NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质修补腹壁疝

背景：与其他疝修补材料相比,脱细胞真皮基质具有易血管化、抗感染、从而可用替代传统补片用于感染腹壁缺损重建等特点。 目的：观察NaOH消蚀法制备的脱细胞真皮基质作为修补材料应用于腹疝的应用价值。 方法：以全厚猪皮制成脱细胞真皮基质,45只SD雄性大鼠制备腹壁疝模型,随机数字表法分为腹壁疝组：直接缝合皮肤,Marlex网组和脱细胞真皮基质组：分别应用大小为3.5 cm×4.0 cm的Marlex网和脱细胞真皮基质缝合皮肤;观察修复后1周时有无腹壁疝发生,脱细胞真皮基质组修复后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于苏木精-伊红染色,光镜观察。修复后第5周Marlex网组和脱细胞真皮基质组各取6只用于抗张力试验。 结果与结论：术后1周脱细胞真皮基质组与Marlex网组腹壁疝发生率均显著低于腹壁疝组(P < 0.001)。脱细胞真皮基质的胶原纤维无明显变化,即有少量成纤维细胞植入,术后2周可见新生血管,术后5周脱细胞真皮基质内部血管密度基本稳定。将单独脱细胞真皮基质片与Marlex网行抗张力试验,Marlex网的抗张力显著高于脱细胞真皮基质(P < 0.001)。但植入体内5周后,脱细胞真皮基质筋膜组织的抗张力高于Marlex-筋膜组织(P < 0.05)。提示复合消蚀制备的脱细胞真皮基质可以作为良好的疝修补材料。     

异体脱细胞真皮基质作为组织工程皮肤真皮支架的可行性*

背景：组织工程皮肤是目前研究皮肤损伤修复重建的重要手段之一,异体脱细胞真皮基质不存在免疫原性,在异体移植时不会发生排斥反应,是比较理想的真皮替代物。 目的：观察异体脱细胞真皮基质的组织相容性。 方法：以正常人体真皮组织作为对照,通过体外、体内细胞毒性实验检测异体脱细胞真皮基质的组织相容性,以膨胀度、饱和含水量及生物力学分析检测异体脱细胞真皮基质的亲水性及机械性能。 结果与结论：真皮基质中未见任何细胞成分,其网孔直径介于100~180 μm 之间。脱细胞真皮基质组饱和含水量为(69.6±3.97)%,膨胀度2.30±0.42,最大断裂力为(3.082±0.046) N,与对照组相比,差异无显著性意义(P > 0.05)。体内外细胞毒性检测,未见明显细胞生长抑制及免疫排斥反应。提示异体脱细胞真皮基质机械性能接近正常皮肤,组织相容性好,免疫排斥反应小,是构建组织工程皮肤理想的真皮材料。     

NaOH消蚀法制备胎儿脱细胞真皮基质的研究

目的：探索NaOH消蚀法对胎儿真皮基质的成分及其形态结构的影响。方法：使用NaOH消蚀法制备胎儿皮肤的脱细胞真皮基质(ADM)，应用组织化学和免疫组织化学染色方法检测细胞的余留及细胞外基质成分的破坏情况，应用扫描电镜观察ADM的构筑。结果：NaOH消蚀处理16h即可去除真皮细胞成分。制备的ADM韧性好，勿需戊二醛交联。弹性纤维的含量有所减少而胶原纤维形态完整，排列正常，保留了基本的真皮构筑。HLA—DR呈阴性，Fibronectin(FN)呈弱阳性，Laminin(LN)和Ⅳ型胶原均呈阴性。结论：NaOH消蚀法简易经济，去除细胞成分较彻底，所制备的ADM韧性好，胶原纤维形态完整，排列正常，但对基膜的成分及结构破坏较重。     

