2-巯基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑的合成工艺的改进

目的 对2-巯基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑的合成工艺进行改进。方法 以对氨基苯甲醚为原料，经氨基保护后硝化得2-硝基-4-甲氧基乙酰苯胺，然后酰胺基水解得2-硝基-4-甲氧基苯胺，再将硝基还原为氨基得4-甲氧基-1，2-苯二胺，最后环合得2-巯基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑。结果 此法得到的2-巯基-5-甲氧基-1H-苯并咪唑质量、收率高，成本低。结论 此法简化了操作，适于工业化生产。     

2-(2-甲氧基苯基)-5-[2’-(2H-四唑-5-基)联苯-4-甲硫基]-1,3,4-噻二唑的合成及抑菌活性

目的研究2-(2-甲氧基苯基)-5-[2’-(2H-四唑-5-基)联苯-4-甲硫基]-1,3,4-噻二唑(化合物4)的合成方法及抑菌活性。方法通过2-(2-甲氧基苯基)-5-巯基-1,3,4-噻二唑(化合物1)与2-N-三苯基甲基-5-(4’-溴甲基联苯-2-基)-四唑(化合物2)在碳酸钾/丙酮体系中进行缩和反应,制得化合物3。化合物3在酸性条件下脱保护,制得化合物4。用元素分析和波谱方法确定化合物3和4的结构,用杯盘培养法测化合物4的抑菌活性。结果经检测确定化合物3和4分别为2-(2-甲氧基苯基)-5-[(2’-三苯甲基四唑-5-基)联苯-4-基]甲硫基-1,3,4-噻二唑和2-(2-甲氧基苯基)-5-[2’-(2H-四唑-5-基)联苯-4-甲硫基]-1,3,4-噻二唑。初步抑菌结果表明化合物4对大肠杆菌、链球菌显示了较好的抑菌活性。结论化合物4有望成为含有联苯四唑的新抗菌药物。     

HCl溶液中2-巯基苯并咪唑和1-苯基-5巯基-四氮唑对铜的缓蚀作用

采用失重法、电化学极化曲线和电化学阻抗谱考察了 0 .5 mol/ L HCl溶液中 2 -巯基苯并咪唑 (MBI)和 1 -苯基 -5 -巯基 -四氮唑 (PMTA)对铜的缓蚀作用。MBI和 PMTA的加入使铜的自腐蚀电位正移 ,对铜电极的阳极腐蚀过程存在抑制作用。两者复配使用增强了对铜电极的阳极和阴极电化学过程的抑制作用 ,提高了铜电极膜电阻 ,从而具有较好的缓蚀协同效果。     

2-(1H-苯并咪唑-2-基)-3-苯丙烯腈类化合物的电喷雾质谱裂解方式研究

目的 探讨2-(1H-苯并咪唑-2-基)-3-苯丙烯腈类化合物的质谱裂解规律.方法 分别在正离子和负离子检测模式下,解析2-(1H-苯并咪唑-2-基)-3-苯丙烯腈类化合物的主要特征碎片离子以及可能的裂解途径.结果 在正离子模式下,1～16号化合物二级质谱主要有[M+H-HR2]+、[M+H-NH]+和[M+H HCN]+3个特征离子峰.其中1～ 10号化合物[M+H HR2]+特征离子进一步三级质谱可裂解为碎片离子峰218、217、77;12～ 16号化合物[M+H-HR2]+特征离子进一步三级质谱可裂解为碎片离子峰244[M+H-HR2-HR1]+.17～18号化合物在正离子模式下,二级质谱主要有[M+H-HR2]+、[M+H-HR3]+2个特征离子峰;[M+H-HR3]+特征离子峰进一步三级质谱可裂解为碎片离子峰[M+H-HR3-HR2]+、[M+H-HR3-NH]+、[M+H-HR3-HCN]+.在负离子模式下,1～ 18号化合物二级质谱主要有[M-H-HCN]I个特征离子峰,1～11号化合物进一步三级质谱可裂解为碎片离子峰216.结论 2-(1H-苯并咪唑-2-基)-3-苯丙烯腈类化合物二级质谱主要有3条裂解途径,当苯并咪唑环上氮或苯环上有取代时都将发生裂解,氮上有取代的化合物裂解易于苯环上有取代的化合物.     

