偶氮氯磷Ⅲ比色法测定血清钙的实验研究

本文对偶氮氯磷Ⅲ（ＣｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈｏｎａｚｏⅢ）比色法测定血清钙的实验方法作了系统性研究。结果表明：显色剂中偶氮氯磷Ⅲ浓度以１２０μｍｏｌ／Ｌ为宜，反应最适ｐＨ为２．８～３．２，最佳检测波长为６２０ｎｍ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１６４Ａ，线性为４．５ｍｍｏｌ／Ｌ，批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．０８％和２．２６％，平均回收率为１００．２％。本法（Ｙ）与ＡＡＳ法（Ｘ１）及ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ法（Ｘ２）结果比较：Ｙ＝０．９８５６Ｘ１＋０．０３７０、ｒ＝０．９９１２，Ｙ＝０．９５４０Ｘ２＋０．１３６５、ｒ＝０．９８８７．溶血、脂血、黄疸不干扰测定，当标本中Ｍｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋分别达５ｍｍｏｌ／Ｌ、２ｍｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ、３００μｍｏｌ／Ｌ时也不影响测定结果。     

血清无机磷的酶法测定

建立了一种酶偶联测定血清无机磷的方法，方法线性范围为０～３ｍｍｏｌ／Ｌ，变异系数批内ｘ＝１．０３ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝１．２１％，批间：ｘ＝１．２８ｍｍｏｌ／Ｌ，ｎ＝２０，ＣＶ＝３．７％，与钼酸铵紫外光度法相关性为ｒ＝０．９９４２，Ｙ＝０．９５０９Ｘ＋０．０５４１，参考值范围为０．９８～１．５５ｍｍｏｌ／Ｌ。     

偶氮胂Ⅲ比色法测定血清（浆）钙

对偶氮肿Ⅲ（ＡｒｓｅｎａｚｏⅢ）比色法测定血清（浆）钙的方法学作了系统研究。结果表明：反应混合液的吸收光谱呈Ｍ型，两个吸收峰分别为６００ｎｍ和６５０～６６０ｎｍ，但以６６０ｎｍ为适。试剂中ＡｒｓｅｎａｚｏＩＩＩ的最适浓度为１５０μｎｏｌ／Ｌ，试剂空白Ａ（吸光度曾称光密度ＯＤ）受ｐＨ的影响，当ｐＨ为７．０　时Ａ值最低。本法批内（ｎ＝２０）和批间（ｎ＝４０）ＣＶ分别为２．８％～２．９６％、３．１５％～３．３７％，平均回收率为９９．３％，线性高达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，灵敏度为１ｍｍｏｌ／Ｌ＝０．１７Ａ。本法Ｙ与ＥＤＴＡ自动滴定法Ｘ比较：Ｙ＝１．００５９Ｘ－０．０１４１，ｒ＝０．９９８５、Ｐ＜０．００１、ｎ＝２０。Ｍｇ￣（２＋）、Ｃｕ￣（２＋）、Ｆｅ￣（２＋）、Ｚｎ￣（２＋），Ｈｂ、Ｂｉｌ均不干扰测定。     

简便,灵敏的天冬氨酸转氨酶同工酶电泳法

以醋纤薄膜为载体，半胱氨酸亚磺酸为氨基供体，ｍ－ＰＭＳ和ＭＴＴ为显色剂，电泳分离天冬氨酸转氨酶同工酶ｍ－ＡＳＴ和Ｃ－ＡＳＴ。灵敏度达２．２Ｕ／Ｌ，批内重复性７．５Ｕ／Ｌ（ｎ＝１０）ＣＶ＝９．５％；２１．４Ｕ／Ｕ（ｎ＝１０）ＣＶ＝８．４％。用１４０Ｕ／Ｌｍ－ＡＳＴ作倍化稀释考核其线性，结果为Ｙ＝０．０８５２９＋０．９９６２Ｘ（理论值），ｒ＝０．９９９７。与Ｔｅｒａｎｉｓｈｉ法比较，Ｙ＝１．７５５８＋０．８３１１Ｘ（本法），ｒ＝０．８９４０。     

