一起诺如病毒感染性腹泻暴发的病原学调查分析

目的检测某高校一起感染性腹泻暴发疫情的标本,以明确其致病原,为制定防控措施提供依据。方法采集患者的粪便、呕吐物、唾液、手涂抹样标本,健康人群的粪便标本,患者宿舍外环境标本进行检测。采用四号琼脂、Mac、SS、沙门科玛嘉培养基对标本进行划线分离培养与系统生化鉴定常见肠道致病菌细菌学种类。采用普通PCR、多重RT-PCR和实时荧光RT-PCR方法进行诺如GⅡ型病毒和C组轮状病毒检测,并对阳性标本进行测序鉴定。结果共检测291份标本,病毒总阳性率17.53%,其中诺如GⅡ型病毒检测阳性45份,阳性率15.47%,C组轮状病毒阳性率2.06%。98份病例标本检出阳性率高,总阳性率37.76%,其中诺如GⅡ型病毒阳性率31.63%。54份健康人群标本诺如GⅡ型病毒阳性检出率7.41%,环境标本诺如GⅡ型病毒检测阳性率7.19%。结论本起疫情为主要由诺如GⅡ型病毒引起的诺如病毒感染性腹泻暴发,致病病原中同时混杂有C组轮状病毒。     

成都地区腹泻病例人杯状病毒感染状况研究

目的 了解成都地区2010年7～12月之间人杯状病毒感染性腹泻的情况.方法 采集成都市2家哨点医院2010年7～12月之间腹泻病人的大便标本501份,采用RT-PCR方法,对501份大便标本同时进行诺如病毒、札如病毒核酸检测.结果 501份标本中检出阳性122份,核酸阳性率为24.35％ (122/501),其中诺如病毒GⅠ型1份,占阳性标本的0.82％ (1/122);诺如病毒GⅡ型100份,占阳性标本的81.97％ (100/122);札如病毒18份,占阳性标本的14.75％(18/122);诺如病毒GⅡ型和札如病毒共同感染3份,占阳性标本的2.46％ (3/122).5岁以下儿童患者标本病毒核酸阳性检出率为24.3％ (109/449),其中诺如病毒GⅡ型的检出率最高;5～18岁患者标本病毒核酸阳性检出率为14.29％(1/7),标本检验结果为诺如病毒GⅡ型;18岁以上患者标本阳性检出率为26.67％ (12/45),其中诺如病毒GⅡ型检出率最高.9、10、11 3个月病毒核酸检出率较高,其中9月份病毒核酸检出率最高为36.51％ (23/63).结论 成都地区人杯状病毒感染性腹泻的病原体以诺如病毒GⅡ型为主,主要在秋冬季节高发,且婴幼儿和成人同样容易感染.     

2012-2013年上海市浦东新区成人病毒性腹泻感染情况调查

目的了解上海市浦东新区2012—2013年间成人病毒性腹泻感染情况。方法通过实时荧光PCR方法检测该区14家监测医院成人腹泻患者粪便标本中的轮状病毒、诺如病毒、星状病毒、扎如病毒和肠腺病毒。结果共检测腹泻患者粪便样本3 403份。在1 060份样本中检出至少1种病毒核酸,核酸阳性检出率为31.15%。诺如病毒、轮状病毒、扎如病毒、星状病毒以及肠腺病毒的检出率分别为21.28%、7.70%、1.85%、1.55%和0.59%。患者的性别分布不存在差异,性别比为0.95∶1。诺如病毒在各年龄组均有检出。不同病毒病原的感染存在不同的高峰期,但主要集中在秋冬季。结论诺如病毒是浦东地区成人病毒性腹泻的主要病原。应该加强对病毒性腹泻的监测,预防由诺如病毒引起的腹泻暴发。     

