转录因子Runx2调控前成骨细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达

背景：细胞外基质磷酸化糖蛋白基因在骨的矿化和吸收、成骨细胞与破骨细胞的平衡中起重要的作用,研究细胞外基质磷酸化糖蛋白的功能及其调控机制可为骨质疏松症的治疗提供新的思路。目的：分析转录因子Runx2在小鼠前成骨细胞中对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的调控作用,进而初步研究转录因子Runx2在骨形成发育过程中的作用。方法：首先根据Genbank中Runx2的基因序列构建Runx2真核表达载体;然后利用双荧光素酶基因检测报告系统分析Runx2对不同长度的细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响,以确定Runx2有明显作用的启动子区段,分析3种MAPK信号通路抑制剂调控Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子转录活性的影响;最后利用定时定量RT-PCR法分析Runx2对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子表达活性的影响。结果与结论：成功构建Runx2真核表达载体;双荧光素酶基因检测报告系统分析显示Runx2能够上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子在前成骨细胞中的转录活性,在(-300-+66)366 bp片段区域内上调效果较为显著,Runx2可通过激活MEK激酶MAPK通路上调细胞外基质磷酸化糖蛋白启动子活性;定时定量RT-PCR法检测再次验证Runx2上调细胞外基质磷酸化糖蛋白基因启动子的表达水平。提示转录因子Runx2可以通过MEK激酶MAPK信号通路对细胞外基质磷酸化糖蛋白基因表达进行调节,为探讨细胞外基质磷酸化糖蛋白在骨形成发育过程中的意义奠定基础。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

HBV基因组转染对小鼠NIH3T3细胞内基质金属蛋白酶组织抑制因子的转录调控作用

ObjectiveTo understand the mechanism of liver cirrhosis after the infection of hepatitis B virus.MethodsMouse fibroblast NIH3T3 cells were transfected with 3.2 kb HBV DND by exposure of the cells to calcium phosphate.The change of the levels of mRNA for tissue inhibitor of metalloproteinase 1and 2(TIMP1,2) was detected in mouse fibroblast NIH3T3 cells and the cells of transfection with HBV Genome by in situ hybridization.ResultsThe levels of mRNA for TIMP1 and TIMP2 were increased significantly.ConclusionHBV infection can induce the expression of the mRNA for TIMP1 and TIMP2.     

膝关节炎软骨基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9表达与MRI表现的相关性

BACKGROUND: Matrix metalloproteinases (MMPs) have been shown to break the balance between the production and degradation of extracellular matrix by degrading collagen, gelatin, elastin and other macromolecules, which is the leading cause of bone and cartilage damage in rheumatic arthritis. OBJECTIVE: To determine the expression levels of MMP-2 and MM-9 in the rabbit knee osteoarthritis cartilage, and to analyze whether they are related to the early MRI performance. METHODS: Fifty healthy Japanese white rabbits free from osteoarthritis were enrolled and randomly divided into control group (n=10) and model group (n=40). The anterior and posterior cruciate ligament amputation was adopted to establish the model of osteoarthritis. Subsequently, MRI examination and the expression levels of MMP-2 and MMP-9 were detected at 1, 3, 5 and 7 weeks (n=10 at each time point), respectively. RESULTS AND CONCLUSION: MRI examination showed that more damaged cartilage appeared with time in the rabbit model of osteoarthritis, and significantly different from MRI classification (P < 0.05). The expression levels of MMP-2 and MMP-9 mRNA in the model group were always significantly higher than those in the control group (P < 0.05); MMP-2 level reached the highest at 3 weeks after modeling (P < 0.01), and then presented a slight decline; MMP-9 level peaked at 5 weeks after modeling (P < 0.01) and slightly decreased at 7 weeks. MRI classification of cartage injury and expressions of MMP-2 (R2=0.119, P=0.119) and MMP-9 (R2= 0.466, P=0.466) were shown to have the correlation. These results illustrate that the serum levels of MMP-2 and MMP-9 are related to the early destruction of articular cartilage in patients with osteoarthritis, and can be used as predictors for early osteoarthritis. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞基质金属蛋白酶2及其组织抑制因子2表达的改变