邻苯三酚红—钼酸盐作醋纤膜蛋白电泳染色

用０．０６１ｍｍｏｌ／Ｌ邻苯三酚红，０．０４０ｍｍｏｌ／Ｌ钼酸钠，ｐＨ３．０±０．５染液作醋纤膜蛋白电泳染色，染料只与蛋白络合并呈蓝色，不着染载体，吸收峰在６０２ｎｍ处。用Ａ／Ｇ比例各为５０％的蛋白溶液作电泳分析（批内，ｎ＝２０），Ａ与Ｇ的平均测得值分别为５０．４％和４９．６％，Ａ、Ｇ两种蛋白质的呈色强度很接近。与丽春红－Ｓ法比较（ｎ＝２２），白蛋白ｔ＝１．２８７，Ｐ＞０．０５，球蛋白ｔ＝１．７６４，Ｐ＞０．０５，均无显著差异；白蛋白Ｙ＝１．２２＋０．９６３Ｘ，ｒ＝０．９９５。球蛋白Ｙ＝５．４４＋０．８７９Ｘ，ｒ＝０．９７８。１２２例健康成年人血清蛋白电泳结果与国内外资料基本一致。     

化学修饰ICD酶法测定血清镁

本文介绍采用化学修饰ＩＣＤ酶法测定血清镁的速率法。结果表明此法线性范围可达０～５ｍｍｏｌ／Ｌ,批内与批间重复性分别为１．３％～３．４％和２．４％～４．８％。平均回收率为９５．２％,与原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）比较ｒ＝０．９８６,Ｙ＝０．９８２Ｘ＋０．０４。     

高密度脂蛋白胆固醇的直接测定法

基于选择性抑制法的原理，通过对聚阴离子和表面活性剂的筛选实验，以及试剂配方和实验条件优化实验，建立了直接测定高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的方法。本法的线性范围达３．９ｍｍｏｌ／Ｌ，批内ＣＶ为１．４５％～２．０２％；总ＣＶＯ １．７１％～３．１４％，和ＴＰＡ法比较：Ｙ＝０．９９２３Ｘ＋０．０５２，ｒ＝０．０９８３４，ｎ＝６６。加入ＨＤＬ组份的回收率为１００．１％，本法的特异性好，加入ＬＤＬ－Ｃ达     

血清钙甲基麝香草酚蓝显色EDTA褪色测定法

一种能扣除样本空白的血清外比色测定法，基本步骤为钙与甲基麝香草酚蓝反应生成蓝色化合物，测定吸光度（Ａ１），加入ＥＤＴＡ后再测定吸光度（Ａ２）。吸光度降低值与钙离子浓度成正比。本法线性范围为０－４．４ｍｏｌ＝Ｌ批内ＣＶ１．２－１．８％（ｎ＝１０）批间ＣＶ２．１－２．５％（ｎ＝１４）；回收率１００．３％，求得 （Ｘ）与Ｒｏｃｈｅ公司产的同类试剂盒（Ｙ）间的相关系数为０．９９５，Ｙ＝０．９６Ｘ＋０．０６     

血清高密度脂蛋白胆固醇均相法测定试剂的研制

目的研制高密度脂蛋白胆固醇均相法测定的试剂。方法利用多聚体和聚阴离子在表面活性剂的作用下对脂蛋白进行选择性遮蔽,仅使高密度脂蛋白中的胆固醇参与胆固醇反应。结果研制的试剂（Ｙ）与推荐方法ＤＳ５０Ｍｇ（Ｘ１）和ＰＴＡＭｇ沉淀法（Ｘ２）相关良好,分别为Ｙ＝１．０４０Ｘ１－０．０６３,ｒ＝０．９８８３;Ｙ＝０．９４４Ｘ２＋０．０７３,ｒ＝０．９６５７。在ＨＤＬＣ浓度为２．８４ｍｍｏｌ／Ｌ以下线性良好,ｒ＝０．９９８２,ＨＤＬＣ低、中、高值血清标本的批内和批间（ＣＶ）值分别为２．０７％、１．８１％、０．８０％和２．７７％、１．９７％、１．７３％,特异性好,平均回收率为９８％,胆红素、血红蛋白等干扰不明显。结论ＨＤＬＣ均相法测定结果的准确性与精密度符合临床要求。     

