c—erbB—2,p53,bcl—2和nm23—H1在肺癌中的表达

目的：探讨ｃ－ｅｒｂＢ－２,ｐ５３,ｂｃｌ－２和ｎｍ２３－Ｈ１基因在肺癌发生发展过程中的作用。方法;用免疫组化ＡＢＣ法对原发性肺癌组织中４种基因的表达和突变进行检测。结果：５８例肺癌中,３１例ｐ５３过度表达,１８例ｂｃｌ－２过度表达。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ｎｍ２３－Ｈ１在１０例小细胞癌中未见表达。     

鼻咽癌组织中bcl-2、bax和p53的表达及其与瘤细胞凋亡的关系

目的：了解鼻咽癌组织中瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达及其与瘤细胞凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｅｘ,ＡＩ）的关系。方法：对３８例未经治疗的鼻咽癌组织,应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达;末端标记细胞死亡检测法（ＴＵＮＥＬ）计算癌细胞的凋亡指数。结果：（１）３７例（９７４％）中有９０％左右的瘤细胞呈ｂｃｌ２过表达;（２）３８例（１００％）中有７０％左右的瘤细胞过表达ｂａｘ;（３）２９例（７６３％）呈ｐ５３过表达;（４）３８例活检组织的平均ＡＩ为２６０２±２６４２／ＨＰＦ;（５）ＡＩ与ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达无相关性。结论：（１）本组大多数鼻咽癌组织的绝大部分瘤细胞均呈ｂｃｌ２和ｂａｘ高表达;（２）由于ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达已在高水平达到相对平衡,因此在大多数人体鼻咽癌中它们可能并不起到介导瘤细胞凋亡的主导作用;（３）鼻咽癌组织中过表达的ｐ５３蛋白可能已失去了调节ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达进而影响细胞凋亡的功能。     

c-erbB-2、p53、bcl-2和nm23-H1在肺癌中的表达

目的：探讨ｃｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｂｃｌ２和ｎｍ２３Ｈ１基因在肺癌发生发展过程中的作用。方法：用免疫组化ＡＢＣ法对原发性肺癌组织中４种基因的表达和突变进行检测。结果：５８例肺癌中,３１例（５３４５％）ｐ５３过度表达,１８例（３１０３％）ｂｃｌ２过度表达。ｃｅｒｂＢ２与ｎｍ２３Ｈ１在１０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）中未见表达。而在４８例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣｓ）中两者过度表达率均为５０％。ｃｅｒｂＢ２与ｎｍ２３Ｈ１表达呈正相关（Ｐ＜００５）。腺癌ｎｍ２３Ｈ１的表达明显高于鳞癌（Ｐ＜００５）。ｐ５３、ｂｃｌ２蛋白表达在肺癌分化程度中呈负相关（Ｐ＜００５）。ｎｍ２３Ｈ１、ｐ５３和ｂｃｌ２的表达与患者的生存率有关（Ｐ＜００５）。结论：ｃｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｂｃｌ２和ｎｍ２３Ｈ１基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。     

细胞凋亡调控因素有关基因的研究

抑制细胞凋亡的基因主要是Ｂｃｌ－２基因和Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂｃｌ－ＸＬ，ＭＣＬ－１），其编码的蛋白质能抑制细胞凋亡和延长细胞寿命，其抑细胞凋亡作用以Ｂｃｌ－２最为重要。促进细胞凋亡基因或因素较多，主要有Ｂｃｌ－２相关基因（Ｂａｘ，Ｂｃｌ－Ｘｓ）、ｐ５３肿瘤抑制基因、ｃ－ｍｙｃ原癌基因、ＴＧＦ－β、Ｆａｓ抗原及其配体，其中Ｂａｘ基因、ｐ５３基因与Ｂｃｌ－２基因在细胞凋亡的调控作用方面密切相关     

维生素A对胸腺凋亡有关基因的影响

为观察营养缺乏及补充维生素Ａ（ＶＡ）对胸腺细胞凋亡有关基因的影响，采用原位杂交及免疫组化的方法观察了胸腺组织ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ，Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达。结果表明营养缺乏的大鼠胸腺细胞ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显降低，而Ｆａｓ及Ｂａｘ蛋白的表达则明显增强；补充ＶＡ后大鼠胸腺ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达明显增强，Ｂａｘ蛋白的表达明显降低，而Ｆａｓ蛋白的表达无明显变化。本结果表明：营养缺乏时胸腺细胞凋亡增加导致免疫功能降低，补充ＶＡ可抑制细胞凋亡，可能是通过促进ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的表达，抑制Ｂａｘ蛋白的表达而起作用     

