塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用

目的研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用.方法用MTr比色法观察其对肝癌细胞生长的影响;荧光显微镜和透射电子显微镜检测细胞凋亡,TUNEL染色法记数细胞凋亡指数,流式细胞仪定量分析.结果塞来昔布以剂量依赖的方式抑制SMMC-7721细胞的生长,2、10、20及40mmol/L塞来昔布对肝癌细胞的生长抑制率分别为20.78%、33.37%、48.57%和64.96%(P＜0.01).荧光显微镜和透射电镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂以及凋亡小体形成等凋亡形态学改变.流式细胞仪定量分析示2、10、20及40mmol/L浓度下细胞凋亡率分别为(7.44±0.34)%、(19.59±1.73)%、(29.04±4.18)%和(42.14±2.40)%,与对照组(2.13±0.17)%比较均有显著性差异.结论塞来昔布能抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,亦能诱导其凋亡;诱导肿瘤细胞凋亡可能是塞来昔布抑制人肝癌细胞生长的机制.     

塞来昔布诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的实验研究

目的探讨环氧化酶-2特异抑制剂-塞来昔布对喉癌Hep-2细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及可能机制。方法以不同浓度的塞来昔布处理喉癌Hep-2细胞,以四甲基偶氮唑盐（Mar）法检测对细胞增殖的影响,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察细胞核的形态改变,以Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax及COX-2的表达,Western blot分析Caspase-3裂解激活。结果MTT结果表明塞来昔布抑制Hep-2细胞的增殖呈时间和浓度依赖;Hoechst33342荧光染色见随塞来昔布处理时间延长,细胞核逐渐出现凝集、碎裂等凋亡表现;流式细胞术检测细胞凋亡率见塞来昔布处理细胞24h,70、100μmol/L组凋亡率分男q为（28．9±2．74）％、（32．7±3．96）％;Western blot分析蛋白表达,见随药物处理浓度增加,COX-2、Bcl-2表达降低,Bax表达增加,随药物处理时间延长Caspase-3出现裂解片段。结论塞来昔布能够有效地抑制Hep-2细胞增殖和诱导Hep-2细胞凋亡。其诱导凋亡作用机制可能与Bax/Bcl-2比值升高,Caspase-3蛋白裂解激活有关。     

环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对人肝癌细胞侵袭转移能力的影响

目的 探讨环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭转移能力的影响,为塞来昔布在临床上治疗肝肿瘤提供理论依据.方法 应用体外细胞培养技术培养人肝癌细胞株SMMC-7721,并以重建基底膜的侵袭试验、趋化运动试验、对层粘连蛋白的粘附试验以及损伤刮擦实验观察不同浓度塞来昔布对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭、转移能力的影响.结果 塞来昔布作用于人肝癌SMMC-7721细胞后,其细胞黏附率明显下降,而运动抑制率及侵袭抑制率明显上升,与对照组相比差别均有统计学意义,且塞来昔布浓度与肿瘤细胞黏附率,运动抑制率及侵袭抑制率均有相关性.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布能明显抑制人肝癌SMMC-7721细胞的黏附、运动及侵袭能力,故可阻抑肝癌细胞的转移,可能是预防肝癌复发的重要候选药物之一.     

塞来昔布对人食管癌细胞株Eca-109 增殖和凋亡的影响

目的 体外研究选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人食管癌细胞株Fca-109增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)、吖啶橙染色结合荧光显微镜观察细胞形态等技术,研究塞来昔布对Eca-109细胞增殖的抑制和促进凋亡的影响.结果 MTT比色法显示塞来昔布对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;FCM显示有凋亡峰出现,凋亡率在(15.89±0.87)%～(73.57±1.63)%;塞来昔布使G0/G1期细胞比例升高,S期和G2/M期比例下降,呈一定效应关系;荧光显微镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征细胞体积缩小、细胞核固缩,凋亡小体形成等.凋亡比例呈剂量和时间依赖.结论 塞来昔布体外能够显著抑制Eca-109增殖,诱导凋亡,可能与诱导凋亡和阻止细胞周期进展有关.     