纳米银/脱细胞真皮基质的制备及抗菌效果评价

目的探讨含纳米银的脱细胞真皮基质的制备方法,以解决脱细胞真皮基质无抗菌活性的缺点;通过各种方法评价新型复合敷料的抗菌效果。方法通过倍比稀释法和基内接种法测定纳米银溶液的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度;将脱细胞真皮基质浸渍在不同浓度的纳米银溶液中一定时间,制备出含不同浓度纳米银的复合敷料;通过Kirby-Baucer方法比较不同浓度浸渍的脱细胞真皮基质的抑菌效果。结果纳米银溶液对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度是8mg/L,最低杀菌浓度是64mg/L;纳米银溶液对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度8mg/L,最低杀菌浓度是32mg/L。浸渍吸附法制备出含有不同浓度纳米银的脱细胞真皮基质。纳米银/脱细胞真皮基质对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌效果优于纳米银医用抗菌敷料。结论纳米银/脱细胞真皮基质拥有良好的抗菌和杀菌效果,可望成为具有抗菌活性的生物敷料。     

脱细胞异体真皮基质与人脂肪干细胞的生物相容性

背景：脱细胞异体真皮基质具有优良的生物相容性和组织细胞诱导功能。 目的：评价人脂肪干细胞与脱细胞异体真皮基质的生物相容性。 方法：取健康成年人吸脂术后的脂肪组织分离脂肪干细胞,并行原代与传代培养,传至第3代,将细胞与脱细胞异体真皮基质联合体外培养3,7 d,倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞在支架材料上的黏附、生长及增殖情况,并计算细胞在材料上的黏附率;XTT比色法检测细胞的生长增殖情况。 结果与结论：脂肪干细胞在支架材料上分布均匀,24 h内细胞开始伸展、黏附,二三天完全伸展变形,以梭形为主,呈网状排列;随着培养时间延长,支架上的细胞逐渐增多;人脂肪干细胞细胞与脱细胞异体真皮基质混合培养后平均黏附率为95.03%,并保持正常的生长增殖速度,表明支架对细胞具有良好的黏附性;脱细胞异体真皮基质材料与人脂肪干细胞复合后相容性良好。     

异体脱细胞真皮基质的研究进展

异体脱细胞真皮基质是天然真皮的脱细胞基质,经过冷冻干燥形成的三维支架结构。作为一种新兴的生物工程支架,它通过空间诱导和组织替代作用修复组织缺损。由于其源于人体正常组织,经临床应用证实,异体脱细胞真皮基质拥有优秀的组织相容性,现已广泛地应用于临床各科的创伤修复。     

脱细胞真皮基质修复组织缺损研究进展

脱细胞真皮基质(ADM)是一类经过特殊方法分离皮肤表皮与真皮,去除真皮层内的朗格汉斯细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等附件细胞以及抗原成公主要组织相容性复合物(MHC)而仅保留胶原纤维、弹力蛋白等细胞外基质的特殊生物材料.ADM不引起机体排斥反应,为组织修复提供了良好支架,便于血管化和宿主细胞植入.其制备过程包括分离表皮与真皮、脱细胞成分及打孔、冷冻干燥等.根据分类方法的不同,ADM可分为同种异体ADM和异种ADM、补片型及注射型ADM、交联型与非交联型ADM,同时已有产品相继问世,可根据临床需要进行选择.ADM现已广泛应用于各外科领域,如深度皮肤烧伤、乳腺癌术后乳腺重建、修复口腔黏膜、腹壁疝及声带麻痹等.因其自身特点,临床应用前景广阔.就ADM近年来的研究进展作一综述.     

脱细胞真皮基质补片治疗小儿肛瘘

背景：采用异体脱细胞真皮基质材料填塞治疗成人低位肛瘘具有较好的临床效果。 目的：探讨脱细胞异体真皮基质补片修补小儿肛瘘的可行性以及方法。 方法：将138例肛瘘患儿随机分为2组,用可吸收线将脱细胞异体真皮基质生物补片固定在直肠黏膜下,A组双层缝合封闭内口,B组不游离、缝合内口。 结果与结论：随访观察6个月,所有病例肛周无红肿,外观无异常,外口硬结消失,内口愈合良好,无肛门狭窄及肛门外形改变。两组在修复后均有部分患儿出现瘘口出流便,但未经特殊处理,症状均自行消失,痊愈。A组术后瘘口漏便患儿人数较B组多(P < 0.01),出现时间较B组早(P < 0.05),但总体愈合时间无差异。说明手术中仅固定补片于内口,而不游离、缝合内口即可达到满意疗效。     

