外源核苷酸对受损小鼠胸腺细胞DNA修复的影响

目的:探讨外源核苷酸对受损小鼠胸腺细胞DNA修复的影响.方法:采用10 μmol/L的N-甲基-N-硝基-N亚硝基胍(MNNG)诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤后,在终浓度分别为0,0.1,1和10 mmol/L核苷酸的RPMI-1640基础培养基或完全培养基中培养,在培养的第2,5 h采用单细胞凝胶电泳技术分析细胞DNA损伤和修复情况.结果:培养2 h时,基础培养基中各组间的拖尾细胞百分率差异无统计学意义(P＞0.05);完全培养基中核苷酸能降低拖尾率(P＜0.01).5 h时,随着核苷酸添加浓度的升高,拖尾率均降低(P＜0.01).在相同的培养基中,各组的彗星尾长在2 h差异无统计学意义(P＞0.05),5 h后,在基础培养基中添加1,10 mmol/L的核苷酸使得彗星尾长降低(P＜0.05);在完全培养基中添加1,10 mmol/L的核苷酸也使得彗星尾长降低(P＜0.01).在培养的2～5 h内,补充核苷酸均能提高基础培养基(P＜0.05)和完全培养基(P＜0.01)中DNA修复细胞的百分率.结论:外源核苷酸能明显促进受损小鼠胸腺细胞DNA的修复,且核苷酸的作用与其添加水平有关.     

低剂量γ射线照射后小鼠脾细胞外液对胸腺细胞DNA辐射抗性的作用

目的:通过观察小鼠脾细胞在给予不同低剂量γ射线体外照射,其细胞外液对胸腺细胞DNA辐射抗性和损伤修复的作用,探讨适应性反应的可能发生机制。方法:将小鼠脾细胞分组给予不同剂量(0,0.5,2.0,4.0,8.0cGy)的诱导剂量(D1)的γ射线照射后,收集其细胞外液,分别加入到胸腺细胞中,给予攻击剂量(D2)15Gy照射,观察脾细胞外液对胸腺细胞DNA的辐射抗性的影响;胸腺细胞给予D2照射后,加入对照或2cGy照射后的脾细胞外液,用FADU法检测DNA链断裂程度。结果:经1～4cGy照射后的脾细胞外液使胸腺细胞DNA的损伤程度(Qd)减小,其中以2cGy照射组最为明显(P<0.01),并且其DNA修复率增加。结论:适当的D1照射后的脾细胞外液可诱导出胸腺细胞DNA对D2的抗性,并且能促进胸腺细胞DNA损伤后的修复功能。分析细胞间的信息传递可能影响低剂量辐射诱导的适应性反应。     

苯引起鼠胸腺细胞DNA的损伤及其机制的研究

目的研究苯对小鼠胸腺细胞DNA的损伤及其机制. 方法运用单细胞凝胶电泳技术,将苯分为3个浓度组染毒胸腺细胞,测定胸腺细胞DNA的彗星尾长.结果在有代谢活化系统存在下,苯对小鼠胸腺细胞DNA产生损伤,且呈浓度依赖.但加入抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸后,可抑制苯对胸腺细胞DNA的损伤.结论苯能引起胸腺细胞DNA损伤,可能与其代谢物有关.     

恶性脑胶质瘤烷化剂耐药机制及其调节

烷化剂是用于治疗恶性脑肿瘤的主要药物,通过破坏DNA并诱导细胞凋亡对肿瘤细胞进行杀伤作用。内在性或获得性的烷化剂耐药是恶性脑肿瘤患者治疗失败的主要原因。烷化剂治疗脑肿瘤受多种途径调节影响：包括DNA修复途径、碱基切除修复（BER）途径等,对其影响途径的研究有助于克服烷化剂耐药,同时采用临床前模型试验有助于制订有效治疗方案克服耐药及促进药物开发。     

脾肾双补法对衰老小鼠胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响

目的观察脾肾双补法对衰老小鼠胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响。方法小鼠随机分为6组,每组10只。分别为正常组、模型组、维生素E组、脾肾双补方治疗高剂量组、脾肾双补方中剂量组,脾肾双补方低剂量组,采用单细胞凝胶电泳法检测胸腺细胞DNA氧化损伤修复的情况。结果实验表明:正常组胸腺细胞虽有很短尾长,但并未表现为彗星样拖尾,提示正常组胸腺细胞DNA氧化损伤较少。中、高剂量组和西药对照组的胸腺细胞尾长与模型组比较均有显著性差异,且中药高剂量组作用强于维生素E组。结论脾肾双补法可以减少衰老模型小鼠胸腺细胞彗星拖尾长度,对DNA氧化损伤具有一定的拮抗或修复作用,并存在一定的量效关系,说明脾肾双补法延缓模型小鼠衰老的作用可能与其对DNA氧化损伤的拮抗或修复作用有关。     

