正常人和原发性开角型青光眼患者小梁网M3受体的表达

目的 研究正常人和晚期原发性开角型青光眼（primary open angle glaucoma,POAG）患者小梁网M3受体的表达,探讨POAG患者小梁网的病理生理改变。方法 取5例正常人及10例晚期POAG患者小梁网组织标本,应用免疫组化方法检测小梁细胞M3受体,并利用计算机图像分析系统对检测结果进行分析。结果 5例正常人的小梁网组织标本的M3受体表达,阳性细胞主要分布在葡萄膜小梁网处,前至Schwalbe线,后达巩膜突。晚期POAG患者小梁网组织标本中,小梁细胞数量明显减少,M3受体阳性细胞亦相应减少且散在分布,部分标本甚至无阳性M3受体表达。结论 正常人小梁网细胞M3受体表达阳性,晚期POAG患者小梁网M3受体阳性细胞数量明显减少且分布不规则。     

开角型青光眼有Rieger综合征患者中RIEG基因突变筛查

目的 分析国人开角型青光眼及Ｒｉｅｇｅｒ综合征中ＲＩＥＧ基因突变情况。方法 收集无血源关系的原发性开角型青光眼１５例、先天性青光眼８例、Ｒｉｅｇｅｒ综合征４例。制备全体患者的血白细胞基因组ＤＮＡ。应用ＰＣＲ法扩增所有样品中ＲＩＥＧ基因全部编码区（共６例引物）,然后分别用异源双链－ＳＳＣＰ法筛查基因突变。结果 所分析的２７例患者基因组ＤＮＡ中均未检测到ＲＩＥＧ突变。结论 ＲＩＥＧ基因变异可能不是本组     

小梁网细胞外基质与原发性开角型青光眼的病因研究

小梁网细胞外基质与原发性开角型青光眼的病因研究陈林闻毅颐广州市第二医院眼科（５１０１５０）小梁网是小梁细胞贴附于小梁柱上形成的筛网状结构。房水是通过网孔引流的。房水引流通畅与否直接与网孔大小有关。小梁网细胞外基质（ＥｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒＭａｔｒｉ...     

糖皮质激素对小梁网的作用研究进展

应用糖皮质激素可引起眼压升高，它与原发性开角型青光眼关系密切。糖皮质激素对小梁网的作用可作为一个良好模型用于研究青光眼的发病机制。糖皮质激素对小梁网的作用是多方面的，它包括细胞外基质、细胞膜、细胞骨架及细胞核的多重变化。糖皮质激素受体的分子机制的新发现有助于从受体角度了解青光眼的发病机制。     

原发性开角型青光眼小梁细胞的体外培养及其生物学特性

背景原发性开角型青光眼（POAG）是一种常见致盲性眼病,其特点是房水外流阻力增加导致眼压增高。位于房水外流通道的小梁网调节房水的外流,因此研究小梁网细胞的生物学特性有着重要的意义。目的探讨POAG小梁细胞体外培养的方法及其生物学特性。方法经小梁切除术收集8例开角型青光眼患者患眼的带小梁网的深层巩膜组织块进行体外原代和传代培养,用鼠抗人层黏连蛋白（LM）单克隆抗体、兔抗人纤维连结蛋白（FN）单克隆抗体、鼠抗人神经元特异性烯醇化酶（NSE）单克隆抗体进行免疫组织化学检测以对传代细胞进行鉴定,在透射电子显微镜下对传代细胞的超微结构进行观察,并将传代小梁细胞的生物学特性与本研究组前期培养的正常小梁细胞进行比较。结果组织块培养10d左右,可见细胞从其边缘向外生长。传代细胞在4d内处于对数生长期,其后进入平台期,第7天细胞基本融合。第3代POAG小梁细胞及正常人眼小梁细胞中可见FN、LM和NSE均呈阳性表达,证实传代细胞为小梁细胞,而空白对照组细胞未见FN、LM和NSE表达。第3代POAG小梁细胞和正常小梁细胞中FN的A450值分别为0．354±0．06和0．26±0．01,LM的A450值分别为0．34±0．03和0．25±0．02,差异均有统计学意义（FN：t=14．446,P=0．001;LM：t=9．346,P=0．001）。与正常小梁细胞比较,第3代POAG小梁细胞表面的微绒毛、细胞质的溶酶体及吞噬小泡含量减少。结论采用组织块培养法可成功在体外培养POAG小梁细胞,该研究结果为研究青光眼的发病机制提供了细胞学基础。     

