大肠腺瘤及癌变组织hMLH1和hMSH2表达与细胞凋亡的研究

目的:探讨hMLH1和hMSH2基因在大肠腺瘤及其癌变中的作用,及其表达对细胞凋亡的影响.方法:采用免疫组织化学染色检测63例大肠腺瘤、20例腺瘤癌变和20例大肠癌组织hMLH1和hMSH2表达;同时采用TUNEL法检测其细胞凋亡指数(AI).结果:大肠腺瘤、腺瘤癌变和大肠癌组织错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达率逐渐降低,与正常大肠相比相差显著,随腺瘤不典型增生程度增加其阳性率逐渐降低;大肠腺瘤、腺瘤癌变和大肠癌中hMLH1表达缺失者细胞凋亡指数较显著高于其阳性者,且大肠腺瘤不典型增生Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级hMLH1-与hMLH1+组存在差异显著;而hMSH2-与hMSH2-间AI仅大肠腺瘤组有显著性差异,不典型增生Ⅰ、Ⅱ级组hMSH2-与hMSH2+间AI差异显著,而不典型增生Ⅲ级组hMSH2蛋白的表达阴性与阳性间AI无统计学差异.结论:DNA错配修复基因突变或功能缺失与大肠癌的发生有关,可能系大肠癌发生过程中的早期事件,且可能与大肠肿瘤细胞凋亡活性增加相关.     

错配修复基因hMSH2和hMLH1在结直肠癌组织中的表达及意义

[目的]评价错配修复基因hMLH1和hMSH2在结直肠癌中的表达及意义.[方法]经病理学确诊的结直肠癌手术切除标本85例,术前均未接受过放疗或化疗,免疫组化检测hMLH1和hMSH2蛋白表达情况.[结果]85例结直肠癌组中,hMSH2缺失率为69.4％(59/85),hMLH1蛋白缺失率为78.8％(67/85).hMSH2蛋白缺失率在T1、T2、T3和T4期结直肠肿瘤中的缺失率分别为50.0％、43.8％、71.1％和82.8％,随T分期增加而增加(x2=11.037,P=0.012).有淋巴结转移者的hMSH2蛋白缺失率达88.57％ (31/35),而无淋巴结转移患者的hMSH2蛋白缺失率为56.0％(28/50) (x2=10.287,P=0.001).hMLH1蛋白缺失率与肿瘤分化程度和T分期相关,但与性别、年龄、肿瘤部位、N分期和M分期均无关.[结论]在结直肠癌组织中存在hMSH2和hMLH1蛋白缺失,且hMSH2和hMLH1蛋白缺失与肿瘤T分期和分化程度相关.检测hMLH1和hMSH2蛋白表达对预后判断有一定的参考价值.     

散发性结直肠癌组织中hMSH2和hMLH1的表达研究

[目的]分析散发性结直肠癌中的hMLH1和hMSH2蛋白表达情况。[方法]选取经病理学确诊并在术前未接受过放疗或化疗的结直肠癌手术切除标本127例,以及内镜活检无肿瘤患者肠黏膜上皮20例。用免疫组化方法检测hMLH1和hMSH2蛋白表达情况。[结果]结直肠癌组织中hMSH2蛋白表达缺失率为65.4%（83/127）,高于对照肠组织（20.0%,4/20）（χ2=14.714,P〈0.001）。结直肠癌组织中hMSH2蛋白缺失率随T分期增加而增加（χ2=8.233,P=0.041）;与N分期有关（χ2=20.235,P〈0.001）,有淋巴结转移者患者中hMSH2蛋白表达缺失率达87.1%（27/31）,高于无淋巴结转移患者（54.2%）（χ2=9.250,P=0.002）。hMLH1蛋白表达缺失率为74.0%,与T分期（χ2=29.115,P〈0.001）、N分期（χ2=9.807,P=0.006）、M分期（χ2=7.363,P=0.007）有关。[结论]结直肠癌组织中存在hMLH1和hMLH2蛋白表达缺失,通过免疫组化方法检测,可以简便、准确地发现错配修复基因的突变,可为后期的治疗和预后判断提供参考。     

