大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学研究

目的　在建立C6 Wistar胶质瘤大鼠模型的基础上 ,研究大鼠胶质瘤模型的C6胶质瘤细胞的增殖动力学。方法　应用流式细胞仪检测、PCNA免疫组化染色和核仁组织区银染三种方法 ,研究C6胶质瘤细胞的增殖动力学指标 ,并进行相关性分析。结果　 1、肿瘤细胞接种 2周后 ,肿瘤模型建立 ,HE染色见肿瘤细胞增殖活跃 ,各项增殖指标显示该肿瘤增殖活性较强。 2、AgNor面积、AgNOR计数与S期百分比和PCNA指数具有良好的相关性 ,AgNOR面积 (P <0 0 1)比AgNOR计数 (P <0 0 5 )相关性更强     

紫杉醇对绒癌JEG-3细胞增殖与凋亡的影响

目的该文围绕紫杉醇对人绒毛膜癌细胞JEG-3的增殖与凋亡的影响进行研究。方法通过MTT法检测细胞增殖及流式细胞术检测不同浓度紫杉醇作用下细胞的凋亡及其对细胞周期的影响。结果随紫杉醇浓度的增加或时间的延长,JEG-3细胞增殖抑制率及凋亡率均增大,各组间比较有统计学意义（P〈0.05）。结论该次实验的结果显示紫杉醇在抑制绒癌细胞JEG-3增殖及促凋亡方面均有显著的作用。     

紫杉醇对膀胱癌EJ细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的:探讨紫杉醇体外抑制膀胱癌E J细胞株及诱导凋亡的作用。方法:体外培养膀胱癌E J细胞株,以不同浓度紫杉醇处理12~72h后,通过M TT法测定细胞生长抑制作用,采用电镜观察和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:紫杉醇能抑制E J细胞的生长,并在一定剂量和时间范围内呈现出明显的时间、浓度依赖关系。电镜下凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩致密,并沿核膜分布形成花瓣形。电泳见出现典型的凋亡DNA梯形带。结论:紫杉醇能抑制膀胱癌E J细胞株的生长,诱导凋亡可能为其抗肿瘤作用机制之一。     

地昔帕明对胶质瘤C6细胞增殖抑制的神经酰胺通路

目的:研究神经酰胺通路在抗抑郁药地昔帕明抑制大鼠胶质瘤C6细胞增殖及诱导细胞凋亡中的作用。方法:MTT法测定C6细胞活力;AnnexinⅤ/PI双染色流式细胞术对细胞早期凋亡进行定量分析。结果:地昔帕明(5~20μmol·L-1)浓度依赖性抑制C6细胞的增殖且与C2-神经酰胺具协同作用;10μmol·L-1神经酰胺合成酶抑制剂烟曲霉毒素(FB1)预处理18h可显著对抗地昔帕明对C6细胞增殖的抑制作用。地昔帕明(20μmol·L-1)可诱导C6细胞发生早期凋亡(13.1%),而FB1(10μmol·L-1)预处理对凋亡发生率无明显影响。结论:地昔帕明可通过增加神经酰胺从头合成抑制胶质瘤细胞C6的增殖。     

地昔帕明对脑胶质瘤C6细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的研究地昔帕明（ＤＭＩ）对大鼠脑胶质瘤Ｃ６的增殖抑制和凋亡诱导作用,为三环类抗抑郁药作为肿瘤辅助治疗提供新的理论和实验依据。方法用ＭＴＴ比色法测定Ｃ６细胞活力,用透射电镜、流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,用免疫组化法分析ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果ＤＭＩ对Ｃ６细胞的增殖具有明显的浓度依赖性抑制作用, ＩＣ５０（ ９５ ％置信区间）为２０．７（１７．３～２４．２）μｍｏｌ·Ｌ－１,细胞阻滞于Ｇ０～Ｇ１期。ＤＭＩ（４０μｍｏｌ·Ｌ－１）使细胞发生典型的凋亡形态改变,ＤＮＡ含量分析显示 Ｇ０峰左侧出现亚二倍体细胞凋亡峰,呈浓度依赖性,蛋白合成抑制剂ＣＨＸ可显著抑制ＤＭＩ诱导的细胞凋亡。同时,ＤＭＩ（１０ μｍｏｌ·Ｌ－１）可下调细胞 ｂｃｌ－２蛋白的表达。结论ＤＭＩ体外对Ｃ６细胞的增殖具浓度依赖性抑制作用,并诱导细胞凋亡。     

