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本文在微波处理微量全血标本用于PCR检测HBV DNA的可行性进行了研究,在172例受标标本中,微波处理全血和血清标本提取模板DNA进行PCR扩增的方法HBVDNA检出阳悸分别为154例和151例,而且常规方法处理全血和血清标本制备DNA模板HBV DNA的阳性例数分别为69和143例,结果显示,应用微波处理全血标本,不仅可以提高检出率而且具有方法简单,取样方便易为患者接受的优点,适用于临床工作。 相似文献
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程宗浩 《上海医学检验杂志》1996,(3)
临床血清标本的HBV-DNAPCR检测指标与若干HBV免疫学指标关系程宗浩上海青浦县卫校我们应用上海复华公司的PCR检测试剂和上海科华公司ELISA检测试剂分别检测了347份血清标本的HBV-DNA和HBsAg、HBeAg指标。其中HBsAg阴性30... 相似文献
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传统免疫组织化学方法及分子杂交检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒(HBV)DNA灵敏度低,聚合酶链反应(PCR)方法能否检验到石蜡肝癌组织中的HBV DNA报道尚不见。为此,采用HBV与丙型肝炎病毒二合-PCR试剂盒对17例肝癌患者的石蜡包埋癌组织进行了HBV DNA检测,结果7例阳性,阳性率为41%,而8例非肝癌对照患者则均阴性。组织HBV DNA结果与血清HBsAg比较显示,该试剂盒有较高的检出率 相似文献
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荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义 总被引:2,自引:0,他引:2
本文采用荧光定量PCR法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行HBV DNA含量测定 ,探讨HBV DNA含量与肝病变发展的关系。1 材料和方法1 1 材料 标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量HBV DNA试剂盒由匹基公司提供。仪器∶PE5 70 0PCR仪。1 2 方法 HBV DNA定量分析采用荧光定量PCR法。按操作说明书进行。1 3 统计学方法 各组HBV DNA含量均数比较采用t检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2 结果2 1 HBV DNA、FQ PCR标准曲线 HBV … 相似文献
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HBV五项血清指标与HBV—DNA—PCR相关性探讨山东省青岛市胶州中心医院(青岛266300)李志斌吴衍芝本文对572例肝炎门诊和住院病人进行ELISA法检测乙型肝炎病毒(HBV)五项血清指标和应用免疫PCR技术检测HBV-DNA进行分析。1材料与... 相似文献
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本文设计一对HBV亚型通用的PCR引物,用于检测血清HBV DNA。PCR扩增后,产物经2%琼脂糖凝胶电泳分析与EIA法有较高的阳性符合率。阳性扩增条带单一清晰,扩增产物的分子量可靠,可测出80fg/ml的微量HBV DNA。本法准确、敏感,可用于临床常规检测HBV DNA。 相似文献
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用聚合酶链反应(PCR)方法检测了42例维持性血液透析患者血清标本的乙型肝炎病毒(HBV)DNA,以评价PCR技术在调查透析中心HBV感染的流行病学方面的应用价值。结果在42例标本中有17例HBVDNA阳性(40.5%),与常规血清标志物相比较,HBsAg阳性者其HBVDNA阳性率为60.9%,而全部血清标志物均阴性者其HBVDNA阳性率为13.3%。提示:PCR方法是监测中心透析HBV传染的更灵敏、更可靠手段。它也是对HBV变异类型的鉴别及疗效评价方面的一个重要方法。 相似文献
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PCR检测血清中HBVDNA罗仁福,陈秀珍(内江市二医院,四川内江641003)笔者建立的PCR方法可检出血清中lfgHBVDNA,应用这一新技术检测了一批慢性肝炎及肝癌病人血清中的HBVDNA,并观察了其临床意义。1材料和方法1.112例临床诊断为... 相似文献
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传统免疫组织化学方法及分子杂交检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒(HBV)DNA灵敏度低,聚合酶链反应(PCR)方法能否检测到石蜡肝癌组织中的HBVDNA报道尚不多见。为此,采用HBV与丙型肝炎病毒二合一PCR试剂盒对17例肝癌患者的石蜡包埋癌组织进行了HBVDNA检测,结果7例阳性,阳性率为41%,而8例非肝癌对照患者则均阴性。组织HBVDNA结果与血清HBsAg比较显示,该试剂盒有较高的检出率及符合率。这为今后进一步研究大量保存的肝病石蜡包埋组织的HBV感染提供了一个可靠灵敏的方法,也为研究其他病毒感染的石蜡包埋材料提供了参考。 相似文献
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斑点杂交与荧光定量PCR检测血清HBV-DNA的临床意义 总被引:2,自引:0,他引:2