优选人脱细胞真皮基质及荧光标记示踪与其复合培养的成纤维细胞

目的 优选人脱细胞真皮基质(ADM)并评价其生物学特性. 方法 通过高渗盐-NaOH消蚀法(A组)、高渗盐-十二烷基硫酸钠(SDS)法(B组)和DispaseⅡ-Triton X-100法(C组)制作人脱细胞真皮基质,以特殊染色、免疫组织化学观察3种方法 制作ADM的组成成分;四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验评价3种方法 制作ADM的细胞毒性反应;细胞培养法评价其细胞相容性,优选ADM .重组腺病毒绿色荧光表达载体(Ad-GFP)转染的人成纤维细胞(FB)接种在优选ADM上,荧光显微镜观察 FB的生长情况. 结果 3种方法 均能够保留胶原纤维、弹性纤维, A组和C组能够完全脱去细胞,B组未能完全脱去细胞;A组和B组制备ADM细胞毒性反应小于1级;C组制备ADM细胞毒性反应大于1级.A组与B组24h 3T3细胞贴壁数有统计学意义( P <0.05),3T3细胞能够在A组ADM表面贴附;优选A组ADM.转染Ad-GFP的FB在优选ADM上生长和增殖良好. 结论 高渗盐-NaOH消蚀法制备的ADM蕴涵丰富的生物信息,细胞毒性小,生物相容性好,是一种很好的生物支架材料.     

脱细胞真皮基质水凝胶的制备及生物学评价

背景：最近脱细胞真皮基质水凝胶因其可注射性和能填充不规则空间,在组织填充与修复中有着广阔的应用前景,而细胞相容性和生物相容性是组织修复的关键,探究脱细胞真皮基质水凝胶的相容性具有重要意义。目的：构建一种脱细胞真皮基质水凝胶,用于组织填充和修复。方法：制备可注射型脱细胞真皮基质水凝胶,扫描电镜下观察其微观形貌。将质量浓度8,10 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别与骨髓间充质干细胞共培养,检测细胞增殖与细胞相容性。将蛋白质量浓度0.25,0.5 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别注射至同一SD大鼠背部皮下不同部位,术后2,4周,观察水凝胶降解情况。将蛋白质量浓度1,1.5,2 g/L的脱细胞真皮基质水凝胶分别注射至同一SD大鼠背部皮下不同部位,术后8,16周,观察水凝胶降解情况,并进行组织学分析。结果与结论：(1)扫描电镜下可见,脱细胞真皮基质水凝胶呈现一种不规则随机走向的多孔纤维结构,孔径大小不一。(2)共培养1,3,5 d后,两种浓度的水凝胶对骨髓间充质干细胞的增殖无影响;共培养1,2,3 d后的Live/Dead染色显示,两种浓度的水凝胶对骨髓间充质干细胞的增殖无影响,但水凝胶上的细胞...     

胰岛素样生长因子在正畸牙牙周组织改建中的作用

背景：正畸牙牙周组织改建主要是牙槽骨的改建。胰岛素样生长因子是牙周组织改建的重要因子,它在细胞的增殖、分化及个体的生长发育中发挥着重要的促进作用。 目的：综述胰岛素样生长因子在牙周组织改建中的作用。 方法：运用计算机检索PubMed,中国知网以及贵州省数字图书馆等数据库,查阅至今有关胰岛素样生长因子在牙周组织改建中作用的中英文文献。关键词“胰岛素样生长因子;牙周组织;改建;insulin-like growth factor;Periodontal tissue;remodeling”。纳入胰岛素样生长因子与牙周组织改建中作用相关的文献进行归纳分析。 结果与结论：胰岛素样生长因子属于胰岛素家族的一类多肽,对牙周膜中的成骨细胞、成纤维细胞以及诱导间充质细胞等,有促进其细胞迁移、增殖、分化、胶原和基质合成、增强碱性磷酸酶活性及在损伤修复中发挥着重要作用。在正畸治疗中,使用适宜矫治力的同时可适当运用能促进牙周组织改建的胰岛素样生长因子,加快正畸牙齿的移动,缩短患者的矫治时间。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

