麻黄、五味子影响肺纤维化大鼠血管新生的差异性研究

目的 探讨麻黄、五味子对肺纤维化大鼠血管新生影响差异的作用机制.方法 选择SPF级Wistar雄性大鼠90只,随机设立假手术组、模型组、氢化可的松组、麻黄组、五味子组以及麻黄五味子组.采用博莱霉素A5(7 mg/kg)气管滴入方法建立肺纤维化模型,假手术组灌胃生理盐水(6 mL/kg)28 d;中药水煎液浓缩至每毫升含原药材1 g,麻黄组、五味子组分别灌胃麻黄(5g/kg)、五味子(2.5g/kg)水煎液28 d,麻黄五味子组灌胃麻黄水煎液(5g/kg)7 d后灌胃五味子水煎液(2.5g/kg)至28 d,氢化可地松组肌注氢化可地松20 mg/kg 28 d.于7、28 d放射免疫法检测各组大鼠内皮素-1(ET-1)、6-酮-前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)含量变化,免疫组化法观察肺组织微血管密度.结果 7 d时,模型组血浆ET-1含量升高,较假手术组差异有统计学意义(P＜O.05),6-Ke-to-PGF1a含量较假手术组有所升高,但差异无统计学意义;28 d时,麻黄五味子组与氢化可的松组血浆ET-1含量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05),各治疗组6-Keto-PGF1a含量较7 d时均有所升高.模型组肺微血管密度显著多于假手术组及各治疗组(P＜0.05),麻黄组对肺小动脉血管新生的抑制高于五味子组、麻黄五味子组.结论 麻黄对改善肺纤维化大鼠肺系数有积极作用,麻黄、五味子联合应用对肺纤维化的肺部小动脉损伤有抑制作用.     

麻黄、五味子联用地塞米松对肺纤维化大鼠血管新生促进因子与抑制因子的影响

目的探讨麻黄、五味子联用地塞米松(DXM)对肺纤维化大鼠血管新生促进因子与抑制因子的影响。方法将106只SPF级雄性Wistar大鼠随机分成假手术组、模型组、麻黄组、五味子组、麻黄+DXM组、五味子+DXM组以及DXM组。采用气管滴入博莱霉素(7 mg/kg)法复制肺纤维化模型,并分别给予相应的药物干预。各组大鼠分别于造模后第7天、第28天腹主动脉取血处死,肺组织灌洗后HE染色观察病理形态变化,ELISA法检测血清中缺氧诱发因子(HIF)-1α、血小板衍生生长因子(PDGF)、色素上皮源性因子(PEDF)和内皮抑素endostatin的表达水平。结果模型组HIF-1α、PDGF、PEDF和endostatin的表达升高,与假手术组比较具有显著性差异(P0.01);第28天时HIF-1α、PDGF含量较第7天时升高,PEDF和endostatin含量较第7天时降低。与模型组比较,麻黄组、五味子组HIF-1α、PDGF表达降低,PEDF、endostatin表达升高(P0.05);麻黄组第28天与第7天比较,HIF-1α、PDGF表达升高,PEDF、endostatin表达降低。五味子组与麻黄组情况相反。第7天、第28天,麻黄+DXM组、五味子+DXM组与模型组比较,HIF-1α、PDGF表达降低,PEDF、endostatin表达升高(P0.05);第7天、第28天比较表达无显著变化。与DXM组比较,五味子+DXM组HIF-1α表达升高,PEDF表达降低,具有显著性差异(P0.05)。结论肺纤维化进程中血管新生调控因子失去平衡,麻黄、五味子可抑制HIF-1α、PDGF的表达,促进PEDF、endostatin表达,与地塞米松联用后,对肺纤维化的不同病理阶段选择性减弱。     