蟾毒灵对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响

摘 要 目的：探讨蟾毒灵(Bufalin)对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响。方法: 采用四甲基偶氮蓝（MTT）比色法检测Bufalin对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响;倒置显微镜观察各组细胞数目、形态及活性的变化;膜联蛋白（AnnexinV）碘化丙啶（PI）标记法检测其对细胞凋亡的影响。结果: 不同浓度Bufalin对U251细胞增殖活性具有不同程度的抑制作用,在0.001～10 μmol·L^-1浓度范围内呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,Bufalin给药组对U251细胞的凋亡率均显著增高（P<0.01）。结论:Bufalin可显著抑制U251细胞的生长增殖,并在一定范围内呈浓度和时间依赖性,诱导其凋亡。     

漆黄素对胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及细胞周期的影响

目的 研究漆黄素对胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及细胞周期的影响.方法 以不同浓度的漆黄素(12.5、25、50μmol/L)处理C6细胞,以DMSO作为对照组.分别采用Transwell体外侵袭实验、Transwell体外迁移实验检测漆黄素对C6细胞侵袭、迁移能力的影响,采用流式细胞术检测漆黄素对C6细胞增殖及细胞周期的影响.结果 Transwell侵袭实验显示:漆黄素处理24 h后与对照组相比,漆黄素处理组的C6细胞侵袭率明显降低.Transwell侵袭实验显示:漆黄素处理C6细胞12h后与对照组相比,漆黄素处理组的C6细胞迁移率显著降低.流式细胞术检测细胞增殖结果显示:与对照组相比,漆黄素处理组的C6细胞增殖率明显降低.流式细胞术检测细胞周期结果显示:与对照组相比,漆黄素处理组的G1期细胞比例逐渐增高,而G2期和S期的细胞比例相应降低,将细胞周期阻滞在G1期.结论 漆黄素能够明显抑制胶质瘤C6细胞的侵袭、迁移能力;并可通过阻滞C6细胞的细胞周期进程来抑制其增殖.     

多西紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制及诱导凋亡的研究

<正>多西紫杉醇(DTX)是一种广谱的、半合成紫杉类抗肿瘤的化疗药物。已有研究表明,多西紫杉醇可用于治疗多种癌症如乳腺癌、肺癌、胃癌和头颈部癌等。本实验通过研究不同     

姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与凋亡诱导的影响

目的研究姜黄素对人原髓细胞白血病HL-60细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用,探讨其诱导细胞凋亡的机理。方法应用MTT比色法、细胞荧光染色法和Western blotting检测姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制、凋亡诱导以及对HL-60细胞表达Bcl-2、Caspase9和c-myc的影响。结果姜黄素对HL-60细胞的增殖抑制与剂量相关(P<0.05);经姜黄素作用后HL-60细胞的形态差异明显,表现凋亡的特征性变化,而且姜黄素作用后HL-60细胞的Bcl-2和原癌基因c-myc的表达量低于对照组(P<0.05),而Caspase9的表达量则明显高于对照组(P<0.05)。结论姜黄素可有效抑制体外培养的HL-60细胞增殖,其诱导HL-60细胞凋亡的途径可能通过线粒体介导。     

HEF1对神经胶质瘤细胞U251的增殖﹑凋亡、侵袭和迁移的研究

目的：探讨HEF1对神经胶质瘤细胞U251增殖、凋亡、侵袭和迁移影响情况。方法通过RT-PCR、Western Blot检测脑组织正常标本与胶质瘤细胞U251中HEF1的表达水平,化学合成HEF1基因小干扰RNA（siRNA）下调其基因表达,检测siRNA对U251细胞的生物学行为的影响。MTT法、Transwell、Hochest染色分别检测细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡。结果HEF1基因在正常脑组织标本中的表达水平明显低于胶质瘤细胞。与对照组相比,干扰HEF1的表达,神经胶质瘤细胞U251增殖、侵袭和迁移能力受到显著抑制,细胞凋亡明显增强。结论HEF1促进神经胶质瘤恶性增殖及侵袭,抑制细胞凋亡,有可能成为分子治疗有效靶点。     