奥美拉唑钠与脂溶性维生素注射液（Ⅱ）存在配伍禁忌

奥美拉唑钠为白色疏松块状物或粉末,其化学名称为：5-甲氧基-2-{[（4-甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基）-甲基]-亚磺酰基}-1H-苯并咪唑钠-水合物。作为当日服疗法不适用时下列病症的替代疗法：十二指肠溃疡、胃溃疡、反流性食管炎及Zollinger—Ellison综合征。     

奥咪拉唑的合成

以对氨基苯甲醚为起始原料，经酰胺化、硝化、还原、成咪唑环制得前体2-巯基-5-甲氧基苯并咪唑。另以3，5-二甲基吡啶为原料经氧化、硝化、甲氧基化、羟甲基化及氯化后制得3，5-二甲基-4-甲氧基-2-氯甲基吡啶。然后在甲醇中缩合、用间氯过氧苯甲酸氧化后制得奥咪拉唑。     

1-甲基-3-乙基-3-(3-羟基苯基)-六氢-1H-氮杂(艹卓)盐酸盐的合成

目的由间甲氧基苯乙酮(Ⅴ)合成1-甲基-3-乙基-3-(3-羟基苯基)-六氢-1H-氮杂(艹卓)盐酸盐(Ⅰ).方法以间甲氧基苯乙酮(Ⅴ)为起始原料经Willgerodt重排和氯置换成酰氯,然后与4-甲氨基丁酸甲酯盐酸盐(Ⅳ)缩合成酰胺,碱性环合后再乙基化,通过Wolff-Kishner-Huang和锂铝氢二步还原,最后成盐共八步反应得到1-甲基-3-乙基-3-(3-羟基苯基)-六氢-1H-氮杂(艹卓)盐酸盐(Ⅰ).结果采用价廉易得的原料、试剂和普通的反应条件、经八步反应高质量地合成了1-甲基-3-乙基-3-(3-羟基苯基)-六氢-1H-氮杂(艹卓)盐酸盐(Ⅰ).结论该合成法操作简便、成本低廉,具有工业生产价值.     

2-苯基-5-[[2''''-氰基(1,1''''-联苯基)-4-]甲基]巯基-1,3,4-(口恶)二唑的合成及抑菌活性

目的研究2-苯基-5-[2’-氰基（1，1’-联苯基）-4-]甲基]巯基-1，3，4，-噁二唑的合成方法及抑菌活性。方法通过2-苯基-5-巯基-1，3，4-噁二唑与2-氰基-4’-溴甲基联苯在氢氧化钾／N，N-二甲基甲酰胺体系中进行缩和反应，制得化合物2。用元素分析和波谱方法确定其结构，用杯盘培养法测其抑菌活性。结果经检测确定化合物2为2-苯基-5．[[2’-氰基（1，1’-联苯基）-4-]甲基]巯基-1，3,4-噁二唑。该化合物对大肠杆菌、链球菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌均显示了较好的抑菌活性。结论该化合物有望成为含有联苯的新抗菌药物。     

5-氯-2，4-二羟基吡啶的合成

目的：合成二氯嘧啶脱氢酶抑制剂5-氯-2，4-二羟基吡啶。方法：以丙二腈、原乙酸三甲酯、1，1-二甲氧基三甲胺为起始原料制备1，1-二氰基-4-（N，N-二甲基氨基）-2-甲氧基-1，3-丁二烯，经冰醋酸环合得2-羟基-4-甲氧基-3-氰基吡啶，再经硫酰氯氯化形成5-氯-4-甲氧基-3-氰基-2-（1H）-吡啶酮，经47％HBr水解得5-氯-2，4-二羟基吡啶。结果：合成了5-氯-2，4-二羟基吡啶，总收率为56％。结论：该工艺路线成本较低，反应条件温和，操作简便，容易实现工业化生产。     

5-氯-2,4-二羟基吡啶的合成

目的:合成二氯嘧啶脱氢酶抑制剂5-氯-2,4-二羟基吡啶。方法:以丙二腈、原乙酸三甲酯、1,1-二甲氧基三甲胺为起始原料制备1,1-二氰基-4-(N,N-二甲基氨基)-2-甲氧基-1,3-丁二烯,经冰醋酸环合得2-羟基-4-甲氧基-3-氰基吡啶,再经硫酰氯氯化形成5-氯-4-甲氧基-3-氰基-2-(1H)-吡啶酮,经47%HBr水解得5-氯-2,4-二羟基吡啶。结果:合成了5-氯-2,4-二羟基吡啶,总收率为56%。结论:该工艺路线成本较低,反应条件温和,操作简便,容易实现工业化生产。     

