用呼吸道合胞病毒单克隆抗体快速诊断合胞病毒感染

用呼吸道合胞病毒单克隆抗体快速诊断合胞病毒感染余福勋，孙俊秀，郭万申，吕新华，曾贵金，李林村，吴振溢河南省卫生防疫站（４５０００３河南郑州）呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）是婴幼儿急性下呼吸道感染的主要病原体。据报道，婴幼儿急性下呼吸道感染中有４０％是由ＲＳ...     

应用系列呼吸道病毒单克隆抗体快速检测分泌物中的病毒抗原

应用系列主要时吸道病毒［呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ），甲型流感（ＦｌｕＡ）、乙型流感（ＦｌｕＢ）、副流感１、３型（ＰＩＶ１．３）、副流感２型（ＰＩＶ２）病毒共６种］单克隆抗体（ＭｃＡｂ），联接ＡＰＡＡＰ桥联技术，深入部队对２６０例呼吸道感染青年战士的鼻咽部脱落细胞中的抗原进行检测。检出ＦｌｕＡ抗原１８例，ＰＩＶ２抗原１０例，ＦｌｕＢ和ＲＳＶ各１例。以上结果经间接免疫荧光（ＩＦＡ）以及阻断和替代试验，证实系列单克隆抗体检出抗原结果是特异的。笔者认为本方法是临床快速诊断以及流行病学调查的有效手段。     

莪术油对呼吸道合胞病毒性肺炎的治疗作用

用呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染棉鼠和小白鼠，制作 ＲＳＶ肺炎模型，用莪术油混悬剂腹腔注射，观察疗效。「方法」用１００倍半数感染剂量（ＴＣＩＤ５０）ＲＳＶ感染棉鼠和小白鼠，从感染当天开始用０．５％莪术油腹腔注射治疗，注射第５天、第１０天解剖动物观察肺组织光学病理和超微病理的改变。用ＲＳＶ感染体外培养的Ｈｅｐ－２传代细胞株，用０．５％，莪术油抑制ＲＳＶ病毒，计算其治疗指数。「结果」０．５％莪术油可以有     

合胞病毒性肺炎

新近有报道香港在过去两个月中 ,有 119人感染呼吸道合胞病毒 ,导致呼吸道感染 ,但国内近期还未见疫情报道。呼吸道合胞病毒 (Respiratorysyncytiavirus ,简称RSV ) ,属副粘液病毒科 ,肺病毒科。 195 6年首先从上呼吸道感染的猩猩上分离到 ,由于该病毒在组织培养上繁殖时能引起明显的细胞融合现象 ,故定名为呼吸道合胞病毒。合胞病毒分布于世界各地 ,多数成年人可查到合胞病毒抗体 ,合胞体病毒性肺炎是一种小儿常见的肺炎 ,患者半数以上为 1岁以内的婴幼儿。当婴幼儿及儿童患毛细支气管炎及肺炎突然增多时 ,提示可能为该病毒在流行。合胞…     

甲型流感病毒核蛋白单克隆抗体制备及其初步应用

目的 制备甲型流感病毒核蛋白(NP)单克隆抗体,为甲型流感病毒诊断试剂盒以及相关研究提供材料.方法 大肠埃希菌BL21 (DE3)表达NP作为免疫原,免疫Balb/c小鼠后取脾脏细胞与SP2/0细胞融合,筛选获得阳性细胞株,注射小鼠腹腔得到单克隆抗体,纯化后进行Western印迹法、ELISA法、细胞免疫染色和荧光法、双抗夹心ELISA法确定NP抗体的生物学特性,探索应用范围.结果 从Western印迹法、ELISA和细胞免疫染色法的结果可得知,抗NP单克隆抗体可以与免疫原特异性结合,也可以与H1N1、H3N2亚型流感病毒的NP特异性结合,具备检测流感病毒的能力.双抗夹心ELISA法进一步提升了抗体对抗原的检测灵敏度至128 pg.同时,通过细胞免疫荧光法观察到抗体可在细胞内显示NP从细胞核扩散到细胞质的过程.结论 制备的抗体成功检测H1N1、H3N2两种亚型的流感病毒,可作为用于流感防治的流感病毒诊断试剂盒的材料.     

