PAR-2对心肌缺血再灌注损伤大鼠Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的探讨蛋白酶激活受体2(PAR-2)对缺血再灌注(IR)大鼠心肌Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法 40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、I/R组和SLIGRL-NH2(0.5,1,3 mg)组。结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min制作心肌I/R模型;采用实时荧光定量PCR法检测大鼠心肌组织Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。结果与假手术组比较,模型组Bcl-2和Bax显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,SLIGRL-NH2(1、3 mg)组的Bcl-2显著升高、而Bax显著降低(P<0.05～0.01)。结论 I/R可诱导大鼠心肌组织Bcl-2、Bax mRNA表达上调,而PAR-2活化可通过抑制心肌组织Bax mRNA的表达和促进Bcl-2 mRNA的表达,起到抑制心肌细胞凋亡的作用。     

蛋白酶激活受体2与心肌缺血/再灌注损伤

氧化应激、炎症和细胞凋亡在心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury,MI/RI)中起重要作用,而蛋白酶激活受体（protease-activated receptor,PAR）-2与MI/RI之间存在密切关系。PAR-2广泛分布于心血管系统,可被多种蛋白酶激活,启动多种生物学效应。本文从上述几方面对PAR-2与MI/RI的关系进行阐述,为MI/RI的防治提供理论依据。     

蛋白酶活化受体-2与心肌缺血再灌注损伤

蛋白酶活化受体-2是一种G蛋白偶联的细胞膜表面受体，广泛分布于心血管以及富含血管的组织器官，能通过溶蛋白性裂解的方式激活受体自身，启动多种细胞效应。近年诸多研究表明该受体与心肌缺血再灌注损伤的关系密切。本文主要就其在心肌缺血再灌注中的作用作一综述。     

大鼠急性心肌缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡的实验研究

目的:观察心肌缺血再灌注(IR)损伤与心肌细胞凋亡关系及凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达情况。方法:选用健康雄性SD大鼠29只,随机分为:假手术组(n=8),缺血组(n=12),缺血再灌注组(n=9),分别取上述大鼠心肌组织。(1)观察心肌组织及线粒体的形态结构,并进行体视学分析。(2)采用缺口末端标记法(TUNEL)原位检测凋亡细胞。(3)用免疫组化SP法检测心肌细胞Bcl-2、Bax表达。结果:(1)假手术组心肌纤维排列整齐,细胞间质血管未见明显异常,细胞核膜完整,缺血组及缺血再灌注组可见心肌嗜酸性变、空泡变性、心肌纤维紊乱及收缩带形成,心肌纤维间出血及灶性心肌坏死。心肌细胞线粒体体视学分析,与假手术组比较,心肌缺血组形状因子显著降低(P<0.05),面密度显著增加(P<0.05),缺血再灌注组形状因子显著降低(P<0.01),面密度及周密度均显著增加(均P<0.05)。(2)与假手术组比较,缺血组细胞凋亡率明显升高(P<0.001),缺血再灌注组细胞凋亡率明显升高(P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。(3)与假手术组比较,缺血再灌注组凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(P<0.01,P<0.001)。缺血再灌注组与缺血组比较凋亡调控基因Bcl-2、Bax表达明显升高(均P<0.01)。结论:心肌缺血及再灌注在导致细胞形态、线粒体超微结构改变的同时,诱导心肌细胞的凋亡,Bcl-2、Bax蛋白表达在心肌细胞凋亡的发生中起重要作用,细胞凋亡加重了缺血再灌注损伤。     