天津市婴幼儿病毒性腹泻诺如病毒检测

目的研究天津市秋冬季婴幼儿腹泻患儿中诺如病毒感染的流行情况及其基因型别。方法 2008年10-12月收集天津市儿童医院住院部310例疑似病毒性腹泻的婴幼儿粪便标本,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测粪便中诺如病毒核酸,并将部分阳性株的PCR产物进行测序,采用序列分析软件分析测序结果 ,推断其毒株型别。结果 310份腹泻标本中,诺如病毒RT-PCR阳性37份(GII型37份,GI型0例),检出率为11.94%;23份PCR产物送往测序,经Genebank Blast及系统进化树分析,所有诺如病毒均为诺如病毒基因组Ⅱ型,其中GII-4/2006b占95.65%(22/23),GII-3占4.35%(1/23);感染诺如病毒的患儿多为1岁以下,且11月份检出率最高。结论诺如病毒是天津市秋冬季婴幼儿病毒性腹泻的重要病原体,2008年诺如病毒以GII-4/2006b型毒株流行为主。     

大连市2013年腹泻患者诺如病毒检测分析

目的了解大连地区2013年腹泻患者中诺如病毒的感染情况。方法收集2013年大连地区腹泻监测点大连市儿童医院及大连市中心医院腹泻粪便标本300份,用荧光定量PCR方法检测并分析基因型。结果 300份粪便标本中,诺如病毒阳性27份,均为GⅡ型,检出率9.0%;检出率:男性9.9%,女性8.0%;儿童21.2%,成人2.5%;发病以冬季为主(63.0%,其中儿童病例占94.1%)。结论诺如病毒是大连地区病毒性腹泻病原体之一,以GⅡ型为主,冬季高发,冬季儿童腹泻应考虑诺如病毒感染。     

北京市某些医院内腹泻暴发与诺如病毒的相关性研究

目的确定2006年11-12月北京市某些医院内发生的住院患者腹泻爆发性流行的病原及其分子生物学特点。方法首先检测腹泻标本中轮状病毒抗原并用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒核酸检测,然后用逆转录-聚合酶链反应进行诺如病毒核酸检测,对检测阳性标本进行诺如病毒VP1全基因的扩增;并对其中一例进行全基因克隆、测序和分析。另外对来自不同医院的2份阳性标本中的VP1的5′端部分序列进行测序分析。结果30份腹泻患者粪便标本中共有17份检测为诺如病毒阳性,总阳性率为56.7%,每一家医院送检标本的阳性率都在42.9%以上。对其中一份标本的诺如病毒VP1全基因序列测定和分析显示为GⅡ-4型诺如病毒。另2份标本中的部分序列测定显示与全基因序列高度保守,只有1个核苷酸的差异,因此也提示为GⅡ-4型诺如病毒。结论诺如病毒是北京地区医院内腹泻暴发的重要病原,此次暴发极可能是由GⅡ-4型诺如病毒引起。     

学校感染性腹泻疫情中诺如病毒的分子流行病学分析

目的研究学校感染性腹泻疫情中诺如病毒的分子流行病学特征。方法对2017年义乌地区的学校感染性腹泻疫情中的粪便标本进行诺如病毒核酸检测,选取部分阳性标本对衣壳蛋白区基因片段进行扩增和测序,通过序列比对和进化分析确定诺如病毒的基因型别。结果 120份感染腹泻标本中检测到诺如病毒阳性45份,阳性率为37. 5%,选取的部分阳性菌株序列分析结果显示均为GⅡ. 2型。结论诺如病毒是引起学校感染性腹泻暴发疫情的重要病原菌之一,流行时间集中在2017年1月-3月,流行型别为GⅡ. 2型。     

广州市1起诺如病毒急性胃肠炎暴发的实验室检测

目的确定1起学校急性胃肠炎暴发原因。方法采集病例粪便标本,直饮水标本,采用实时荧光定量(Real-time)PCR和RT-PCR方法检测病毒核酸,阳性标本测序分析。结果 5份粪便标本中3份呈诺如病毒阳性,2份直饮水标本均呈诺如病毒阳性。3份病例粪便标本病毒株核苷酸序列一致,均为GⅡ-4型,提示病毒同源。结论对诺如病毒进行核酸检测,证实该疫情为一起诺如病毒GⅡ-4型引起的急性胃肠炎暴发。     

