Hedgehog信号通路与基底细胞癌的研究进展

基底细胞癌(basalcellcarcinoma,BCC)是皮肤科临床常见的非黑素瘤性皮肤癌,可侵犯深部组织,破坏邻近结构,易局部复发,较少发生远处转移。研究显示,Hedgehog信号通路的异常可导致BCC的发生。动物模型的建立进一步证实了该信号通路与BCC之间的密切联系,为研究疾病的治疗奠定了基础。Vismodegib等小分子抑制剂可阻断这一信号通路,抑制肿瘤生长。最近的基因组学研究指出,BCC的发展可能与额外的基因突变有关,这表明除了Hedgehog外,WNT、m TOR等其他信号通路在该肿瘤的发病机制中也具有重要意义。就Hedgehog信号通路对BCC发病的影响进行综述。     

Hedgehog信号通路与Snail在肝癌细胞系中的表达及意义

目的 探讨Hedgehog(Hh)信号通路在各种肝癌细胞系中的表达及其与Snail蛋白的关系.方法 用RT-PCR检测了Hh信号通路分子Shh、Ihh、Ptch-1、Smo、Gli-1、Gli-2、Gli-3 mRNA在4种肝癌细胞系HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Huh-7和永生化肝细胞系L02中的表达情况,应用Western blot检测了Snail蛋白在SMMC-7721和L02细胞中的表达差异.结果 RT-PCR结果显示Hedgehog信号通路分子mRNA在肝癌细胞株中呈高表达,并以Shh信号为主;Gli-2在SMMC-7721细胞中表达最显著,而在正常肝细胞株L02中表达最弱,两者差异显著(P<0.01).Snail蛋白在SMMC-7721细胞中的表达显著高于L02细胞(P<0.05),且与Gli-2的表达呈正相关(P<0.05).结论 Hh信号通路可能通过Gli-2上调Snail的表达,增强肝癌细胞增殖力和侵袭力,促进肝细胞癌的发生和发展.     

Hedgehog信号通路与肿瘤的关系

Hedgehog信号通路是调节动物胚胎正常发育的经典信号通路之一,主要由信号分子HH、膜受体Ptch、Smo以及转录因子Gli等组成.近年来,有关Hedgehog信号通路的研究取得了较大进展,对其在肿瘤发生、发展中的作用有了新的认识,并为肿瘤治疗提供了新的靶点.本文就Hedgehog信号通路的异常激活与肿瘤的关系作一综述.     

Hedgehog信号通路在鳞状细胞癌中的研究进展

Hedgehog(Hh)信号通路对哺乳动物的器官发育、维持成熟组织内环境稳定、慢性炎症的组织修复、癌症的发生等发挥重要作用[1]。有研究[2]证实,与Hh信号通路有关的肿瘤有胃癌、胰腺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、髓母细胞癌、基底细胞癌、子宫颈癌、鳞状细胞癌(SCC)等,该途径的异常和任何分子的突变均与这些肿瘤的发生、发展、转移有关。现就Hh信号通路与SCC的关系作一综述。     

Hedgehog和Notch信号通路与乳腺癌关系的研究进展

乳腺癌是一类高度异质性肿瘤,严重威胁女性的身心健康.目前统一使用2017年St.Gallen会议提出的4种乳腺癌分子分型.即luminal A型、luminal B型、HER2过表达型及三阴性型(triple negative breast cancer,TNBC)[1].针对不同分子分型乳腺癌进行针对性治疗取得了较好的疗效,但是对于乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌的治疗,仍需要寻找新的治疗靶点,以提高疗效.近来,对信号通路的研究已经成为热点,目前所知Hedgehog信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路等与乳腺癌的发生发展关系密切;且各个信号通路之间存在交互对话,通过研究信号通路及信号通路之间的交互对话将为指导乳腺癌临床诊疗提供新思路.     

Hedgehog信号通路在食管癌中研究进展

Hedgehog信号通路在人类胚胎发育过程中发挥重要作用,可以调控细胞增殖和组织分化,大量研究表明,食管癌的发生、发展和异常激活的Hedgehog信号通路密切相关.本文从Hedgehog信号通路在食管癌的细胞增殖、血管形成、浸润转移等方面出发,将近年来Hedgehog信号通路和食管癌中发生、发展的研究进展进行报道.     

