头孢地嗪对中性粒细胞细胞因子分泌的影响

目的研究头孢地嗪（cefodizime，CDZ）对肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）感染诱导的小鼠中性粒细胞因子分泌的影响，并初步探讨其与LPS—TLR—NFKB信号传导通路的关系。方法用RT—PCR、ELISA等方法检测肺炎克雷伯菌感染诱导中性粒细胞分泌的TNF—α、IL-1β改变和Toll like receptor 4（TLR4）的表达；Western blotting检测I-κB活性，以及CDZ对上述指标的影响。结果CDZ促进了肺炎克雷伯菌感染早期小鼠中性粒细胞TNF—α、IL-1β分泌及TLR4的mRNA表达，同时伴有I—κB的降解增强；在感染后期CDZ降低了中性粒细胞TNF—α、IL-1β的分泌，但仍可促进TLR4表达。结论CDZ对肺炎克雷伯菌感染诱导的小鼠中性粒细胞有免疫调节作用，此作用可能与其调节TLR4表达和I-κB活性而影响TNF—α、IL-1β等促炎因子基因转录有关。     

脂氧素A4受体激动剂及白介素-1β在Toll样受体2/髓样分化因子88/核因子-κB信号通路对哮喘小鼠气道炎症的调控作用

目的:研究脂氧素(LX)A4受体激动剂及白介素-1β抗体在Toll样受体2(TLR2)/髓样分化因子88(MyD88)/核因子-κB（NF-κB)信号通路中对哮喘小鼠气道炎症的调控机制。方法:以卵清蛋白(OVA)致敏激发法制备小鼠哮喘模型,60只二级雄性Balb/c小鼠随机分为6组,分别给予脂氧素A4受体激动剂(BML-111)、白介素(IL)-1β抗体、BML-111载体、兔IgG治疗。末次激发后留取血清和肺组织标本,光镜下观察支气管周围炎症浸润情况;测定血清IL-1β、IL-4、IL-8、干扰素(IFN)-γ水平;检测肺组织TLR2、MyD88、NF-κB的表达。结果:OVA致敏的小鼠血清IL-1β、IL-4、IL-8水平升高,IFN-γ浓度降低; OVA致敏导致明显的支气管周围炎症细胞浸润,使支气管炎症分级指数有明显提高;BML-111或IL-1β抗体治疗均能明显阻止上述OVA介导的炎症变化(χ2=28.14,P<0.01)。OVA致敏使肺组织TLR2、MyD88 表达及NF-κB活性升高,BML-111及抗IL-1β抗体可抑制由OVA引发的上述表达变化。结论:OVA可诱导产生气道炎症,这一作用可能受TLR2/MyD88/NF-κB信号通路调控,IL-1β在这一过程中起了至关重要的作用。BML-111和IL-1β抗体可能通过对TLR2/MyD88/NF-κB信号通路的负调控而实现抑制OVA诱发的呼吸道炎症的作用。     

海地瓜岩藻聚糖硫酸酯抑制慢性低度炎症反应及机制研究

目的 采用胰岛素抵抗模型小鼠研究海地瓜岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan from Acaudina molpadioidea,Am-FUC)对慢性低度炎症反应的影响。方法 以高脂高果糖饲料饲喂法建立胰岛素抵抗小鼠模型,灌胃Am-FUC(80mg.kg-1.d-1)90d。实验结束后,检测小鼠空腹血糖、空腹胰岛素水平和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、瘦素(leptin,Lep)、抵抗素(resistin,Res)、游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)等促炎因子水平及脂联素(adiponectin,ADP)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)等抗炎因子水平;采用q-RT-PCR法检测小鼠肝脏中TNF-α、IL-6、Lep、ADP mRNA表达及NF-κB通路中关键基因IKKβ、IκB-α、NF-κB mRNA表达。结果 Am-FUC可显著降低胰岛素抵抗小鼠空腹血糖和空腹胰岛素水平;显著降低血清中促炎因子分泌及TNF-α、IL-6、Lep mRNA表达,提高抗炎因子分泌及ADP mRNA表达;显著下调NF-κB通路中关键基因NF-κB、IKKβ mRNA表达,上调IκB-α mRNA表达。结论 Am-FUC具有抑制慢性低度炎症反应作用,其作用机制与下调NF-κB信号转导通路有关。     