OPTN基因突变与一原发性开角型青光眼家系的关系研究

目的　探讨视神经病变诱导基因OPTN与一原发性开角型青光眼 (POAG)家系的关系。方法　通过遗传学调查并对该家系中 11例POAG患者和 9例一级亲属的OPTN基因进行荧光标记自动测序 ,寻找OPTN基因 4～ 16外显子的单核苷酸多态性 (SNP) ,用限制性内切酶分析技术检测 3 2例对照组人群相应的SNP。结果　OPTN基因 4～ 16外显子共检测出 5种SNP :412G >A、60 3T >A、12 67 12 68insC并 12 71 12 72insC、15 3 7 15 3 8insC和 1878 1879insA。其中除412G >A外 ,其他突变均将改变氨基酸的编码 ,和对照人群分布有显著性差异。结论　OPTN基因突变可能是本家系POAG发病的原因之一     

高度近视与原发性开角型青光眼

目的:从流行病学、临床特征及诊断、遗传学说及机制等方面对高度近视与原发性开角型青光眼的关系及研究进展进行综述。方法:仔细分析了28篇原文,总结出高度近视与原发性开角型青光眼的可能机理。结果:高度近视与原发性开角型青光眼密切相关,其可能的机制有:①升压基因学说。②胶原基因学说。结论:高度近视与原发性开角型青光眼密切相关,根据TIGR基因理论和胶原基因理论,高度近视与原发性开角型青光眼都与TIGR基因突变和胶原疾病有关。     

原发性开角型青光眼MYOC- TIGR基因突变研究

目的 筛选并研究原发性开角型青光眼(POAG)小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白MYOC- TIGR基因突变情况。方法 病例对照研究。抽取2002年1至12月就诊并诊断为POAG患者118例和150例非POAG对照者的外周静脉血4～8ml,采用酚-氯仿抽提全基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增全基因组DNA,以单核苷酸构象多态性(SSCP)分析MYOC基因的3个外显子（7对引物）编码区域序列改变。对SSCP分析异常者,采用双向测序法进一步证实。应用Cfr13I、Hinfl及BsmA1等限制性内切酶检测对照者MYOC基因编码区序列改变。POAG与非POAG人群MYOC基因各位点突变率比较采用x2检验。结果 基因序列分析发现G12R、I288M及Y353I共3个基因序列改变。118例POAG患者中仅有5例(4.23％)发生G12R位点突变,150例对照者中未见G12R位点改变;两组G12R位点突变率比较差异有统计学意义(x2=4.37,P=0.037)。POAG组和对照组均有I288M和Y353I位点改变,但两组突变率比较差异无统计学意义(x2=0.07,P=0.791和x2=0.56,P=0.453)。POAG患者基因突变率4.23％。结论 MYOC基因突变可能与POAG发病有关,MYOC基因突变可能是POAG发病的分子机制之一。     

Myocilin基因Gln368STOP位点突变与原发性开角型青光眼相关性的Meta分析

目的研究Myocilin（MYOC）基因Gln368STOP位点突变与原发性开角型青光眼（POAG）的相关性。方法以POAG患者和对照组基因型分布的优势比（OR）为统计量。电子检索和手工检索相关文献,剔除不符合要求的文献,应用RevMan 4．2软件对各纳入研究结果进行异质性检验,采用相应数学模型进行数据合并,并评价发表偏倚的影响。结果共检索到符合要求的文献11篇,均为病例-对照研究,POAG患者共3077例,对照组共2063例,数据合并结果显示POAG组与对照组发生Gln368STOP位点突变的OR值（95％C1）为6．01（2．57～14．04,P〈0．01）。结论MYOC基因Gln368STOP位点突变与POAG患病风险增加相关,是POAG发病的危险因素之一。     

广州开角型青光眼家系致病基因定位与功能初步研究

目的 鉴定常染色体显性遗传家族性开角型青光眼家系（GZ.1）致病基因并探讨其致病机制。方法 应用全基因组扫描、连锁分析、核苷酸直接测序法筛查GZ.1家系的致病性基因突变,进一步利用体外基因转染技术,观察突变型基因在小梁细胞中的表达、分布及对细胞凋亡的作用。结果 GZ.1家系所有患者均存在myocilin基因第三外显子Pro370Leu杂合突变（16／16）,而家系正常人中均未检测到该突变（0／8）。小梁细胞体外转染野生型和突变型myocilin基因后,经免疫印迹法检测证实,培养上清液中突变型myocilin蛋白的细胞外分泌较野生型明显减少;荧光免疫组化检测结果证实野生型myocilin蛋白在小梁细胞内呈点状、弥漫分布;而Pro370Leu突变型myocilin蛋白以积聚体形式存在于胞质内;经流式细胞仪检测突变型转染组凋亡细胞百分比较野生型转染组及对照组轻度升高。结论 突变型（Pro370Leu）myocilin基因为GZ.1家系的致病基因,突变型（Pro370Leu）myocilin蛋白在小梁细胞内以积聚体形式存在,可能是由于蛋白质错误折叠所致,并可能诱导小梁细胞凋亡。     

