不同血清学标志血清中HBV DNA和HCV RNA的分析研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４８１例乙肝血清学五项指标至少一项阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果显示ＨＢＶＤＮＡ的检出率为９１．５％，ＨＣＶＲＮＡ的检出率为１５．４％，并提示（１）当乙肝患者血清中抗ＨＢｅ阳性甚至抗ＨＢｓ阳性时，仍有相当部分的ＨＢＶ存在且仍在复制；（２）ＨＢＶ和ＨＣＶ感染可相互增加其易感性；ＨＢｓＡｇ阳性与否与抗ＨＣＶ可能有一定关系；（３）ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ具有较高的敏感性。     

微波处理全血标本用于PCR检测HBV DNA的可行性研究一附172…

本文在微波处理微量全血标本用于ＰＣＲ检测ＨＢＶ ＤＮＡ的可行性进行了研究，在１７２例受标标本中，微波处理全血和血清标本提取模板ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增的方法ＨＢＶＤＮＡ检出阳悸分别为１５４例和１５１例，而且常规方法处理全血和血清标本制备ＤＮＡ模板ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性例数分别为６９和１４３例，结果显示，应用微波处理全血标本，不仅可以提高检出率而且具有方法简单，取样方便易为患者接受的优点，适用于临床工作。     

临床血清标本的HBV－DNAPCR检测指标与若干HBV免疫学指标关系

临床血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ检测指标与若干ＨＢＶ免疫学指标关系程宗浩上海青浦县卫校我们应用上海复华公司的ＰＣＲ检测试剂和上海科华公司ＥＬＩＳＡ检测试剂分别检测了３４７份血清标本的ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ指标。其中ＨＢｓＡｇ阴性３０...     

聚合酶反应检出石蜡包埋肝癌组织的乙型肝炎病毒DNA

传统免疫组织化学方法及分子杂交检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ灵敏度低，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法能否检验到石蜡肝癌组织中的ＨＢＶ ＤＮＡ报道尚不见。为此，采用ＨＢＶ与丙型肝炎病毒二合－ＰＣＲ试剂盒对１７例肝癌患者的石蜡包埋癌组织进行了ＨＢＶ ＤＮＡ检测，结果７例阳性，阳性率为４１％，而８例非肝癌对照患者则均阴性。组织ＨＢＶ ＤＮＡ结果与血清ＨＢｓＡｇ比较显示，该试剂盒有较高的检出率     

荧光定量PCR检测HBV—DNA的临床意义

本文采用荧光定量ＰＣＲ法对本院临床和门诊血清标本2 0 0份进行ＨＢＶ ＤＮＡ含量测定 ,探讨ＨＢＶ ＤＮＡ含量与肝病变发展的关系。1　材料和方法1 1　材料　标本取自确诊或怀疑乙肝的患者及无症状体检者 ,共检测 2 0 0例。试剂∶荧光定量ＨＢＶ ＤＮＡ试剂盒由匹基公司提供。仪器∶ＰＥ5 70 0ＰＣＲ仪。1 2　方法　ＨＢＶ ＤＮＡ定量分析采用荧光定量ＰＣＲ法。按操作说明书进行。1 3　统计学方法　各组ＨＢＶ ＤＮＡ含量均数比较采用ｔ检验。遇有阴性结果不参加平均值的统计。2　结果2 1　ＨＢＶ ＤＮＡ、ＦＱ ＰＣＲ标准曲线　ＨＢＶ …     

HBV五项血清指标与HBV-DNA-PCR相关性探讨

ＨＢＶ五项血清指标与ＨＢＶ—ＤＮＡ—ＰＣＲ相关性探讨山东省青岛市胶州中心医院（青岛２６６３００）李志斌吴衍芝本文对５７２例肝炎门诊和住院病人进行ＥＬＩＳＡ法检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）五项血清指标和应用免疫ＰＣＲ技术检测ＨＢＶ－ＤＮＡ进行分析。１材料与...     