丹参酮II-A通过调控TLR4/IκBα/NFκB信号通路抑制LPS诱导的细胞炎症

目的建立脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型,探究丹参酮II-A(Tan IIA)的抗炎活性及其机制。方法CCK-8法测定Tan IIA对细胞活力的影响;迁移小室测定Tan IIA对LPS诱导细胞迁移能力作用;ELISA法测定细胞上清液中小鼠肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factoralpha,TNF-α)、白介素6(interleukin 6,IL-6)、IL^-1β、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein,MCP-1)的含量;Western blot法检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases,MMP-2)、MMP-9、Toll样受体-4(TLR4)、IκB-α、p-IκB-α、NFκB和p-NFκB蛋白的表达。结果Tan IIA对LPS诱导的RAW264.7细胞培养液中炎症因子TNF-α、IL-6、IL^-1β和MCP-1的分泌有明显的抑制作用;明显下调MMP-2、MMP-9、TLR4、p-IκB-α和p-NFκB的蛋白的表达,抑制IκB-α磷酸化和NFκB的入核和活化。结论Tan IIA可通过抑制MMP-2和MMP-9的表达以及TLR4/κB-α/NF-κB信号通路,调控TNF-α、IL-6、IL^-1β等炎症因子的释放而发挥抗炎活性。     

巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制.方法:用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预.RTPCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88 (MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平.结果:MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移.LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响.结论:MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移.     

海参岩藻聚糖硫酸酯对巨噬细胞的调节作用及信号通路研究

目的研究海参岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)对巨噬细胞的调节作用及相关信号通路,探究其调节机体免疫的作用机制。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测巨噬细胞的增殖情况;中性红法检测吞噬活性;Griess试剂法测定培养上清液中NO含量;RT-PCR检测巨噬细胞下游细胞因子IL-6、IL-10、Toll样受体和相关信号分子My D88、TRIF、NF-κB的mRNA表达量。结果 SC-FUC对巨噬细胞增殖、吞噬能力和NO分泌均有促进作用,在作用前期(6h和12h)效果更为明显。SC-FUC能上调细胞因子IL-6和IL-10的mRNA表达量,上调TLR4、TLR5、TLR9的表达量,促进信号分子My D88、TRIF和NF-κB的mRNA表达量。结论 SC-FUC能够激活巨噬细胞,促进其分泌NO、IL-6、IL-10等细胞因子,从而发挥免疫调节作用。SC-FUC激活巨噬细胞的信号通路与细胞表面TLR4、TLR5、TLR9及NF-κB通路相关。     

清肠化湿方对HT-29细胞IL-6/JAK2/STAT3的影响

<正>溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种反复发作的肠道慢性非特异性炎症性疾病,发病机制尚未明确,细胞因子IL-6及其介导的信号通路在非可控性肠道炎症过程中起关键作用[1]。导师沈洪教授所拟清肠化湿方(QHR),治疗轻、中度UC,取得良好效果[2]。课题组前期研究表明该方能调控UC大鼠NF-κB/COX-2通路、PPAR-γ/NF-κB及Toll通路,减少IL-1β、TNF-α等促炎因子分泌,促进抑炎因子IL-10分泌     

葛根素联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病患者 TLR4／NF－κB 炎症信号通路及脂肪因子的影响

目的：观察葛根素联合门冬胰岛素对妊娠期糖尿病（ GDM）患者外周血单核细胞Toll样受体4／核因子－κB（ TLR4／NF－κB）炎症信号通路及脂肪因子的影响。方法选取2013年6月至2015年12月诊治的GDM患者100例,随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组给予门冬胰岛素治疗,观察组在对照组基础上加用葛根素注射液治疗。比较2组外周血单核细胞（ PBMC） TLR4、NF－κB、IκB mRNA和蛋白表达及血清白细胞介素6（ IL－6）、白细胞介素12（IL－12）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）、C－反应蛋白（CRP）、网膜素（chemerin）、脂联素（APN）、内脂素（visfatin）变化。结果2组治疗后TLR4、NF－κB mRNA和蛋白表达、IL－6、IL－12、TNF－α、CRP、visfatin水平较治疗前显著降低,IκB mR－NA和蛋白表达、chemerin、APN水平较治疗前显著升高（ P ＜0．05）,但观察组以上指标改善程度优于对照组,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。结论葛根素联合门冬胰岛素能够明显抑制TLR4／NF－κB炎症信号通路活化引起的炎性因子的释放,并调控脂肪因子分泌。     