错配修复基因hMSH2和hMLH1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

  目的   评价hMLH1和hMSH2蛋白在结直肠癌中的表达及意义。   方法   选取2009年1月至2011年12月经病理学确诊的结肠癌手术切除标本72例, 所有患者在术前均未接受过放疗或化疗, 内镜活检取正常肠黏膜上皮25例。免疫组织化学检测hMLH1和hMSH2蛋白表达情况。   结果   结直肠癌组织中hMSH2缺失率为88.9% (64/72), 高于正常肠组织中hMSH2蛋白缺失率28.0% (7/25)。hMSH2蛋白缺失率随T分期增加而增加, 但差异无统计学意义(χ2=37.622, P < 0.001);hMSH2蛋白缺失率与N分期相关, 有淋巴结转移者的hMSH2蛋白缺失40例, 缺失率达97.6% (40/41), 无淋巴结转移患者的hMSH2蛋白缺失率为77.4% (24/31, χ2=7.251, P=0.007)。而hMLH1蛋白缺失率为90.3% (65/72), 高于正常组肠组织中hMLH1蛋白缺失率为32.0% (8/25, χ2=33.847, P < 0.001), 但与肿瘤部位、分期、分化程度均无关。   结论   在结直肠癌组织中存在错配修复基因hMSH2和hMLH1蛋白缺失, 且表达缺失与肿瘤分期有关。通过免疫组织化学方法检测hMLH1和hMSH2蛋白表达可以简便、准确地发现错配修复基因的突变, 从而对其后期的治疗和预后判断有参考价值。      

错配修复基因hMLH1、hMSH2蛋白在宫颈疾病中的表达

[目的]分析不同级别宫颈癌前病变及宫颈癌中错配修复基因hMLH1和hMSH2蛋白表达情况。[方法]收集宫颈活检及手术标本139例,其中宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级43例,CINⅡ、Ⅲ级48例,宫颈鳞癌(SCC)48例;对照组慢性宫颈炎50例。用免疫组化技术检测hMLH1和hMSH2蛋白,分析其与宫颈病变级别及宫颈癌临床病理特征关系。[结果]hMLH1阳性率在CIN各组明显高于慢性宫颈炎及SCC组,差异有统计学意义(P<0.01)。hMSH2阳性率随宫颈病变级别增加而升高,差异有统计学意义(P<0.01);但SCC组与CIN各组相比差异无统计学意义。hMLH1阳性率随FIGO分期增加而下降,但差异无统计学意义;hMSH2阳性率随FIGO分期增加而上升,且与淋巴转移及病理分级有关(P<0.05)。两者与肿瘤大小均无关。[结论]错配修复基因hMLH1、hMSH2蛋白与宫颈癌发生发展有关,但两者作用机制可能不同。     

散发性结直肠癌、腺瘤组织中hMLH1和突变型p53表达

[目的]探讨hMLH1和p53基因在散发性结直肠癌发生机制中所起的作用。[方法]采用PV-6000二步法免疫组化检测技术对60例散发性结直肠癌，45例大肠腺瘤和26例正常大肠黏膜石蜡切片进行hMLH1和p53表达的检测。[结果]（1）60例散发性结直肠癌hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达分别为11例（18．3％）和32例（53.3％），hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达与患者年龄、肿瘤部位、组织学类型和分化程度密切相关（P〈0．05或P〈0．01），而与患者性别、肿瘤大体类型、肿块大小、浸润深度、淋巴结及远处转移与否和患者的Duke’s分期均无显著相关性（P〉0．05）。（2）大肠腺瘤患者p53蛋白阳性表达与患者腺瘤部位、组织学类型和不典型增生程度密切相关（P〈0．05），而与患者性别、年龄无显著相关性（P〉0．05）。（3）散发性结直肠癌中hMLH1蛋白阴性表达组p53蛋白阳性表达率（18.2％，2/11）低于阳性表达组（61．2％，30／49）（P〈O．05）。[结论]（1）大部分散发性结直肠癌是沿染色体不稳定途径发生，其中抑癌基因p53的突变起重要作用。同时，一定比例的散发性结直肠癌中存在错配修复基因的缺陷，并具有相对特殊的临床病理特征。（2）大肠腺瘤组织中有一定比例的hMLH1蛋白阴性表达和p53蛋白阳性表达，提示hMLH1和p53基因的突变可能是散发性结直肠癌发生的早期事件之一。     