用通用引物PCR检测HBV DNA的研究

本文设计一对ＨＢＶ亚型通用的ＰＣＲ引物，用于检测血清ＨＢＶ ＤＮＡ。ＰＣＲ扩增后，产物经２％琼脂糖凝胶电泳分析与ＥＩＡ法有较高的阳性符合率。阳性扩增条带单一清晰，扩增产物的分子量可靠，可测出８０ｆｇ／ｍｌ的微量ＨＢＶ ＤＮＡ。本法准确、敏感，可用于临床常规检测ＨＢＶ ＤＮＡ。     

双带PCR提高检测血清HBV-DNA质量的意义

应用双带ＰＣＲ方法（ＤＢ－ＰＣＲ）检测了２４０份血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，该方法能直接观察和判断假阴性和假阳性结果，提高了检测的准确性。与国内其它ＰＣＲ试剂比较，符合率分别为９４．０５％（ＤＢ－ＰＣＲ／华美产品），和９５．２８％（ＤＢ－ＰＣＲ／长城产品）。ＨＢｅＡｇ阳性的血清，经ＤＢ－ＰＣＲ检测ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者达９３．５５％（２９／３１）。ＰＣＲ产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ后能与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针杂交，证明了该方法的特异性。     

聚合酶链反应检测血透患者血清中HBV DNA的临床意义

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了４２例维持性血液透析患者血清标本的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，以评价ＰＣＲ技术在调查透析中心ＨＢＶ感染的流行病学方面的应用价值。结果在４２例标本中有１７例ＨＢＶＤＮＡ阳性（４０．５％），与常规血清标志物相比较，ＨＢｓＡｇ阳性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６０．９％，而全部血清标志物均阴性者其ＨＢＶＤＮＡ阳性率为１３．３％。提示：ＰＣＲ方法是监测中心透析ＨＢＶ传染的更灵敏、更可靠手段。它也是对ＨＢＶ变异类型的鉴别及疗效评价方面的一个重要方法。     

PCR检测血清中HBVDNA

ＰＣＲ检测血清中ＨＢＶＤＮＡ罗仁福，陈秀珍（内江市二医院，四川内江６４１００３）笔者建立的ＰＣＲ方法可检出血清中ｌｆｇＨＢＶＤＮＡ，应用这一新技术检测了一批慢性肝炎及肝癌病人血清中的ＨＢＶＤＮＡ，并观察了其临床意义。１材料和方法１．１１２例临床诊断为...     

聚合酶链反应检出石蜡包埋肝癌组织的乙型肝炎病毒DNA

传统免疫组织化学方法及分子杂交检测石蜡包埋肝组织乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ灵敏度低，聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法能否检测到石蜡肝癌组织中的ＨＢＶＤＮＡ报道尚不多见。为此，采用ＨＢＶ与丙型肝炎病毒二合一ＰＣＲ试剂盒对１７例肝癌患者的石蜡包埋癌组织进行了ＨＢＶＤＮＡ检测，结果７例阳性，阳性率为４１％，而８例非肝癌对照患者则均阴性。组织ＨＢＶＤＮＡ结果与血清ＨＢｓＡｇ比较显示，该试剂盒有较高的检出率及符合率。这为今后进一步研究大量保存的肝病石蜡包埋组织的ＨＢＶ感染提供了一个可靠灵敏的方法，也为研究其他病毒感染的石蜡包埋材料提供了参考。     

斑点杂交与荧光定量PCR检测血清HBV-DNA的临床意义

ＨＢＶ ＤＮＡ是一种十分重要的ＨＢＶ感染标志 ,是直接反映ＨＢＶ的存在、病毒活动性复制与具有传染性的标志 ,对于确定ＨＢＶ感染的诊断有重要价值[1] 。目前ＨＢＶ感染的基因诊断技术已从定性发展到定量[2 ] 。斑点杂交定性检测不能直接反映病毒负荷量。近年来 ,荧光定量ＰＣＲ逐渐应用于临床检测ＨＢＶ ＤＮＡ。通过对 10 5例慢性乙型肝炎患者用斑点杂交与荧光定量ＰＣＲ两种方法同时进行血清ＨＢＶ ＤＮＡ检测 ,以了解两种方法的一致性 ,探讨两者的临床应用价值及问题。1　材料和方法1.1　研究对象　 2 0 0 1年 3至 7月间中山医科大学…     

PCR—ELISA检测HBV DNA方法学建立及初步临床应用

建立ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ检测ＨＢＶ ＤＮＡ的方法学，探讨其最佳实验条件并初步评价其临床应用价值。常规ＰＣＲ引物用地高辛标记，使扩增产物带有地高辛标记成份，再通过亲合素－生物素系统把生物素标记探针包被在固相聚苯乙烯小孔中，通过固相探针与ＨＢＶＤＮＡ扩增产物进行杂交，与碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体反应，经ＮＰＰ显色，根据其Ａ４０５ｎｍ值大小，推算样品中ＨＢＶ ＤＮＡ模板含量。建立ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ的最     

用PCR检测慢性乙肝患者唾液、尿液中HBV－DNA

用ＰＣＲ检测慢性乙肝患者唾液、尿液中ＨＢＶ－ＤＮＡ龚希平，徐乾（南京市钟阜医院，２１００７０）本文通过应用ＰＣＲ技术对慢性乙肝患者的唾液、尿液进行了ＨＢＶ－ＤＮＡ检测，以了解唾液、尿液中ＨＢＶ－ＤＮＡ的确切情况及其传染性如何，并就其临床意义作了一些探...     