一起诺如病毒感染性腹泻暴发疫情调查

目的对北京市某医院老年病房的一起诺如病毒感染性腹泻暴发疫情进行调查和分析,为防治诺如病毒感染性腹泻提供科学依据。方法采用现场流行病学调查方法,了解疫情发生特征、临床表现、采集标本,应用荧光定量PCR法对粪便标本进行实验室检测。结果此次疫情从2013年1月17日起到21日结束,共确诊病例18例。6件粪便标本中检出5件诺如病毒核酸阳性,阳性率83.33%,其中2件阳性标本经基因测序分析为诺如病毒GⅡ.4/Sydey 2012变异株。结论此次诺如病毒感染性腹泻暴发疫情可能是由于水污染和密切接触导致传播,通过采取加强饮食饮水卫生管理、隔离病人、加强消毒、加强院内感染管理等综合措施后疫情中止。     

一起监管场所诺如病毒性胃肠炎流行病学调查

目的 调查一起监管场所诺如病毒感染性腹泻疫情的暴发原因及处理对策,为制定防治对策提供依据.方法 采用现场流行病学调查方法,采集的标本用RT-PCR进行检测.结果 2006年12月24日至2007年2月2日,该监管场所共发生腹泻病患者340例,罹患率6.9％;患者大多呈腹胀、腹痛、腹泻、呕吐等胃肠炎症状,病情较轻.部分病人粪便标本检测诺如病毒阳性.通过采取各项综合措施,疫情得到有效控制.结论 建议在诺如病毒感染性腹泻好发季节,卫生部门应重点加强对集体单位、学校诺如病毒感染性腹泻疫情监测,积极开展健康教育,有效预防诺如病毒感染性腹泻疫情的发生.     

Molecular characterization of norovirus GII.17 detected in healthy adult,intussusception patient,and acute gastroenteritis children in Thailand

Noroviruses (NoVs) have been recognized as a leading cause of sporadic cases and outbreaks of acute gastroenteritis in all age groups. During the surveillance of NoVs in Chiang Mai, Thailand, four cases of the novel GII.17 NoVs were sporadically detected by RT-PCR in 2014–2015. The first case of GII.17 was detected in a healthy adult who worked for a restaurant. The second case was found in a pediatric patient who admitted to the hospital with intussusception. The third and fourth cases were found in acute gastroenteritis children. Phylogenetic analysis clearly demonstrated that GII.17 NoVs detected in this study were genetically closely related with the novel GII.17 Kawasaki reference strains. These four GII.17 NoV positive specimens were also tested by two immunochromatographic test kits in order to evaluate the sensitivity for GII.17 NoV detection. The viral loads in those specimens were determined by real-time RT-PCR. The sensitivity of GII.17 NoV detection varies by individual test kits and also depending on the amount of the viruses contained in the fecal specimens. In summary, our study reported the detection of novel GII.17 NoVs in a wide range of subjects with and without diarrhea. Therefore, continued comprehensive screening and genetic molecular characterization of NoV strains circulating in this area need to be further investigated.     

2017年烟台市病毒性腹泻病原学监测分析

目的研究2017年烟台市病毒性腹泻病原学的分布特征,为感染性腹泻防治提供依据。方法采集烟台市二级以上医院2017年1月-12月的病毒性腹泻病例粪便标本。采用ELISA法检测轮状病毒(Rotavirus,RV),利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法对得到的阳性标本进行RV-A病毒的检测,用RT-PCR法进一步对阳性标本进行基因分型。诺如病毒(Norovirus,NV)利用qRT-PCR法检测并分型。利用SPSS 17.0软件进行数据统计分析。结果共检测753份标本,ELISA法检测轮状病毒阳性率为16.33%(123例),qRT-PCR法检测阳性率轮状病毒A组为13.94%(105例),诺如病毒为10.36%(78例)。轮状病毒腹泻主要在冬春季流行,3月和12月份阳性率较高。诺如病毒全年均可发病,主要在6月份流行。2种病毒各年龄段均可感染,轮状病毒婴幼儿感染居多。2种病毒感染无性别差异。轮状病毒A组基因型以G9型和P[8]型为主,诺如病毒基因型以GⅡ型为主。结论病毒性腹泻全年均可发生,各年龄组男女均可感染。轮状病毒阳性检出率较高,为烟台地区病毒性腹泻的主要病原。     

