桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌体外抗菌作用及机制的初步研究

目的:探讨桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性及作用机制.方法:通过体外抑菌试验,测定桂千金子乙醇提取物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),比较标准菌株金黄色葡萄球菌(SA)及临床分离的金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌活性大小.测定桂千金子乙醇提取物作用后MRSA碱性磷酸酶(AKP)活性、外流DNA/RNA大分子含量、胞内蛋白含量的变化,采用电镜观察MRSA细胞形态.结果:桂千金子提取物对3种供试菌株的抑菌圈直径均大于15mm,MIC为1.56～12.50mg/mL,MBC为3.13～25.00 mg/mL,抗菌强度排序为乙醇提取物≈乙酸乙酯萃取物＞正丁醇萃取物;与空白对照组比较,实验组AKP活性升高(P＜0.05),各实验组与空白组外流DNA/RNA大分子含量和胞内蛋白含量比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05);电镜下MRSA菌体细胞变形,表面粗糙有颗粒附着.结论:桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌及其耐药菌株均具有显著的抗菌活性,其抗菌作用可能与细胞壁结构破损致通透性发生改变有关.     

氯松霜抑菌试验分析

目的：对氯松霜进行体外抑菌试验。方法：最低抑菌浓度（MIC）测定，最低杀菌浓度（MBC）测定及抗菌效价测定。结果：氯松霜对金黄色葡萄球菌MIC为20μg/mL，MBC为30μg/mL，对铜绿假单胞菌MIC为40μg/mL，MBC为100μg/mL，表明该药对金黄色葡萄球菌及铜绿假单胞菌均有抗菌活性。但金黄色 葡萄球菌相对较敏感。     

黄白痤疮膏体外抑菌实验

目的 探讨黄白痤疮膏体外抑菌效果.方法 采用试管倍比稀释法、平板法,用黄白痤疮膏水煎液、头孢曲松钠、维A酸乳膏,对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌进行抗菌实验.结果 黄白痤疮膏方煎液、维A酸乳膏、头孢曲松钠金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为125mg/mL、500mg/mL、4μg/mL.表皮葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为125mg/mL、500mg/mL、16μg/mL.结论 黄白痤疮膏方水煎液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有较好的抑菌和杀菌效果.     

表没食子儿茶素没食子酸酯及其纳米粒子制备及抗菌增敏作用研究

目的：研究表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）及其纳米粒子对6种临床常见多重耐药细菌（MDRO）的抗菌及药物增敏作用。方法：选取从临床标本中分离培养的6种MDRO，分别为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）、多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR-Aba）、多重耐药铜绿假单胞菌（MDR-Pae）、产ESBL大肠埃希菌（ESBL-Eco）及产ESBL肺炎克雷伯菌（ESBL-Kpn），采用肉汤稀释法测定EGCG及其纳米粒子的最低抑菌浓度（MIC），绘制细菌22 h生长曲线，采用活菌涂板法测定最低杀菌浓度（MBC），采用棋盘稀释法测定EGCG及其纳米粒子分别联用7种抗菌药物（克林霉素、头孢西丁、青霉素、左氧氟沙星、氨曲南、头孢曲松、氨苄西林/舒巴坦）的联合效应及增敏效果。结果：EGCG对6种MDRO的MIC为350～500μg/mL,MBC为350～700μg/mL;EGCG纳米粒子对6种多重耐药细菌的MIC为62.5～125μg/mL,MBC为175～350μg/mL，说明纳米粒子的MIC、MBC较低，生长曲线也表明了纳米粒子较明显地延后了细菌的对数生长期。EGC...     