食管癌变过程中p53、c-myc、bcl-2表达及其与细胞凋亡的关系

目的：探讨食管癌变过程中肿瘤抑制基因ｐ５３和癌基因ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的变化及其与细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化法（ＡＢＣ）检测２７９例食管粘膜活检组织中ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２的表达以及细胞凋亡的变化。结果：从食管正常上皮到基底细胞增生、间变和癌，ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２免疫阳性表达率及细胞凋亡发生率和细胞凋亡指数（ＡＩ）均呈升高趋势，而且在同一阶段病变，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ阳性表达时凋亡指数高于其阴性表达，而ｂｃｌ－２阳性表达时凋亡指数低于其阴性表达。结论：在食管癌变过程中可能有多种肿瘤抑制基因和癌基因参与，细胞凋亡在食管癌变过程中可能有重要的生物学意义。     

胶质瘤p53、bcl-2、MDM2表达与细胞增殖和凋亡的关系

目的：研究胶质瘤中ｐ５３ 、ｂｃｌ２ 、ＭＤＭ２ 表达与细胞增殖和凋亡的关系。方法：对４８ 例胶质瘤用免疫组化法检测ｐ５３、ｂｃｌ２、ＭＤＭ２ 蛋白表达;以Ｋｉ６７ 标记指数和ＡｇＮＯＲ 计数检测其增殖活性;用ＴＵＮＥＬ 法检测细胞凋亡。结果：ｐ５３、ｂｃｌ２、ＭＤＭ２ 蛋白表达阳性率分别为４７－９ ％ 、３５－８ ％ 及１２－５ ％ ,细胞增殖活性随肿瘤ｐ５３ 、ｂｃｌ２、ＭＤＭ２ 表达水平增高而增高,细胞凋亡则相反。结论：ｐ５３、ｂｃｌ２、ＭＤＭ２ 蛋白过表达与细胞增殖失控、凋亡抑制关系密切,在胶质瘤恶性进展中起重要作用。     

鼻咽癌组织中bcl—2,bax和p53的表达及其与瘤细胞？…

目的;了解鼻咽癌细胞中瘤细胞ｂｃｌ－２、ｂａｘ和ｐ５３的表达及其与瘤细胞凋亡指数的关系。方法：对３８例未经治疗的鼻咽癌组织,应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测瘤ｂｃｌ－２、ｂａｘ和ｐ５３的表达;末端标记细胞死亡检测法（ＴＵＮＥＬ）计算癌细胞的凋亡指数。结果：（１）３７例（９７．４％）中有９０％左右的瘤细胞呈ｂｃｌ－２过表达;（２）３８例（１００％）中有７０％左右的瘤细胞过表达ｂａｘ;（３）２９例（７６．３     

食管癌变过程中p53,c—myc,bcl—2表达及其与细 …

探讨食管癌变过程中肿瘤抑制基因Ｐ５３５ 基因ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的变化及其与细胞凋亡的关系。方法：采用免疫组化法检测２７９例食管粘膜活检组织中ｐ５３－，ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２的表达以及细胞凋亡的关系。结果：从食管正常上皮到基底细胞增生，间变和部，ｐ５３，ｃ－ｍｙｃ－ｂｃｌ－２免疫阳怀表达率及细胞凋亡发生率和细胞凋亡指数均呈升高趋势，而且在同一阶段病变，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ阳性地凋亡指数高于其阴性表     

脑缺血过程中B细胞淋巴瘤-2基因家族基因的表达及与细胞死亡的关系

为了了解Ｂ细胞淋巴瘤－２基因（ｂｃｌ－２）家族基因在脑缺血后表达规律及其调节细胞死亡的作用，通过阻塞大鼠双侧颈总动脉和椎动脉建立全脑缺血模型，观察了Ｂａｘ、ｂｃｌ－ｘＬ及ｂｃｌ－２基因表达变化以及与细胞死亡的关系。在缺血再灌流６ｈ，Ｂａｘ免疫染色增加，２４～４８ｈ达到高峰，ｂｃｌ－ｘＬｍＲＮＡ在２４ｈ后表达下降，ｂｃｌ－ｘＬ蛋白在４８ｈ可见明显降低，并且在缺血敏感神经元Ｂａｘ和ｂｃｌ－ｘＬ表达变化显著，与细胞凋亡发生的部位一致，相反，ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ和蛋白表达未见明显变化。提示ｂｃｌ－ｘＬ和Ｂａｘ可能参与脑缺血再灌流中神经细胞死亡的调节，其表达变化与神经元对缺血的敏感性相关     