非甾体类抗炎药塞来昔布对肺腺癌抑制作用的实验研究

目的观察选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布在体内及体外对肺癌细胞的抑制作用.方法噻唑蓝(MTT)比色法检测肺癌细胞的增殖抑制,流式细胞仪检测塞来昔布处理后肺癌细胞周期变化,通过裸鼠移植瘤实验,比较移植瘤重量检测塞来昔布对肺癌细胞体内抑制作用,TUNEL法染色检测移植瘤癌细胞凋亡.结果塞采昔布对肺癌细胞增殖有抑制作用,且呈剂量依赖关系,IC 50为50umol/L.塞来昔布可将细胞阻滞在G0/G1期,阻碍G1期细胞进入S期.称量裸鼠移植肿瘤的瘤结节重量,对照组平均瘤重(2 1567±0.9750)g,药物组平均瘤重(0.9783±0.5423)g,两组有显著性差异(P＜0.05),抑瘤率为54.64%.TUNEL法移植瘤凋亡细胞染色,对照组凋亡指数(AI)为(1.58±0.61),用药组(9.50±2.51),二组有显著性差异(P＜0.05).结论塞来昔布在体内及体外均对肺癌细胞表现出抑制作用,其将细胞周期阻滞在G1期并诱导肿瘤细胞凋亡可能是抑制肺癌细胞增殖的重要机制.     

特异性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷诱导的足细胞凋亡的影响

目的 研究特异性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布对嘌呤霉素氨基核苷(puromycm ammonucleoside,PA)诱导的足细胞凋亡的影响,初步探讨特异性COx-2抑制剂对足细胞保护作用的机制.方法 以条件永生性小鼠足细胞株为研究对象,分为正常对照(CON)组、PA组、塞来昔布(CEL)组和地塞米松(DEx)组.在0、8、24和48 h检测各组足细胞活性和凋亡水平,并检测足细胞凋亡过程中caspase-3的活性水平,运用western印迹法检测各组足细胞P53及COX-2的表达.结果 与CON组比较,PA、CEL、DEx组在24、48 h的足细胞凋亡率均显著升高(P值均＜0.05),但各组这两个时点间的足细胞调亡率的差异无统计学意义(P值均＞0.05).与PA组比较,CEL、DEX组在24、48 h的足细胞凋亡率均显著降低(P值均＜0.05).与CON组比较,各组细胞caspase-3活性无明显变化(P值均＞0.05).与CON组比较,PA组在24、48 h的P53、COX-2表达均显著增多(P值均＜0.05),各组这两个时间点间P53、COX-2表达的差异无统计学意义(P值均＞0.05).与PA组同时间点比较,CEL、DEX组在24、48 h的P53、COX-2的表达显著下降(P值均＜0.05).结论 PA诱导的足细胞凋亡呈时间依赖性,随时间延长,足细胞凋亡逐渐增多.PA诱导的足细胞凋亡过程中P53、COX-2的表达增加,足细胞凋亡过程与caspase-3无关.COX-2抑制剂具有抑制足细胞凋亡的作用,与地塞米松相当.     

塞来昔布对急性白血病原代细胞凋亡的影响

目的:探讨塞来昔布对急性白血病原代细胞的增殖抑制与诱导凋亡的作用。方法:采用MTT法检测塞来昔布对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用,倒置显微镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:塞来昔布能显著抑制急性白血病原代细胞的增殖,且呈时间和剂量具有依赖性(P0.05);流式细胞仪结果分析发现,实验组与对照组的凋亡率有显著差异,且实验组的凋亡率明显升高,呈剂量依赖性(P0.01)。结论:塞来昔布能有效抑制急性白血病原代细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制有待进一步研究。     

塞来昔布对胆管癌细胞株QB0939 VEGF表达的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对胆管癌细胞株QBC939血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法体外培养胆管癌细胞株QBC939,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测塞来昔布与胆管癌细胞株QBC939VEGF表达间的时-效关系和量-效关系。结果塞来昔布在一定剂量（20-80μmol／L）和时间（12-48h）内显著抑制QBC939细胞VEGFmRNA的表达和培养上清液中VEGF的浓度,与单独培养液对照组比较,差别有统计学意义（P〈0．05）。结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布可在一定时间和剂量范围抑制胆管癌细胞株QBC939VEGF的表达。     