血清钾离子的丙酮酸激酶法测定

建立一种用螯合物以替代离子载体（Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２１）的丙酮酸激酶测定血清钾的方法。使用酶偶联多标准固定时间法检测。该法与定值血清的相对误差为０．３７２％～２．１５８％；批内ＣＶ＜２．０１％，批间ＣＶ＜２．１０％；线性２．０～８．０ｍｍｏｌ／Ｌ；回收率９９．８％～１０２．８％，脂血、黄疸、内源性酶（ＬＤＨ和ＰＫ）、镁及氨等对测定无干扰；与火焰光度法回归方程为Ｙ＝０．０１８８＋１．００９２Ｘ，ｒ＝０．９８７５，Ｐ＜０．０１，与离子电极法对比，回归方程为Ｙ＝０．３９６７＋０．９３５７Ｘ，ｒ＝０．９８６７，Ｐ＜０．０１；试剂复溶后（４℃）至少稳定９天。该法准确度高、重复性好、测定范围宽、抗干扰能力强，与火焰光度法及电极法相关性好，试剂稳定、价廉，可在多种全自动与半自动生化分析仪上应用。     

胆红素氧化酶法测定血清结合胆红素

介绍使用国产胆红素氧化酶和二牛磺酸胆红素校准物建立血清结合胆红素测定方法。测定缓冲液为０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲液（ｐＨ＝５．０），胆红素氧化酶浓度５００Ｕ／Ｌ，反应（终点）时间１５分钟。本法线性范围可达２４０μｍｏｌ／Ｌ，批内不精密度＜１０％，回收率为９８．３％～１０７．１％，与重氮方法比较，回归方程为Ｙ（酶法）＝０．９５６Ｘ（重氮法）－０．５１３。本法测定人血清结合胆红素参考值２．５７±２．５６μｍｏｌ／Ｌ（ｎ＝９５）。     

匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇

目的 探讨匀相法直接测定血清低密度脂蛋白胆固醇的价值。方法 用９７０７Ａ ＬＤＬ－ｃ试剂盒及ＢＥＣＫＭＡＮ ＣＸ７自动生化分析仪直接测定血清ＬＤＬ－ｃ含量。 结果（１）批内变异ＣＶ％为．５５２％￣０．８０５％,批间变异ＣＶ％〈１％;（２）线性关系良好,直线范围可达４．９５９ｍｍｏｌ／Ｌ;（３）经与聚乙烯硫酸沉淀（ｐｖｓ）法测定对照３０例,ｒ＝０．９４１,Ｐ〈０．０５,呈显著相关,回归方程为Ｙ＝０．     

高密度脂蛋白胆固醇直接测定法与硫酸葡聚糖50-镁法比较

目的评价高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）直接测定法在临床应用的可行性。方法将直接测定法与硫酸葡聚糖（ＤＳ５０）－氯化镁沉淀法进行比较，并分析其线性范围、准确度和干扰因素。结果直接法与ＤＳ５０沉淀法相关良好，Ｙ＝０．９２７Ｘ＋０．２１４，ｒ＝０．９６４，ＨＤＬ－Ｃ浓度为２．４５ｍｍｏｌ／Ｌ范围内线性良好，ｒ＝０．９９９，ＨＤＬ－Ｃ浓度两组低、中、高值血清标本（０．８４、１．３１、２．３１；０．９２、１．４２、２．５３ｍｍｏｌ／Ｌ）的批内和批间ＣＶ值分别为２．３８％、１．１５％、２．４７％和３．４８％、０．９９％、２．０６％。浓度为１０．５８ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯并不影响ＨＤＬ－Ｃ直接测定法。结论ＨＤＬ－Ｃ直接测定法简易快速，结果准确，适于自动化分析。     