目的　通过对大鼠肾小球系膜细胞 (mesangialcell,MsC)转染Smad 7基因 ,观察转染阳性细胞克隆基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )及其组织抑制因子 2 (TIMP 2 )表达的改变 ,以进一步阐明Smad7阻断肾组织纤维化过程的作用机制。方法　经脂质体介导将含有Smad 7重组表达质粒转染大鼠MsC ,用G4 18筛选及Western印迹分析、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法鉴定 ;又分别采用Western印迹分析、酶谱分析法和RT PCR法 ,检测转染阳性细胞克隆MMP 2和TIMP 2表达改变。结果　成功建立高表达Smad 7的阳性MsC克隆 (S 2 2 ,S 2 6 ) ,并证实其MMP 2蛋白分泌和酶活性均明显升高 ,而TIMP 2mRNA及其蛋白的表达则被明显抑制。阳性MsC克隆S 2 2 ,S 2 6细胞分泌MMP 2比对照组高约 3 8倍 (P <0 0 1) ;S 2 2与S 2 6细胞TIMP 2蛋白表达约为对照组 4 8% (P <0 0 5 )。结论　Smad 7可能通过增强肾组织内MMP 2酶活性和抑制TIMP 2的生成而起到减轻肾组织纤维化进展的作用。     

转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用

目的:明确转录因子Sp1和Sp3对食管癌细胞ezrin基因的表达调控作用.方法:将转录因子表达载体CMV-Sp1和CMV-Sp3分别转染食管癌EC109细胞,采用定量RT-PCR和Western blot技术检测过表达转录因子Sp1和Sp3对ezrin mRNA和蛋白表达的影响;将ezrin基因启动子驱动的报告基因表达载体与内参照质粒pRL-TK和转录因子表达载体共转染EC109细胞,采用双荧光素酶报告基因分析系统检测转录因子Sp1和Sp3对ezrin基因启动子的激活作用以及这种激活作用是否依赖于ezrin基因的Sp1结合位点-75/-69.结果:过表达转录因子Sp1和Sp3显著提高EC109细胞ezrin mRNA和蛋白表达水平以及启动子活性.Sp1和Sp3增强ezrin基因启动子活性的作用位点不同,只有Sp1通过-75/-69位点调控ezrin基因启动子活性.结论:转录因子Sp1和Sp3可调控EC109细胞ezrin基因的表达.     

PRL-2基因转染对肝细胞基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

目的:研究PRL-2基因增强肿瘤细胞侵袭及转移能力的机制。 方法:采用脂质体转染的方法将PRL-2基因表达质粒转染至正常永生化肝细胞系CL1中，G418筛选阳性克隆。应用明胶酶谱法检测转染肝细胞分泌MMPs 酶谱变化，Western blotting 及RT-PCR检测转染肝细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2的变化。以PRL-2磷酸酯酶特异性抑制剂处理转染细胞，观察抑制PRL-2活性对上述指标的影响。 结果:经过 8周G418筛选及RT-PCR和Western blotting鉴定,获得稳定表达PRL-2的细胞亚系PRL-2-CL1。转染后的CL1细胞分泌MMP－9 、活性型MMP－9 和MMP－2 ,均显著高于转染前CL1细胞的MMPs 分泌(P<0.01);使用特异性抑制剂后， MMP－9 、活性型MMP－9 和MMP－2活性显著降低(P<0.01)。Western blotting及RT-PCR检测显示PRL-2-CL1细胞MMP2、MMP9蛋白及mRNA含量均较转染前显著升高(P<0.05)，TIMP-2则显著降低(P<0.05)；使用抑制剂后，可以逆转上述变化。 结论:PRL-2在永生化肝细胞中获得稳定、高效表达，PRL-2基因增强肝细胞侵袭及转移能力与其提高细胞MMP2、MMP9表达，降低TIMP-2有关。     