五种国产酶免疫测定法乙型肝炎病毒表面抗原检测试剂的评价

目的为全国人群乙型病毒性肝炎（乙肝）血清流行病学调查,筛选适宜的乙肝病毒表面抗原（Hepatitis B Virus Surface Antigen,HBsAg）检测试剂。方法选择符合国家质量标准,且在全国销量最大的五种（A、B、C、D、E）酶免疫测定法HBsAg检测试剂,平行检测由63份阳性和90份阴性品组成的参比系统各5次,将每个检测的s/n值做log（s/n＋1）转换,计算并比较各试剂的可靠性指标组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数（Coefficient of Variability,CV）和真实性指标受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲线下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（partial）ROC AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fixed Specificity,Se（FPR=e）]等。结果五种试剂ICC、CV从优到劣的排位顺序均为E、C、D、B、A,且差异有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;五种试剂的AUC均在0.965～0.987,pAUC最大的试剂E、B明显高于最小的试剂A、D（Bootstrap法,P〈0.05）;Se（FPR=e）最高的试剂E明显高于试剂C（Bootstrap法,P〈0.05）。结论五种试剂均有较强的诊断能力,其中试剂E为最佳。     

浙江省2006-2007年暴发性胃肠炎中诺如病毒的分子流行病学分析

目的 分析浙江省2006-2007年暴发性病毒性胃肠炎中诺如病毒感染的分子流行病学特征.方法 收集监测期间暴发性病毒性胃肠炎疫情患者的粪便标本及相关流行病学资料.采用RT-PCR及荧光定量RT-PCR检测诺如病毒.随机选掸部分阳性标本扩增部分多聚酶区和衣壳蛋白片段,进行序列测定,结合诺如病毒I(GI)、Ⅱ(GⅡ)基因型参考株进行进化分析.结果 诺如病毒感染暴发性胃肠炎共5起,发生时间均集中于9-12月,送检标本63份,诺如病毒检测阳性45份.序列分析结果显示,浙江省诺如病毒序列与诺如病毒GⅡ/4型参考株同源性最高,其中与北京2006年、荷兰2006年诺如病毒GⅡ/4型变异株最为接近,核苷酸同源性分别为99.7%和98.5%～99.0%.诺如病毒与北京、荷兰流行的GⅡ/4型变异株处于同一分支.结论 诺如病毒是浙江省病毒性腹泻暴发疫情的重要病原体,流行时间集中于秋季,其流行株为GⅡ/4型变异病毒株.     

几种国产HIV抗体酶免法检测试剂的质量评价

目的 考察国产艾滋病抗体酶免法试剂盒的质量，为部队选择质量好的艾滋病诊断试剂盒提供依据。方法 对7种主要的国产人免疫缺陷病毒(HIV)抗体酶免法试剂盒进行质量考核。以1种进口HIV抗体酶免法试剂为参比试剂，用7种考评试剂对300份血清标本进行了统一的检测。300份血清标本都经过免疫印迹方法确认，其中包括国家艾滋病参比实验室提供的50份血清和本实验室的250份血清。结果 参比试剂可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂A、B、C、D和E可以检测出全部125份阳性血清，敏感性为100％；国产试剂F和G可以检测出124份阳性血清，敏感性为99．3％。在153份阴性血清中，参比试剂将1份错判为阳性，特异性为99．3％。国产考评试剂有1-6份错判为阳性，特异性为96．1％。99．3％。结论 国产酶免疫法HIV抗体检测试剂大部分已经达到或接近进口试剂质量水平，可以作为部队艾滋病初筛试验的诊断试剂盒。     