Sonic Hedgehog信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌中表达与意义

目的:探讨Sonic Hedgehog(SHH)信号通路分子Shh和Smo在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其意义?方法:用RT-PCR方法检测10例HCC组织及相应癌旁组织和肝癌细胞系HepG2?Huh7中Shh?Smo mRNA的表达?采用免疫组化方法检测30例肝癌组织及10例正常肝组织中Shh?Smo蛋白的表达?结果:RT-PCR结果显示HCC组织中Shh?Smo mRNA的表达率显著高于癌旁组织(P < 0.05);Shh?Smo mRNA在Huh7中的表达强度高于HepG2,但两者间无显著性差异(P > 0.05)?免疫组化结果显示Shh?Smo蛋白在HCC组织中阳性率分别为63.3%(19/30)?76.7%(23/30);Smo蛋白的表达与肿瘤大小相关(P < 0.05)?Shh?Smo蛋白在正常肝组织中均无表达?结论:Shh和Smo在肝癌中高表达,表明SHH信号通路可能参与肝癌的发生,为肝癌防治提供新的依据?     

Hedgehog信号通路在前列腺癌中的研究进展

[摘要]　Hedgehog（Hh)信号通路不仅在前列腺的胚胎发育和器官形成扮演重要的角色,而且在前列腺癌的肿瘤形成、侵袭、转移中起十分重要的作用。Hh信号通路将为前列腺癌的诊断提供重要的思路,以Hedgehog信号传导通路成员作为靶点,联合其他药物可能成为前列腺癌治疗的新策略。但Hh信号通路如何调控前列腺癌的机制尚不清楚,本文就Hh信号通路在以上方面的研究进展进行综述。     

Hedgehog信号通路在骨性关节炎中的研究进展

近来研究表明,骨性关节炎(OA)关节软骨中印度刺猬蛋白(Ihh)表达上调,而这种上调与OA的进展,软骨细胞的形态变化密切相关.小鼠的遗传研究进一步表明,在软骨细胞有条件缺失Ihh信号可以延缓OA的进展,表明阻断Ihh信号用来作为OA潜在治疗方法的可能,以防止软骨变性.因此,基于Hh在软骨内成骨和骨关节炎的发生发展中发挥的重要作用,本文就Hedgehog信号通路在OA软骨细胞中的作用以及作为潜在治疗靶点的研究作一综述.     

Hedgehog信号通路与肿瘤的关系

Hedgehog（HH）信号通路最早在果蝇中被发现，它在一系列生物的胚胎发育过程中都有很重要的作用。除此之外，近年来HH信号通路和肿瘤的关系也引起了人们的广泛关注。HH蛋白是一个分泌性的信号蛋白，通过自我剪接过程，可以将一个45000的前体转变为19000功能性蛋白。在脊椎动物中，编码HH蛋白的HH基因至少有3个同源基因：Sonic Hodgehog（SHH），Indian Hodgehog（IHH）和Desert Hodgehog（DHH）。     

Identification of Nedd4 as a novel regulator in Hedgehog signaling

Background  Hedgehog (Hh) signaling plays an important role in both embryonic development and postnatal tissue homeostasis. Aberrant Hh activation results in a large variety of cancers. This study was designed to discover novel modulators in Hh signaling pathway.

Methods  We performed yeast-two-hybrid screening and immunoprecipitation to identify the interaction of Nedd4 and  Smo. To verify whether Nedd4 is involved in the regulation of Hh signaling, we monitored the activation of Gli-luciferase reporter by overexpressing Nedd4 together with Gli-luciferase reporter. In order to examine the role of endogenous Nedd4 in regulating Hh signaling, we used a short hairpin RNA (shRNA) interference strategy to silence the Nedd4 expression, and then perform dual-luciferase reporter assay. Statistical comparisons were performed by Student’s t tests.

Results  We showed that Nedd4 binds to Smo in the transfected HEK293 cells. Overexpression of Nedd4 alone did not significantly activate the Gli reporter compared to pcDNA3 control (Nedd4 group: dimethyl sulfoxide (DMSO), relative luciferase unit (RLU) 1.87±0.41). However, Smo agonist (SAG)-stimulated activation of Gli-luciferase reporter was markedly potentiated in Nedd4 transfected cells (Nedd4 group: SAG, RLU 13.49±1.04, P <0.05), indicating that overexpression of Nedd4 increases Gli luciferase reporter activity and Nedd4-induced activation of Hh signaling is activity dependent. In Nedd4 knockdown NIH 3T3 cells, the luciferase reporter activity was measured basally and after SAG treatment. In scrambled cells, compared to DMSO, SAG could activate reporter activity by (4.16±0.84)-fold. In Nedd4 knockdown cells, the luciferase reporter activation by SAG was significantly inhibited (SAG, RLU 1.72±0.24, P <0.05); knockdown of Nedd4 did not change the basal activity of luciferase activity (DMSO, RLU 0.86±0.11), suggesting that the loss of Nedd4 expression diminishes Gli-dependent activity in the Hh pathway and the regulation of Nedd4 in the Hh signaling pathway is activity-dependent.