骨性关节炎关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3的表达

 背景：已有实验证实膝骨关节炎的发病与炎症细胞因子有密切的关系。目的：研究骨性关节炎患者关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平及其相关性,以及两者与骨性关节炎严重程度之间的相关性。方法：收集关节穿刺治疗的骨性关节炎患者关节液标本78份,应用ELISA法检测标本中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3质量浓度,并对患者骨性关节炎严重程度进行HSS评分,采用Pearson相关分析探讨白细胞介素6、基质金属蛋白酶3和美国纽约特种外科医院(HSS)评分两两之间的相关性。结果与结论：骨性关节炎患者膝关节液中白细胞介素6为(13.1±5.7) μg/L,基质金属蛋白酶3为(989.3±429.5) μg/L, HSS为(56.4±12. 0)分。Pearson相关分析显示白细胞介素6、基质金属蛋白酶3的表达水平呈显著性正相关关系(r=0.70,P < 0.001);白细胞介素6和基质金属蛋白酶3均与关节美国纽约特种外科医院(HSS)评分均呈负相关关系(r=-0.70,r=-0.75,P < 0.001)。结果显性关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平之间,以及两者与骨性关节炎严重程度之间均呈正相关,提示测定骨性关节炎患者关节液中白细胞介素6和基质金属蛋白酶3水平对早期诊断和治疗具有重要意义。  中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

椎间盘退变患者血清及髓核组织中基质金属蛋白酶1及抑制剂1的表达

BACKGROUND:Matrix metalloproteinases are now generally considered to be able to degrade all extracellular matrices. Hypersecretion of matrix metalloproteinases or reduction in tissue inhibitors of matrix metalloproteinases leads to destruction of the dynamic balance of extracellular matrix. OBJECTIVE: To elucidate the role of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 in the pathogenesis and progression of intervertebral disc degeneration. METHODS: A total of 60 patients with intervertebral disc degeneration were included. Mild, moderate, and severe degeneration signals appeared on MRI imaging of the patients. Meanwhile, 20 patients with vertebral fracture, mainly cervical spine fracture, were selected as the control group. Venous blood samples were collected before the surgery; the intervertebral disc specimens were sequentially collected. RESULTS AND CONCLUSION: Serum and tissue levels of matrix metalloproteinase-1 in patients with intervertebral disc degeneration were significantly increased compared with the control group (P < 0.05), and furthermore those were significantly increased in patients with severe disc degeneration compared with patients with mild and moderate disc degeneration (P < 0.05). However, serum and tissue levels of tissue inhibitors of matrix metalloproteinases did not differ significantly between the disc degeneration and control groups (P > 0.05). These results indicate that hypersecretion of matrix metalloproteinase-1 occurs in patients with intervertebral disc degeneration; however, the expression of tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 is not correlated with intervertebral disc degeneration. 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

维药买朱尼含药血清影响大鼠关节软骨细胞基质金属蛋白酶1及其组织抑制因子1的表达

背景：基质金属蛋白酶1及其组织抑制因子1的失衡是骨关节炎软骨降解的关键。 目的：观察维药买朱尼对白细胞介素1β诱导的大鼠关节软骨细胞基质金属蛋白酶1及其组织抑制因子1表达的影响。 方法：从1周龄SD大鼠关节中分离培养原代软骨细胞,鉴定后选用第2代细胞随机分为正常对照组、模型组、买朱尼组。模型组和买朱尼组用10 μg/L的白细胞介素1β干预24 h后,买朱尼组在此基础上加入体积分数10%的买朱尼含药血清,模型组加入正常大鼠血清,继续培养12,24,48 h进行实验。 结果与结论：各组细胞培养48 h,RT-PCR检测发现体积分数10%的买朱尼含药血清可上调软骨细胞基质金属蛋白酶组织抑制因子1 mRNA的表达同时抑制基质金属蛋白酶1 mRNA的表达,但此作用在细胞培养的24,36 h时不明显。同时免疫荧光细胞化学染色也显示买朱尼含药血清可促进软骨细胞基质金属蛋白酶组织抑制因子1的表达。说明买朱尼可以调节白细胞介素1β诱导的大鼠关节软骨细胞基质金属蛋白酶1及其组织抑制因子1的表达,且此作用具有时间依赖性。     