NF-κB信号通路参与消退素E1促进牙髓和根尖周炎症消退的研究进展

核转录因子kappa B(NF-κB)是存在于各种细胞中的重要的转录调节因子,参与调节炎症反应和抗细胞凋亡等相关基因的转录,被认为是典型的促炎信号通路,因此靶向调控NF-κB信号通路的激活来控制炎症性疾病具有重要意义。消退素E1(RvE1)是一类具有强效抗炎、促炎症消退功效的内源性脂质介质,其能促进组织从炎症状态尽快地恢复并且有利于组织的再生和修复,对于临床治疗牙髓、根尖周炎有着巨大的潜力。本文回顾了NF-κB信号通路和RvE1在牙髓和根尖周组织炎症性疾病中的作用以及NF-κB信号参与RvE1发挥促炎症消退的作用,为RvE1用于促进牙髓和根尖周组织炎症消退与修复再生提供研究基础。     

炎症因子在2型糖尿病及妊娠期糖尿病发病中的作用研究进展

妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）是指在妊娠期间首次发现或发生的糖代谢异常,包括糖尿病及糖耐量异常,不包括妊娠前已诊断的糖尿病患者,是妊娠期常见的并发症之一,发病率逐年升高。其发病相关因素有胰岛素抵抗、自身免疫遗传因素、慢性炎症等。胰岛素抵抗过程中的炎性反应通常是先天性免疫反应,这种反应常引起机体异常炎症因子的产生、急性期反应蛋白的增加以及炎症信号转导通路的激活。当这些细胞如巨噬细胞、抗原提呈细胞、内皮细胞等受到来自感染、化学物质等体内外潜在危险因素刺激时,便通过结构识别受体激活炎症信号通路,从而释放肿瘤坏死因子（TNF）、白介素-6（IL-6）、IL-8、IL-10、IL-12、C-反应蛋白（CRP）、核因子-κB （NF-κB）等炎症因子以及炎症介质,进而引起胰岛素抵抗和胰岛素分泌障碍。胰岛素抵抗与促炎性细胞因子（如TNF-α、IL-6）的分泌异常及抗炎性调节因子（如IL-4、IL-10）分泌减少有关[1-2]。GDM 的病因至今尚不清楚,胰岛素抵抗及胰岛β细胞分泌降低被认为是GDM发病机制的重要环节。Hotamisligil[3]认为,炎症与胰岛素抵抗之间存在相关关系,并推测炎症可能为促进胰岛素抵抗发生的重要因素之一。近年来,炎性反应在糖尿病发生、发展中的作用研究已受到广泛关注。本文对2型糖尿病及GDM发病中的相关炎症因子综述如下。     

Toll样受体2基因小干扰RNA对高氧所致氧化应激状态下肺泡上皮细胞功能的影响

目的探讨Toll样受体2（TLR2）基因小干扰RNA（siRNA）对体外高氧暴露条件下A549细胞TLR2基因、蛋白表达及其下游信号通路功能的影响。方法肺泡上皮细胞株A549置于6孔培养板培养,完全随机分为4组：N组（正常培养组）、H组（高氧组）、T组（高氧±TLR2-siRNA转染组,转染化学合成TLR2-siRNA）和C组（高氧±阴性对照siRNA转染组,转染化学合成含对照序列的阴性对照-siRNA）。运用脂质体转染技术介导化学合成siRNA转染,其中H组、T组和C组细胞高氧培养6h后,流式细胞术检测转染后A549细胞5．羧基荧光素双醋酸盐的表达率,实时定量荧光聚合酶链反应方法检测各组A549细胞TLR2mRNA的表达水平,流式细胞术方法检测各组A549细胞TLR2蛋白表达变化,凝胶电泳迁移率实验检测各组细胞核因子KB核转录水平,酶联免疫吸附测定方法检测各组上清液中白细胞介素6（IL-6）和IL-8含量。结果转染后A549细胞5-羧基荧光素双醋酸盐的表达率为（92．3±9．6）％;经高氧处理后,H组和C组的TLR2mRNA、TLR2蛋白水平、核因子KB核转录水平较N组均明显上调[（1．68±0．02）、（1．52±0．06）比（1．26±0．02）,（9．1±0．8）、（7．8±1．4）比（5．9±2．8）,（484±64）、（378±38）比（46±3）]（P〈0．05）,各组上清液IL-6、IL-8含量较N组也明显升高（P〈0．05）;而T组TLR2mRNA表达（0．87±0．06）、TLR2蛋白表达（2．8±0．4）、核因子KB核转录水平（228±29）和上清液IL-6、IL-8含量较H组和C组均明显下调[IL-6：（48．5±6．3）ng／L比（66．7±7．8）、（59．6±6．5）ng／L,IL-8：（125±19）ng／L比（773±96）、（971±149）ng／L]（均P〈0．05）;T组与N组相比,各项检测指标表达差异也有统计学意义（P〈0．05）。结论针对TLR2mRNA的小干扰RNA可以部分抑制高氧诱导的A549细胞的炎症反应,但是并不能完全阻断核因子KB-炎症因子信号通路。     