γ干扰素对实验性肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化的影响

目的探讨γ干扰素(IFN-γ)在博莱霉素诱导的实验性大鼠肺纤维化治疗中的作用及其机制。方法雄性健康Wistar大鼠80只,随机分为正常对照组、实验模型组、氢化可的松组及IFN-γ组,在给予实验药物后第3、7、14及28 d,每组取5只大鼠麻醉后处死,左肺行支气管肺泡灌洗术收集支气管肺泡灌洗液(BALF),测定其IFN-γ及转化生长因子β1(TGF-β1)浓度;取右肺中叶行石蜡包埋,观察肺泡炎及肺纤维化程度,测定肺组织羟脯氨酸含量。结果BALF中IFN-γ浓度在实验模型组于第3和7 d明显增高(P均<0.05),在IFN-γ组第3、7、14及28 d均较实验模型组明显增高(P均<0.05),并于第3、7及14 d高于氢化可的松组(P均<0.05);BALF中TGF-β1浓度在实验模型组第3、71、4及28 d均较正常对照组明显增高(P均<0.001),在IFN-γ组于第3 d明显高于实验模型组,但于第71、4及28 d与实验模型组相似(P>0.05),于第3、7及14 d明显高于氢化可的松组(P均<0.01)。IFN-γ组肺泡炎、肺组织纤维化评分及羟脯氨酸含量均与实验模型组相近。结论早期应用IFN-γ肺组织IFN-γ含量增加,但并不能抑制肺组织TGF-β1和羟脯氨酸的产生,也不能预防和阻止实验性大鼠肺泡炎和肺纤维化的形成。     

Fas/FasL与氧自由基在肺纤维化大鼠细胞凋亡中的作用研究

目的 探讨肺纤维化大鼠肺组织中Fas/FasL介导的细胞凋亡与氧自由基的关系。方法 将32只大鼠分为3组：对照组（16只）、模型7d组（8只）及模型28d组（8只）,测定博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺组织的细胞凋亡率、Fas/FasL表达和丙二醛（MDA）的含量。结果 模型7d组肺组织细胞凋亡增加,Fas/FasL表达增高（P〈0.01）,28d组细胞凋亡、Fas/FasL表达升高更为明显;模型7d组肺组织中MDA含量明显增加（P〈0.01）,28d组MDA含量下降但仍高于对照组（P〈0.05）。结论 肺纤维化大鼠细胞凋亡和氧自由基增加;Fas/FasL系统与氧自由基在大鼠肺纤维化中起着重要作用。     

不同时间点雾化吸入STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的：探讨雾化吸入信号转导子与转录活化子1（STAT1）反义寡核苷酸（ASON）干预肺纤维化大鼠的最佳时机。方法：清洁级健康雌性Wistar大鼠25只,随机分为生理盐水（NS）组、博来霉素（BLM）组和ASON 0 d组、ASON 7 d组、ASON14d组各5只。BLM组、ASON 0 d组、ASON 7 d组和ASON 14 d组大鼠气管内灌注BLM,NS组大鼠气管内灌注NS。大鼠气管内灌注BLM或NS后第0、2、4、6 d,NS组和BLM组大鼠雾化吸入NS,ASON 0 d组大鼠雾化吸入STAT1 ASON,ASON 7天组大鼠于气管内灌注BLM后第7、9、11、13d雾化吸入STAT1 ASON,ASON 14 d组于灌注BLM后第14、16、18、20d雾化吸入STAT1 ASON,各组均于气管内灌注BLM或NS后28d处死大鼠。左肺组织HE染色观察肺泡炎程度,Masson染色观察肺纤维化程度,免疫组织化学SP法测定肺组织中PAI-1、TGF-β1的表达。右肺测定肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达及羟脯氨酸含量。结果：①STAT1 ASON雾化吸入后,ASON 0 d组与BLM组、ASON 7 d组、ASON 14d组比较,肺泡炎和肺纤维化程度均明显减轻（P〈0.05）。②ASON 0d组与BLM组比较,肺组织转移生长因子β1（TGF-β1）表达减少（P〈0.05）。ASON 14d组与ASON 0d组比较,肺组织TGF-β1表达增多（P〈0.05）。③与BLM组比较,ASON 0d组和ASON 7d组肺组织PAI-1表达降低（P〈0.05）;与ASON 0d组和ASON 7d组比较,ASON 14d组肺组织PAI-1表达增加（P〈0.05）。④与BLM组比较,ASON 0d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低,ASON 7d组肺组织Ⅲ型胶原mRNA表达水平降低（P〈0.05）;与ASON 0d比较,A-SON 7d组和ASON 14d组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达水平增高（P〈0.05）。⑤与BLM组比较,ASON 0d组、ASON 7d组羟脯氨酸含量均减少（P〈0.05）;与ASON 0d组比较,ASON 7d组和ASON 14d组羟脯氨酸含量增高（P〈0.05）;与ASON 7d组比较,ASON 14d组羟脯氨酸含量增高（P〈0.05）。结论：不同时间点雾化吸入STAT1 ASON对肺纤维化的干预作用是不同的,0d、7d可以减轻肺纤维化,其中0d雾化吸入是治疗的最佳时间。     