塞来昔布对人舌鳞癌Tca8113细胞survivin表达与诱导细胞凋亡的作用

目的　观察环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对人舌鳞癌Tca8113细胞COX-2、survivin表达的影响及诱导细胞凋亡的作用,探索抑制COX-2活性后对Tca8113细胞生物学行为影响的机制。方法　塞来昔布作用Tca8113细胞后,采用流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡率,半定量RT-PCR法、Western Blot法检测COX-2、Survivin mRNA及其蛋白表达变化。结果　塞来昔布以剂量依赖方式抑制细胞周期进程的同时,其诱导细胞凋亡的作用也明显增强,同时,塞来昔布下调节Survivin mRNA及其蛋白表达,同时抑制COX-2蛋白的表达,但对COX-2 mRNA表达的抑制作用较弱。结论　COX-2抑制剂塞来昔布下调节survivin表达的作用可能与抑制肿瘤细胞生长、诱导细胞凋亡的有关,其机制有待进一步研究。     

塞来昔布对人肝癌细胞增殖的抑制作用

目的 观察塞来昔布对肝癌增殖的抑制作用.方法 以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,四唑氮蓝还原法(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞增殖的抑制作用,流式细胞技术检测细胞周期,并用小鼠肝癌细胞株H22建立昆明鼠移植瘤模型,观察塞来昔布对移植瘤生长的抑制效果.结果 MTT显示塞来昔布对人肝癌细胞SMMC-7721生长有显著的抑制作用,且呈现出时间和剂量依赖性;塞来昔布(40 μmol/L)作用于SMMC-7721细胞36h后,G1期细胞比率由44.7%上升至49.9%,S G2/M期细胞比率由55.4%下降至50.1%,细胞增殖受抑制.在体动物实验表明,塞来昔布对移植瘤的生长和局部转移有显著的抑制效果.结论 环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对不同来源的肝癌细胞株均有增殖抑制作用,可能是预防和治疗肝癌的重要候选药物之一.     

塞莱西布诱导胆囊癌细胞凋亡和生长抑制的作用

目的:研究塞莱西布对人胆囊癌细胞生长抑制及诱导凋亡的作用.方法:应用TUNEL,MTT法,流式细胞技术等方法对经塞莱西布作用的人胆囊癌细胞进行观察和检测.结果:塞莱西布对人胆囊癌细胞具有明显的生长抑制和促进调亡作用(P<0.05),在一定范围内存在时间依赖关系和剂量依赖关系(P<0.05).结论:塞莱西布诱导肿瘤细胞产生凋亡,是其对肿瘤细胞生长抑制作用的基础.     

Celecoxib Inhibits Proliferation and Induces Apoptosis via Cyclooxygenase-2 Pathway in Human Pancreatic Carcinoma Cells

In order to evaluate the effects and mechanisms of celecoxib in inhibiting proliferation and inducing apoptosis on human pancreatic carcinoma cells, the anti-proliferative effect was measured by using methabenzthiazuron (MTT) assay. Cell cycle and apoptosis were analyzed by using flow cytometry (FCM), and the PGE2 levels in the supernatant of cultured pancreatic carcinoma cells were quantitated by enzyme-linked immunoabsordent assay (ELISA). Our results showed that celecoxib suppressed the production of PGE2 and inhibited the growth of JF-305 cells, and the anti-proliferative effect of celecoxib could be abolished by addition of PGE2. FCM revealed that celecoxib could inhibit proliferation and induce apoptosis by G1 S cell cycle arrest. It was concluded that cyclooxygenase-2 specific inhibitor celecoxib could inhibit proliferation and induced apoptosis of human pancreatic carcinoma cells via suppression of PGE2 production in vitro.     