周期性张应力下人牙周膜成纤维细胞结缔组织生长因子的表达

背景：前期研究发现,周期性张应力在一定时间内可以诱导人牙周膜成纤维细胞增殖。 目的：观察周期性张应力对人牙周膜成纤维细胞表达结缔组织生长因子的影响;明确JNK、p38MAPK、PI3K信号通路在周期性张应力诱导人牙周膜成纤维细胞表达结缔组织生长因子过程中的作用。 方法：采用多通道细胞牵张应力加载系统对体外培养的人牙周膜成纤维细胞分别给予周期性张应力刺激1,6,12,24 h,并以未加力组为对照组。对加力12 h的细胞分别添加JNK、p38MAPK、PI3K信号通路特异性抑制剂预处理,并与未加抑制剂的细胞作对比。应用ELISA法检测培养细胞分泌到上清液中的结缔组织生长因子蛋白;应用荧光定量PCR技术检测细胞结缔组织生长因子mRNA的表达。 结果与结论：加载周期性张应力组与对照组相比较,1 h人牙周膜成纤维细胞表达结缔组织生长因子开始增强、6 h表达明显增强,12 h达最高峰值、24 h表达开始下降。加入JNK信号通路特异性抑制剂后,人牙周膜成纤维细胞表达结缔组织生长因子出现下降;而加入p38MAPK信号通路和PI3K信号通路的特异性抑制剂后结缔组织生长因子表达未发生明显改变。提示在一定时间范围内,周期性张应力引起结缔组织生长因子mRNA与蛋白水平的表达与时间呈依赖性升高;其后随着时间的延长,结缔组织生长因子的表达则开始下降。周期性张应力通过JNK通路的介导调控人牙周膜成纤维细胞结缔组织生长因子的表达。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

成熟瘢痕组织与正常皮肤脱细胞真皮基质的生物学性能比较

BACKGROUND: It is necessary to carry out multiple operations to remove the scar in patients with large area of scar, and whether the scar tissue can be recycled has become the focus of the study. OBJECTIVE: To compare the tissue structure, biomechanical properties and biocompatibility of the acellular dermal matrix of mature scar tissue and normal skin. METHODS: The acellular dermal matrix was prepared from the human mature scar tissue and the normal skin around the scar. Subsequently, histological and scanning electron microscope observations were performed, and biomechanical properties were detected using universal tensile testing machine. Then, the acellular dermal matrix from mature scar tissue and normal skin was co-cultured with fibroblasts for 10 days, respectively, and the cell growth curve was drawn. Additionally, the acellular dermal matrix from mature scar tissue and normal skin was subcutaneously implanted into the dorsal tissue of Sprague-Dawley rats, respectively and histological observation was conducted at 4, 8 and 12 weeks after implantation. RESULTS AND CONCLUSION: There were many gaps but no cellular components in the acellular dermal matrix, in both two groups. Collagen fibers of the acellular dermal matrix derived from mature scar were looser than that of the normal skin, and arranged slightly irregularly; the biomechanical properties of the acellular dermal matrix derived from mature scar were similar to that of the normal skin, which exhibited appropriate flexibility and strength. There was no significant difference in the growth state of the two kinds of acellular dermal matrix, and the growth curve was basically consistent. After 4 weeks of implantation, more inflammatory cells infiltration could be found in the mature scar group, and in contrast, only a few inflammatory cells infiltration appeared in the normal skin group, These inflammatory reactions disappeared with time in both two groups. Besides, collagen fibers arranged in neat, and small vessels grew into the implants in both two groups. In conclusion, the tissue structure, biomechanical properties and biocompatibility of the acellular dermal matrix derived from scar tissue are almost consistent with those of the human normal skin.     