High frequency of coexpression of maspin with p63 and p53 in squamous cell carcinoma but not in adenocarcinoma of the lung

Maspin, a member of the serpin family of protease inhibitors, has been shown to inhibit tumor growth and suppress metastasis in several malignancies, including lung cancer. Previous studies have reported that p63 and p53 control maspin expression by transactivating the promoter. The present study analyzed immunohistochemical studies to determine the expression and coexpression patterns of maspin, p63 and p53 in non-small cell lung carcinoma, specifically squamous cell carcinoma and adenocarcinoma. The results showed that 83/86 cases (96.5%) of squamous cell carcinoma and 82/161 cases (50.9%) of adenocarcinoma included in this study were positive for maspin. There were 79/86 cases (91.9%) of squamous cell carcinoma and 16/161 cases (9.9%) of adenocarcinoma with positive expression for p63. In addition, 77/86 cases (89.5%) of squamous cell carcinoma and 99/161 cases (61.5%) of adenocarcinoma were positive for p53. Maspin, p63 and p53 expression were each significantly higher in squamous cell carcinoma than adenocarcinoma. Squamous cell carcinomas more highly coexpress maspin and p63, as well as maspin and p53, when compared with adenocarcinomas. The high frequency of coexpression of maspin and p63, as well as maspin and p53, in squamous cell carcinoma, suggests that p63 and p53 may be involved in the pathway to control maspin expression. Therapeutic targeting on maspin, p63 and p53 molecules might be beneficial in the management of patients with squamous cell carcinomas of the lung in the future.     

Expression and function of retinoblastoma binding protein 6 (RBBP6) in human lung cancer

Retinoblastoma binding protein 6 (RBBP6) interacts with both p53 and pRb, and has been identified as an E3 ubiquitin ligase due to the presence of a RING finger domain. RBBP6 promotes the degradation of p53, thereby increasing cell proliferation. However it is not known whether RBBP6 is expressed in lung cancer, or interacts with p53 and pRB to modulate the proliferation or apoptosis of lung cancer cells. As assessed by immunohistochemistry, RBBP6 and p53 proteins were overexpressed in lung adenocarcinomas and lung squamous cell carcinomas. Expression of RBBP6 mRNA in lung tumor tissue was demonstrated by quantitative RT-PCR and fluorescence in situ hybridization. Expression of RBBP6 mRNA was low in poorly differentiated tumors but high in well-differentiated tumors. Bronchoalveolar carcinomas showed intense RBBP6 mRNA hybridization in the cytoplasm of cells undergoing mitosis, supporting the association between RBBP6 expression and cell proliferation. By qRT-PCR, RBBP6 mRNA expression was 1.6 fold higher, whereas p53 mRNA expression was 2.9 fold lower in lung tumors compared with normal lung tissue. Transfection of lung adenocarcinoma and squamous cell carcinoma cells with RBBP6 siRNA decreased RBBP6 mRNA expression, whereas transfection with p53 siRNA increased RBBP6 mRNA expression. Treatment with RBBP6 siRNA increased the ratio of Bax/Bcl2 mRNA, suggesting that RBBP6 may have an anti-apoptotic function in lung cancer cells. This is the first report that RBBP6 mRNA and “its protein products” are expressed in subtypes of human lung cancer. RBBP6 may be involved in the degradation of p53, thereby enhancing cell proliferation and inhibiting apoptosis in lung cancer.     

Expression of metallothionein in lung carcinoma: correlation with histological type and grade

AIMS: Over-expression of cellular metallothionein occurs frequently in human tumours but the underlying mechanism remains unknown. The aim of this study was to assess metallothionein expression in cases of lung carcinoma and to correlate it with histopathological parameters. METHODS AND RESULTS: Tumour tissue samples from 89 patients with lung carcinoma were immunostained by the streptavidin-biotin-peroxidase technique, using a monoclonal antibody against both metallothionein-1 and -2 isoforms. Positive matallothionein immunostaining was prominent in 44 out of 89 (49%) and negative in 45 out of 89 (51%) cases of lung carcinoma examined. Metallothionein positivity was prominent in 32 out of 43 (74%) cases of squamous cell lung carcinoma, and in 12 out of 35 (34%) cases of adenocarcinoma, while it was negative in all 11 cases of small-cell lung carcinoma examined, presenting a statistically significant difference between the different histological types. The intensity of metallothionein staining revealed a statistically significant difference between the squamous cell and adenocarcinoma cases examined. The pattern and extent of metallothionein staining in tumour cells and the expression of metallothionein in stromal cells were not correlated with histopathological parameters (type and grade) in metallothionein-positive cases of lung carcinoma examined. No association was found between metallothionein expression and lymph node status in the examined cases of lung carcinoma. CONCLUSIONS: Our findings indicate that expression of metallothionein was evident in squamous cell lung carcinoma and adenocarcinoma, but absent in small-cell lung carcinoma, supporting evidence for participation of this protein in the biological mechanisms underlying the carcinogenic evolution in the lung.     