补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响

目的观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的影响。方法采用博来霉素诱导建立实验性肺纤维化大鼠模型,以氢化可的松琥珀酸钠为对照,观察补肾通络方对肺纤维化大鼠肺组织病理形态及血清羟脯氨酸(HYP)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)的影响。结果同正常组比较,模型组大鼠肺组织病理纤维化显著,炎性反应明显,同时伴有血清HYP,HA,LN升高(P0.05,P0.01)。同模型组相比,各治疗组肺组织病理形态明显改善,补肾通络高剂量组大鼠血清HYP,HA,LN含量明显下降(P0.05);补肾通络低剂量组LN含量明显下降(P0.01),氢化可的松琥铂酸钠对照组HYP、HA、LN含量明显下降(P0.05,P0.01)。结论补肾通络方可改善实验性肺纤维化大鼠肺组织病理形态,抑制肺纤维化。     

百草枯致大鼠肺纤维化肺组织内质网相关凋亡基因Caspase-12的表达

目的 观察内质网相关凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12（ Caspase-12） 在百草枯诱导肺纤维化模型大鼠肺组织中的表达。方法 30 只Spragne-Dawley（ SD） 大鼠随机分为对照组、14 d模型组和28 d 模型组。采用百草枯灌胃法复制肺纤维化模型。逆转录-聚合酶链反应（ RT-PCR）检测肺内Caspase-12 mRNA 表达, 免疫组化检测其蛋白表达。HE 和Masson 染色判断肺组织肺泡炎及肺纤维化程度。结果 HE 和Masson 染色结果证实成功复制肺纤维化模型。模型组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度较对照组严重（ P 〈0. 01） 。与对照组比较, Caspase-12 表达在14 d 模型组中明显升高（ P 〈0. 01） , 在28 d 模型组中更高（ P 〈 0. 01） 。结论 百草枯中毒大鼠肺内质网相关凋亡基因Caspase-12 表达增高, 提示内质网应激在百草枯中毒引起的肺纤维化中发挥重要作用。     