X线照射对鼻咽癌细胞hMSH2和hMLH1表达的影响

目的研究X线照射对鼻咽癌细胞中错配修复基因hMSH2和hMLH1表达的影响,探讨放射损伤后肿瘤细胞的DNA错配修复机制。方法将鼻咽癌CNE-1细胞分为实验组和对照组,对2组细胞进行X线分次外照射。实验组每次照射剂量为2Gy,总剂量为10Gy。对照组每次照射剂量为0Gy。应用RT-PCR、免疫细胞化学及Western blot方法,检测照射终止后不同时间点细胞hMSH2和hMLH1的表达。结果实验组细胞在照射后hMSH2mRNA和蛋白的表达均显著强于对照组(P<0.01);hMLH1mRNA及蛋白表达与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论放射可以诱导鼻咽癌细胞hMSH2表达;hMSH2对放射造成的DNA损伤可能有修复作用,这可能是临床上鼻咽癌放疗敏感性降低的原因之一。     

鼻咽癌组织照射前后细胞凋亡的临床意义初探

目的 采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧核苷酸切口末端标记（ＴＮＵＥＬ）法检测鼻咽癌患者不同剂量照射前后肿瘤细胞凋亡的变化,并初步探讨其潜在临床意义。方法 将接受根治性放射治疗的病理证实为鼻咽低分化鳞状细胞癌的２５例患者分为５个组。５个组分别在分割剂量１．９Ｇｙ／次照射１～５次后３～６ｈ活极取鼻咽癌肿瘤组织。采用ＴＵＮＥＬ免疫组织化学法检测鼻咽癌组织放射治疗前、后肿瘤细胞凋亡。结果 放射治疗前、后     

大肠正常粘膜、腺瘤和癌的凝集素受体表达及其价值

 本文应用DBA和PNA凝集素对大肠正常粘膜、腺瘤及癌进行免疫组化研究，结果显示：正常粘膜100%DBA呈强阳性反应，30%PNA呈弱阳性反应．大肠癌32.4%DBA呈弱阳性反应，76.5%PNA呈较强阳性反应．腺瘤凝集素受体表达介于前两者之间，并随腺瘤组织异型程度加重而越近似于大肠癌．本研究表明，DBA受体的丧失和PNA受体的表达为癌性粘液糖蛋白结构的特征性改变，有助于进一步了解大肠癌的生物学特性．检测腺瘤组织PNA受体表达可判断腺瘤癌变危险性，对大肠癌防治有一定价值．     

FLIP在非小细胞肺癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 研究FLIP在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达并观察其与细胞凋亡的关系。方法 采用免疫组化技术检测FLIP在48例NSCLC和16例肺良性疾病组织中的表达，并应用TUNEL技术检测48例NSCLC的凋亡情况。结果 肺癌组织中FLIP的表达率为83．33％(40／48)，明显高于肺良性病变组织(25.00％)(P＜0．01)。FLIP的表达水平与TNM分期及淋巴结转移有密切关系，但与肿瘤组织学分型、分化程度无明显关系。FLIP在肺癌组织中的表达水平与癌细胞凋亡指数(AI)末见明显相关性(r＝-0.211，P＞0.05)。结论 FLIP的过量表达在NSCLC的发生发展中起重要作用，但与细胞凋亡无明显关系。     