血小板衍化生长因子DD刺激大鼠肾成纤维细胞增殖及向肌成纤维细胞的转化

背景：血小板衍化生长因子可诱导肾小球系膜细胞及肾间质多种细胞增殖、迁移、转化及细胞外基质的过表达。目的：观察血小板衍化生长因子DD/血小板衍化生长因子βR信号通路激活对大鼠肾成纤维细胞细胞增殖及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法：体外培养正常大鼠肾成纤维细胞(NRK-49F),按照血小板衍化生长因子DD刺激质量浓度分为对照组、1 μg/L组、10 μg/L组、50 μg/L组、100 μg/L组,然后根据50 μg/L 血小板衍化生长因子DD刺激不同时间分为对照组、12 h组、24 h组、48 h组。CCK8检测不同血小板衍化生长因子DD质量浓度及血小板衍化生长因子DD作用不同时间对NRK-49F增殖的影响;Real-time PCR检测各质量浓度组血小板衍化生长因子βR、α-平滑肌肌动蛋白mRNA变化;Western blot检测各浓度组血小板衍化生长因子βR、α-平滑肌肌动蛋白蛋白表达变化。结果与结论：与对照组相比,血小板衍化生长因子DD可明显刺激NRK-49F细胞增殖,呈现剂量依赖性及时间依赖性。血小板衍化生长因子DD可剂量依赖性刺激其相应血小板衍化生长因子βR及α-平滑肌肌动蛋白在mRNA水平及蛋白水平上的表达增加。提示血小板衍化生长因子DD/血小板衍化生长因子βR信号通路的激活可显著刺激NRK-49F细胞的增殖及向肌成纤维细胞的转化。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

矿化明胶静电纺丝诱导牙周组织成骨的有效性

背景：当前国内外关于矿化明胶电纺丝纤维对牙周组织成骨诱导有效性的文献较少。 目的：观察矿化明胶静电纺丝对牙周膜成纤维细胞增殖及向成骨方面分化的影响。 方法：将人牙周膜成纤维细胞分别与未矿化明胶静电纺丝、纳米羟基磷灰石矿化1 d的明胶静电纺丝、纳米羟基磷灰石矿化5 d的明胶静电纺丝复合培养,采用MTT法检测培养1,4,7,10,13 d的细胞增殖;应用生化仪检测培养1,7,14 d的细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：培养10 d时,矿化明胶静电纺丝膜组表面的牙周膜细胞分布均匀,生长良好,铺展成片状并分泌大量细胞外基质,细胞与材料结合紧密,且以矿化5 d组效果更明显,细胞生长密度和状态优于未矿化明胶静电纺丝膜组。不同时间点的细胞增殖活性与碱性磷酸酶活性：矿化5 d明胶静电纺丝膜组>矿化1 d明胶静电纺丝膜组>未矿化明胶静电纺丝膜组(P均< 0.05)。表明经纳米羟基磷灰石矿化的明胶静电纺丝,可促进牙周膜成纤维细胞增殖及向成骨方向分化,且矿化时间越长效果越明显。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