消水肿膏对肾阳虚大鼠肾功能改善的研究

目的 观察消水肿膏对氢化可的松致肾阳虚大鼠肾功能改善的作用。方法 将大鼠随机分为4组,正常组,模型组,消水肿膏高、低剂量组。正常组大鼠im生理盐水1 mL/(kg·d),其余大鼠均im氢化可的松25 mg/(kg·d),给药体积1 mL/(kg·d),连续8 d。消水肿膏高、低剂量组分别连续ig消水肿膏42、21 g生药/kg,2次/d,连续12 d,正常组与模型组大鼠ig相同体积纯净水。观察各组大鼠体质量变化;末次给药1 h后,用4.5%戊巴比妥钠麻醉大鼠,经腹主动脉取血,测定血清醛固酮、肌酐、尿素;取尿液测定尿蛋白、尿Na+、K+浓度;取肾脏、脾脏称量质量。结果 给药12 d,消水肿膏高、低剂量组大鼠体质量较模型组有增加趋势,但未见明显统计学差异（P＞0.05）。消水肿膏高剂量组大鼠肾脏与脾脏质量均明显高于模型组（P＜0.05）,血清肌酐水平显著低于模型组（P＜0.05）。消水肿膏高剂量对尿蛋白、尿K+的影响与模型组比较无显著差异（P＞0.05）,有增加尿Na+排泄量的趋势。结论 消水肿膏能够对抗氢化可的松所致的肾阳虚大鼠肾脏、脾脏质量减轻,降低其血清肌酐,可增加尿Na＋的排泄量,对肾阳虚大鼠的肾功能具有明显改善作用。     

NF-κB上调神经病理性疼痛大鼠脊髓CX3CR1表达

目的：观察鞘内注射核转录因子-κB（NF-κB）抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸（PDTC）对坐骨神经慢性挤压伤（CCI）大鼠痛阈和脊髓CX3CR1受体表达的影响.方法：60只成年雄性SD大鼠,体质量250～300g,鞘内置管成功后,随机分5组（n=12）：假手术＋生理盐水（sham组）、CCI＋生理盐水（CCI组）、假手术＋PDTC1000pmol/d（PDTC＋sham组）、CCI＋PDTC100pmol/d（PDTC＋CCI组1）、CCI＋PDTC1000pmol/d（PDTC＋CCI组2）.鞘内置管5d后开始鞘内输注生理盐水或不同剂量的PDTC,鞘内注射1d后建立大鼠CCI神经病理性疼痛模型或者假手术模型,分别于术前及术后不同时点测定5组大鼠的痛敏值,并在鞘内注射4d后取脊髓腰膨大部进行Western Blot实验检测CX3CR1的表达.结果：CCI组与sham组比较大鼠术后各时点痛敏阈值明显下降,并在术后第3日降至最低点（P〈0.05）,脊髓CX3CR1的表达明显升高（P〈0.01）.PDTC＋CCI组与CCI组比较,术后各时点大鼠痛敏阈值增高（P〈0.05）,脊髓CX3CR1的表达下降（P〈0.01）.结论：鞘内给予PDTC可减轻CCI大鼠的病理性疼痛,并抑制脊髓CX3CR1的表达.活化的NF-κB可能通过上调脊髓CX3CR1表达而参与了神经病理性疼痛的发生.     

红豆杉多糖对免疫功能低下小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨红豆杉多糖增强免疫低下小鼠免疫功能的机制。方法将48只昆明小鼠按随机数字表法分为正常对照组,氢化可的松模型组,红豆杉多糖低、中、高剂量组及猴头菇多糖阳性对照组,每组8只。除正常对照组外,其余各组小鼠皮下注射氢化可的松0.2mg/kg,隔天1次,共14d,制备小鼠免疫功能低下模型。正常对照组和氢化可的松模型组予0.9%氯化钠溶液10ml/kg灌胃,红豆杉多糖低、中、高剂量组分别予等量不同浓度10、20、40mg/ml红豆杉多糖溶液灌胃,猴头菇多糖阳性对照组予等量浓度为1.1mg/ml猴头菇多糖溶液灌胃,均1次/d,连续14d。流式细胞术检测小鼠血CD4+、CD8+细胞百分比,ELIAS法检测血清IL-4水平,测量小鼠胸腺指数。结果与正常对照组比较,氢化可的松模型组CD4+、CD8+细胞百分比均明显降低（P＜0.01）,红豆杉多糖低、中、高剂量组与氢化可的松模型组对比,CD4+、CD8+细胞百分比均有所增加（均P＜0.05）,其中红豆杉多糖中剂量组能降低CD4+/CD8+比值（P＜0.05）。与正常对照组比较,氢化可的松模型组血清IL-4水平明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;红豆杉多糖低、中、高剂量组IL-4水平均高于氢化可的松模型组（P＜0.05或0.01）。氢化可的松模型组与正常对照组比较,胸腺指数明显降低（P＜0.01）。红豆杉多糖低、中、高剂量组及猴头菇多糖阳性对照组与氢化可的松模型组比较,胸腺指数均有所增加（P＜0.05）,其中红豆杉多糖中剂量组及猴头菇多糖阳性对照组均明显增高（P＜0.01）。结论红豆杉多糖增强细胞免疫的机制它可能主要通过调节细胞免疫来增强免疫低下小鼠的免疫功能。     