五味消毒饮联合红霉素对MRSA生物膜作用的初步研究

目的探讨五味消毒饮联合红霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抑菌效果。结论用微量稀释法分别测定红霉素、五味消毒饮的最低抑菌浓度(MIC)及MRSA生物膜MIC(SMIC),再用微量棋盘稀释法进行联合抑菌试验,观察五味消毒饮联合红霉素抗MRSA的作用。结果五味消毒饮、红霉素单独及联合检测时MRSA的最低抑菌浓度(MIC)和MRSA生物膜MIC(SMIC)分别为>1000g/ml、8μg/ml、2μg/ml+/1000g/ml和>1000g/ml、32μg/ml、8μg/ml+1000g/ml。结论五味消毒饮联合红霉素可增强对MRSA的抑菌作用,为临床MRSA的感染提供了新的治疗思路。     

6种广西药用红树植物的体外抑菌作用研究

[目的]研究广西产6种药用红树植物的提取物对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抑菌作用。[方法]采取纸片扩散法检测药物敏感性;采用琼脂稀释法检测最低抑菌浓度(MIC);采用试管稀释法检测最低杀菌浓度(MBC)。[结果]6种药用红树植物提取物对金黄色葡萄球菌及MRSA的抑菌圈直径均大于10 mm,表现出不同强度的抑制活性。MIC及MBC值显示:白骨壤水提物、红海榄水提物及醇提物的活性最强。[结论]榄李、白骨壤、桐花树、秋茄、红海榄和木榄具有抗金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用,值得进一步深入研究。     

黄芩素对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用的体外研究

目的研究黄芩素(Baicalein)对金黄色葡萄球菌(S.a)早期、成熟生物膜(biofilm,BF)的抑制作用。方法以编号为17546金黄色葡萄球菌为实验菌株,构建体外BF模型。分为空白对照组、实验组(黄芩素组),二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);荧光显微镜观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数。结果建模3 d,荧光显微镜发现黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组形成BF明显少于空白对照组,载体表面活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.00±0.27、4.24±0.31、5.26±0.45,均少于空白对照组活菌计数5.69±0.18(P<0.05);建模7 d荧光显微镜观察,黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组仅见少许散在生物膜,BF结构较空白对照组明显稀薄,其BF内细菌活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.04±0.12、4.69±0.41、5.63±0.10亦均少于空白对照组活菌计数6.08±0.10(P<0.05)。结论黄芩素在体外可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成。     

8种滇产中草药体外抑菌活性筛选

目的:测定8种采自云南中草药提取物的体外抑菌活性。方法:制备8种云南产中草药的醇提物(冷或热),用琼脂打孔法对其进行抗菌活性的筛选,通过微量稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:16种醇提取物中有15种对标准金黄色葡萄球菌、标准大肠埃希菌、标准铜绿假单胞菌、标准白色念珠菌有抑制活性,其中7种中草药醇提取物对标准金黄色葡萄球菌的抑制作用较好,抑菌圈直径为15～27 mm,对耐药菌株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株抑菌圈直径为9～25 mm,MIC在32～1 024 mg/L,MBC在64～1 024 mg/L。结论:罗汉松、箭根薯等对MRSA菌株以及白色念珠菌均有有较好的抑制作用,表现出广谱抗菌活性。     

回毒银花散中各药及药物不同配比对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用研究

目的 研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(α-hemolysin, Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古方新用提供实验支撑。方法 通过最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)、纸片扩散法(K-B法)分析回毒银花散及组方中各味药对MRSA菌株USA300的抑制效果,溶血实验、Hla中和实验、Hla寡聚实验、免疫印记(Western blot)实验验证药物以何种形式抑制毒力因子Hla的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。结果 回毒银花散抑制MRSA菌株,MIC₉₀为64 mg/mL,MBC为256 mg/mL,抑菌圈直径为(7.50±0.50)mm。回毒银花散还通过抑制Hla的释放抑制...     

