山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的 了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义，探讨家猪与HFRS发病的关系。方法 以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标，采用反向间接血凝法(RPHA)，血凝抑制法(RPHI)，酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA)，间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果 家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体，脏器抗原阳性率为3.33％～5．00％。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67％、7.04％、2．51％和5.56％，血清抗体阳性率为1．96％，并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器，二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖．并经多途经排出体外。结论 家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。     

小鼠、家兔自然感染肾综合征出血热(HFRS)病毒的调查(简讯)

1983年4月～8月,山西医学院发生了一起由实验室大鼠作为传染源的HFRS爆发流行。为了解HFRS病毒在小鼠、家兔中的感染状况,我们用间接荧光免疫方法(IFAT)检查了42只小鼠各种脏器中的病毒抗原和血清抗体及18只家兔的HFRS血清抗体。结果,在42只小鼠血标本中,41只HFRS血清抗体阴性,1只未查。其中有15只小鼠查了心、肝、脾、肺、肾,27只查了肺,均未查到HFRS病毒抗原。在采集的18只家兔血标本中,其中日本大耳白4只、青紫蓝3只,黑优种3只,品种不详有8只,在品种不详     

山东战略要地肾综合征出血热宿主动物自然带毒与分离毒株抗原型的调查研究

目的：为摸清山东战略要地HFRS传染源及宿主动物自然带毒与地方毒株的抗原型，探讨病毒抗原型发病的关系。方法：从调查点收集动物组织标本，采用免疫荧光法(IFA)和细胞或乳鼠脑培养来分别检测组织HFRSV抗原和病毒分离与鉴定。结果：从8种动物肺中检出HFRSV抗原，其中大仓鼠、褐家鼠和黑线姬鼠带毒率较高，分别为8．15％、6．40％和6．19%。同时从鼠肺、早期病人血和尿等标本分离出6株病毒，抗原成份分析表明，有3株不含Ⅰ型病毒抗原成份，毒力较弱；3株为含Ⅰ型抗原成份的Ⅱ型毒株。结论：从病原学证实当地HFRS疫区呈多宿主性，鼠肺病毒抗原型与宿主种类相一致：分离毒株抗原成份及毒力有差异，检出含有Ⅰ型抗原成份的Ⅱ型病毒。     

肾病综合征出血热病毒分离的研究

用环状沉淀试验、ELISA及其阻断试验从2例典型脑型肾病综合征出血热(HFRS)病人脑脊液(CSF)中查到HFRS病毒相关抗原(HFRSV—AA),并用Vero—E6细胞从1例中分离到一株可稳定传代的病毒,用各种HFRS病毒免疫血清和单克隆抗体(McAb)对感染传代细胞中的HFRSV—AA进行IFA、ELISA、SPA协同凝集试验(Co—SPA)和反向间接胶乳     

广州市2009年肾综合征出血热监测分析

目的分析广州市肾综合征出血热(HFRS)的流行特征和规律,探讨防制对策。方法采用人间疫情监测、健康人群抗体水平监测、宿主动物监测方法,其中实验室用间接免疫荧光法检测血清特异性IgG抗体,直接免疫荧光法检测鼠肺汉坦病毒(HV)抗原。结果共报告HFRS71例,死亡1例,发病率为0.69/10万,病死率为1.41%;排查病例抗体阳性率为16.14%(188/1165),健康人群抗体阳性率为0.50%(2/400);鼠密度为4.60%(361/7856),鼠肺抗原阳性率为8.31%(30/361),鼠血清抗体阳性率为7.43%(26/350),优势鼠种为褐家鼠。结论广州市HFRS疫情形势较为平稳,但仍然存在病例数上升的压力,应加强疫情监测,落实防鼠灭鼠为主的综合性预防控制措施。     

单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病人血清IgM和IgG抗体的研究

肾综合征出血热(HFRS)早期临床症状不典型,因此在病人血清中检出特异性抗体,特别是IgM抗体,对辅助临床早期诊断和流行病学监测均有重要意义。间接免疫荧光法(IFAT )和免疫酶染色法,虽已被广泛用于上述目的,但尚存在需用荧光显微镜或判定结果有一定主观性等不足之处。血凝抑制试验测出的则主要是IgG抗体。本文采用抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)和粗纯抗原建立了一种ELISA间接夹心法,以检测HFRS病人血清中IgM和lgG抗体,并与IFAT进行了比较。     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原的实验研究

间接荧光抗体技术(IFAT)已广泛用于肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原的检测,其不足之处是需用荧光显微镜,有一定主观性及不能检测可溶性抗原。本文建立了以同样的抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)作为包被和第二抗体,以酶标葡萄球菌A蛋白(SpA)作指示抗体的双McAb ELISA间接夹心法,初步用于感染细胞培养上清及组织标本中HFRS病毒抗原的检测,获得较满意结果。     