单克隆抗体对甲_1型流感病毒的抗原分析和快速诊断的研究

用宁夏地区分离的甲,型流感毒株宁防86—27(H_1N_1)制备了抗甲_1型流感病毒血凝素的McAb39株,其血抑滴度在1:2000—1:256000,Ig亚类为IgG_1、IgG2a、IgG2b。用自制的McAb对宁夏历年分离的甲_1型毒株的抗原分析表明:抗原漂移存在,且以1981和1987年的毒株抗原漂移明显。用我们的McAb对甲_1型毒株的间接免疫荧光试验,证实此法特异性好,敏感性高,确有早期快速诊断的意义。     

2株副流感病毒株的分离与鉴定

目的 副流感病毒的分离、鉴定。方法 应用鸡胚和人胚肺成纤维细胞突变株分离病毒,用多株流感国际和国内代表株抗血清进行血凝抑制交互试验,用4类主要呼吸道病毒单克隆抗体间接免疫荧光法做特异性交叉反应鉴定。结果 分离株在鸡胚培养中有较高的血凝效价,但与流感病毒甲、流感病毒乙均不发生血抑反应,而与副流感病毒2型单克隆抗体发生较强免疫荧光反应,在人胚肺成纤维细胞突变株培养出现明显细胞融合病变。结论 分离虽具有高滴度血凝效价,但不是流感病毒,根据与副流感病毒2型单克隆抗体可以发生较强反应和在人胚肺成纤维细胞上的特征性细胞病变,确认为副流感病毒2型。     

莪术油对呼吸道合胞病毒性肺炎的治疗作用

[目的 ]用呼吸道合胞病毒 (RSV)感染棉鼠和小白鼠 ,制作RSV肺炎模型 ,用莪术油混悬剂腹腔注射 ,观察疗效。 [方法 ]用 10 0倍半数感染剂量 (TCID50 )RSV感染棉鼠和小白鼠 ,从感染当天开始用 0 5 %莪术油腹腔注射治疗 ,注射第 5天、第 10天解剖动物观察肺组织光学病理和超微病理的改变。用RSV感染体外培养的Hep -2传代细胞株 ,用0 5 %莪术油抑制RSV病毒 ,计算其治疗指数。 [结果 ] 0 5 %莪术油可以有效治疗患RSV肺炎的棉鼠和小白鼠 ;体外试验证明 ,莪术油对RSV病毒所致的细胞病变有抑制作用 ,其半数有效浓度 (IC50 )为 0 0 116mg/ml,治疗指数为 82 12 9。[结论 ]莪术油对感染RSV肺炎的动物有治疗作用 ,体外有明显抑制RSV感染细胞的作用。     

小儿呼吸道流感病毒感染实验室筛查

小儿呼吸道病毒性感染的种类繁多，我院多年来对临床疑似呼吸道感染者，应用ELISA法检测患者急性期血清中多种病毒IgM早期抗体，为临床提供明确的呼吸道病原学诊断。今将我院2004年9月～2005年8月问，对临床疑似病例，进行病毒病原学检测，其中有关流感病毒（influenza virus，IV）实验室的筛查情况报告如下。     

小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎防治研究进展

即呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus infection,RSV)是一种常见的病原体,主要感染下呼吸道,严重影响着婴幼儿的正常生长发育,相关研究报道发现,小儿呼吸道合胞病毒而引起的下呼吸道感染,约为小儿下呼吸道感染病例的70%左右,免疫抑制者、早产儿以及支气管肺发育不良的婴幼儿,是小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎的高发人群.就现阶段来说,临床上对于小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎,尚无直接、有效的药物,早防范、早诊断、早治疗,是临床防治小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎的工作重点.本篇论文中,笔者主要针对小儿呼吸道合胞病毒感染性肺炎的防治措施,进行了分析与探讨,以供参考.     