错配修复基因hMLH1和hMSH2在散发性大肠癌中的表达及其意义

目的 探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2在散发性大肠癌(SCC)组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化Max Vision二步法对63例SCC标本中的癌组织、距癌灶3 cm以外的癌旁组织、距癌灶10 cm以外的正常组织中hMLH1和hMSH2蛋白的表达进行检测.结果 hMLH1蛋白在63例正常大肠组织、癌旁组织和SCC组织中的阳性表达率分别为95.2%、85.7%和81.0%,hMLH1蛋白在SCC组织中的阳性表达率明显低于正常大肠组织(P＜0.05).hMSH2蛋白在63例正常大肠组织、癌旁组织和SCC组织中的阳性表达率分别为76.2%、66.7%和52.4%,hMSH2蛋白在SCC组织中的阳性表达率明显低于正常大肠组织(P＜0.01).hMLH1蛋白在＜60岁的SCC患者组织中的阳性表达率(100%)明显高于≥60岁的SCC患者组织(75.0%,P＜0.05),在有淋巴结转移的SCC组织中的阳性表达率(50.0%)明显低于无淋巴结转移的SCC组织(93.3%,P＜0.05).hMSH2蛋白在＜60岁的SCC患者组织中的阳性表达率(80.0%)明显高于≥60岁的SCC患者组织(43.8%,P＜0.05),在癌组织浸润至肠壁浆膜层SCC组织中的阳性表达率(61.5%)明显高于浸润至黏膜下层和肌层的SCC组织(37.5%,P＜0.05).SCC组织中hMLH1和hMSH2蛋白的表达呈正相关关系(r=0.254,P＜0.01).结论 hMLH1和hMSH2蛋白在SCC组织中的表达均有一定的缺失,并且与患者的年龄、淋巴结转移和癌组织浸润的范围有关.hMLH1和hMSH2基因可以作为临床预测和判断SCC发生和发展有用的实验室指标.     

错配修复基因hMSH6在胃癌中表达特点的研究

目的：了解错配修复基因hMSH6在胃癌中的表达特点。方法：用免疫组织化学SP法检测45例胃癌组织、36例癌旁黏膜和30例正常胃黏膜hMSH6蛋白的表达情况。结果：胃癌组、癌旁组与正常胃黏膜组hMSH6蛋白细胞核表达阳性率分别为24．44％（11／45）、13．89％（5／36）和53．33％（16／30）;细胞质表达阳性率分别为66．67％（30／45）、58．33％（21／36）和96．67％（29／30）;细胞核和细胞质表达阳性率胃癌组和癌旁组均显著低于正常胃黏膜组（P〈0．05）;而胃癌组与癌旁组hMSH6蛋白在细胞核及细胞质中表达差异均无显著性意义（P〉0．05）。胃癌组织中,hMSH6蛋白在细胞核中表达与患者性别、年龄,肿瘤分化程度及分期、淋巴结转移均无显著相关性（P〉0．05）,但在细胞质的表达与肿瘤分化程度及分期正相关（P〈0．05）,而与患者年龄、性别、淋巴结转移无显著相关性（P〉0．05）。结论：胃癌及癌旁组织均出现错配修复基因hMSH6表达下调,这可能将成为胃癌发生的预警信号。     

Population carrier frequency of hMSH2 and hMLH1 mutations

Knowledge of population carrier frequency for DNA mismatch repair (MMR) gene mutations would contribute to understanding the burden of cancer due to genetic susceptibility, but robust prevalence estimates are lacking. To estimate carrier frequency, we genotyped a cohort of relatives of mutation carriers and determined their colorectal cancer prevalence. Systematic Finnish and US data were combined with Scottish genotype and cancer prevalence data in a Bayesian calculation. The estimated carrier prevalence in the population aged 15-74 years is 1:3139 (95% Cl = 1:1247-1:7626) and these carriers are at high risk of colorectal and other cancers.     