脾肾双补法对衰老小鼠胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响

目的观察脾肾双补法对衰老小鼠胸腺细胞DNA氧化损伤修复的影响。方法小鼠随机分为6组,每组10只。分别为正常组、模型组、维生素E组、脾肾双补方治疗高剂量组、脾肾双补方中剂量组,脾肾双补方低剂量组,采用单细胞凝胶电泳法检测胸腺细胞DNA氧化损伤修复的情况。结果实验表明：正常组胸腺细胞虽有很短尾长,但并未表现为彗星样拖尾,提示正常组胸腺细胞DNA氧化损伤较少。中、高剂量组和西药对照组的胸腺细胞尾长与模型组比较均有显著性差异,且中药高剂量组作用强于维生素E组。结论脾肾双补法可以减少衰老模型小鼠胸腺细胞彗星拖尾长度,对DNA氧化损伤具有一定的拮抗或修复作用,并存在一定的量效关系,说明脾肾双补法延缓模型小鼠衰老的作用可能与其对DNA氧化损伤的拮抗或修复作用有关。     

MTX致小鼠组织DNA损伤的研究

目的为进一步了解甲氨蝶呤(methotlexate,MTX)的作用机制,探测一次给药后不同时间点小鼠组织DNA损伤的修复情况。方法用单细胞凝胶电泳技术检测MTX腹腔注射染毒1、3、6、12、24h后对小鼠肝、脾、骨髓、胸腺、肾、睾丸、胃和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用。结果腹腔注射5mg／kg MTX可诱发小鼠脾细胞、骨髓细胞、胸腺细胞和外周血淋巴细胞的DNA单链断裂。结论MTX可致小鼠体内多脏器细胞的DNA单链断裂,不同细胞对MTX的易感性不同。     

MNNG诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤修复模型的建立

目的本实验研究了诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤的适宜MNNG浓度以及损伤后DNA修复的时间范围。方法用终浓度为5、10、50、100、500、1 000μmol/L的亚硝基胍(N-methyl-N-’nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)分别处理小鼠胸腺细胞0.5 h,然后用RPMI-1640培养基培养,分别于0 h0、.5 h2、h、4 h8、h检测细胞存活情况和细胞DNA损伤修复情况。结果随着MNNG浓度的增大,细胞死亡率、DNA拖尾率以及彗星尾长都显著升高,其中100、5001、000μmol/L MNNG处理细胞后,细胞数量少,拖尾非常严重,无法测量。不同MNNG浓度之间的DNA损伤和修复程度差异显著(P<0.01),呈现明显的剂量反应关系。DNA拖尾率在0.5 h或2 h达到高峰,彗星尾长在2 h最大,在2~8 h内,拖尾率和彗星尾长都显著降低(P<0.01),接近对照。结论采用5μmol/L或10μmol/LMNNG处理小鼠胸腺细胞0.5 h可以诱导细胞DNA损伤,损伤后的DNA可以在2~8 h内基本修复。     

bcr/abl融合蛋白对细胞DNA损伤修复功能的影响

目的:建立稳定表达bcr/ablP210融合蛋白的小鼠转化细胞株BaF3-P210的DNA损伤模型,探讨bcr/abl融合蛋白对细胞DNA损伤修复功能的影响.方法:彗星实验检测不同浓度H2O2诱导的BaF3-P210细胞的DNA损伤建立DNA损伤模型,以空载体转染BaF3-MIGR1细胞为对照;用彗星实验对两组细胞在DNA损伤后的修复进行不同时间段的动态观测.结果:彗星实验确定了细胞DNA损伤模型的建立条件是:采用50 μmol/L终浓度的H2O2对BaF3-MIGR1细胞和BaF3-P210细胞进行染毒,H2O2作用温度和时间均为4℃,10 min.BaF3-P210细胞与BaF3-MIGR1细胞相比DNA损伤后修复时间缩短,在损伤后60 min即可达到完全修复,而后者在损伤后120 min才能完全修复(P＜0.05).结论:建立了表达bcr/ablP210融合蛋白的小鼠转化细胞株BaF3-P210细胞的DNA损伤模型,并发现bcr/abl融合蛋白可增强BaF3-P210细胞的DNA损伤后修复能力.     

MGMT 基因与头颈肿瘤的相关研究

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶（ O6-methylguanine-DNA methyltransfe-rase, MGMT）是DNA烷化剂损伤的主要修复酶,可保护基因烷化剂损伤导致的致突变、致癌作用。 MGMT的表观遗传调控是影响其表达的主要机制。表达减少与肿瘤的发生发展的密切关系与其高表达增加肿瘤烷化剂化疗的耐药性成为一个互相矛盾的问题,此基因序列的单个核苷酸位点变异亦有可能与肿瘤发病风险相关。就MGMT基因在头颈肿瘤方面的研究做了综述。