抗甲型流感病毒内部抗原单克隆抗体的稳定性观察

目的了解抗甲型流感病毒内部抗原单克隆抗体的稳定性。方法应用杂交瘤技术获得3株分泌抗甲型流感病毒内部抗原单克隆抗体细胞株1A9、1B1和1D4,通过ELISA与血凝抑制试验测定其单克隆抗体的稳定性与特异性。结果3株细胞连续传代9个月,能稳定地分泌单克隆抗体,经不同冻融时间观察其A值无明显改变并且与甲3,甲1型流感病毒呈阳性反应,与乙型流感病毒,腺病毒呈阴性反应。结论抗甲型流感病毒内部抗原单克隆抗体具有很好的稳定性与型特异性。在流感病毒的病原学诊断方面有实用价值。     

多重逆转录聚合酶链反应检测主要上呼吸道病毒

目的：建立用多重逆转录聚合酶链反应（mRT-PCR）检测甲1型、甲3型、乙型流感病毒以及呼吸道全胞病毒（RSV）A型、B型等主要上呼吸道病毒的方法，以快速检测上呼吸道感染主要病毒及对甲型、甲亚型、乙型流感病毒在上海地区人群感染、流行情况设计。方法：采用经MDCK细胞接种培养的甲3型、乙型流感病毒和Hep-2细胞接种培养的RSV A型、B型标准毒株病毒液，以及甲1型、甲3型、乙型流感病毒和RSV A型、B型混合毒株病毒液，使用5组引物，分别为HA1-5al和Hal-3al（甲1型流感病毒）、HA3-5al和HA3-3al和HA3-3al（甲3型流感病毒）、NP-5b1和NP-3bl（乙型流感病毒）、RSVAF和RSVAR(RSVA型)、RSVBF和RSVBR(RSVB型)，经mRT-PCR，琼脂糖凝胶电泳，于紫外灯下观察上述病毒特异核苷酸条带。结果：甲1型、甲3型、乙型流感病毒，RSVA型、B型分别在431，210，390，334，183bp处出现清晰的5条DNA条带。结论：应用5组引物，mRT-PCR可用于快速检测临床上呼吸道感染标本中的流感病毒和RSV，并可对其进行分型，对上呼吸道病毒感染性疾病的诊断和流感的监测方面是非常重要的。     

2017-2019年乌鲁木齐机场口岸入境人员呼吸道病毒监测

目的 掌握乌鲁木齐机场口岸入境发热人员呼吸道病毒感染情况.方法 2017-2019年在乌鲁木齐机场口岸采集入境发热人员咽拭子样本,用荧光PCR(RT-PCR)试剂盒检测甲型流感病毒(H1N1、H3N2、H5N1、H7N9)、乙型流感病毒、人冠状病毒OC43、中东呼吸综合征冠状病毒、呼吸道合胞病毒、人偏肺病毒、人鼻病毒,...     

应用多重PCR技术快速检测临床标本中常见呼吸道病毒

[目的]应用多重PCR技术快速检测流感样病例和不明原因肺炎病例呼吸道标本中的常见呼吸道病毒,为急性病毒性呼吸道感染的监测和应急处理提供快速诊断手段。[方法]提取标本中病毒核酸RNA/DNA,反转录合成cDNA,多重PCR扩增目的基因,电泳检测扩增产物。[结果]从30份呼吸道标本中检出甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒3型和呼吸道合胞病毒A型。[结论]本研究初步验证了该多重PCR技术能用于快速检测流感样病例和不明原因肺炎病例呼吸道标本中的常见呼吸道病毒。     