PV-杀白细胞素和PDTC对THP-1巨噬细胞IL-1β表达的影响

目的探讨NF-κB信号通路在金黄色葡萄球菌PV-杀白细胞毒素相关性肺损伤中的作用。方法实验前用100 nmol·L-1佛波酯孵育THP-1细胞48 h,充分诱导使其分化为巨噬细胞,分为三组,正常对照组、PDTC阻断组和rPVL刺激组,PDTC阻断组实验前1 h加入PDTC孵育,1 h后分别加入PBS和rPVL刺激其诱导分化好的巨噬细胞,采用ELISA检测细胞上清IL-1β的蛋白含量,RT-PCR检测IL-1βmRNA水平的表达,Western-blot检测NF-кB的表达。结果 PV-杀白细胞毒素能促进THP-1巨噬细胞分泌IL-1β,同时rPVL能活化NF-κB蛋白,NF-κB信号通路的特异性阻断剂能够抑制NF-κB蛋白的活化。结论 NF-κB信号通路蛋白激活及细胞因子大量释放可能是PVL相关肺损伤重要的发病机制。     

变形链球菌对EAhy926细胞TLR2 mRNA表达的影响

目的:观察变形链球菌细胞壁及培养上清对人血管内皮细胞EAhy926细胞TLR2 mRNA表达影响.方法:不同剂量的变形链球菌细胞壁或培养上清作用于EAhy926细胞,RT-PCR法检测EAhy926细胞TLR2 mRNA的表达.结果:变形链球菌细胞壁作用于EAhy926细胞后,TLR2 mRNA的表达量随着作用时间延长而逐渐增高,于16～24 h达到高峰,以后又逐渐下降(P<0.01);变形链球菌培养上清作用于EAhy926细胞后,TLR2 mRNA的表达量不随着作用时间和作用浓度而发生变化.结论:变形链球菌细胞壁可明显上调EAhy926细胞TLR2 mRNA的表达,并呈时间和剂量依赖性;变形链球菌培养上清不能刺激EAhy926细胞TLR2 mRNA的表达.     

甲氨蝶呤对炎性细胞因子及丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的：探讨甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对类风湿关节炎（RA）发病起重要作用的炎性细胞因子IL-1β和TNF-α的作用及其可能的机制.方法：用Ⅱ型胶原建立类风湿关节炎（CIA）动物模型,以MTX（0.2 mg/kg/W）进行处理,6周后处死大鼠,取血清进行IL-1β和TNF-α检测;分离大鼠膝关节取关节滑膜细胞（FLS）进行培养、鉴定,检测脂多糖（LPS）诱导的FLS培养上清中IL-1β和TNF-α的含量,并观察MTX对FLS分泌IL-1β和TNF-α的影响;在FLS的培养中加入不同剂量的MTX,用Westen Blot方法检测FLS中ERK蛋白及磷酸化蛋白的表达.结果：关节炎指数评分、关节肿胀度测定及关节病理显示造模成功,分离关节滑膜细胞经流式细胞仪检测FLS的血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）的表达为85.5％.造模后,CIA大鼠血清IL-1β和TNF-α明显增加,与空白对照组比较有统计学差异（P＜0.05）,MTX能有效减少CIA大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量（P＜0.05）,但未能恢复至正常水平.MTX能抑制LPS诱导的CIA大鼠关节FLS分泌IL-1β和TNF-α.Western Blot检测显示,不同浓度的MTX对CIA大鼠FLS中ERK蛋白的表达与模型对照组相比无统计学差异（P＞0.05）.CIA大鼠FLS中p-ERK蛋白的表达明显高于空白对照组（P＜0.01）,MTX干预后,低剂量组对p-ERK蛋白表达无明显影响,而中、高剂量组可降低p-ERK蛋白的表达（P＜0.05）.结论：MTX既有免疫抑制作用,同时还通过抑制炎性细胞因子IL-1β和TNF-α而具有抗炎作用,其机制可能部分与其抑制MAPK信号通路中的ERK蛋白磷酸化有关.     