Effects of Mahuang (Herba Ephedra Sinica) and Wuweizi (Fructus Schisandrae Chinensis) medicated serum on chemotactic migration of alveolar macrophages and inters regions macrophages in rats

Objective

To observe the effects of serum containing Mahuang (Herba Ephedra Sinica) or Wuweizi (Fructus Schisandrae Chinensis) on the migration of alveolar macrophages (AM) and interstitial macrophages (IM) from normal rats, and to analyze and compare the mechanisms leading to cell migration differences.

高效液相色谱-电喷雾质谱联用分析红参与五味子配伍机制

目的研究红参与五味子配伍过程中人参皂苷类化合物的变化机制。方法采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术对红参与五味子5种配伍比例水煎液中人参皂苷的变化进行了研究。结果在五味子量较少的条件下,红参与五味子水煎液中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rb2、Rd发生水解。随着五味子量的增加,人参皂苷Ro的量发生减少,而人参微量次级皂苷F2的量显著增加。结论红参与五味子配伍后产生的特殊药效可能与两者配伍过程中人参皂苷F2的量显著增加有关。     

论小青龙汤之五味子

目的：阐述五味子的功效在小青龙汤中的全面应用。方法：查阅方剂学相关知识及相关文献,并结合现代药理研究。结果 ：五味子在小青龙汤中发挥多方面功效。结论：小青龙汤中之所以用五味子,不单单是因为其具有收敛作用,它的补气生津、祛痰止咳及宁心安神及补肾等作用也充分发挥。     

调补肺肾法治疗特发性肺间质纤维化的临床研究

【目的】观察调补肺肾法治疗特发性肺间质纤维化(IPF)的临床疗效。【方法】将42例特发性肺间质纤维化患者随机分为治疗组和对照组各21例,治疗组采用调补肺肾方(由补骨脂、山萸肉、五味子、丹参、紫苏子、黄精、淮山、浙贝母、枇杷叶、炙麻黄等组成)治疗,对照组采用强的松治疗。2组均以3个月为1个疗程。观察2组治疗后总体临床疗效、肺功能[肺总量(TLC)、肺活量(VC)、肺一氧化碳弥散量(DLCO)]及动脉血氧分压(PaO2)的变化。【结果】总有效率治疗组为66.7%,对照组为47.6%,2组比较,差异有显著性意义(P0.05)。治疗后2组患者的TLC、VC、DLCO、PaO2水平均有明显改善(与治疗前比较,P0.05),但2组间比较差异无显著性意义(P0.05)。【结论】调补肺肾法既可改善IPF的症状,又可改善患者肺功能,从而进一步控制IPF的进展,提高患者生活质量,延长患者生存时间。     

山东省抽验五味子药材质量分析

目的 :分析山东省抽验的42批五味子的质量,对其质量标准的提高提供合理建议。方法 :从性状、显微鉴别、检查、浸出物、含量测定、染色补充检验等方面进行检验。结果:42批五味子中1批为抢青品种,其总灰分、浸出物、含量测定不合格;2批水分超标,2批酸性红73染色;不合格率11.9%。结论:现行补充检验方法有其局限性,在检验基础上提出了全面、合理化建议,以期提高质量标准。     