聚合酶链反应凝胶呈像技术检测乙型肝炎病毒

目的 建立聚合酶链反应（ＰＣＲ）－凝胶呈像（ｇｅｌｄｏｃｕｍｅｎｔａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍＧＤＳ）技术,并应用于临床检测乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）核酸ＤＮＡ。方法 用凝胶呈像技术对血清ＨＢＶ－ＤＮＡＰＣＲ扩增产物的电泳凝胶进行摄像,分析,并与紫外灯下的肉眼观察结果相比较,对肉眼未判断出阳性而凝胶呈像分析邮阳性的血清标本,用定量ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）方法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果 通过３８份血清标本的检测,发现     

乙型肝炎病毒感染性病人及携带者的HBV DNA诊断研究

核酸分子杂交技术，能直接从血清中检出１０－１Ｐｇ的ＨＢＶＤＮＡ，最近发展起来的聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术能检出１０－３Ｐｇ的ＨＢＶＤＮＡ。本文所介绍的ＰＣＲ与染色技术的结合于１９９７年８月检测４１６人ＨＢＶＤＮＡ，并与溴化乙锭（ＥＢ）染色进行对比分...     

杂交酶联定量PCR检测HBV DNA的初步应用

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)ＤＮＡ定量检测已越来越受到临床的重视[1～3] 。我们采用聚合酶链反应(ＰＣＲ)杂交定量检测试剂测定乙型肝炎 (乙肝 )患者血清ＨＢＶＤＮＡ含量 ,并且对检测试剂作初步评价和临床应用观察 ,现报道如下。材料和方法一、检测对象乙型肝炎患者 5 3 8例 ,男 40 2例 ,女 1 3 6例 ,平均年龄 3 5岁。二、ＨＢＶＰＣＲ杂交酶联定量检测1 .试剂　由上海浩源生物科技有限公司提供 ,按说明书操作。2 .仪器　ＢＩＯ -ＲＡＤ5 5 0型酶标仪 ,ＭＪ - 1 0 0热循环仪。结果一、扩增效率由于ＰＣＲ反应的定量结果与ＰＣＲ平均效率直接有…     

应用套式聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

为了提高部分乙型肝炎病毒感染者突变株检出率，应用套式聚合酶链反应对１１０例ＡＬＴ升高的传染病科住院病人进行检测。检测结果阳性ＨｂｓＡｇ４２％，ＨＢＶ－ＤＮＡ常规ＰＣＲ６３．６％，套式ＰＣＲ９２．７％。     

聚合酶链反应技术检测HBSAg阳性病人血清中HBV核心前/核心DNA

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）是嗜肝ＤＮＡ病毒之一，以往临床上通过放射免疫或酶联免疫吸附法检测血清中的ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢＳ、ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢＣ等指标判断乙型肝炎的传染性。近年来应用ＰＣＲ技术检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，是反映ＨＢＶ感染者体内病毒复制...     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒

目的用荧光定量聚合酶链反应（ＦＱＰＣＲ）方法准确地定量检测血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的数量和免疫指标,以指导临床。方法设计合成了ＨＢＶＦＱＰＣＲ诊断试剂盒,以一种完全闭管式的ＰＣＲ和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时检测定量ＰＣＲ方法,检测了５３２份临床血清标本。结果经ＦＱＰＣＲ检测,１５８份ＨＢＶ的ｓ抗原、ｅ抗原、ｃ抗体（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ）都阳性的标本,其血清标本ＨＢＶＤＮＡ也全部阳性,平均ＨＢＶＤＮＡ拷贝数为１．１×１０８／ｍｌ;９８例ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性的标本,其阳性率为７３％（７１例）,平均拷贝数为８．６×１０５／ｍｌ,而常规ＰＣＲ只有３３％的阳性率;６７例ＨＢｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ都阳性标本的平均拷贝数为２．３×１０５／ｍｌ。结论能够避免ＰＣＲ后处理导致的假阳性污染,并实现准确定量。ＦＱＰＣＲ可以检测ＨＢＶ的真实感染和复制情况,对于乙型肝炎的临床诊断,治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义。