四环素基因表达调控系统调控β-半乳糖苷酶基因在肝癌细胞中的表达

目的：构建调控β-半乳糖苷酶（β-gal）基因表达的四环素基因表达调控载体,验证其在肝癌细胞内调控β-半乳糖苷酶基因的表达,为进一步利用该调控系统调控治疗基因治疗肝癌奠定实验基础。方法：根据2个四环素调控子结合位点（TetO2）基因与pcDNA3.1载体的基因核苷酸序列,设计引物,以pcDNA3.1载体为模板进行PCR。将具有串联2个四环素调控子结合位点（TetO2）基因的PCR产物连接入pcDNA3.1载体CMV启动子下游,构建成pcDNA3.1-TetO2载体,应用ABI 3130 测序仪利用pcDNA3.1-TetO2载体对TetO2 PCR产物进行测序分析。再将β-gal克隆入pcDNA3.1-TetO2载体,构建成受四环素调控表达的β-半乳糖苷酶基因的表达载体pcDNA3.1-TetO2-β-gal。利用脂质体将携带四环素调控子基因（TR）的pcDNA6/TR载体转染到肝癌细胞HepG2中,利用杀稻瘟菌素进行细胞转染的稳定筛选,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测TR基因在HepG2细胞内的表达。将pcDNA3.1-TetO2-β-gal载体转染到稳定表达pcDNA6/TR的HepG2细胞中,转染3～4 d后,给予强力霉素（4 mg•L^-1）,利用β半乳糖苷酶原位染色试剂盒染色,检测β-半乳糖苷酶基因的表达。结果：构建的pcDNA3.1-TetO2载体测序结果表明,串联2个四环素调控子结合位点（TetO2）基因片段插入到pcDNA3.1载体CMV启动子基因下游。pcDNA3.1-TetO2-β-gal载体酶切鉴定结果表明,β-gal成功地克隆入pcDNA3.1-TetO2载体。RT-PCR结果显示,TR基因在pcDNA6/TR转染的经杀稻瘟菌素筛选的HepG2细胞内得到稳定表达。给予强力霉素后,β-半乳糖苷酶基因在稳定转染TR 基因的HepG2 细胞 内得以表达;而未给予强力霉素,β-半乳糖苷酶基因在稳定转染TR 基因的HepG2 细胞内表达受到抑制。结论：成功地构建了调控β-半乳糖苷酶基因表达的四环素基因表达调控载体,利用该载体成功地调控了β-半乳糖苷酶基因在HepG2细胞内的表达。     

黄豆苷元对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨黄豆苷元(daidizein)对H2O2诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法用H2O2处理体外培养的PC12细胞建立细胞损伤模型,并加入daidizein预处理作为保护,显微镜下观察PC12细胞形态改变,MTT法检测活细胞数,LDH法检测细胞膜的损伤情况.结果 H2O2处理细胞24 h后,细胞形态发生明显改变,胞体变小、突起缩回,MTT吸光值减小,活细胞数减少,LDH释放量明显增加,与正常对组组比较差异有显著性(P<0.01).daidizein处理组细胞形态明显改善,MTT吸光值显著增加,LDH释放量明显降低,与H2O2处理组相比差异有显著性(P<0.01).结论 daidizein能显著抑制H2O2对PC12细胞的毒性,具有较强的神经保护作用.     

木犀草素对人肝癌细胞HepG2的促凋亡作用

目的：研究木犀草素（Luteolin）对人肝癌细胞HepG2的生长抑制与促凋亡作用机制。 方法：用梯度浓度木犀草素作用于多种肿瘤细胞,以MTT法检测药物对细胞的生长抑制作用,以流式细胞术检测HepG2细胞内活性氧水平,以Annexin V-FITC/PI双染法利用流式细胞术检测HepG2细胞凋亡情况,以Western-blot检测HepG2细胞凋亡相关通路蛋白表达水平。 结果：木犀草素对多种肿瘤细胞的生长具有浓度和时间依赖的抑制作用（72 h最高抑制率超过60%）,并能有效降低HepG2细胞内活性氧水平（约降低41.11%）。木犀草素作用下HepG2细胞凋亡率可达14.43%左右。木犀草素能够降低HepG2细胞内iASPP蛋白表达水平并上调p53与ASPP2蛋白表达。 结论：木犀草素能够抑制肿瘤细胞生长,降低HepG2细胞内活性氧水平,并调节细胞内相关凋亡通路蛋白水平,从而诱导HepG2细胞凋亡。     