补骨脂对肥胖大鼠体重、肿瘤坏死因子-α和瘦素的影响

目的：观察补骨脂水煎剂对去卵巢肥胖大鼠体重、肿瘤坏死因子-α和瘦素的影响。方法：将SD雌性成年大鼠随机分为假手术组、手术组、补骨脂组,手术组、补骨脂组均行双侧卵巢切除术制备去卵巢肥胖模型,术后55 d经股动脉取血并测定雌激素、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α和瘦素水平。结果：55 d后处死大鼠,手术组的体重、摄食量、肿瘤坏死因子-α水平和瘦素水平均高于假手术组（P〈0.05）,补骨脂组体重、摄食量、肿瘤坏死因子-α水平和瘦素水平均低于手术组（P〈0.01）,手术组和补骨脂组雌激素水平均低于假手术组（P〈0.01）。结论：补骨脂水煎剂能够降低瘦素水平和肿瘤坏死因子-α水平,抑制摄食,降低去卵巢肥胖大鼠的体重。     

三种补肾中药有效成分对皮质酮致骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞基因表达谱的作用

目的：观察3种补肾中药淫羊藿、补骨脂和女贞子各自的有效成分淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸对皮质酮大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrowstromal cell,BMSC）的调控作用。方法：50只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、模型组、淫羊藿苷组、补骨脂素组、齐墩果酸组（后3组合称治疗组）。模型组和治疗组予皮质酮皮下注射,每日1次,连续14d。正常对照组予等剂量橄榄油皮下注射。治疗组皮质酮注射前5d开始按20mg/kg给予对应药物每日1次灌胃,连续19d。分别于造模第1、4、7、11和14天称量体质量,大鼠处死后取第4腰椎进行Micro-CT扫描,评价骨量改变情况。采用全骨髓贴壁培养法培养原代BMSC,于取材后第7天干细胞基因芯片技术检测mRNA表达。结果：造模和治疗后各组大鼠体质量没有发生明显变化。Micro-CT显示,皮质酮注射14d后,模型组与正常对照组之间,治疗组与模型组之间腰椎骨形态计量学参数未出现显著变化。干细胞基因表达谱显示在皮质酮改变的基因中,淫羊藿苷、补骨脂素和齐墩果酸分别可逆转11、12和15种基因。3个有效成分共同作用的基因有5种,涉及成骨分化、细胞周期调节、细胞代谢和Notch信号通路。结论：补肾中药可能从BMSC周期调节和细胞代谢等方面发挥促进BMSC成骨分化的作用,最终实现治疗骨质疏松的疗效,但其确切的机制还有待深入研究。     

基于国家专利数据库中药复方治疗肺心病用药规律研究

目的：基于数据挖掘技术,挖掘国家专利数据库中治疗肺心病的中药复方,探究其用药规律,为临床治疗肺心病提供依据。方法：检索国家知识产权局收录的中药复方专利治疗肺心病数据,将符合筛选标准的专利复方录入Excel 2021 建立数据库,统计涉及中药性味的归经。采用IBM SPSS Modeler 18.0 进行高频中药关联规则分析。利用IBM SPSS Statistic 23.0 软件进行聚类分析、因子分析。结果：纳入中药复方专利数据80 条,共涉及中药244 味,累计使用939 次。高频中药药性以温、寒为主;药味多见苦、辛;以肝经、心经最常见。支持度较高的关联规则有“五味子- 人参”、“五味子- 麦冬”、“甘草- 川芎”等;核心药物为甘草,五味子,当归等。聚类分析得到6 类有潜在配伍关系的中药;因子分析提取11 个公因子。结论：治疗肺心病应多选甘草、五味子、黄芪、当归、苦杏仁等补虚收涩药、活血化瘀药、化痰止咳平喘药等组方,坚持从痰瘀同治,气血共调以提高临床疗效。