蛋白酶激活受体-2对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨蛋白酶激活受体2(PAR-2)对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 40只雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(sham组),缺血再灌注组(I/R组)和丝-亮-异亮-甘-精-亮-酰胺(SLIGRL-NH2)低剂量组(0.5 mg/kg)、中剂量组(1 mg/kg)、高剂茸组(3 mg/kg),每组8只,建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型.采用末端标记法(TUNEL)和DNA琼脂糖凝胶电泳的方法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,实时荧光定量PCR检测心肌细胞PAR-2mRNA的表达情况.结果 (1)SLIGRL-NH2中、高剂量组凋亡指数明显低于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为23.36%±3.77%、15.56%±1.24%比I/R组35.19%±4.50%,P<0.05～0.01);凋亡相关蛋白Bcl-2高于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为0.983±0.103、1.197±0.119比I/R组0.761±0.043,P<0.05～0.01);凋亡相关蛋白Bax的表达显著低于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为0.646±0.041,0.578±0.029比I/R组0.759±0.035,P均<0.01);PAR-2mRNA的表达明显高于I/R组(SLIGRL-NH2中、高剂量组分别为3.73±0.45,7.62±0.81比I/R组1.42±0.41,P均<0.01).(2)DNA凝胶电泳结果显示,I/R组、SLIGRL-NH2低剂量组可见到DNA梯带,假手术组和SLIGRL-NH2中、高剂量组则无明显DNA梯带.结论 PAR-2激动剂SLIGRL-NH2可上调并激活PAR-2,并通过增加Bcl-2/Bax的比值抑制大鼠缺血再灌注心肌细胞的凋亡而发挥心肌保护效应,且该作用具有一定的剂量依赖效应.     

蛋白酶激活受体-2对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响

Objective To investigate the effect of protease-activated receptor2 (PAR-2) on rat apoptotic cardiomyocytes underwent iachemia reperfusion (I/R) injury. Methods Healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups (n = 8 each): sham-operation group, I/R (ligating the left coronary artery for 30 minutes and followed by 120 minutes reperfusion) group and three SLIGRL-NH2 groups treated with intravenous PAR-2 agonist SLIGRL-NH2 at different doses (0.5,1,3 mg/kg) 5 minutes before reperfusion. Apoptic cardiomyocytes was detected by TUNEL staining and by DNA ladder on agarose gel electrophoresis. Bax and Bcl-2 expression in myocardium was analyzed by immunohistochemical technique. The mRNA expression of PAR-2 was determined by Real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-PCR). Results (1) The apoptosis index and the expression of Bcl-2 and Bax were significantly increased in IR group and SLIGRL-NH2 groups than those in sham group (P<0. 05～0.01). (2) Compared with I/R group, the apoptosis index and the expression of Bax were significantly reduced while the expression of Bcl-2 and PAR-2 mRNA were significantly upregnlated by SLIGRL-NH2 in a dose-dependent manner. (3) DNA Agarose gel electrophoresis demonstrated that DNA ladder existed in I/R and 0.5 mg/kg SLIGRL-NH2 group, but not in 1,3 mg/kg SLIGRL-NH2 groups. Conclusions PAR-2 agonist SLIGRL-NH2 could reduce myocardial apoptosis by upregulating the Bcl-2 and PAR-2 mRNA level and downregnlating Bax expression in a dose-dependent manner in this rat I/R model.     

蛋白酶激活受体2在冠心病中作用的研究进展

蛋白酶激活受体2（PAR2）是G蛋白耦联受体的家族成员,作为一种细胞表面受体,PAR2可被丝氨酸蛋白酶及药理学上的合成配体激活,其在机体内分布广泛并在心血管病理生理机制中发挥着重要作用。近年来大量研究显示PAR2在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤及心肌纤维化中具有重要作用,且抗凝剂利伐沙班可通过作用于PAR2对心脏产生...     

