的供体是Lewis雌性大鼠,受体是Wistar雄性大鼠,供受体体质量差约20 g;移植肝质量/受体肝质量≈50 %。采用改良减体积肝移植模型。获取供体肝组织过程中按照要求进行减体积,修整供体肝脏,将门静脉和肝下下腔静脉分别套入不同型号的套管以备套入受体的门静脉和肝下下腔静脉,胆道用细小支撑管植入供体的胆管中以备插入到受体的胆管中;最后进行受体的肝移植,受体先切除受体的原来肝脏组织,然后将准备好的供体肝脏植入受体中。造模后1,3和7 d获取移植肝脏组织,然后与预先获取冻存的供、受体肝脏组织应用蛋白组学技术建立双向凝胶电泳图谱,再利用串联质谱分析及数据库对差异表达的蛋白质点进行鉴定。 结果与结论：采用变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择,结果总共发现了72个差异点,通过鉴定,最终32个蛋白的功能比较明确,其中有ATP合成酶β亚基、电子转化黄素蛋白β多肽和质子转运ATP合成酶3个蛋白参与了细胞能量代谢的过程,其分布于肝移植后的第1和7天,占6%。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

受体大鼠非清髓嵌合的建立及对供体细胞反应性的监测

目的：通过非清髓方式诱导嵌合体而产生免疫抑制。方法：动物分为三组：A组（BMC移植组）经全身辐照雌性SD大鼠于D0经尾静脉输注雄性Wistar大鼠骨髓细胞（BMC）。B组（BM-MSCs移植组）经全身辐照雌性SD大鼠于D0经尾静脉输注雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）。C组（对照组）经全身辐照大鼠于D0经尾静脉输注生理盐水0.8mL。随后测定异基因嵌合体量的变化,及单向混合淋巴细胞培养的刺激效应。结果：A、B组动物在21天后均检测到一定比例的嵌合体细胞,流式细胞仪检测A组嵌合率明显高于B组（P〈0.05）。两组在预处理后第35天观测发现嵌合率均明显降低。A组较B组和C组的受体淋巴细胞增殖显著减弱,B组较C组也显著减弱。结论：选用的非清髓预处理方案可使受者体内形成混合性嵌合体,大鼠耐受性较好,移植后供者细胞植入一定时间内嵌合稳定、死亡率低,是一种有效的移植免疫抑制诱导方法。