HMGN2对大肠埃希氏菌黏附Hela细胞的影响

目的探讨HMGN2对大肠埃希氏菌黏附Hela细胞的影响。方法采用Hela细胞模型,光镜以及扫描电镜观察大肠埃希氏菌ATCC25922黏附Hela细胞模型的建立。用以下三组不同方式,观察梯度抑菌浓度下（分别为5、10、15μg／ml）HMGN2对细菌黏附的影响。黏附抑制组：HMGN2、细菌、细胞共同孵育1小时;干扰模型组：细菌、细胞孵育1小时后,PBS洗去未黏附细菌,再加入HMGN2孵育2小时;细菌预处理组：HMGN2、细菌孵育2小时,离心洗去HMGN2,收集细菌,所得细菌再与细胞孵育1小时。用平板菌落计数法观测细胞内、外活茼数,并计算黏附指数以及黏附抑制率。结果光镜及扫描电镜可见细菌黏附于细胞表面,黏附模型构建成功。三组的结果均提示：在HMGN2梯度抑菌浓度下,细菌的黏附指数随着HMGN2的浓度的升高而减小;黏附抑制率则随着其浓度的升高而逐渐增大（P〈0．05）。结论抑菌浓度下的HMGN2：对大肠埃希氏菌ATCC25922黏附Hela细胞有明显的抑制作用;可减低已经黏附于细胞表面的细菌的黏附能力;可能直接作用于细菌,导致其黏附能力降低。     

HPV感染对宫颈COX-2表达及血PGE2表达水平的影响*

目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染对宫颈组织环氧合酶-2（COX-2）及血前列腺素E2（PGE2）表达水平的影响及其相互关系。方法 采用杂交捕获Ⅱ代技术检测HPV,实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测宫颈组织COX-2 mRNA表达情况,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血PGE2含量。结果 HPV DNA载量及COX-2表达均与宫颈病变程度呈正相关（P?<0.05）。与HPV阴性患者比较,HPV阳性患者血PGE2含量升高（P?<0.05）,随着HPV病毒载量升高,血PGE2含量随之升高,呈正相关（rs?=0.257,P?= 0.003）。宫颈癌患者COX-2表达与PGE2含量呈正相关（rs?=0.684,P?=0.000）。结论 在HPV感染的宫颈癌患者中,宫颈组织COX-2高表达,血PGE2含量升高,其相互作用可能在宫颈癌的增殖、凋亡耐受、侵袭及转移过程中占据重要位置,为临床治疗宫颈癌提供了新的思路。     

运用组织芯片技术检测COX-2在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨结直肠癌组织中COX-2的表达及其与各临床病理因素的关系，评价COX-2在结直肠癌预后判断中的价值。方法 应用组织芯片技术结合免疫组织化学SABC法，检测126例早中期结直肠癌组织中COX-2的表达情况，回顾性分析COX-2与各临床病理因素及预后之间的关系。结果 根据免疫组化染色强度，所有病例被分为COX-2高表达组和低表达组，其中高表达组有32例（25．4％），低表达组有94例（74．6％）。COX-2在结直肠癌中表达情况与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、浸润深度、淋巴是否转移、Dukes分期均无相关。然而，高表达的COX-2与肿瘤复发、特别是血行转移显著相关（P〈0．05）。两组之间生存率具有显著差异（P=0．0067），COX-2高表达组术后五年生存率显著低于低表达组。多因素回归模型分析结果显示．在潜在的预后因素中（年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位、组织学类型、淋巴是否转移、Dukes分期、COX-2表达），COX-2表达和Dukes分期可作为是结直肠癌根治术后独立预后因素，COX-2的检测可作为结直肠癌患者预后判断的一个有价值的指标。结论 高表达的COX-2与肿瘤复发、特别是血行转移显著相关，COX-2的检测町作为结直肠癌患者琐后判断的一个有价值的指标：应用组织芯片高效检测临床组织样本具有快速、方便、经济、准确的优点。     