塞来昔布对肺癌细胞的增殖抑制、环氧化酶-2表达的影响和化疗敏感性

目的：探讨环氧化酶（COX）-2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对肺癌A549细胞的增殖抑制、COX-2表达和化疗敏感性的影响。方法：用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTY法）检测塞来昔布单药及联合顺铂（DDP）对COX-2高表达的人肺腺癌细胞A549的增殖抑制，流式细胞术分析塞来昔布联合DDP对细胞周期及细胞凋亡的影响,Westernblot法分析不同浓度塞来昔布干预后对A549细胞内COX-2蛋白表达的影响。结果：MTT法检测显示，塞来昔布（0-100μmol／L）对肺腺癌A549细胞的抑制作用呈时间依赖性、剂量依赖性效应。联合用药组与单药组相比差异有显著性（P〈0．001）。流式细胞术分析显示，塞来昔布12．5μmol／L与25μmol／L联合DDP0．5ms／L时，A549细胞明显阻滞于c,o-Gl期，S期细胞比例减少，联合用药组的凋亡率明显高于单药组（P〈0．001）。Westem blot法分析显示，塞来昔布浓度超过50μmol／L时，COX-2蛋白的表达受到了抑制。结论：塞来昔布的抗肿瘤作用机制涉及到COX．2依赖性途径。塞来昔布能增加DDP的化疗敏感性，塞来昔布与DDP联用对人肺腺癌A549细胞有明显协同抗肿瘤效应，该作用可能是通过增强对A549细胞的增殖抑制、诱导凋亡来实现的。     

光动力联合塞来昔布对子宫颈癌COX-2表达及影响的研究

目的研究光动力联合塞来昔布对子宫颈癌细胞中环氧合酶-2(cyclooxynase-2,COX-2)蛋白表达及细胞增殖和凋亡的影响。方法①培养子宫颈癌Hela细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测选择性COX-2抑制剂塞来昔布(celecoxib)对子宫颈癌Hela细胞增殖抑制作用。②将Hela细胞分为4组:空白对照组(Hela,H组)、塞来昔布组(celecoxib,C组)、光动力组(photodynamics therapy,PDT,P组)、塞来昔布+光动力组(celecoxib+photodynamics therapy,P+C组)、分别应用蛋白印迹法(Westernblot)和免疫组化法检测COX-2蛋白表达情况。结果 MTT比色法检测显示,celecoxib作用Hela细胞24 h后对宫颈癌细胞有相对的抑制作用。Western blot和免疫组化法检测结果均显示:celecoxib联合PDT作用Hela细胞24 h后COX-2蛋白的相对表达水平明显降低,与其它3组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论选择性COX-2抑制剂celecoxib能抑制人子宫颈癌细胞的增殖,且呈浓度依赖性,随着浓度的增大作用逐渐增强。PDT联合选择性COX-2抑制剂celecobix能有效抑制靶基因COX-2的表达,进而可抑制子宫颈癌细胞增殖并诱导细胞调亡增加,为子宫颈癌的基因研究及治疗提供新思路。     

NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制

目的 探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制.方法 采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(comet assay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05).NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡.结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制.     

shRNAmir慢病毒载体沉默环氧合酶-2对鼻咽癌细胞放疗敏感性的影响

摘要：目的探讨COX-2基因沉默对鼻咽癌C666-1细胞放射敏感性的影响。方法以稳定沉默COX-2基因表达的鼻咽癌
Anti-COX-2 C666-1细胞和对照细胞Anti-GL-2 C666-1为研究对象,采用克隆形成实验及曲线拟合计算不同剂量辐射后
各放射生物学参数和放射增敏比;采用流式细胞仪检测辐射后细胞周期的变化;采用体内荷瘤裸鼠动物模型检测放疗后
皮下移植瘤的生长曲线,并计算抑瘤率。结果Anti-COX-2 C666-1细胞SF2、D0、Dq值较对照组均明显偏低,α/β显著增
高,放射增敏比为1.4014;COX-2 沉默后降低了辐射诱导的G2/M 期阻滞,并增加辐射后荷瘤裸鼠的抑瘤率。结论
COX-2基因稳定沉默后可改变鼻咽癌C666-1的放射生物学参数,并降低辐射引起的G2/M期阻滞,增大抑瘤率,能够起到
放疗增敏的作用。
     