北京地区肾综合征出血热疫源地调查与病毒分离

1982～1986年在北京地区8个监测点先后检测1905只鼠。结果仅于1985,1986两年从通县、朝阳、某机场、顺义4个点的鼠类中检出6份黑线姬鼠鼠肺肾综合征出血热(HFRS)抗原、带毒率为0.9％～1.9％;检出抗体25份、阳性率为0.6％～11.2％;并以2份抗原阳性鼠肺接种Vero-E_6细胞首次分离出2株HFRS病毒。确定了北京地区HFRS的主要传染源为本地黑线姬鼠,并非由外地传入。从而证实北京地区HFRS自然疫源地的存在。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。     

肾综合征出血热病毒经消化道传播的实验研究

将实验动物Wistar大鼠分为四组,用HFRS病毒AR90162株感染。A组用毒株悬液灌胃,B组让其自然食入含病毒的毒饵,C组经破皮感染,D组为“空白”对照。结果,A、B、C 3组均于感染后10d从尾血中查到特异性抗体,3组抗体累积阳性率分别为4/7、4/9.5、4/9.5;肺脏特异性抗原检出率3组分别为2/6,2/9,2/9。脏器抗原定位以肺为最多,其次为肝、脑,胃中没有查到抗原,肠道中仅A组1例;各组粪尿抗原均于感染后10～15d查到,但阳性率最高只有2/10。我们还对Wistar大鼠胃排空时间及胃内容物平均pH值进行了检测,结果胃排空时间平均为6h,胃内容物平均pH值为3.2±2.1。综合分析实验结果,我们认为消化道传播是可以实现的,但有条件性,如毒株的毒力、胃内容物pH值、饮食因素、外环境条件等均可影响经此途径的传播。     

Efficacy of inactivated vaccine containing cyto-hemagglutinin against epidemic hemorrhagic fever in rabbits

Using the Z-10 strain of epidemic hemorrhagic fever virus (EHFV) as seed, and the primary cell of Meriones unguiculatus kidney tissue as incubation cell, a propiolactone inactivated epidemic hemorrhagic fever (EHF) vaccine was prepared, according to a similar procedure required for the production of biological products such as the Japanese B encephalitis vaccine. Besides the EHFV antigen detected by ELISA or reversed passive hemagglutination test (RPHA) as were used for the formalin inactivated vaccine, higher titres (1:128-1:1024) of EHFV hemagglutinin antigen was also detected in this EHFV vaccine. Immunization with twice intramuscular injection of this vaccine produced high titred (1:20-1:160) neutralizing antibody and low titred (1:10-1:20) hemagglutination antibody, in addition to the immunofluorescence (IF) and reversed passive hemagglutination inhibition (RPHI) antibodies. These results indicated an apparent difference in the immunogenicity between the beta-propiolactone and formalin inactivated EHF vaccines. With the approval of the Ministry of Health, human test is now underway in this laboratory.     

云南巴尔通体感染的血清学调查

目的了解巴尔通体（Bartonella）在云南人群中的感染情况。方法采用间接免疫荧光抗体测定法（indirect immunofluorescence test,IIFT）-滴定平板技术对379份不同地区及人群血清的汉赛巴尔通体（B henselae）及五日热巴尔通体（B quintana）的IgG抗体进行检测。结果在西双版纳等7州市检查抗汉赛巴尔通体（B henselae）抗体的血清共计281份,其中：不明原因发热病人血清190份,查出阳性标本35份,阳性率为18.42%;健康人群血清91份,查出阳性标本13份,阳性率为14.28%。在大理等3个州市检查抗五日热巴尔通体（B quintana）抗体的血清98份,查出阳性标本5份,阳性率为5.10%。结论巴尔通体感染存在于人群中,提示巴尔通体感染在云南省属多发病的疾病之一,一些不明原因发热病人及一些临床疑难杂症很可能由巴尔通体感染所致。今后有必要引起卫生部门的关注。     

肾综合征出血热尸检组织中HFRSV抗原分布的研究

应用双桥 PAP 法和 ABC 法对12例肾综合征出血热尸检组织(1962～1986年)的 HFRSV抗原检测发现病毒抗原广泛分布于各组织中,所检测过的大脑、肾、心、肺、肝、脾、胰、肾上腺等主要脏器大部分病例为明显阳性,少数病例还保存有胃、支气管、小脑、脑垂体、甲状腺、淋巴结和扁桃体,经检测部分病例也为阳性。各组织中的阳性细胞主要为小血管和毛细血管内皮细胞,肾小管上皮细胞、胰腺、脑垂体、肾上腺和甲状腺上皮细胞部分病例明显阳性,另外,各组织中病毒抗原量与病程发展(病期)有一定的关系。     