人组织金属蛋白酶抑制因子-3的分离纯化及其生物学性质

目的:从人胎盘中分离、纯化组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3),并对其对基质金属蛋白酶1(MMP1)的抑制作用进行评价。方法:利用含4mol/L尿素的TrisHCl缓冲液(pH8.0),从除去多数水溶性蛋白的胎盘匀浆液中提取难溶性蛋白。经CM52阳离子交换树脂和SephacrylS200凝胶过滤两步柱层析纯化后,用SDSPAGE鉴定TIMP3的纯度;用EIA和Westernblot检测TIMP3的含量;用免疫荧光测定法检测TIMP3对MMP1的抑制活性。结果:人胎盘来源的TIMP3由相对分子质量(Mr)为24000的非糖化蛋白和Mr为27000的糖化蛋白组成。非糖基化的TIMP3对MMP1的IC50为1.1×10-10mol/L,糖基化的TIMP3为1.2×10-10mol/L,显著高于重组的TIMP3(IC50为8×10-8)。结论:人胎盘来源的TIMP3由Mr为24000的非糖基化蛋白和Mr为27000的糖基化蛋白两部分组成,二者对MMP1均具有明显的抑制作用。     

大鼠脑缺血模型中基质金属蛋白酶2/9活化增加及紧密连接蛋白逐渐降解

背景：在脑卒中后急性期脑损伤过程中,基质金属蛋白酶破坏血管基膜的完整性,促进中性粒细胞和炎性因子的迁移,引起继发性脑损伤。 目的：观察大鼠局部脑缺血模型中不同缺血时间下基质金属蛋白酶2/9活性及紧密连接蛋白的降解规律。 方法：将39只雄性SD大鼠随机均分为3组,采用改良线栓法建立大脑中动脉缺血(脑卒中)模型,即分离颈外动脉,采用经颈外动脉插入线栓进入颈内动脉最终到达大脑中动脉的方法,3组缺血时间分别为3,5,7 h,再灌注后2 h,测试各组Zea-Longa和Ludmila Belayev神经功能学评分,脑组织梗死面积、基质金属蛋白酶2/9活性及紧密连接蛋白5的降解。 结果与结论：随着缺血时间的延长,脑梗死面积逐渐增大,组间两两比较差异有显著性意义(P < 0.05);随着缺血时间的延长,中枢神经系统损伤逐渐加重,组间两两比较差异有显著性意义(P < 0.05);随着缺血时间的延长,基质金属蛋白酶2/9的活性逐渐增强,组间两两比较差异有显著性意义(P < 0.05);随着缺血时间的延长,紧密连接蛋白5的表达逐渐减少。说明长时间缺血后,脑组织的进行性损伤引起基质金属蛋白酶2/9活化的逐渐增加及紧密连接蛋白5的逐渐降解。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

Delayed Tooth Eruption in Membrane Type-1 Matrix Metalloproteinase Deficient Mice

Membrane-type 1 matrix metalloproteinase (MT1-MMP) is expressed highly in mineralizing tissues including bones and teeth. Mice deficient in MT1-MMP ( &#109 / &#109 ) display severe defects in skeletal development including dwarfism, osteopenia, and craniofacial abnormalities. Death occurs in these mice by about 3 weeks of age. Since MT1-MMP is expressed by the ameloblasts of the enamel organ and by the odontoblasts of the dental papilla, we asked if the developing teeth were adversely affected in the knockout animals. Molars from MT1-MMP &#109 / &#109 mice and controls were examined by histological, X-ray, and SEM analysis at 4, 18-20, and 25 days of postnatal development. At 4 days of development the molars from the &#109 / &#109 mice appeared histologically normal. At 18-20 days of development, the first molars of the &#109 / &#109 mice had apparently normal tooth crowns with normal dentin and enamel; however, the roots were truncated and the teeth had not yet erupted. In contrast to the &#109 / &#109 mice, the first molars of the 18-20-day control animals had erupted. SEM analysis of a &#109 / &#109 first molar and incisor revealed a normal enamel prism pattern. However, X-ray analysis demonstrated that tooth eruption was delayed by approximately 5 days and that the tooth roots were abnormally short in the knockout animals. Since MT1-MMP-deficient mice have been demonstrated to display a generalized increase in bone resorption, these data suggest that inefficient growth of bone surrounding the tooth root complex causes a delay in tooth eruption.     