Conclusion  Nedd4 positively regulates the Hh pathway and provides a potential target for inhibiting Hh signaling in cancer therapy.

     

Shh信号通路成员Shh蛋白在胃癌细胞SGC-7901中的表达

目的：研究Shh信号通路成员Shh蛋白在胃癌细胞中的表达，探讨其与胃癌发生的关系。方法：培养胃癌细胞（SGC-7901）和正常肠上皮细胞（IEC-6），用免疫细胞化学法检测两种细胞中Shh蛋白的表达，用RT—PCR法检测Shh mRNA在两种细胞中的表达。结果：Shh蛋白在正常肠上皮细胞中表达阳性率为15％，在胃癌细胞中表达阳性率为70％，Shh蛋白在正常肠上皮细胞中的表达明显低于胃癌细胞（P〈0．05）。Shh mRNA在正常肠上皮细胞中不表达或低表达，在胃癌细胞中明显表达（P〈0.05）。结论：Shh信号通路可能与胃癌发生有关。     

Hedgehog通路介导上皮-间质转化促进CCl4诱导的大鼠肝纤维化进展

[目的]观察四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导大鼠肝纤维化发生发展过程中,Hedgehog信号通路及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)关键分子的变化情况,探讨其可能的作用机制.[方法]将64只雄性无特殊病原体(specific p...     

Sonic Hedgehog信号通路在大鼠牙髓炎中的作用

目的:观察Sonic Hedgehog(Shh)信号分子在大鼠牙髓炎中的免疫定位,探讨Shh信号通路在牙髓防御和修复中所起的作用。方法:将15只SD大鼠随机分成1d、3d和7d组,每组5只,用穿髓开放法建立大鼠牙髓炎模型,3组大鼠分别于术后1,3,7d处死,取出下颌磨牙,常规组织学处理,免疫组化方法检测Shh,Smo,Ptc,Gli1的表达,并对Shh信号通路在大鼠牙髓炎中的表达进行半定量分析,对照组为大鼠正常牙髓。结果:大鼠牙髓炎模型1,3,7dShh广泛表达于穿髓孔下方牙髓间充质细胞及远离穿髓孔的根髓细胞中,表达量随炎症的进展无显著性提高(P>0.05)。Ptc、Smo、Gli1在大鼠牙髓损伤后1d未见阳性表达,3d和7d均表达于穿髓孔下方牙髓间充质细胞中,且表达量均有显著性提高(P<0.05)。空白对照组中Shh信号通路阴性表达。结论:Shh信号通路在牙髓炎过程中表达,提示其可能被激活,参与牙髓炎症反应。     

Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌模型过程中的动态表达

目的探讨C57BL／6J小鼠诱癌过程中Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo在各阶段的动态表达。方法将95只正常C57BL／6J雄性小鼠随机分为诱癌组50只（化学诱癌处理）和对照组45只（正常喂养）,定期获取小鼠肝组织标本行免疫组织化学法、实时荧光定量RT—PCR法和蛋白质印迹法检测。结果免疫组织化学提示,诱癌组Shh、Ptch和Smo蛋白分别在第6周、第8周和第10周出现弱阳性,均在第16周出现中度阳性,第20周出现强阳性表达,而正常对照组中未检测出三者的表达。RT—PCR法提示,诱癌组小鼠肝组织中ShhmRNA、PtchmRNA和SmomRNA的表达量持续升高,第20周时j者的表达水平均达到最高（ShhmRNA15．986±1．784,PtchmRNA11．272±0．295,SmomRNA10．185±0．716）,明显高于同期正常对照组（P〈0．05）。蛋白质印迹法提示,诱癌组Shh、Ptch和Smo蛋白分别从第6周、第8周和第10周起出现弱表达,到第20周时显著增强,而正常对照组中未检测出3种蛋白的表达。结论Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo伴随着小鼠诱发肝癌时间的延长其表达量逐步升高,认为Hedgehog信号通路与小鼠肝癌的发生、发展密切相关。     