过氧化物酶体增殖物激活受体与心肌缺血再灌注损伤

过氧化物酶体增殖物激活受体作为核受体超家族的一员,其作用广泛,它涉及脂质和脂蛋白代谢,葡萄糖代谢,细胞增值分裂和凋亡。其中,过氧化物酶体增殖物激活受体与心肌缺血再灌注损伤中也起着重要的作用,现就此作一综述。     

曲美他嗪对人再灌注损伤心肌蛋白酶活化受体-2表达的影响

目的:观察曲美他嗪口服预处理对再灌注损伤心肌蛋白酶活化受体-2(PAR-2)的表达影响,探讨其对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将40例行体外循环二尖瓣瓣膜置换术患者随机分为曲美他嗪组和对照组,每组20例,曲美他嗪组术前予以曲美他嗪预处理2周(曲美他嗪片20mg/次,3次/d)。术中取开放升主动脉恢复心肌血供30min时的右房心肌,采用实时定量PCR检测心肌组织PAR-2的mRNA水平;免疫组织化学法检测心肌组织PAR-2的蛋白水平;在主动脉开放后30min、6h、24h经颈内中心静脉置管处取血,测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌红蛋白(MYO)的水平。结果:①与对照组比较,曲美他嗪组心肌组织PAR-2的mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),CK-MB、cTnI、MYO的水平(主动脉开放后30min、6h)显著降低(P<0.05)。结论:曲美他嗪对心肌缺血再灌注损伤具有显著的保护作用,其机制可能与上调PAR-2的表达有关。     

钙敏感受体参与心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制

目的 探讨钙敏感受体（CaSR）参与心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制。方法 采用离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。实验分5组：对照组灌注2h；缺血组单纯缺血40min；缺血再灌注组缺血40min再灌注2h；激动剂组同缺血再灌注组，在再灌注液中加入氯化钆（GdCl3）；阻断剂组同缺血再灌注组，在再灌注液中加入氯化镍（NiCl2）和氯化镉（CdCl2）。利用光镜观察各组心肌细胞凋亡情况；检测各组乳酸脱氢酶（LDH）活力和丙二醛（MDA）水平变化；Western Blot分析各组心肌组织中CaSR、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果 缺血再灌注和激动剂组细胞凋亡指数、LDH活力和MDA水平明显高于对照组；同时CaSR、细胞浆中的Caspase-3表达也明显高于对照组．反之，Bcl-2表达低于对照组。结论 CaSR参与缺血再灌注损伤所诱发的细胞凋亡。     

中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞相关凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法 40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注2h复制大鼠MIRI模型,分别以HE染色、TUNEL法及免疫组织化学法检测心肌组织病理学、心肌细胞凋亡指数、心肌细胞Bcl-2、Bax的阳性表达。结果 MIRI组与假手术组比较心肌细胞凋亡指数值显著升高(P<0.01),而冠心康组明显降低(P<0.01);抑凋亡因子Bcl-2在MIRI后表达明显降低,而促凋亡因子Bax表达则明显升高,冠心康可明显升高Bcl-2的表达,同时降低Bax的表达(P<0.01)。结论中药复方冠心康对大鼠MIRI心肌细胞具有明显的保护作用,其作用机制与调控心肌细胞的凋亡因子Bcl-2、Bax的表达有关。     

辛伐他汀缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨辛伐他汀缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注（I/R）损伤的保护作用及机制。方法采用Langendorff离体心脏灌流模型,将32只大鼠随机分为四组各8只。对照组用改良K-H缓冲液持续灌流;I/R组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌、再灌;治疗组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌后,在K-H缓冲液中加入辛伐他汀20μmol/L再灌;K-H缓冲液再灌;N-硝基-L-精氨酸甲酯（L-NAME）组用改良K-H缓冲液稳定灌注、停灌后,在K-H缓冲液中加入辛伐他汀20μmol/L、L-NAME 100μmol/L再灌,K-H缓冲液再灌。观察各组再灌注心律失常发生情况,检测其冠脉流出液中的肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、NO,心肌组织总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性、丙二醛（MDA）及细胞凋亡指数（AI）。结果与I/R组比较,治疗组心律失常发生率下降,CK、LDH、MDA及细胞AI降低,T-SOD活性、NO升高（P均〈0.01）;与治疗组比较,L-NAME组心律失常发生率升高,CK、LDH、MDA及细胞AI升高,T-SOD活性、NO降低（P均〈0.01）。结论辛伐他汀缺血后处理能减轻大鼠心肌I/R损伤,其作用机制与清除氧自由基、增加NO含量、减少心肌细胞凋亡有关。     