川崎病患儿多器官损害及其冠状动脉瘤的发生

目的 探讨川崎病(Kawasaki disease,KD)多器官损害和各脏器受累时冠状动脉瘤(coronary aneurysms,CAA)发生的情况.方法 对1997年6月至2006年12月住院的92例KD患儿,进行3大常规、肝功能、心肌酶谱、心电图、X线胸片及超声心动图(UCG)等检测,结合临床表现确定受累器官及CAA的发生.结果 92例KD患儿各器官受累情况:心脏66例(71.7%)、肺脏34例(37.0%)、肝脏32例(34.8%)、肾脏17例(18.5%)、胃肠道14例(15.2%)、脑11例(12.0%)、关节9例(9.8%)、脾脏2例(2.2%)、胆囊1例(1.1%);CAA18例(19.6%),其中巨大CAA3例(3.3%).同时两个器官受累率为40.2%(37/92)、3个器官受累率为26.1%(24/92)、4个及以上器官受累率为8.7%(8/92).CAA在各器官受累时的发生率:脑45.5%(5/11)、关节44.4%(4/9)、心包积液41.7%(5/12)、肺脏23.5%(8/34)、肝脏18.8%(6/32)、肾脏17.6%(3/17)、胃肠道14.3(2/14).结论 KD时,各器官均可受累,心脏受累率最高,其他依次为肺、肝、肾、胃肠道、脑、关节等,并可同时并发多个器官受累,2个及2个以上器官同时受累率为75.0%.CAA在各器官受累时的发生率不同,本组资料显示KD合并脑、关节病变及心包积液时CAA的发生率明显升高.     

肾综合征出血热病毒血凝素单克隆抗体的建立与鉴定

用HFRSV血凝素免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,共获得56株分泌抗HFRSV McAb的杂交瘤细胞系。对其中10株细胞系应用血凝抑制试验证明有9株为特异性分泌抗HFRSV血凝素McAb的杂交瘤细胞系。应用微量细胞培养中和试验证明6株具有中和活性。z株(3D_8和3G_1)具有高滴度的血凝抑制活性和中和活性。10株HFRSV血凝素McAb均能与从不同疫区,不同宿主分离的HFRSV反应,说明HFRSV血凝素具有群共同性。     

Studies on the antigenicity of an inactivated, aluminum hydroxide adjuvant equine influenza vaccine.

An inactivated, aluminum hydroxide adjuvant equine influenza vaccine was tested in horses and guinea pigs to determine the levels of antigen that would elicit maximum serological responses. Vaccine containing serial twofold increments of A/Equi-1/Prague and A/Equi-2/Miami strains of equine influenza virus was administered to random groupings of both types of test animals. The hemagglutination inhibition antibody response for each group was then measured. Results in horses and guinea pigs were compared to determine if the equine serological values could be related to a potency test in laboratory animals. The highest mean hemagglutination inhibition antibody response in horses occurred in groups vaccinated, respectively, with 128 or 256 hemagglutination units of A/Equi-1 and 512 or 1024 hemagglutination units of A/Equi-2 antigen. Groups vaccinated with further two- or fourfold increases in these antigens had mean hemagglutination inhibition titers that were somewhat lower than the maximum levels. When graded doses of vaccine were given to guinea pigs, their hemagglutination inhibition antibody titers reached a plateau of maximum values, similar to the serological response in vaccinated horses. Test horses remained clinically free from signs of equine influenza during the year following vaccination and no untoward post-vaccination reactions were observed.     

Antibody to hepatitis A antigen in institutionalized mentally retarded patients.

Institutionalized patients with Down syndrome and matched controls with other causes of mental retardation were tested by immune adherence hemagglutination for the presence of antibody to hepatitis A antigen (anti-HA). Altogether 75.1% (175 of 233) exhibited presence of anti-HA, with no differences by sex or age. Patients reactive for hepatitis B surface antigen (HBsAg) or its antibody (anti-HBs) were reactive for anti-HA significantly more frequently than those with a negative reaction for these markers. In contrast to serologic markers of hepatitis type B, prevalence of anti-HA does not depend on the cause of mental retardation or on the age at primary infection. The rate of anti-HA positivity was found to be closely correlated with duration of institutionalization. The study confirmed that many closed institutions for the mentally retarded are hyperendemic for hepatitis type A and that formation of anti-HA is not greatly affected by either immune deficiency or immune immaturity.     

一株抗独特型人单抗轻链可变区基因的克隆及序列测定

目的：探索抗独特型抗体模拟抗原的分子机理。方法：利用反转录－ＰＣＲ方法，从分泌肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）内影像型抗独特型人单抗的杂交瘤细胞系（Ｃ８），成功地克隆了抗ＨＦＲＳＶ Ｉｄ人单抗轻链可变区基因，并将此基因重组入Ｍ１３噬菌体ＤＮＡ中，测定了此轻链可变区基因全序列。结果：经计算机分析，基因全长共３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸，氨基酸序比较性分析发现所得的该单抗ＣＤＲ２区与ＨＦＲＳＶＧ２蛋     

南京、广州、齐齐哈尔铁路地区儿童青少年肺炎支原体抗体分布特点的研究

1990年3～4月,我们用 PHA 法对广州、南京和齐齐哈尔三个铁路地区《4724名健康儿童进行了 MP 抗体检测。抗体平均阳性率为13。87%,GMT 为1:4.13。抗体阳性率以南京最高(20.31%),齐齐哈尔次之(14.32%),广州最低(4.58%)。提示三个地区均存在不同程度的 MP 感染。