蛋白激酶C- 核因子相关因子2 调节大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶-1 的表达

目的：探讨蛋白激酶C(PKC)- 红系衍生的核因子相关因子2 (Nrf2) 对香烟烟雾提取物(CSE) 诱导 的大鼠气道上皮细胞血红素加氧酶-1(HO-1) 表达的影响。方法：将25 只SD 大鼠的气道上皮细胞随机分为对 照组、CSE3h 组、RO318220(PKC 抑制剂) 组、Nrf2 siRNA 组和Nrf2 siRNA+RO318220 组,每组5 只。对照组 用DMEM/F12 正常培养,CSE3h 组用10% CSE 共培养3 h;RO318220 组则用3 mol/L RO318220 预处理0.5 h,余处理同CSE3h 组;Nrf2 siRNA 组先用Nrf2 siRNA 预处理,余处理同CSE3h 组;Nrf2 siRNA+RO318220 组则先用3 mol/L RO318220 和Nrf2 siRNA 预处理,余处理同CSE3h 组。用Western 印迹法分别检测HO-1, Nrf2 和PKC 蛋白表达,细胞免疫化学法观察HO-1 蛋白表达,反转录- 聚合酶链反应(RT-PCR) 法检测HO-1 mRNA 表达,免疫荧光法观察Nrf2 核转位,测定HO-1 活性。结果：CSE 明显诱导Nrf2 核转位,其诱导作 用可被RO318220 阻断。HO-1 蛋白在CSE3h 组强阳性表达,在对照组、RO318220 组、Nrf2 siRNA 组和Nrf2 siRNA+RO318220 组均弱阳性表达。CSE3h 组PKC 蛋白、HO-1 mRNA 和蛋白表达较对照组显著升高,HO-1 活性较对照组明显增强(P<0.05)。PKC 蛋白表达水平在Nrf2 siRNA 组和CSE3h 组无明显差异(P>0.05)。结论： CSE 通过PKC 信号通路诱导Nrf2 核转位,上调HO-1 的表达水平。     

羧基化多壁碳纳米管修饰电极循环伏安法测定过氧化氢

目的：研究用羧基化多壁碳纳米管修饰电极伏安法测定过氧化氢的浓度。方法：采用涂布法制成羧基化多壁碳纳米管修饰电极;在pH=7.0KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液中,采用该修饰电极伏安法测定H2O2。结果：该修饰电极对H2O2有着显著的电催化作用,与裸玻碳电极相比,其灵敏度大大提高,在1.2×10-6～1.0×10^-3mol/L浓度范围内,过氧化氢的氧化峰电流与其浓度呈良好的线性关系,检测限为3.1×10^-7mol/L,将该修饰电极用于医用过氧化氢的测定,相对平均偏差为1.2%,平均回收率为97.6%,结果满意。结论：该修饰电极响应快,灵敏度高,稳定性好,寿命长,适合于具有电活性生物分子的测定。     

阳和汤加味治疗慢性支气管炎114例疗效观察

目的 :观察阳和汤加味治疗慢性支气管炎 (简称慢支 )的治疗作用。方法 :将 196例慢支的患者随机分为阳和汤加味治疗组 114例 ;抗生素、茶碱类治疗对照组 82例治疗。疗程 4周 ,停药后 1年随访。结果 :近期治疗总有效率 ,治疗组为 94 .74 % ,对照组为 78.0 5 % ;远期治疗总有效率治疗组为92 .98% ;对照组为 70 .73%。近、远期疗效明显优于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :临床症状的控制和改善 ,显示阳和汤加味能调节整体 ,改善肺、肾肃降与摄纳之枢机 ,而达到宣通血脉 ,散寒祛痰 ,使嗽止痰消 ,喘平而收效 ,侧优于西药单纯对支气管局部组织炎症的治疗和缓解平滑肌的痉挛及控制炎症的反应之治法。     

微小染色体维持蛋白-2和CD24在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨微小染色体维持蛋白-2（MCM2）和CD24在非小细胞肺癌中的表达及其与预后的关系。方法选取在我院初诊并手术的73例非小细胞肺癌（non—small cell lung cancer,NSCLC）患者,应用免疫组织化学方法检测其病理组织标本中MCM2和CD24的表达,回顾性分析其表达与患者预后的关系。结果73例NSCLC中分别有42例和54例呈MCM2和CD24高表达,各占57．5％和74．0％。MCM2和CD24高表达患者的死亡风险较低表达者均显著升高（P〈0．05）。MCM2和CD24均高表达患者的死亡风险显著高于其中仅一项高表达者（HR=2．59,95％CI1．40～4．80,P=0．002）和两项均低表达者（HR=15．32,95％CI=2．07～113．41,P=0．008）,而一项高表达者与两项均低表达者相比死亡风险升高无统计学意义（HR=5．60,95％CI=0．79～44．82,P=0．083）,两项均高表达者的累积生存率显著低于一项高表达者（P=0．001）和两项均低表达者（P=0．001）。结论MCM2和CD24均是NSCLC的独立预后因素,两者联合检测对NSCLC患者预后的评估价值更高。