酶循环法测定血清总胆汁酸

采用氧化型β－硫烟酰胺腺苷二核苷酸（Ｔｈｉｏ－ＮＡＤ）底物酶循环法测定血清总胆汁酸（ＴＢＡ）,对其方法学进行初步研究。该法灵敏度：试剂空白△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．００４／ｍｉｎ;５０μｍｏｌ／Ｌ△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．０５０／ｍｉｎ;平均回收率９９．２％;线性０￣１５０μｍｏｌ／Ｌ;精密度：批内ＣＶ〈１．０％;批间ＣＶ〈４．５％;该法（Ｙ）和偶联黄递酶比色法（Ｘ）比较：Ｙ＝０．８８Ｘ－１．     

血清氯葡萄糖苷酶动力分析法

葡萄糖苷酶动力学测定血清氯，在７０－１４０ｍｍｏｌ／Ｌ间线性良好，精密度验批内变异数为２．１０％，批间变异系数为２．２６％；平均回收率为９９．２％；与电极法相关试验ｒ＝０．９５２５，Ｙ酶法＝３．４＋０．９８Ｘ电极法，差异不显著。ＴＢＩＬ８４μＭＯＬ／ｌ，ｔｇ２．１ｍｏｌ／Ｌ，Ｃｈｏ９．６ｍｍｏｌ／Ｌ对测定结果无影响，试剂在４℃冰箱保在保存１０ｄ内起始吸光度不高于０．１５０。     

单一试剂测定血清无机磷

报道钼酸铵显色法测定无机磷，该试剂稳定，血清标本不需去蛋白，可直接测定，线性达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，回收率９８．４％，批内ＣＶ为１．７２％，与紫外法对比：Ｙ＝０．９８４Ｘ＋０．１１，适合于手工和自动生化分析仪测定。     

尿液丙氨酸氨基肽酶连续监测法

建立了用丙氨酸对硝基苯胺（Ａｌａ－ｐＮＡ）为底物测定尿液丙氨酸氢基肽酶（ＡＡＰ）的连续监测法。此酶的最适ｐＨ８．０～８．３（２５℃），Ｋｍ值０．６０ｍｍｏｌ／Ｌ，Ａｌａ－ｐＮＡ的最终浓度６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，批内，批间ＣＶ分别为４．２％，线性范围高达４００Ｕ／Ｌ。健康成人（ｎ＝７４）尿ＡＡＰ活性内１．９１～１４．４Ｕ／ｇ．ｃｒ。同时还对其重复性、尿中共存物质的干扰、尿ＡＡＰ的稳定性进行了初步观察。此     

血浆血红蛋白的分光光度法直接测定

用分光光度计直接测定血浆血红蛋白浓度，操作简单，试剂单一稳定，具有较好的精密度和准确度，批内变异为ＣＶ１．８％（Ｘ＝７８．６ｍｇ／Ｌ），ＣＶ０．７９％（Ｘ＝７７４．６ｍｇ／Ｌ），批间变异为ＣＶ５．０８％（Ｘ＝６７．７５ｍｇ／Ｌ），ＣＶ３．３７％（Ｘ＝４０４．９ｍｇ／Ｌ），线性范围至少可达２０００ｍｇ／Ｌ。本法与ＨＩＣＮ法及Ｃｒｏｓｂｙ法平行对比测定，显示三者结果具有良好的一致性。     

单一酶两点法测定血清镁

以镁离子激活异柠檬酸氢酶，双试剂，两点反应法检测血清镁。线性可达０￣５ｍｍｏｌ／Ｌ。批内与批间的重复性分别以１．３￣２．４和２．５￣３．５％，平均回收率为９８．６％，与原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）比较ｒ＝０．９９０，Ｙ＝０．９８Ｘ＋０．０３，本法测定血清镁具有简便、准确和重复性好，尤其适用于自动化分析等优点。     

邻甲酚酞络合剂速率法测定血清胆碱酯酶

以邻甲酚酞络合剂作指示剂，速率法测定血清胆碱酯酶。最适底物浓度为２０ｍｍｏｌ／Ｌ的氯化酰胆碱，最适ＰＨ８．１，最适邻甲酚酞络合剂浓度２．５ｍｍｏｌ／Ｌ。线性范围０－１０Ｕ／ｍｌ（γ＝０．９９８７）。批内ＣＶ２．６％，批间ＣＶ３．９％。