Toll样受体与心肌缺血再灌注损伤及其保护作用研究进展

早期及时的再灌注是治疗心肌缺血的关键,然而随之带来的心律失常及心脏功能障碍等,直接影响患者的预后。缺血预处理和缺血后处理是目前最强的两种心肌内源性保护方法,在缺血性心肌保护中受到广泛关注。研究显示Toll样受体信号通路在心肌缺血再灌注损伤缺血预处理和缺血后处理心脏保护方面起着重要调控作用。现就Toll样受体与心脏缺血再灌注损伤及其保护作用的研究进展予以综述。     

促血小板生成素对大鼠脑缺血再灌注脑组织的保护作用

目的探讨促血小板生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的保护作用及机制。方法采用线栓法阻断大鼠大脑中动脉血流制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型。将60只雄性SD大鼠随机分成促血小板生成素(TPO)组、缺血再灌注组、假手术组和正常组。于缺血开始时TPO组给予TPO 5μg/kg腹腔注射;缺血再灌注组给予等剂量生理盐水。分别于再灌注6、12、24、48 h后断头取脑、切片,进行HE染色、Bcl-2免疫组化染色和细胞凋亡检测。结果缺血再灌注后,TPO组和缺血再灌注组大鼠缺血侧皮层可检测到凋亡细胞,且TPO组凋亡细胞数明显少于缺血再灌注组,差异有统计学意义(P0.05),而假手术组及正常组未检测到凋亡细胞;TPO组和缺血再灌注组缺血侧皮层Bcl-2阳性细胞数均高于假手术组及正常组,与缺血再灌注组相比,TPO组Bcl-2蛋白表达显著增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 TPO可抑制缺血再灌注损伤后缺血侧皮层的细胞凋亡,其机制可能是通过上调Bcl-2基因表达而实现。     

罗格列酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察罗格列酮对大鼠在体心肌缺血再灌注损伤及心肌细胞凋亡的影响.方法 采用结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min的方法 ,复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型.实验动物随机分为罗格列酮组(3 mg·kg-1·d-1)、模型组(生理盐水2ml/d)和假手术组(生理盐水2ml/d).再灌注后观察血清酶学改变,Evans blue、TTC双重染色检测心肌梗死面积,流式细胞术测定心肌细胞凋亡指数,免疫组化检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达.结果 与模型组比较,罗格列酮显著降低血清酶CK、LDH水平(P＜0.01),缩小心肌梗死面积(P＜0.01),增加Bcl-2、减少Bax表达(P＜0.01),减少心肌细胞凋亡(P＜0.01).结论 罗格列酮对心肌缺血再灌注损伤有保护作用.     

银杏叶提取物保护胰腺缺血再灌注损伤作用的机制探讨

目的探讨银杏叶提取物(EGb)对大鼠胰腺缺血/再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制。方法制备大鼠胰腺IR损伤模型。取SD大鼠24只,随机分为3组(n=8)假手术组(Sham组)、IR组、缺血/再灌注银杏叶提取物保护组(EGb IR组)。光镜、电镜观察胰腺腺泡细胞结构改变;采用TUNEL方法检测细胞凋亡;流式细胞仪定量检测细胞凋亡;应用免疫组化染色检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果IR组凋亡指数明显大于Sham组(P<0.01),EGb IR组凋亡指数明显小于IR组(P<0.01);EGb IR组Bcl-2蛋白表达明显高于IR组(P<0.01);EGb IR组Bax蛋白表达明显低于IR组(P<0.01)。结论银杏叶提取物可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对大鼠胰腺IR损伤起保护作用。     

缺血后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用

缺血后处理是指在缺血发生后、长时间的再灌注之前,对心脏进行数次短暂的再灌注/缺血循环的处理方法.与缺血预适应一样,缺血后处理能减轻再灌注后心肌的损伤.由于缺血后处理可在心肌缺血发生后应用,所以比缺血预适应具有更大的临床应用价值.     