胰岛素样生长因子Ⅰ转染对脂肪干细胞TWEAK/Fn14信号通路的影响

背景：胰岛素样生长因子Ⅰ具有诱导间充质干细胞向软骨细胞分化的能力,通过基因转染的方式将胰岛素生长因子Ⅰ转染入脂肪干细胞或许能够更好的促进脂肪干细胞向软骨细胞分化。 目的：探讨胰岛素样生长因子Ⅰ基因对脂肪间充质干细胞体外定向成软骨分化能力以及对TWEAK/Fn14信号通路的影响。 方法：构建慢病毒载体pLVX-IGF-I-IRES-ZsGreenl基因并转染第3代人脂肪间充质干细胞,诱导细胞向软骨分化。同时将pLVX-IRES-ZsGreenl转染的脂肪间充质干细胞设为绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组,单纯脂肪间充质干细胞设为对照组。 结果与结论：与绿色荧光蛋白/脂肪间充质干细胞组和对照组相比,胰岛素样生长因子Ⅰ/脂肪间充质干细胞组细胞中TWEAK mRNA表达水平降低,而胰岛素样生长因子Ⅰ,Col2al和Sox9 mRNA的表达水平增加,Col2a1表达水平增加,基质金属蛋白酶3以及TWEAK的表达降低。提示pLVX-IGF-I-IRES-ZsGreenl慢病毒转染脂肪间充质干细胞后可获得胰岛素样生长因子Ⅰ的高效表达,且能下调细胞TWEAK基因及蛋白表达,可促进体外培养的脂肪间充质干细胞转化为软骨细胞。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

应用脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究

目的： 采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料，接种人脐带血管内皮细胞，构建组织工程血管。方法: 以新鲜猪胸主动脉为原材料， 1% Triton X-100为脱细胞试剂，制备脱细胞血管基质；采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性，并进行组织学观察及力学性能测定。用人脐带内皮细胞经培养和扩增后，再与所制备的脱细胞血管基质进行复合培养，光学显微镜及扫描电镜观察内皮细胞生长状况。结果: 1% Triton X-100处理84h的猪胸主动脉，既能完全脱除血管中细胞，同时又完整保留血管基质的三维结构；对脱细胞血管基质冷冻干燥24 h，120 ℃下热交联12 h，能有效提高材料的机械强度，断裂强度可达到1.70 MPa。扫描电镜下可见，脱细胞血管基质与内皮细胞复合培养7 d，已形成典型血管内膜样结构。结论: 经改性后的脱细胞血管基质与内皮细胞具有良好的相容性，用其作为支架材料与内皮细胞复合培养，有望应用于构建组织工程化血管。     

异种(猪)脱细胞真皮基质粉对表皮细胞和成纤维细胞的促进作用

目的观察冷冻研磨获得的脱细胞真皮基质粉(ADMP)生物学性状,探索高纯度且保留生物活性的异种(猪)ADMP对表皮细胞和成纤维细胞生长的支持及在皮肤创伤修复中的应用。 方法选取幼龄长白猪背部皮肤,经生物酶法脱细胞、冷冻干燥后经过不同冷冻研磨程序得到异种(猪)ADMP,再由⁶⁰钴辐照获得无菌异种(猪)ADMP;通过扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察异种(猪)ADMP颗粒大小及胶原形态,确定适合应用的研磨程序;通过MTT法检测HaCaT细胞和BJ人皮肤成纤维细胞在不同浓度异种(猪)ADMP包被下的黏附作用,确定异种(猪)ADMP实现细胞最大黏附的浓度范围;DMEM培养液基添加异种(猪)ADMP为实验组,单纯DMEM培养液基为对照组,使用实时细胞分析技术分析BJ人皮肤成纤维细胞迁移指数,验证异种(猪)ADMP对成纤维细胞的促迁移作用;原代表皮细胞接种在异种(猪)ADMP培养液8 d,绘制增殖曲线,检测异种(猪)ADMP对原代表皮细胞的促增殖作用,同时免疫荧光检测原代表皮细胞表面成熟与分化蛋白的表达。对数据进行Student′s t－检验。 结果1、2、3、5、7、10次循环研磨获得异种(猪)ADMP,肉眼可见全部为白色、无块状,其中1、2、3次循环呈较粗颗粒;5、7、10次循环呈现集中均匀趋势,粒径分布在0～12 μm之间。其中5次循环粒径(13.00±2.10) μm与7次循环[(6.00±0.96) μm比较,差异有统计学意义(t＝6.093,P＝0.0002)。异种(猪)ADMP透射电子显微镜下发现,不同循环次数获得的异种(猪)ADMP均能保留大量胶原分子。BJ人成纤维细胞和HaCaT细胞随包被浓度的增加,细胞黏附作用不断增强,浓度高于750 μg/cm²,无明显变化。实时细胞分析技术检测BJ人皮肤成纤维细胞在DMEM培养液基对照组培养液72 h后的迁移指数为1.21±0.10,而异种(猪)ADMP培养液基试验组的迁移指数为3.66±0.11,两组比较差异有统计学意义(t＝22.24,P＝0.002)。在异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞形态统一增殖迅速,对照组出现一定比例的分化细胞,试验组与对照组第5天细胞数分别为(4.11±0.28)×10⁵、(1.10±0.12)×10⁵个,两组比较差异有统计学意义(t＝13.51,P＝0.005);第8天细胞数分别为(5.00±0.48)×10⁵、(3.05±0.30)×10⁵个,两组比较差异有统计学意义(t＝4.87,P＝0.039),增殖曲线显示试验组在接种即日培养液至第5天,一直处于指数增长期。荧光染色中异种(猪)ADMP培养液的原代表皮细胞E-cad全部表达,少量表达角蛋白10,整合素α6几乎全部强阳性,角蛋白14全部表达并有部分强阳性,Ki-67抗原表达率高。 结论通过生物酶解和冷冻研磨获得的异种(猪)ADMP对参与皮肤创伤修复最重要的表皮细胞和成纤维细胞,具有促进其增殖和迁移的作用,未来可进一步应用于皮肤创伤修复。     