丙型肝炎病毒窗口期感染核酸阳性血清检测和基因型别分析

目的分析丙型肝炎病毒（HCV）早期感染血液样品核酸（RNA）检测的意义，并对检出的核酸阳性血清进行基因分型。方法对8649份自然供血员及566份HCV可疑感染者血清进行核酸（TMA RNA试剂）检测，检测出的HCV RNA阳性样品利用基因分型芯片进行分型。同时利用HCV核心总抗原（HCVc Ag）和游离抗原（HCV free Ag）试剂以及抗体（Anti—HCV）试剂进行检测。并对检测数据进行比较分析。结果在所有血液样品中发现1份HCV抗体、HCVc Ag、HCV free Ag全部阴性但RNA阳性的样品，基因型别为1b型。在8649份自然供血员血清中筛出1份HCVc Ag、HCV free Ag以及HCVRNA阳性但抗体阴性血清，基因型别为1b型。在566份HCV可疑感染者血清中，筛出1份HCV free Ag和核心抗体同时阳性血清，基因型别为1b型。TMA试剂筛出5份RNA阳性血清但微粒子抗体试剂检测阴性，TMA试剂筛出6份RNA阳性的血清而酶标抗体试剂检测阴性。这6份血清，利用傲拓HCV总抗原试剂检测，其中5份HCV总抗原阳性。在澳大利亚国家血液中心进行复核，其中5份RNA阳性。在566份血清中，TMA试剂检出RNA阳性495份，阳性率87．4％。对RNA阳性血清进行型别分析，以1b、2a型为主，分别为46．5％和27％。结论由于检出了HCV RNA单独阳性的窗口期样品，认为利用HCV抗体试剂对血液进行筛查的同时，使用HCV RNA试剂做必要的补充实验，可以减少因窗口期造成的漏检。型别分析认为，窗口期感染样品基因型别也以1b，2a型为主。     

2006-2007年杭州市余杭区诺如病毒性腹泻分子流行病学研究

目的研究杭州市余杭区群发性腹泻中诺如病毒的分子流行病学特点。方法采集2006-2007年6起余杭区群发性腹泻疫情患者的粪便和肛拭子标本,采用荧光定量PCR技术进行诺如病毒检测,然后对病毒的N/S区域进行序列测定。结果6起群发性腹泻疫情都是由诺如病毒引起的,基因分析显示这些病毒都属基因Ⅱ型4组。结论诺如病毒是余杭区群发性非细菌性胃肠炎的重要病原体之一,在现阶段存在优势毒株是GII.4型,正在发生变异。     

Molecular detection and characterization of norovirus in asymptomatic food handlers in Chiang Mai,Thailand

Norovirus (NoV) is the leading cause of nonbacterial foodborne outbreaks of gastroenteritis. Individuals who are asymptomatically infected may act as reservoirs to facilitate transmission of NoV. This retrospective study was conducted to identify the viral agent and investigate potential transmission of NoV infection in a foreigner patient who had severe acute gastroenteritis after having a meal in a restaurant in Chiang Mai province, Thailand. The fecal specimens collected from the patient and 26 restaurant staffs were tested for the presence of gastroenteritis viruses by PCR and RT-PCR. The NoV positive cases were confirmed by real-time PCR and IC kits. The sensitivity of detection of IC kit B, as compared to those of real-time PCR, could detect the viral load down to at least 2.1 × 10⁴ copies/g of stool. The diarrheic patient was infected solely with GII.3 NoV without co-infection with any other gastroenteritis viruses while 4 staffs (15.4%) were positive for different NoV strains (3 with GII.4 and 1 with GII.17) and all were asymptomatic. Interestingly, the GII.3 NoV strain detected in fecal sample of the patient was closely related to GII.3 NoV strains detected previously in fecal samples of children hospitalized with acute diarrhea in Chiang Mai, in the same year and the same geographical area where the patient was infected, suggesting the circulation and transmission of GII.3 NoV in this area. In conclusion, our data indicated that the patient was infected with GII.3 NoV and the virus was not directly transmitted to the patient by asymptomatic food handlers instead it might be transmitted by consumption of NoV-contaminated food provided by the restaurant. In addition, the existence of NoV in asymptomatic food handlers could be a potential source of NoV transmission. Therefore, strict adherence to hand hygiene practices should be reinforced to prevent foodborne outbreaks.