HBV DNA是一种十分重要的HBV感染标志 ,是直接反映HBV的存在、病毒活动性复制与具有传染性的标志 ,对于确定HBV感染的诊断有重要价值[1] 。目前HBV感染的基因诊断技术已从定性发展到定量[2 ] 。斑点杂交定性检测不能直接反映病毒负荷量。近年来 ,荧光定量PCR逐渐应用于临床检测HBV DNA。通过对 10 5例慢性乙型肝炎患者用斑点杂交与荧光定量PCR两种方法同时进行血清HBV DNA检测 ,以了解两种方法的一致性 ,探讨两者的临床应用价值及问题。1 材料和方法1.1 研究对象 2 0 0 1年 3至 7月间中山医科大学… 相似文献
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PCR—ELISA检测HBV DNA方法学建立及初步临床应用 总被引:4,自引:1,他引:4
建立PCR-ELISA检测HBV DNA的方法学,探讨其最佳实验条件并初步评价其临床应用价值。常规PCR引物用地高辛标记,使扩增产物带有地高辛标记成份,再通过亲合素-生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚苯乙烯小孔中,通过固相探针与HBVDNA扩增产物进行杂交,与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应,经NPP显色,根据其A405nm值大小,推算样品中HBV DNA模板含量。建立PCR-ELISA的最 相似文献
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用PCR检测慢性乙肝患者唾液、尿液中HBV-DNA龚希平,徐乾(南京市钟阜医院,210070)本文通过应用PCR技术对慢性乙肝患者的唾液、尿液进行了HBV-DNA检测,以了解唾液、尿液中HBV-DNA的确切情况及其传染性如何,并就其临床意义作了一些探... 相似文献
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聚合酶链反应凝胶呈像技术检测乙型肝炎病毒 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 建立聚合酶链反应(PCR)-凝胶呈像(geldocumentationsystemGDS)技术,并应用于临床检测乙型肝炎病毒(HBV)核酸DNA。方法 用凝胶呈像技术对血清HBV-DNAPCR扩增产物的电泳凝胶进行摄像,分析,并与紫外灯下的肉眼观察结果相比较,对肉眼未判断出阳性而凝胶呈像分析邮阳性的血清标本,用定量PCR(QPCR)方法检测HBV-DNA。结果 通过38份血清标本的检测,发现 相似文献
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核酸分子杂交技术,能直接从血清中检出10-1Pg的HBVDNA,最近发展起来的聚合酶链式反应(PCR)技术能检出10-3Pg的HBVDNA。本文所介绍的PCR与染色技术的结合于1997年8月检测416人HBVDNA,并与溴化乙锭(EB)染色进行对比分... 相似文献
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丁友法 《上海医学检验杂志》2002,17(3):179-180
乙型肝炎病毒 (HBV)DNA定量检测已越来越受到临床的重视[1~3] 。我们采用聚合酶链反应(PCR)杂交定量检测试剂测定乙型肝炎 (乙肝 )患者血清HBVDNA含量 ,并且对检测试剂作初步评价和临床应用观察 ,现报道如下。材料和方法一、检测对象乙型肝炎患者 5 3 8例 ,男 40 2例 ,女 1 3 6例 ,平均年龄 3 5岁。二、HBVPCR杂交酶联定量检测1 .试剂 由上海浩源生物科技有限公司提供 ,按说明书操作。2 .仪器 BIO -RAD5 5 0型酶标仪 ,MJ - 1 0 0热循环仪。结果一、扩增效率由于PCR反应的定量结果与PCR平均效率直接有… 相似文献
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为了提高部分乙型肝炎病毒感染者突变株检出率,应用套式聚合酶链反应对110例ALT升高的传染病科住院病人进行检测。检测结果阳性HbsAg42%,HBV-DNA常规PCR63.6%,套式PCR92.7%。 相似文献
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乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒之一,以往临床上通过放射免疫或酶联免疫吸附法检测血清中的HBsAg、抗HBS、HBeAg、抗HBe、抗HBC等指标判断乙型肝炎的传染性。近年来应用PCR技术检测血清中HBV-DNA,是反映HBV感染者体内病毒复制... 相似文献
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荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒 总被引:29,自引:1,他引:28
目的用荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)的数量和免疫指标,以指导临床。方法设计合成了HBVFQPCR诊断试剂盒,以一种完全闭管式的PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量PCR方法,检测了532份临床血清标本。结果经FQPCR检测,158份HBV的s抗原、e抗原、c抗体(HBsAg、HBeAg、HBcAb)都阳性的标本,其血清标本HBVDNA也全部阳性,平均HBVDNA拷贝数为1.1×108/ml;98例HBsAg、HBeAb、HBcAb都阳性的标本,其阳性率为73%(71例),平均拷贝数为8.6×105/ml,而常规PCR只有33%的阳性率;67例HBsAb、HBeAb、HBcAb都阳性标本的平均拷贝数为2.3×105/ml。结论能够避免PCR后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量。FQPCR可以检测HBV的真实感染和复制情况,对于乙型肝炎的临床诊断,治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。 相似文献