新型海藻酸钠组织工程支架材料与人成纤维细胞的相容性

目的 利用N-乙基.N'-[(3-二甲氨基)丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)作为催化剂-乙二胺作为交联剂制备新型海藻酸钠组织工程支架材料(简称材料)并测试其细胞相容性.方法 以体外培养的人成纤维细胞作为对象.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测材料浸渍液对细胞增殖情况的影响,光镜下观察材料浸渍液中细胞的生长状况.将人成纤维细胞悬液接种于材料表面,制备人成纤维细胞-材料复合物,扫描电镜下观察培养7 d的复合物表面细胞的黏附和生长状态,评价材料的细胞相容性.结果 材料浸渍液作用1、2,4、7 d后人成纤维细胞的相对增殖率(RGR)分别为98.00%、104.10%、110.80%、93.17%,毒性均为0级或1级.倒置显微镜观察人成纤维细胞在材料浸渍液中生长形态良好.扫描电镜下培养7 d的人成纤维细胞-材料复合物表面人成纤维细胞能很好的与材料黏附,材料表面细胞均生长旺盛形成许多伪足状突起,并分泌产生细胞基质.结论 新型海藻酸钠组织工程支架材料与人成纤维细胞的相容性良好,为其作为细胞生长支持物和进一步的医学应用提供了实验依据.     

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达

背景：有研究表明,卵泡发育、成熟、排卵和黄体形成以及退化等卵巢的生理过程都涉及细胞外基质的形成,而基质金属蛋白酶9和结缔组织生长因子与细胞外基质的形成有着密切的关系。 目的：探讨卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达与多囊卵巢综合征的关系。 方法：将有规律动情周期的SD雌性大鼠随机分为2组,模型组大鼠采用来曲唑灌胃建立多囊卵巢综合征模型,对照组灌胃等量的羧甲基纤维素。当模型组大鼠动情周期固有规律不存在,连续出现间期时采集大鼠的血清和卵巢组织,对照组在其间期采集标本进行检测。 结果与结论：放射免疫分析法和免疫组织化学染色法检测显示,与对照组相比,模型组的血清促黄体生成激素、血清垂体泌乳素、窦前卵泡卵泡膜胞浆中的结缔组织生长因子、卵泡基底膜胞浆结缔组织生长因子、白膜结缔组织生长因子以及黄体中基质金属蛋白酶9表达量明显升高(P < 0.05),促卵泡激素、血清雌二醇和卵泡基底膜中的基质金属蛋白酶9表达量则明显降低(P < 0.05)。结果证实,结缔组织生长因子可能与多囊卵巢综合征中可能与小卵泡的过多生长和排卵障碍有关,基质金属蛋白酶9可能与多囊卵巢综合征中的排卵障碍有关。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程