PRMT1通过促进RRM2表达抑制鼻咽癌细胞凋亡

目的 探讨PRMT1能否通过促进RRM2抑制鼻咽癌细胞凋亡。方法 免疫组化和Western blot共同检测鼻咽癌和癌旁组织中PRMT1及RRM2的相对表达量;以人正常鼻黏膜上皮细胞系（HNEpC）作为对照,Western blot实验检测不同鼻咽癌细胞系中PRMT1和RRM2蛋白的相对表达量;对CNE-2细胞中PRMT1分别进行过表达和下调,过表达实验设阴性对照组（oe NC:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1质粒）、过表达PRMT1组（oe PRMT1:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1 PRMT1质粒）、下调实验设阴性对照组（si-NC:CNE-2细胞中转染NC无关序列）及PRMT1小干涉RNA组（si-PRMT1:CNE-2细胞中转染PRMT1小干涉RNA）,对CNE-2细胞中RRM2分别进行过表达和下调,过表达实验设阴性对照组（oe NC:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1质粒）、过表达RRM2组（oe RRM2:CNE-2细胞中转染pcDNA3.1 RRM2质粒）、下调实验设阴性对照组（si-NC:CNE-2细胞中转染NC无关序列）及RRM2小干涉RNA组（si-RR...     

AKT抑制剂E20诱导鼻咽癌细胞凋亡和自噬

目的：通过细胞实验探讨一种新的AKT抑制剂E20对人类CNE-2细胞的抗肿瘤效应及其内在的调节机制。方法：CCK8法检测E20处理后CNE-2细胞的活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Mito-SOX流式数据分析检测线粒体ROS水平的变化;Western blot检测E20处理后细胞凋亡相关蛋白（AIF和Bcl-2）和自噬相关蛋白（LC3B-I、LC3B-II和P62）表达的变化;透射电子显微镜观察细胞线粒体超微结构和自噬小体的变化。结果：E20显著抑制CNE-2细胞增殖,促进其凋亡,且呈时间剂量依赖性（P<0.05）;E20处理后CNE-2细胞线粒体ROS水平显著升高,细胞凋亡蛋白AIF显著升高,抗凋亡蛋白Bcl-2显著降低,自噬相关蛋白LC3B-II显著升高、P62显著降低（均P<0.05）;透射电镜发现E20处理后的细胞线粒体受损,自噬小体增多。结论：E20可以通过线粒体途径诱导细胞凋亡,同时可能激活其自噬来抑制鼻咽癌细胞的增殖,为鼻咽癌的治疗提供了一种潜在的化疗策略。     

氯喹对鼻咽癌细胞凋亡的影响

目的:探讨氯喹(CQ)对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法检测不同浓度(0、2、4、8、16、32mol/L)CQ对鼻咽癌细胞CNE-2Z的增殖抑制效应;集落克隆实验法检测不同浓度CQ对集落克隆形成的影响;溴化丙啶单染检测CQ诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡;Western blot检测CQ(10mol/L)处理鼻咽癌细胞CNE-2Z不同时间(0、6、16、24 h)内质网应激反应标志物葡萄糖调节蛋白(GRP-78)的表达。结果:不同浓度CQ均对鼻咽癌细胞CNE-2Z具有明显的增殖抑制作用,16mol/L CQ作用于鼻咽癌细胞CNE-2Z 24、48、72 h细胞存活率分别为85.94%、75.34%和56.45%。同时,CQ具有抑制鼻咽癌细胞CNE-2Z的集落克隆形成的作用。并且,CQ呈剂量依赖性诱导鼻咽癌细胞CNE-2Z的凋亡。另外,CQ诱导鼻咽癌细胞上调GRP-78的表达。结论:CQ能抑制鼻咽癌细胞增殖,并通过引起过度的内质网应激反应机制诱导其凋亡。