抗人stathmin单克隆抗体及其联合紫杉醇对人乳腺癌细胞的生长抑制作用

目的：探讨抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别单用或联用对乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制及促凋亡作用。方法：以不同浓度的抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇分别组成单药组和联合用药组,另设不加药的空白对照组,分别作用于MCF-7细胞24、48、72、96h,观察细胞数量和形态的变化。MTT法检测单克隆抗体、紫杉醇单用组、联用组以及对照组对MCF-7细胞的增殖抑制作用,用流式细胞仪通过AnnexinV/PI双染法检测各组细胞凋亡率的改变。结果：不同浓度的各实验组作用后细胞数量明显减少、形态不规则,部分细胞核固缩和胞质减少,而对照组细胞生长状态良好。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,呈剂量-时间依赖效应,联用组细胞抑制率较单药组明显增高,差异具有统计学意义（P〈0.05）,两药联用有交互效应（P〈0.05）。抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能诱导MCF-7细胞凋亡,联合组更为明显（P〈0.05）。结论：抗人stathmin单克隆抗体、紫杉醇单用与联用均能抑制MCF-7细胞增殖,诱导其凋亡;两药联合作用于人乳腺癌MCF-7细胞具有协同作用。     

Fluvastatin inhibits growth and alters the malignant phenotype of the C6 glioma cell line

BackgroundFluvastatin is a member of the family of HMG-CoA reductase inhibitors (statins) extensively used in medical practice. Increasing evidence suggests that fluvastatin may be implicated in suppression of cancer growth and development. The aim of the present study was to investigate the anti-cancer potential of fluvastatin in C6 rat malignant glioma cells.MethodsFirst, the effects of fluvastatin on cell viability (MTT assay), proliferation (BrdU assay), cell morphology, and cytoskeleton were examined. Subsequently, its effect on extracellular signal regulated kinase 1 and 2 (ERK1/2) and c-Jun N-terminal kinase 1 and 2 (JNK 1/2) expression was estimated by Western blot. Finally, the influence of fluvastatin on cell migration and production of MMP-9 and VEGF was determined using a wound-healing assay and ELISA test, respectively.ResultsThe results obtained showed that fluvastatin had a remarkable inhibitory and cytotoxic effect on tumor C6 cells (IC₅₀ = 8.6 μM, 48 h), but did not inhibit the growth of normal neuronal cells. The concentrations from 1 to 10 μM induced marked morphologic alterations typical for apoptosis including shrinkage of cytoplasm, chromatin condensation, and nucleus breakdown.ConclusionThe inhibitory effects of fluvastatin on cell proliferation seemed to be associated with decreased p-ERK1/2 expression, upregulation of p-JNK1/2, and reduction in the MMP-9 and VEGF concentrations in culture media. The high anticancer (antiproliferative, proapoptotic, antiinvasive) activity of fluvastatin and lack of its toxicity against normal cells indicate a potential use of this statin in the treatment of malignant glioma.     

异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响

目的研究异甘草素对大鼠C6胶质瘤细胞增殖和分化的影响。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)比色法和克隆形成实验考察异甘草素对C6胶质瘤细胞增殖抑制作用;Giemsa染色观察细胞形态学变化;半定量RT-PCR、Western blot鉴定细胞分化相关基因及蛋白表达水平。结果大鼠C6胶质瘤细胞经异甘草素诱导后,以浓度依赖性抑制细胞增殖(P<0.01);光镜观察到异甘草素诱导前的C6胶质瘤细胞呈两极长梭形或多角形,胞质多,胞突短;而诱导后细胞突起数目不同程度增多,细胞形态变细变长。诱导前克隆形成出现早,数量多,直径大,克隆形成率高;异甘草素处理组克隆形成率降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR、Western blot结果显示,异甘草素诱导后C6细胞GFAP mRNA和蛋白表达均明显上升(P<0.01)。结论异甘草素能抑制大鼠C6胶质瘤细胞的增殖,并能诱导C6细胞分化。     

紫杉醇联合miR-200b对胃腺癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响

【摘要】目的 体外观察紫杉醇联合应用miR-200b模拟物（miR-200b mimics）对抑制胃癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的影响。方法 分别单独应用miR-200b转染细胞（200b组）及50 nmol/L紫杉醇单独处理胃癌SGC-7901细胞（紫杉醇组）,并联合应用上述两者（联合组）,同时设转染无义序列组和对照组。通过流式细胞技术检测细胞的凋亡水平和周期分布情况,克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭实验和细胞划痕实验观测细胞的侵袭迁移能力,Western-blot检测E2F3蛋白的表达水平。结果 与单药组相比,联合组早期凋亡率显著升高;克隆形成率显著降低,穿过Transwell小室的细胞数目显著减少;划痕48 h后的细胞迁移能力明显降低;E2F3蛋白在200b组及联合组中表达水平降低（均P< 0.001）。联合组阻滞于G2/M期细胞的比例高于200b组、无义序列组及对照组,但和紫杉醇组比较差异无统计学意义。结论 miR-200b可能通过降低E2F3表达增强紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞增殖侵袭能力的抑制作用。     