肺癌侵袭力的影像学表现与c-erbB-2及bcl-2基因蛋白表达的关系

目的和方法：利用免疫组化技术ＬＳＡＢ法和计算机图像分析系统的结合,测定经手术病理证实之３７例肺鳞癌及４８例肺腺癌组织中ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白的表达水平,分析其表达或共表达与反映肺癌侵袭力的影像征象的关系。结果：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白在两种不同类型肺癌组织中的阳性表达及表达定位有明显的差异,并且,ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达阳性的肺癌,肿块毛刺征的出现率明显高于表达阴性者;ｂｃｌ－２基因蛋白表达阳性的肺癌,肿块毛刺征及三级支气管受累的出现率明显高于表达阴性者（Ｐ＜００５）;当两种基因蛋白在肺鳞癌中共表达时,肿块毛刺征及肺门或纵隔淋巴结转移的出现率明显高于它们单独表达者（Ｐ＜００５）。结论：ｃ－ｅｒｂＢ－２及ｂｃｌ－２基因蛋白与反映肺癌侵袭力的某些影像征象之间可能存在密切的关系。     

人甲状腺髓样癌内凋亡细胞检测和bcl-2、p53及Ki-67的免疫组化研究

目的：检测甲状腺髓样癌内凋亡细胞、ｂｃｌ－２、ｐ５３和Ｋｉ－６７，探讨其与患者的预后关系。方法：在２１例甲状腺髓样癌内，用ＤＮＡ末端标记方法检测凋亡细胞和用免疫组织化学技术检测ｂｃｌ－２、ｐ５３及Ｋｉ－６７的表达。结果：在２１例甲状腺髓样癌标本中，凋亡细胞ｂｃｌ－２、ｐ５３和Ｋｉ－６７的检出率分别为８１％，１００％，６２％和７１％。ｂｃｌ－２阳性物质位于肿瘤细胞的胞浆内，少数病例则位于膜上。ｐ５３蛋白阳性主要位于胞核内，少数病例也同时见于胞浆内。Ｋｉ－６７抗原主要位于肿瘤细胞核内。本研究结果表明，ｂｃｌ－２和肿瘤细胞凋亡之间有密切关系（Ｐ＜０．０１）。ｂｃｌ－２阳性细胞检出率较高的病例，凋亡细胞检出率则较低；反之，凋亡细胞检出率则较高。ｐ５３和Ｋｉ－６７阳性细胞检出率和细胞凋亡无相关性（Ｐ＞０．０５）。结论：ｂｃｌ－２具有抑制细胞凋亡的作用。上述各因素检测结果与患者存活率无统计学意义。ｂｃｌ－２肿瘤蛋白在甲状腺髓样癌中高表达，可作为该肿瘤的一个新的标记物，对预后的判断可能也有一定的意义     

p53蛋白堆积和CK-18neo在非小细胞

目的:检测非小细胞肺癌组织的p53蛋白堆积水平和细胞骨架蛋白18新抗原决定簇(cytokeratin18neo-epitope,CK-18neo)的暴露情况,探讨p53蛋白和CK-18neo在肺癌发生发展过程中的作用及其临床病理意义。方法:用免疫组化法检测62例非小细胞肺癌以及10例对照组织中p53蛋白的堆积和CK-18neo的暴露情况。用显微图象分析仪测定p53免疫组化反应的强度,并作定量分析。以凋亡指数(AI%)表示CK-18neo的阳性检出率。结果:①非小细胞肺癌组织中p53的阳性检出率为48.39%(鳞癌为51.72%,腺癌为45.45%),对照组p53的阳性率为0.00%(P＜0.01);②非小细胞肺癌组织的AI%为1.10%(鳞癌0.95%,腺癌1.24%),对照组为1.06%,各组间无显著差异;③非小细胞肺癌组织中p53(-/+)、p53(5级)和p53(PU)呈正直线相关关系(P＜0.01)。结论:本实验结果提示,突变型p53基因可能参与NSCLC的发生机制,NSCLC的发生和发展与癌细胞的过度增生和细胞凋亡减少有关。     