CYP1B1基因突变与原发性开角型青光眼发病关系的研究进展

原发性青光眼包括原发性开角型青光眼（POAG）、原发性闭角型青光眼（PACG）及原发性婴幼儿青光眼（PCG）.目前认为原发性青光眼的发病是遗传因素、环境因素、生活习惯等多种因素综合作用的结果,其中遗传因素,尤其是基因突变,在青光眼的发病过程中起着重要作用.自1997年发现CYP1B1基因为PCG的致病基因以来,关于CYP1B1基因突变与青光眼发病关系的研究成为青光眼遗传和基因研究的热点.随着研究的逐渐深入,许多学者认为CYP1B1基因也是POAG致病基因的候选基因.本研究对近十余年来对CYP1 B1基因的结构和功能以及CYP1B1基因突变与POAG发病及进展关系的研究进展进行总结.     

我国东北地区两家系原发性开角型青光眼的OPTN基因新突变研究

目的 研究我国东北地区两家系原发性开角型青光眼(POAG)的致病基因并确定其基因突变位点.方法 病例对照实验.对两家系POAG患者进行临床研究和系谱分析.采集L家系6例患者和6例健康成员与C家系4例患者和4例健康成员的静脉血,提取基因组DNA.通过连锁分析,确定致病基因的染色体位点后,应用聚合酶链反应(PCR)扩增OPTN基因外显子,直接测序确定致病的基因突变位点.结果 L家系POAG患者的OPTN基因第10外显子发生错义突变,1274 位点AAA变为GAA,对应的赖氨酸替换为谷氨酸(Lys322Glu).L家系中健康成员、C家系全部成员及87名正常人均未发现该位点突变.结论 OPTN基因新突变(Lys322Glu)是L家系POAG的致病基因.     

原发性开角型青光眼与正常人群搏动性眼血流量比较研究

目的　探讨原发性开角型青光眼 (POAG)的血流变化规律 ,及其作为诊断指标的敏感性和特异性。方法　选择POAG患者 10 0例 (10 0只眼 ) ,其中男、女各 5 0例 ,均取单眼测量。POAG诊断标准 :(1) 3次不同时间测量眼压值 >2 5mmHg(1mmHg =0 133kPa) ,眼压升高时房角开放 ;(2 ) 2 4h眼压差值 >8mmHg ;(3)典型青光眼性视乳头改变 ;(4)典型青光眼性视野缺损。正常对照者男、女各5 0例 (5 0只眼 ) ,选择条件 :(1)性别相同 ;(2 )年龄相差 <5岁 ;(3)屈光不正 ,屈光度数差异 <± 2 0 0DS。采用搏动性眼血流量 (POBF)测定仪 ,测量项目包括搏动性眼血流量、脉搏周期内眼压变化值(IOPPA)、脉率 (PR)、最大眼压值 (Max Iop)、最小眼压值 (Min IOP)、眼压均值 [(Max IOP Min IOP) /2次眼压均值 (Ave IOP) ]。青光眼组与正常对照组测定数值比较采用配对t检验 ,Ave IOP的变化值及视野检测均值和标准差与POBF的变化值做相关性分析 ;计算POBF值作为诊断指标的特异性和敏感性。结果　POAG组与正常对照组非研究因素有可比性 ,POAG组POBF值为 (9 72± 3 4 7) μl/s ,正常对照组POBF值为 (12 0 4± 4 6 8) μl/s;POAG患者的POBF、PV、PA、Ave IOP值均小于正常对照组 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。视野检测均值和标准差与PO     