H2S促进神经胶质瘤细胞增殖作用的机制探讨

目的为了明确硫化氢(H2S)是否能够促进人胶质瘤U251细胞的增长,探讨Survivin和Sirt1在U251细胞中是否有表达及H2S促进U251细胞增长机制。方法 CCK8(Cell Counting Kit-8)法测细胞活力,Western Blot检测U251细胞内Survivin和Sirt1表达。结果 100-400μmol/L的H2S呈浓度依赖性地促进了U251细胞的增长;100-400μmol/L的H2S处理U251细胞24 h后,细胞内Survivin和Sirt1呈H2S浓度依赖性地增加,与空白对照比较,差异有统计学意义(P<0.01);用100μmol/L Sirt1抑制剂,Sirtinol预处理U251细胞0.5 h后,在继续用200μmol/L H2S继续培养细胞4 h后,预处理组和单独的硫化氢组相比,细胞的活力显著下降,差异有统计学意义(P<0.001),但是单独Sirtinol组对细胞活力影响不大,说明H2S促进细胞增殖功能可能是通过促进Sirt1的表达来实现的。结论 H2S促进了U251细胞的增长,H2S促进了U251细胞内Survivin和Sirt1表达,Sirt1抑制剂抑制了H2S对细胞的促进增长作用。     

c-myc反义寡核苷酸对大鼠脑胶质瘤细胞凋亡及增殖作用

目的　探讨c myc反义寡核苷酸 (c mycASON)对大鼠脑胶质瘤细胞凋亡及增殖作用的影响。方法　立体定向法将C6胶质瘤细胞接种于大鼠右侧尾壳核建立鼠脑胶质瘤模型 ,采用人工合成的c mycASON和c myc正义寡核苷酸 (c mycSON)注射于瘤区。按接种后给药的种类、浓度及给药间隔时间将动物随机分成ASON 1组、2组、3组 ;SON 1组、2组、3组 ;生理盐水 1组、2组 (NS1组、2组 )。电镜观察凋亡细胞 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期的变化。结果　 (1)反义组出现较多的凋亡细胞 ,正义组与生理盐水组凋亡细胞少。 (2 )各治疗组均显示凋亡峰 ,ASON 1组、2组、3组细胞凋亡率分别为 (18 8± 1 3) %、(2 0 3± 1 4 ) %、(17 8± 1 1) % ,各反义组与各正义组、各生理盐水组分别比较差异有显著性 (P <0 0 5 )。 (3)反义组肿瘤细胞在细胞周期G0 /G1期所占比例较大 ,各反义组差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;各反义组与各正义组、各生理盐水组分别比较差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　c myc反义寡核苷酸能诱导鼠脑胶质瘤细胞凋亡和抑制细胞增殖。     

抑制HSP 70表达对体外培养的脑胶质瘤细胞生长的影响

目的 探讨抑制热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）表达对脑胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法 利用细胞培养、电子显微镜及流式细胞仪的方法，观察阻滞ＨＳＰ７０表达后对肿瘤细胞生长的影响。结果 体外培养脑胶质瘤细胞株、经不同浓度槲皮素作用不同时间后，碘化丙碇染色荧光显微镜观察发现细胞核固缩，致密和破裂现象；流式细胞检测发现亚二倍体峰，提示出现细胞凋亡。分析细胞周期，发现凋亡细胞主要出现在Ｇ０、Ｇ１期，随药物的浓     

骨髓间充质干细胞对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对胶质瘤C6细胞体外增殖的影响。方法从大鼠骨髓中分离MSCs,体外培养和鉴定。取MSCs培养上清液,按照1/5,2/5,3/5的比例加入到C6培养基中,用MTT实验和BrdU标记指数(BrdU LI)评估C6细胞增殖。将MSCs与C6按照1∶1,1∶2,2∶1比例共培养。结果大鼠MSCs贴壁生长,有较强的增殖能力。经硫代甘油和巯基乙醇诱导分化后,分化为神经元或胶质细胞样细胞。C6培养基中加入MSCs培养上清液后,活性受到明显抑制,BrdU LI明显减低(P<0.05)。C6与MSCs共培养后,生长明显受到抑制,BrdU LI明显降低,尤其在MSCs周围,表现更加明显。结论大鼠MSCs在体外有明显的抑制胶质瘤C6增殖作用。