肺癌p53蛋白表达和基因突变与临床病理的相关研究

目的 检测肺癌中ｐ５３蛋白表达和基因突变状况及其与临床病理和预后的相关性。方法：应用免疫组织化学（ＬＳＡＢ法）和聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）二种方法。结果 检测肺鳞癌４６例，共９５例。免疫组化ｐ５３蛋白总阳性率为５０．５％（４８／９５例），肺鳞癌阳性率为５６．５％（２６／４６例）、肺腺癌为４４．７％（２２／４９例）。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测ｐ５３基因突变率为４１．１％（３９／９     

p63基因在肺癌组织中的表达

目的研究肺鳞状细胞癌、腺癌、大细胞肺癌、小细胞肺癌以及淋巴结或肺内转移性肿瘤标本组织中p63基因的mRNA转录因子和蛋白表达水平,探讨p63基因表达与其定位在3q 27-q29区域改变的关系.方法采用cDNA微阵列技术同时检测72例不同病理组织学类型的原发性肺癌(包括鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌、小细胞癌)和肺癌肺内转移及淋巴结转移灶内的p63基因mRNA水平.另外,利用组织芯片技术构建150例原发性肺癌石蜡包埋标本组织芯片,采用免疫组织化学LSAB法检测p63基因蛋白表达情况.同时应用比较基因组杂交(CGH)技术对70例原发性肺癌标本进行了3号染色体长臂改变的分析.结果p63mRNA转录因子在肺鳞状细胞癌标本表达明显增强,与腺癌、大细胞癌、小细胞癌相比增多10倍以上.肺癌转移灶内p63基因mRNA表达水平明显高于其相对应的原发性灶,差异有统计学意义(P＜0.001).免疫组织化学染色结果显示肺鳞状细胞癌阳性表达率为94.64%;腺癌是1.79%;4例大细胞肺癌中2例为阳性染色;但所有小细胞肺癌标本免疫组织化学染色均为阴性.pT1分期肺癌的p63基因蛋白表达阳性率与pT2分期肺癌相比有统计学差异(P＜0.05).比较基因组杂交结果发现肺鳞状细胞癌3号染色体长臂27-29区域有显著的扩增,腺癌表现为缺失.鳞状细胞癌p63基因的表达增强与3q27-q29区域的显著扩增有明显正相关性(P＜0.000 1),说明定位于3号染色体长臂27-29区域的p63基因的拷贝有明显的扩增.结论p63mRNA转录因子和蛋白在肺鳞状细胞癌较其他肿瘤表达显著增高,转移灶高于原发灶;肺鳞癌p63表达增强与3号染色体长臂3q27-q29区域的扩增显著相关.     

非小细胞肺癌组织中细胞凋亡与p53蛋白表达的定量研究

目的 :观察非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中Caspases介导的细胞凋亡与p5 3蛋白表达情况 ,探讨两者之间的相关关系和意义。方法 :临床手术切除的NSCLC标本 4 4例 ,其中鳞癌 2 0例 ,腺癌 2 4例。采用Caspase特异的单克隆抗体M30Cy toDEATH免疫组化染色显示凋亡细胞 ,计算凋亡指数 (AI) ;免疫组化法检测p5 3蛋白表达 ,用显微图像分析系统测定阳性细胞百分率 (P/A)、平均光密度 (AOD)及阳性水平指数 (PLI)。结果 :NSCLC组织中M30阳性率为 2 5 0 % ,肺鳞癌组织的M 30阳性率明显高于肺腺癌组织 (P <0 0 5 )。低分化鳞癌组织的AI高于中、高分化鳞癌 (P <0 0 5 )。NSCLC组织中 p5 3蛋白阳性率为 5 2 2 %。p5 3蛋白的PLI与癌细胞AI之间无直线相关关系。 结论 :在NSCLC组织中存在Caspases介导的细胞凋亡机制 ,且与组织学类型及组织分化程度有关。p5 3蛋白表达与癌细胞凋亡无相关关系 ,提示突变型 p5 3蛋白失去了激活Cas pases而诱导细胞凋亡的作用 ,与肺癌的发生、发展、治疗及预后有关。