西罗莫司对小鼠树突状细胞CD（86）、I-Ab和Toll样受体4表达的影响

目的：研究西罗莫司（SRL）对小鼠骨髓源树突状细胞（DC）发育成熟和Toll样受体4（TLR4）mRNA表达的影响。方法：（1）用细胞因子定向诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞分化为DC,在相差显微镜和扫描电镜下动态观察DC在分化发育不同阶段的典型形态。（2）用SRL处理DC,通过流式细胞仪测定CD11c、CD86、MHC-Ⅱ类分子（I-Ab）的表达及在脂多糖（LPS）刺激后各分子表达的变化。（3）实时定量PCR法检测SRL处理DCTLR4mRNA表达水平。结果：（1）在相差显微镜和扫描电镜下可以看到DC在分化发育不同阶段的典型形态。（2）SRL抑制LPS刺激后DC表面CD86和I-Ab表达的上调。（3）与常规培养的DC相比,SRL组DCTLR4mRNA表达水平明显增高。结论：SRL处理的DC可抵抗LPS的促成熟作用。SRL促进DCTLR4mRNA表达。     

牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙龈成纤维细胞炎症刺激作用的研究*

【摘要】 目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(P.g)脂多糖(LPS)刺激人牙龈成纤维细胞(HGFs)分泌炎症细胞因子的作用及其机制。方法 组织块法培养HGFs,用不同浓度(1mg/L、10mg/L)的P.gLPS刺激HGFs后6h和12h,采用酶联免疫法(ELISA)检测细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β),定量real-timePCR检测Toll样受体(TLR)2和TLR4在HGFs中的表达。结果 与非P.gLPS刺激组相比较,P.gLPS刺激HGFs6h和12h后,TLR2的表达和炎症细胞因子TNF-α、IL-1β分泌显著升高,呈浓度依赖性(P<0.05),而且随时间的延长TNF-α、IL-1β分泌明显增加(P<0.05)。TLR4在P.gLPS刺激HGFs6h后的表达明显升高(P<0.05),随着P.gLPS浓度增加其表达量升高更明显,但LPS刺激细胞12h后,TLR4的表达与对照组无明显差别(P>0.05)。结论 P.gLPS能刺激HGFs分泌炎症细胞因子,可能是早期主要通过其表面的TLR2、TLR4来介导炎症细胞因子的分泌,随后主要通过其表面的TLR2来介导炎症反应。      

髓样细胞表达的触发受体-1分子的功能与信号转导机制研究进展

髓样细胞表达的触发受体-1（TREM-1）是新近发现的一种与炎症级联放大密切相关的免疫球蛋白超家族成员,主要表达于中性粒细胞及成熟的单核细胞、巨噬细胞表面。多种细菌性成分以及创伤等能使其表达增加,并能与其位于血小板表面的内源性配体一起激活该受体,从而激发炎症因子、趋化因子的产生及中性粒细胞的脱颗粒、呼吸暴发和吞噬作用。TREM-1分子在脂多糖（LPS）所致的内毒素血症中尤其具有显著放大炎症反应的作用,近年来对其信号转导机制的研究取得了大量新的进展。另外,TREM-1与Toll样受体-4（TLR4）在LPS所致炎症反应的放大中存在协同作用,但具体机制目前还不太明确。血浆中还存在TREM-1的可溶性形式,由金属蛋白酶使膜上TREM-1分子外功能区脱落而形成,可作为炎症性疾病早期诊断和预后判断的新指标。     