结直肠癌组织中Golph3的表达与细胞凋亡的相关性

  目的  探讨Golph3在结直肠癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系。   方法  免疫组织化学方法检测62例结直肠癌组织中的Golph3、Caspase-3的表达,TUNEL法检测结直肠癌组织的凋亡指数,分析结直肠癌组织中的Golph3表达与临床病理因素、细胞凋亡的相关性。   结果   Golph3在结直肠癌组织中的表达率明显高于正常结直肠黏膜（P < 0.05）;低分化、浸润深度侵及浆膜外、淋巴结转移、Ⅲ期的结直肠癌组织中Golph3的表达率分别明显高于高中分化、浆膜内、无淋巴结转移者、Ⅰ~Ⅱ期结直肠癌组织的表达率（P均 < 0.05）,而Golph3的表达与年龄、性别、肿瘤位置、大体类型、肿瘤长度无关（P>0.05）。Golph3高表达的结直肠癌组织中Cas. pase-3阳性表达率及凋亡指数明显低于Golph3低表达的结直肠癌组织（P < 0.05）,相关分析显示结直肠癌组织中Golph3的表达与AI呈负相关（r=-0.320,P < 0.05）。   结论  结直肠癌组织中Golph3存在过表达,与细胞凋亡呈负相关。      

筛查结直肠癌DNA错配修复基因缺失的方法分析

目的:通过对筛查结直肠癌DNA错配修复(mismatch repair,MMR)基因缺失两种最常用的检测方法的分析,寻找更为经济有效的检测策略。方法:分析新疆医科大学第一附属医院2018年9月至2019年9月收治并行手术的结直肠癌患者的肿瘤组织223例,采用免疫组织化学法检测平台检测MLH1、MSH2、PMS2、MSH6的表达缺失情况,PCR-毛细管电泳法检测肿瘤微卫星不稳定(microstatellites instability,MSI)状态。结果:在223例结直肠癌中,27例(12.1%)MMR蛋白表达缺失(MMR deficiency,dMMR),196例(87.9%)MMR蛋白表达完整(MMR proficient,pMMR)。MLH1、MSH2、MSH6和PMS2的缺失率分别为9.0%(20/223)、1.8%(4/223)、2.7%(6/223)和9.4%(21/223)。包含PMS2和MSH6的2种抗体试验筛查dMMR结直肠癌的灵敏度和特异度与4种抗体试验(MLH1、MSH2、PMS2、MSH6)的灵敏度和特异度均相同。微卫星高度不稳定(MSI-high,MSI-H)2...     

Immune responses to DNA mismatch repair enzymes hMSH2 and hPMS1 in patients with pancreatic cancer, dermatomyositis and polymyositis

To identify tumor antigens useful for diagnosis and immunotherapy of patients with pancreatic ductal adenocarcinoma, we applied a SEREX approach with a cDNA library made from 5 pancreatic cancer cell lines and sera obtained from 8 patients with pancreatic cancer, and isolated total 32 genes, including 14 previously characterized genes and 18 genes with unknown functions. Among these isolated antigens, serum IgG antibodies for 2 isolated DNA mismatch repair enzymes, Homo sapiens mutS homolog 2 (hMSH2) and Homo sapiens postmeiotic segregation increased 1 (hPMS1), were detected in patients with pancreatic ductal adenocarcinoma and dermatomyositis (DM), and polymyositis (PM), but not in sera from healthy individuals. Immunohistochemical study demonstrated that hMSH2 and hPMS1 were over-expressed in pancreatic ductal adenocarcinoma compared to normal pancreatic ducts. These results suggested that hMSH2 and hPMS1 may be useful as CD4+ helper T cell antigens for immunotherapy of pancreatic cancer patients and that serum IgG antibodies may be useful for diagnosis of patients with pancreatic ductal adenocarcinoma and DM/PM.