Study of TIGR gene in patients with primary open angle glaucoma

PURPOSE: The aim of the study was to identify the mutations of TIGR gene in Polish patients with primary open angle glaucoma (POAG), and to define the genotype-phenotype correlation, between the type of mutation and the clinical picture of POAG. MATERIAL AND METHODS: The study included 45 patients with verified and proved diagnosis of POAG. DNA was isolated from peripheral blood lymphocytes of patients. The PCR amplification of all three exons of TIGR gene was done for every patient. The screening for the sequence changes in the PCR products of TIGR gene was done using conformation sensitive gel electrophoresis (CSGE). The probes with identified heteroduplexes were sequenced using an automatic DNA sequencer. RESULTS: During amplification of the coding regions of TIGR gene and the promoter sequences and flanking sequences of introns, 315 PCR products were obtained. The CSGE analysis of these PCR products allowed to detect 60 possible changes of sequence in 28 patients. 34 heteroduplexes were chosen for sequencing, including 29 unique changes and 5 changes representative for repeated, identical heteroduplexes. Direct sequencing allowed to detect only four different changes in TIGR gene sequence. Three of them: 5'UTR -83G-->A (present in 14 patients), +227 exon 1 G-->A, Arg76Lys (present in 14 patient) and +311 exon 3 T-->C, Tyr347Tyr (present in 4 patients) were already described in literature as neutral polymorphisms of TIGR gene. Only one change in promoter: 5'UTR 126T-->C (present in 2 patients) was not described in the literature to date. However, because this change doesn't alter directly the sequence of aminoacids in protein product of TIGR gene, it is very difficult to conclude its pathogenetic role. CONCLUSIONS: Our studies have shown no TIGR gene changes that can be recognized as causative mutations in development of POAG. Thus, the definition of any genotype-phenotype correlation was impossible. The study on the role of the change in promoter sequence that was not yet described, will be continued. Exclusion of TIGR gene mutations in Polish patients with POAG means that they probably have mutations in other genes, what paves the way to the studies on other loci that predispose to POAG.     

原发性开角型青光眼患者房水内皮素的检测

目的 探讨内皮素在原发性开角型青光眼发病中的作用。方法 应用放射免疫分析法对３０例原发性开角型青光眼患者和１５例对照组房水中ＥＴ含量进行测定。结果 青光眼患者组房水ＥＴ含量明显高于对照组房水ＥＴ含量（Ｐ〈０．０５）。结论 开角型青光眼患者的眼局部ＥＴ分泌过多。内皮素可能在原发性开角型青光眼的发病机制中起作用。     

高眼压性和正常眼压性原发性开角型青光眼视神经损害特征的比较

目的探讨高眼压性原发性开角型青光眼(POAG)和正常眼压性青光眼(NTG)患者视神经损害的不同特点。方法应用德国Heidelberg公司生产的视网膜断层扫描仪对高眼压性POAG39例(47只眼)和NTG32例(38只眼)进行定量视盘参数和神经纤维层检查,并行眼底立体照相观察视网膜神经纤维层(RNFL)缺损类型,检测静态定量视野,并对检查结果进行比较。结果(1)NTG组视盘总体参数和分区(除颞侧外)盘沿面积、沿/盘面积小于高眼压性POAG组,而C/D大于高眼压性POAG组;平均RNFL厚度和RNFL面积在颞下和颞上小于高眼压性POAG组;总体盘沿容积小于高眼压性POAG组,总体平均视杯深度和颞下视杯面积大于高眼压性POAG组,两组差异均有统计学意义(P<005)。两组颞侧视盘各参数比较,差异无统计学意义(P>005)。(2)RNFL缺损类型高眼压性POAG组RNFL弥漫性缺损占5319%,局限性缺损占426%;NTG组弥漫性缺损占2105%,局限性缺损占5526%。两组RNFL缺损类型构成比比较,差异有统计学意义(P<001)。结论NTG较高眼压性POAG具有较大的C/D值、C/D面积比和窄盘沿面积,RNFL丢失严重。高眼压性POAG患者的RNFL以弥漫性缺损为主,NTG患者的RNFL以局限性缺损为主。两者视神经损害具有不同特点,其损害机制可能不同。(中华眼科杂志,2005,41136140)     

我国原发性开角型青光眼患者TIGR基因突变筛选、克隆及序列分析

目的　研究我国原发性开角型青光眼 (primaryopenangleglaucoma,POAG)患者小梁网糖皮质激素诱导反应蛋白 (trabecularmeshworkinducedglucocorticoidresponseprotein ,TIGR)基因的突变情况。方法　 (1)应用聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction ,PCR)方法扩增 70例POAG患者、2 0例正常对照组的TIGR基因 3个外显子 (7对引物 )的各个片段 ,应用单链构像多态 (single strandedconformationpolymorphism ,SSCP)筛选可能突变的PCR产物。 (2 )将筛选出的样本 (PCR产物 ) ,克隆到PT Adv载体 ,以EcorI酶切鉴定重组质粒 ,然后用ABI 373自动测序仪行双向测序。结果　 (1)用SSCP方法筛选的 2例POAG患者在TIGR基因第 3外显子中部 (第 6对引物 )片段出现单链带型异常 ;正常对照组未见异常。 (2 )克隆测序的 2例样品 ,1例在 388密码子位置出现由GAT突变为AAT ,氨基酸由天冬氨酸替换为天冬酰胺 ,即Asp388Asn ;另 1例碱基序列无变化。提示我国POAG患者TIGR基因突变仅为 1 4% (1/ 70 ) ,远较国外为低。结论　我国POAG患者的发病机制可能与TIGR基因突变有关 ,但突变率较国外低 ,提示POAG发病存在地区或种族之间的差异。