逆行灌注白藜芦醇对猪脊髓缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的 探讨逆行灌注白藜芦醇(resveratrol,Res)对猪脊髓缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤的神经保护作用.方法 将18只西藏小型猪按“随机数字表法”随机分为3组:手术对照组(I/R组,n=6);冷液(cold saline,CL)逆灌组(CL组,n=6);Res逆灌组(CL+Res组,n=6).I/R组:常温阻断降主动脉70 min;CL组:阻断前游离出副半奇静脉,阻断降主动脉70 min,同时经副半奇静脉逆行灌注低温(4℃)9 g/L氯化钠溶液,灌注流速为16.65 mL/min;CL+Res组:阻断降主动脉70 min,同时经副半奇静脉逆行灌注含Res 10 mg/kg的低温(4℃)9 g/L氯化钠溶液.于术后6、24、48 h行神经功能评分,术后48 h取L2～L4段脊髓,免疫组化法和Western Blot检测Bax及Bcl-2蛋白表达变化.结果 18只西藏小型猪全部存活.术后6、24、48 h各组行为学评分均降低,I/R组低于CL+Res组、CL组,CL+Res组高于CL组,差异有统计学意义(F=26.341、18.553、9.637,P＜0.05).将主动脉阻断后各组实验动物的鼻咽温度和椎管温度均有下降,I/R组、CL+Res组和CL组分别在阻断70 min和再灌注20 min时降至最低.再灌注后,I/R组的鼻咽温度和椎管温度逐渐回升,至再灌注60 min时与阻断前相近(P=0.293、0.115);而CL组和CL+Res组回升不明显,在再灌注60 min时仍明显低于阻断前(P＜0.01).Western Blot检测结果与免疫组化结果一致:Bcl-2蛋白表达水平在CL+Res组与CL组均高于I/R组,差异有统计学意义(P＜0.05);且CL+Res组高于CL组,差异有统计学意义(P＜0.05).Bax蛋白表达水平在CL+Res组与CL组均低于I/R组,差异有统计学意义(P＜0.05);且CL+Res组低于CL组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经猪副半奇静脉逆行灌注低温9 g/L氯化钠溶液及Res对脊髓I/R损伤有保护作用,其机制可能是通过下调Bax及上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡而发挥作用.     

乙醛脱氢酶2抗心肌缺血-再灌注损伤机制

心肌缺血-再灌注期间氧化应激产生的毒性醛类可诱发心功能障碍.乙醛脱氢酶2(ALDH2)是乙醛及其衍生物在体内氧化的关键酶,近年研究表明,ALDH2与心肌保护密切相关.目前研究表明,ALDH2除了可有效清除心肌细胞内的毒性醛类,还可在缺血-再灌注中调节自噬、对抗内质网应激、抑制心肌细胞凋亡等.该文旨在概述ALDH2在缺血-再灌注中心肌保护机制研究的新进展.     

大剂量当归预适应抗心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的机制

目的观察大剂量当归水煎液预适应对缺血再灌注(IR)大鼠心肌细胞凋亡及心肌组织Bcl-2及Bax蛋白表达的影响。方法应用离体灌流大鼠心脏,复制大鼠心肌IR与缺血预适应(IPC)模型,并以不同大剂量当归水煎液灌胃6 w后,取大鼠心脏进行离体灌注,复制当归IPC模型,以TTC法测定心肌梗死面积,以Tunel法检测细胞凋亡,Western印迹法检测Bcl-2及Bax蛋白表达。结果大剂量当归水煎液预适应能有效降低IR大鼠心肌梗死面积,降低心肌细胞的凋亡率,并增加心肌组织Bcl-2的表达而抑制Bax的表达,且呈现明显剂量-效应关系(P0.05,P0.01)。结论大剂量当归水煎液预适应可增加心肌组织Bcl-2的表达而抑制Bax的表达,从而减少IR大鼠心肌细胞的凋亡,对IR大鼠心肌具有明显保护作用。