肝门静脉海绵样变性模型大鼠组织抑制因子及基质金属蛋白酶表达 与周围血管新生

背景：目前国内外尚无有效治疗肝门静脉海绵样变性的策略,且其病因的基础研究报道较为鲜见。 目的：拟建立大鼠门静脉海绵样变性模型,检测基质金属蛋白酶2,9,基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2在大鼠门静脉及其周围组织的表达及周围血管新生中的作用。 方法：SD大鼠80只随机分为3组。以门静脉部分缩窄法复制门静脉海绵样变性的大鼠模型,以21 G钝针头操作。模型组和假手术组分别设术后2,4,6周3个时间点,对照组即不做任何处理的正常SD大鼠(造影后取材)。各组分别于处理后不同时间点行门静脉造影,免疫组织化学检测血管内皮细胞标记物CD31观察门静脉周围血管变化,并使用实时荧光定量PCR和免疫组织化学法检测大鼠门静脉及其周围组织的基质金属蛋白酶2,9,基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2 mRNA的含量和蛋白的表达。 结果与结论：门静脉造影及血管内皮细胞标记物CD31免疫组织化学显示,模型组门静脉周围新生血管明显增多。RT-PCR与免疫组织化学结果分析显示：对照组和假手术组基质金属蛋白酶2 mRNA及蛋白表达均较同期模型组低(P < 0.01,P < 0.05),基质金属蛋白酶9 mRNA及蛋白表达均较同期模型组低。模型组基质金属蛋白酶组织抑制剂1,2各个时间段的表达水平与对照组和假手术组相比差异无显著性意义(P > 0.05);模型组造模后第2周基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶组织抑制剂2比值明显高于对照组和假手术组同期(P < 0.05)。结果提示,构建的门静脉海绵样变性的模型大鼠死亡率低,成模率高,且比较稳定。基质金属蛋白酶2,9表达升高以及基质金属蛋白酶2/基质金属蛋白酶组织抑制剂2的比值失衡,可能是大鼠门静脉海绵样变周围血管新生的分子机制之一。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达

背景：有研究表明,卵泡发育、成熟、排卵和黄体形成以及退化等卵巢的生理过程都涉及细胞外基质的形成,而基质金属蛋白酶9和结缔组织生长因子与细胞外基质的形成有着密切的关系。 目的：探讨卵巢中结缔组织生长因子及基质金属蛋白酶9的表达与多囊卵巢综合征的关系。 方法：将有规律动情周期的SD雌性大鼠随机分为2组,模型组大鼠采用来曲唑灌胃建立多囊卵巢综合征模型,对照组灌胃等量的羧甲基纤维素。当模型组大鼠动情周期固有规律不存在,连续出现间期时采集大鼠的血清和卵巢组织,对照组在其间期采集标本进行检测。 结果与结论：放射免疫分析法和免疫组织化学染色法检测显示,与对照组相比,模型组的血清促黄体生成激素、血清垂体泌乳素、窦前卵泡卵泡膜胞浆中的结缔组织生长因子、卵泡基底膜胞浆结缔组织生长因子、白膜结缔组织生长因子以及黄体中基质金属蛋白酶9表达量明显升高(P < 0.05),促卵泡激素、血清雌二醇和卵泡基底膜中的基质金属蛋白酶9表达量则明显降低(P < 0.05)。结果证实,结缔组织生长因子可能与多囊卵巢综合征中可能与小卵泡的过多生长和排卵障碍有关,基质金属蛋白酶9可能与多囊卵巢综合征中的排卵障碍有关。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

PPARs配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响

目的：观察PPAR α、γ配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的影响。方法：体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞，分别加入PPAR α配体氯贝特（clofibrate）、PPARγ配体吡格列酮(pioglitazone)共同培养，应用Real-time RT-PCR和Western blotting测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPRIN基因和蛋白表达，ELISA测定细胞培养上清液MMP-9浓度，Zymgraphy法测定MMP-9活性。结果：氯贝特和吡格列酮均能显著抑制巨噬细胞和泡沫细胞EMMPRIN的表达，此抑制作用与PPAR α、γ配体抑制MMP-9分泌及活性的趋势一致。结论：PPAR α、γ配体均可抑制巨噬细胞、泡沫细胞EMMPRIN的表达，下调EMMPRIN可能是PPARs配体抑制粥样斑块局部MMPs产生的机制之一。     

Effects of hepatocyte growth factor on collagen synthesis and matrix metalloproteinase production in keloids