儿童清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎效果评价

目的观察儿童清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎的效果。方法选择2011年1月—2013年10月收治的呼吸道合胞病毒肺炎患儿88例,随机分为对照组和治疗组各44例,入院后患儿均给予吸氧、抗病毒、吸痰等对症治疗。对照组给予更昔洛韦5 mg/kg加入100 ml生理盐水静脉滴注,2次/d;治疗组在对照组基础上给予儿童清肺口服液,12个月10 ml/次,12~36个月20 ml/次,3次/d。两组均治疗14 d评价疗效、症状体征改善时间及住院时间。计量资料采用t检验,计数资料采用x~2检验,P0.05为差异有统计学意义。结果总有效率对照组70.45%,治疗组97.73%,比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗组发热、咳嗽、啰音消失时间及住院时间[(2.3±1.0)、(4.3±1.0)、(3.5±1.7)、(4.6±2.1)d]均短于对照组[(6.5±2.0)、(7.2±1.5)、(6.7±2.4)、(7.0±2.3)d],两组比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结论儿童清肺口服液治疗小儿呼吸道合胞病毒肺炎可迅速改善患儿症状体征、提高临床疗效、缩短住院时间,值得临床应用。     

北京地区肺炎病例呼吸道病毒及肺炎支原体感染调查

目的:调查北京地区肺炎病例中肺炎支原体及呼吸道病毒感染的病原学现况,探讨不同年龄组、不同月份病原学检出情况及其流行病学意义。方法:采用实时荧光PCR法及多重RT-PCR法,对501份呼吸道样本同时检测9种常见呼吸道病毒及肺炎支原体。结果:阳性检出率为40.32%,肺炎支原体、流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒为主要病原体;不同年龄组的病原体检出阳性率不同;部分病原体有一定的季节分布规律。结论:肺炎支原体、流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒为北京地区肺炎病例感染主要致病原,随年龄不同、流行季节不同而有一定的流行规律。     

儿童合胞病毒性肺炎肝损害32例分析

呼吸道合胞病毒(RSV)是冬春季婴幼儿肺炎的主要病因,除了对肺损害外,对其它器官也有损害,现对2002～2003年住院确诊的142例RSV肺炎进行肝功能检测,发现有肝脏损害32例,现报道如下.     

小儿急性呼吸道感染中常见呼吸道病毒的检测情况分析

目的分析急性呼吸道感染患儿中常见呼吸道病毒的检测情况,为防治小儿急性呼吸道感染提供参考。方法收集2019年6—9月我院收治的330例急性呼吸道感染患儿血样并采用ELISA法对血清副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)、腺病毒(adenovirus,ADV)和呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)抗体进行检测,对上述各种病毒在不同病种、性别、年龄等患儿中的分布特征进行比较分析。结果330份血样中,三种常见呼吸道病毒抗体总检出212份,总检出率为64.2%;其中PIV-1型抗体检出50份(占15.2%,未检出其他型PIV抗体)、ADV抗体检出44份(13.3%)、RSV抗体检出118份(35.7%)。330例患儿中,急性下呼吸道感染者3类呼吸道病毒抗体检出率均高于急性上呼吸道感染患儿(P<0.05);女性患儿3类呼吸道病毒抗体总检出率高于男性患儿(P<0.05);年龄<3岁患儿血清病毒抗体总检出率、RSV抗体检出率高于年龄≥3岁患儿(P<0.05)。结论本地区小儿急性呼吸道感染病例中,PIV感染以1型为主,3岁以下幼儿易感染RSV,下呼吸道感染患儿常见呼吸道病毒检出率高于上呼吸道感染患儿。     

抗病毒药物在免疫活性宿主中的应用(二)流感病毒和呼吸道合胞病毒感染的治疗

抗病毒药物在免疫活性宿主中的应用(二) 流感病毒和呼吸道合胞病毒感染的治疗@宝轶$中国医科大学!86期沈阳110001~~