筛选调控Sonic Hedgehog信号转导的泛素连接酶

目的:发现调控Sonic Hedgehog(Shh)信号转导的泛素连接酶?方法:第一轮筛选,利用荧光素酶报告基因(8 × GliBS-Luc)检测系统,检测相应HECT家族E3泛素连接酶的siRNA对Shh信号通路活性的影响;第二轮筛选,利用细胞免疫荧光激光共聚焦检测系统,检测上述siRNA对Shh的受体Ptch1蛋白原纤毛定位的影响?综合2轮筛选结果,初步发现影响Shh信号通路活性的HECT家族 E3泛素连接酶?结果:通过2轮筛选,发现Smurf1?Smurf2?Ube3c?Wwp1?Wwp2共5个泛素连接酶,不仅能调节Ptch1蛋白的原纤毛定位,也可以增加通路下游转录因子Gli的活性?结论:建立了筛选调控Shh信号通路的泛素连接酶的平台?在初步筛选的27个HECT E3泛素连接酶中,有5个成员参与调控Shh信号通路?     

Hedgehog信号通路及EMT在进展期胃癌中的作用及意义

目的 探讨Hedgehog信号通路与上皮-间质转化相关分子在进展期胃癌组织中的表达及其对预后的影响.方法 采用免疫组化的方法检测121例进展期胃癌组织及对应正常胃黏膜组织中Gli-1(Hedgehog信号通路下游转录因子)及Snail、E-cadherin(上皮-间质转化相关因子)的表达情况,与临床病理资料及术后生存情况作对照分析.结果 (1)Gli-1、Snail及E-cadherin在胃癌组织中的阳性表达率分别为79.3％、76.0％、36.4％;在正常胃黏膜组织则为29.8％、29.8％、100％.3种蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达差异均具有统计学意义(P＜0.05).(2) Gli-1的过度表达与肿瘤的浸润深度、有无淋巴结转移及pTNM分期有关(P＜0.05);Snail的过度表达和E-cadherin的表达缺失则与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期有关(P＜0.05).(3)在胃癌组织中Gli-1的异常表达与Snail蛋白的表达呈正相关(P＜0.05),与E-cadherin的表达呈负相关(P＜0.05).(4) Gli-1及Snail阳性表达的患者均较阴性患者表现出更差的预后和更低的生存率(P＜0.05);而E-cadherin表达的患者则较不表达的患者表现出更好的预后(P＜0.05).E-cadherin的表达情况与组织学分类、有无淋巴结转移为影响胃癌患者预后的独立因素(P＜0.05).而Gli-1与Snail的表达情况则不是影响胃癌患者预后的独立因素(P＞0.05).结论 在进展期胃癌中,Hedgehog信号通路的异常激活与上皮-间质转化的发生之间存在相关性,并且两者的发生对进展期胃癌患者的预后情况产生影响.     

Hedgehog信号通路参与肿瘤耐药机制研究的最新进展

Hedgehog信号通路调控肿瘤增殖、周期调控、侵袭转移等生理过程,维持着肿瘤的发生与发展。研究发现Hedgehog信号通路在多种耐药肿瘤的异常激活,进一步研究证实该通路通过激活靶基因以及与其他通路相互作用等方式介导了肿瘤耐药。因此,Hedgehog信号通路已然成为逆转肿瘤耐药的重要靶点。本文就Hedgehog信号通路传导途径及近年来在肿瘤耐药机制研究中的现状作一综述。     

miR-222在胃癌中的表达分析及其靶基因FOS的鉴定

目的分析miR-222在胃癌中的表达水平并鉴定miR-222的靶基因。方法选取第三军医大学新桥医院普外科10例患者的胃癌及远癌组织,匀浆法提取总RNA,用Real-time PCR法检测miR-222表达。利用miRNA靶基因预测数据库TargetScan,MICROCOSM及PicTar对miR-222的靶基因进行预测。化学合成包含有miR-222结合位点的靶基因3′非编码区(3′UTR)退火引物,插入荧光素酶报告载体pMIR-REPORT及绿色荧光蛋白(GFP)报告载体pMIR-GFP-RE-PORT,检测荧光素酶的活性变化及观察GFP表达量,并在蛋白水平用Western blot检测miR-222对靶基因的抑制。结果 miR-222在70%(7/10)的胃癌组织样本中表达上调。生物信息学(TargetScan,MICROCOSM及PicTar 3个miRNA靶基因预测数据库)分析可得在包括人类在内的不同物种中,FOS基因3′UTR区都有miR-222的保守结合种子序列。通过荧光素酶活性检测和GFP抑制试验可得miR-222在mRNA水平可以与FOS基因结合。Western blot结果显示miR-222...