携带qacA/B基因的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌消毒剂耐受特性分析

目的了解临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）携带qacA/B基因及对消毒剂耐受性的情况。方法对46株MRSA采用PCR检测qacA/B基因,分别选取10株携带与未携带qacA/B基因的MRSA测定对3种消毒剂的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果 MRSA中qacA/B基因的携带率达43.5%,且携带qacA/B基因的MRSA对醋酸氯已定的耐受性明显高于未携带qacA/B基因的MASA,过氧乙酸和乙醇对两组试验菌的抑制和杀灭浓度基本一致,均未超过临床常规消毒浓度。结论 MRSA中耐消毒剂基因已流行,推荐过氧乙酸和乙醇作为MRSA的常规消毒剂。     

两面针叶抗菌活性部位研究

目的研究两面针叶不同溶剂萃取部位对6种菌株的抗菌活性,为评价两面针叶抗菌活性部位提供实验依据。方法应用液体试管两倍稀释法测定两面针叶不同提取部位对大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、副溶血性弧菌等菌株进行最低抑菌浓度和最低杀菌浓度测定。结果乙酸乙酯部位对其中的4个菌株有抑菌活性,它们的抑菌活性依次为：副溶血性弧菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌;正丁醇部位对白色念珠菌的抑菌活性最好,其最低杀菌浓度（MBC）和最低抑菌浓度（MIC）分别为750μg/mL和375μg/mL;水层对副溶血性弧菌抗菌活性最强;其MBC和MIC分别为750μg/mL和375μg/mL。结论乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水层对白色念珠菌、副溶血性弧菌均有较好的抗菌活性,可考虑综合应用两面针叶在抗菌活性方面的应用与研究。     

22种中草药提取物体外抗菌实验研究

目的:测定芸香草等22种中草药提取物体外抑菌活性。方法:乙醇冷浸制备22种植物药材的乙醇提取物,观察其对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抑制作用,用琼脂打孔法对其抗菌活性进行筛选,通过倍比稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。结果:22种乙醇提取物中有6种对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌有不同程度的抑制作用,有7种对MRSA有较强的抑制作用,抑菌圈直径为15~27 mm,MIC为31.25~500 mg/L,MBC为250~2 000 mg/L,对白念珠菌、大肠埃希菌活性较弱。结论:芸香草、肉豆蔻等7种对所测金黄色葡萄球菌及MRSA具有较好的抑菌效果。     

草果油抗MRSA体外活性研究

目的 探讨草果油抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (methicillin-resistant staphylococcus aureus, MRSA)体外活性和逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的多重耐药活性,为后续综合开发抗MRSA感染中药新药提供科学依据.方法 采用96-孔板微量稀释法分别测定草果油的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),微量棋盘稀释法测定草果油与3种β-内酰胺类抗生素(阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟)的联合抑菌指数(FIC).结果 草果油具有明显体外抗MRSA活性,MIC和MBC分别为0.36 ~2.90 mg/mL、1.45 ~11.61 mg/mL;且草果油能明显增强3种β-内酰胺类抗生素(阿莫西林、头孢氨苄和头孢吡肟)抗MRSA的体外活性,除1株(3.70%)在与头孢吡肟联合使用时表现为无关作用外,其余均表现为协同和相加作用,协同率分别为81.48%、81.48%和77.78%,5株(18.52%)表现为相加作用.结论 草果油具有较强的抗MRSA活性及逆转MRSA对β-内酰胺类抗生素的多重耐药活性能力,具有开发与运用防治MRSA感染中药新药的前景.     