金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的调节机制研究

目的：研究金茵清热口服液（JYQR）对人外周血单个核细胞（PBMC）中Toll样2受体（TLR2）信号通路免疫调节作用机制。方法：体外分离、培养人PBMC,设空白对照组和JYQR组,JYQR组加入JYQR刺激PBMC,与空白组经37℃,5% CO₂培养24 h后,分别提取各组PBMC中总RNA、总蛋白、细胞上清液,RT-PCR和Western Blot法检测空白对照组和JYQR组PBMC中相关信号分子TLR2、MyD88、IRAK4、TRAF6、IRF3 mRNA和蛋白的表达情况,ELISA法检测细胞因子IL-1α、IL-6、TNF-α、IFN-α的分泌水平;分别设空白对照组：不作处理;JYQR组：JYQR 2.015 mg·mL^-1;TLR2激动剂组：Pam3CSK4 300 ng·mL^-1;TLR2抑制剂组：OxPAPC 30 μg·mL^-1+JYQR 2.015 mg·mL^-14组,提取核蛋白和浆蛋白,Western Blot法检测IRF3和NF-κB p65的核转位情况。结果：与空白对照组相比,JYQR组中TLR2、IRAK4、TRAF6、IRF3 mRNA表达水平分别上调5.93倍、1.77倍、2.95倍、1.43倍（^*P<0.05,^**P<0.01）;MyD88、TRAF6蛋白的表达分别上调1.26倍、1.24倍（^*P<0.05）,IRAK4和IRF3的相对表达水平差异无统计学意义;细胞因子IL-1α、IL-6的表达下调55%、61%,TNF-α、IFN-α的分泌水平上调4.3倍、2.9倍（^*P<0.05,^**P<0.01）。JYQR预处理PBMC后,IRF3及NF-κB核转位增加,但是经过TLR2抑制剂预处理后,IRF3和NF-κB的核转位减弱;相反,TLR2激动剂预处理可以进一步上调IRF3和NF-κB的核转位。结论：金茵清热口服液对人PBMC中TLR2信号通路的作用机制可能是通过MyD88依赖型信号通路激活中、下游的IRAK4、TRAF6、IRF3以及NF-κB调控终端效应因子发挥免疫调节作用。     

心力衰竭患者核因子-kB活化与细胞因子分泌的相关性实验分析

目的：探讨充血性心力衰竭（CHF）患者外周血单个核细胞（PBMCs）核因子－kB（NF—kB）表达与肿瘤坏死因子－α（TNF-α）,白介素－1β（IL-1β）分泌的相天性。方法：将20例心力衰竭患者和11例健康对照组PBCs NF—kB表达由免疫组化染色检测,血清细胞凶子的含量由放射免疫法测定。对两组的指标进行t检验及相关分析。结果：心力衰竭患者外周血单个核细胞NF—kB／p65胞核染色率明显高于健康对照组（P〈0．01）,且NF—kB表达增高,细胞因子（TNF—β,IL-1β,IL－6）含量呈湿著正相关（P〈0．05）。结论：充血性心力衰竭患者NF—kB／p65表达增高,细胞因子（TNF一α,IL－1β,IL－6）分泌增多。充血性心力衰竭,可能通过NF—kB表达的上调促进细胞凶子（TNF—α,IL－1β,IL－6）的分泌。     

哮喘大鼠肺组织Toll样受体4和5的表达变化及甲泼尼龙对其调控作用

目的：观察哮喘大鼠肺组织中Toll样受体4（TLR4）和5（TLR5）的表达及甲泼尼龙对该受体的影响,探讨TLRs在哮喘炎症机制中的作用。方法：建立哮喘大鼠模型,随机分成哮喘组、对照组和甲泼尼龙组,每组各9只,免疫组化法检测大鼠肺组织TLR4和TLR5的表达。结果：大鼠肺组织TLR4的光密度值哮喘组为（0.196±0.045）,对照组为（0.172±0.025）,两组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;甲泼尼龙组为（0.142±0.019）,显著低于对照组和哮喘组（P均〈0.05）。肺组织TLR5的光密度值哮喘组为（0.185±0.029）,显著高于对照组的（0.138±0.014）（P〈0.05）;甲泼尼龙组为（0.143±0.038）,显著低于哮喘组（P〈0.05）,但与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。肺组织TLR4和TLR5蛋白的表达水平无显著相关性（n=25,r=0.209）。结论：Ⅴ级鸡卵白蛋白致敏的哮喘大鼠肺组织TLR5蛋白的表达升高,TLR4无明显变化,TLR5在哮喘炎症中可能具有促炎作用。甲泼尼龙能下调TLR4和TLR5的表达,其抗炎机制可能与下调TLR4和TLR5水平有关。