Keloids are pathologic proliferations of the dermal layer of the skin resulting from excessive collagen production and deposition. Hepatocyte growth factor (HGF) increases the expression of matrix metalloproteinase (MMP)-1 and suppresses collagen synthesis to modulate extracellular matrix turnover. To investigate the anti-fibrotic effects of HGF, we examine the mRNA expression of collagen types I and III and matrix metalloproteinase (MMP-1, MMP-3) on human dermal fibroblast (HDF) cell lines and keloid fibroblasts (KFs, n = 5) after adding various amount of HGF protein. We also evaluated the enzymatic activity of MMP-2, MMP-9 by zymograghy. In HDFs treated with TGF-β1 and HGF protein simultaneously, both type I and III collagen mRNA expression significantly decreased (P < 0.05). Expression of MMP-1, MMP-3 mRNA also decreased. However, the mRNA expression of MMP-1, MMP-3 significantly increased in KFs with increasing amount of HGF in dose dependent manner (P < 0.05). The enzymatic activities of MMP-2 increased with increasing HGF protein in a dose-dependent manner. However, the enzymatic activity of MMP-9 did not change. These results suggest that the anti-fibrotic effects of HGF may have therapeutic effects on keloids by reversing pathologic fibrosis.     

成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用促进细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达

目的研究成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用对二者表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）的影响,初步探讨肿瘤-基质相互作用在结肠癌侵袭转移中的作用。方法结肠癌SW480细胞与HELF成纤维细胞以RPMI1640培养液分别共培养0、12、24、48h,通过RT-PCR和免疫细胞化学方法检测SW480和HELF细胞中EMMPRIN的表达。结果共培养组SW480细胞EMMPRINmRNA和蛋白的表达均明显升高,HELF细胞本来不表达EMMPRIN,与SW480细胞共培养12、24、48h后检测到EMMPRIN表达,且随时间延长而表达增加。结论成纤维细胞与结肠癌细胞相互作用上调SW480细胞EMMPRIN的表达,并诱导HELF细胞表达EMMPRIN,有可能在结肠癌侵袭转移中发挥重要作用。     

高糖和茶多酚对人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶2及其诱导因子表达的影响

目的 探讨高糖对内皮细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其诱导因子(EMMPRIN)表达的影响,以及茶多酚对高糖作用的干预情况.方法 培养人脐静脉内皮细胞,分为正常对照组、高糖组、茶多酚对照组和茶多酚干预组.培养24 h后,用免疫细胞化学、RT-PCR和Western blot法测定细胞内MMP-2及EMMPRIN的变化.结果 高糖下调内皮细胞MMP-2及EMMPRIN表达,其变化随时间延长更为明显;而茶多酚干预组MMP-2活性明显上调(P<0.05);茶多酚干预组EMMPRINmRNA及蛋白表达均较高糖组上调(P<0.05),茶多酚干预可拮抗高糖对内皮细胞的影响.结论 高糖影响内皮细胞的细胞外基质降解,茶多酚可以抑制这种作用.     

不同浓度的瘦素在胚胎着床中对细胞间粘附分子-1和金属蛋白酶9的影响

目的建立体外子宫内膜培养模型,观察不同浓度瘦素（即leptin）对与着床密切相关的细胞间粘附分子-1（Intercellular Adhesion Molecule-1,即ICAM-1）、金属蛋白酶9（Matrix Metalloproteinase9,即MMP9）的影响,进而探讨leptin对胚胎早期着床的的调节作用。方法采用免疫细胞化学方法检测子宫内膜中ICAM-1和MMP9的表达;采用ELISA方法分别检测经leptin干预培养模型后培养液中ICAM-1和MMP9的表达。结果免疫细胞化学方法：ICAM-1主要在腺体细胞中有表达,基质细胞仅有少量的表达,而MMP9在子宫内膜基质细胞和腺体细胞中均有表达;ELISA结果显示：与对照组相比,ICAM-1经100ng/ml的leptin干预后表达上调（P〈0.05）,而经1ng/ml、10ng/ml的leptin干预后表达无显著性差异（P〉0.05）;MMP9分别经1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml的leptin干预后表达上调（P〈0.05）。结论一定量的leptin可以增加体外培养模型中ICAM-1和MMP9表达。