亚抑菌浓度亚胺培南对MRSA体外增殖及毒力相关基因mRNA表达水平的影响

目的：探讨亚抑菌浓度亚胺培南对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）生物学活性的影响,阐明碳青霉烯类抗生素对MRSA活性的抑制作用及其机制,为临床应用碳青霉烯类抗生素治疗MRSA感染提供依据。方法：选取5株ST239型MRSA临床分离株,采用1/10和1/2最小抑菌浓度（MIC）亚胺培南与其体外共培养1.5、6.0和12.0h,分为对照组（培养液中不加亚胺培南）、1/10MIC组（培养液中添加1/10MIC浓度亚胺培南）和1/2MIC组（培养液中添加1/2MIC浓度亚胺培南）。采用荧光定量PCR方法检测各组MRSA株毒力相关基因纤维黏连蛋白A（fnbA）、葡萄球菌蛋白A（spa）、α溶血素（hla）、白细胞毒素D（lek-D）和E（lek-E）、肠毒素A（sea）mRNA相对表达水平,分光光度法检测各组MRSA株体外增殖活性。结果：与对照组比较,体外共培养6.0和12.0h时,1/2MIC组MRSA株增殖活性明显降低（P<0.01）;培养1.5和6.0h时,6个MRSA毒力相关基因mRNA相对表达水平均明显低于对照组（P<0.01）;培养12h时,1/10MIC和1/2MIC浓度组MRSA株各毒力相关基因mRNA表达未能检测到。结论：亚抑菌浓度亚胺培南对ST239型MRSA多种毒力相关基因mRNA表达具有明显抑制效应,高浓度亚胺培南可抑制MRSA的体外增殖,提示亚胺培南对于重症MRSA感染患者具有潜在的应用价值。     

亚抑菌浓度左氧氟沙星对MＲSA 毒力基因和毒力调控基因mＲNA 表达水平的影响

目的: 探究亚抑菌浓度左氧氟沙星对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌临床株毒力基因表达的影响效
应，为更合理使用喹诺酮类抗生素治疗多重耐药细菌感染提供新的实验依据和思路。方法: 以5 株甲氧西林耐
药金黄色葡萄球菌临床分离株为研究对象，采用1．6μg /mL( MIC1/10
) 、8μg /mL( MIC1/2
) 亚抑菌浓度左氧氟沙星与
其体外共培养6h，采用扫描电镜技术观察不同组金黄色葡萄球菌形态特征变化，采用荧光定量PCＲ 方法检测各
组MＲSA 株毒力基因( 纤维黏连蛋白A、葡萄球菌蛋白A、α 溶血素、杀白细胞毒素D 和E) mＲNA 表达水平的变
化。结果: 体外共培养6 h 时，1．6μg /mL( MIC1/10
) 、8μg /mL( MIC1/2
) 亚抑菌浓度左氧氟沙星MＲSA 组菌体均出现
不同程度破碎和裂解，其毒力基因( spa、hla、luk－D 和luk－E) mＲNA 表达水平均明显低于对照组( P＜0．01) ，fnbA
和sea 2 个毒力基因在培养6 h 时未能检测到其表达。结论: 亚抑菌浓度左氧氟沙星对MＲSA 临床株仍具有一
定杀伤活性，且可显著抑制MＲSA 多种毒力基因的表达。     

MRSA PBP2a表达的影响因素及MecA基因的检测价值

【目的】探讨温度、pH、盐浓度对甲氧西林耐药金葡菌 (methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)青霉素结合蛋白2a(penicillin bindingprotein ,PBP)表达的影响 ,以及PBP2a编码基因MecA的检测价值。【方法】采用聚合酶链式反应(PCR)检测MRSA特异性MecA基因和美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)推荐的琼脂板稀释法 (32℃ ,pH7 2 ,40g/LNaCl苯唑西林MIC≥ 4mg/L)筛选MRSA。检测 2 0株MRSA在不同温度、pH、盐浓度时对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶的体外药物敏感性 ,测定MIC范围 ,MIC50 和MIC90 ;SDS PAGE分析 10株MRSA膜青霉素结合蛋白 (PBP2a)在不同培养条件时表达数量的差异 ,并进行配对差值的t检验。【结果】 180株金葡菌检测出MecA基因阳性MRSA 5 6株 ,按琼脂板稀释法检出 5 2株MRSA ,4株未被检出 (苯唑西林MIC分别为 :2 ,2 ,1,0 5mg/L) ,37℃、pH 5 2和 9g/LNaCl分别与 32℃、pH 7 2和 40 g/LNaCl条件下诱导 10株MRSA ,所表达的PBP2a含量前后比较差值有显著性 (P∶0 .0 2～ 0 .0 5 ,0 .0 1～ 0 .0 0 5 ,0 .0 2～ 0 .0 5 )。【结论】不同温度、pH、盐浓度通过诱导耐药蛋白PBP2a的表达明显影响MRSA对苯唑西林、头孢唑林和头孢他啶耐药水平 ,而其MecA基因却不受培养条件的影响 ,可以快速检测MR     

西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯含量测定及抗菌作用研究

目的 建立西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯含量的测定方法,并测定其对金黄色葡萄球菌(SA)的杀菌作用.方法 采用甲醇和0.2％磷酸水为流动相,检测波长276 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃.测定总鞣质及没食子酸乙酯对SA的最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC);透射电镜探究其抗菌作用机制.结果 没食子酸和没食子酸乙酯线性范围分别为8 ～ 64 mg/L和14～110 mg/L,加样回收率分别为101.18％和100.04％,RSD分别为2.88％和3.59％.总鞣质和没食子酸乙酯对SA的MIC均为0.3125 g/L,MBC分别为1.250 g/L和0.625 g/L.结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好,能准确检测西青果总鞣质中没食子酸和没食子酸乙酯的含量.西青果总鞣质与没食子酸的杀菌机制与改变细菌细胞膜形态有关.     

利福平、利奈唑胺与糖肽类抗生素对预防耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药的比较

目的 比较万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺和利福平对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的防耐药突变选择能力.方法 采用E-test法和混菌法(接种细菌浓度＞1×1010 CFU/mL)测定4种抗生素对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)和预防耐药(突变)浓度(MPC),比较4种抗生素的MPC/MIC比值,即选择指数(SI);并结合最大血清浓度(Cmax),比较MPC/目标Cmax比值.结果 万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、利福平对MRSA的MIC值分别为0.5、1.0、0.5、≤0.5μg/mL,对MRSA的MPC值分别为51.2、25.6、9.6、＞1 024.0 μg/mL,SI值分别为102.4、25.6、19.2、＞2 048.0,MPC/目标Cmax比值分别为1.28、0.57、0.64、＞107.80.结论 利奈唑胺、替考拉宁较万古霉素、利福平对MRSA的“突变选择窗”较窄,在预防细菌产生耐药突变方面有较明显的优势.     

富硒米中某些化学形态硒含量的测定

【目的】测定富硒米中某些化学形态硒的含量,为将富硒米用于肿瘤预防提供科学根据。【方法】2,3-二氨基萘荧光分析法测定富硒米中总硒、无机硒、有机硒含量;CNBr-2,3-二氨基萘荧光分析法测定硒蛋氨酸中的硒含量。【结果】夏、秋季收获的富硒米中总硒含量分别为（2.71±0.97）μg/g,（9.87±1.18）μg/g,均大大地高于普通米,P<0.001;有机硒含量分别为2.68μg/g,9.77μg/g,均占总硒含量的99%以上;富硒米中的有机硒主要成分为硒蛋氨酸,含量分别为（1.45±0.67）μg/g,（4.96±0.98）μg/g,它们占总硒含量的53.5%,50.5%。【结论】富硒米中的硒绝大部分是天然有机硒,有机硒的主要成分是硒蛋氨酸。     

大血藤叶片提取物抑菌作用的初步研究

目的:探讨大血藤叶片提取物抑菌作用;方法:采用70%乙醇、60%丙酮及沸水三种溶剂对大血藤叶片进行提取,并以金黄色葡萄球菌为菌株,以平板二倍稀释法统计MIC,以试管二倍稀释法计算MBC,以菌落计数法绘制杀菌曲线.结果:显示大血藤叶片三种溶剂的提取物对金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用,其中沸水提取物的抑制效果最明显,其次是60%丙酮提取物,再次是70%乙醇提取物.最低抑菌浓度沸水提取物MIC90为25mg/ml,60%丙酮提取物MIC90为100mg/ml,,70%乙醇提取物MIC90为200mg/ml.大血藤叶片沸水提取物随着浓度的降低,对金黄色葡萄球菌的杀菌作用明显下降,最低杀菌浓度(MBC)为500mg/ml.结论:大血藤叶片具有明显的抑菌作用.