新疆维族胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白的表达

目的研究新疆维族胆囊胆固醇结石患者与汉族胆固醇结石患者、维族非结石患者肝组织SCP2的表达情况和血脂变化。方法应用Western blot技术,研究新疆维族胆囊胆固醇结石患者、汉族胆固醇结石结石患者和维族非结石患者各20例肝组织SCP2的蛋白表达水平差异;并采用生物化学技术检测其血脂改变。结果维族与汉族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白表达水平无显著差异,维族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白表达水平较维族非结石组升高,差异有显著性;各组间血脂无显著性差别。结论新疆维族胆囊胆固醇结石患者肝组织SCP2蛋白水平升高,SCP2表达上调可能是胆囊胆固醇结石形成的重要原因。     

消炎痛、动力散预防家兔胆囊结石形成的实验研究

目的 :探讨消炎痛、动力散预防胆囊结石形成机制。方法 :以高胆固醇饲料致家兔胆囊结石动物模型为基础 ,选用家兔 47只随机分为 4组 :(1)对照组 (n =13) :给予标准家兔饲料 ;(2 )高胆固醇组 (n =14 ) :给予含1 2 %胆固醇的高胆固醇饲料 ;(3)高胆固醇 消炎痛组 (n =10 ) :给予高胆固醇饲料加消炎痛 ;(4)高胆固醇 动力散组 (n =10 ) :给予高胆固醇饲料加能促进胆囊收缩的动力散。饲养 4周后检测成石情况、餐后胆囊排空率、胆囊阻力胆汁中胆固醇和粘蛋白、胆囊管病理组织学等指标。结果 :正常对照组 13只中无 1只形成结石 ,高胆固醇组14只中 12只形成结石 ,高胆固醇 消炎痛组 10只中 4只形成结石 ,高胆固醇 动力散组 10只中 2只形成结石。 1组与 2组 (P <0 0 1) ,2组与 3组、4组比较成石率有显著差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。高胆固醇组胆汁中胆固醇和粘蛋白浓度、胆囊管阻力均较正常对照组显著增高 ,胆囊排空率显著下降 ;高胆固醇 消炎痛组胆汁粘蛋白浓度、胆囊管阻力均较高胆固醇组显著降低 ,胆囊排空率无显著改变 ;高胆固醇 动力散组胆汁中粘蛋白含量均较高胆固醇组显著下降 ,胆囊管阻力显著降低 ,胆囊排空率显著增加 ;后 3组间胆汁中胆固醇浓度差异无显著性。结论 :消炎痛能减少胆汁粘蛋白含量     

肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义，采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因(lung resistance protein，LRP)及多药耐药相关蛋白基因(multidrug resistance protein，MRP)的表达。结果显示，正常对照骨髓细胞LRP表达阴性，初治急性髓细胞白血病(AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高，增高的LRP mRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关，LRP表达阳性患的完全缓解率明显低于表达阴性。经直线相关分析发现，LRP表达与MRP表达水平成正相关。结论：LRP可能是一项新的耐药指标，其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关，同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗，估计预后。     

Mucin-3和MDR3在胆固醇结石形成中的作用

目的探讨黏蛋白Mucin-3基因和多重耐药因子3（MDR3）在胆固醇结石形成中的作用及其相互关系。方法应用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测Mucin-3和MDR3在36例胆囊结石（结石组）、20例胆囊炎（炎症组）和12例正常胆囊（对照组）的胆囊黏膜和肝组织中的表达。结果结石组和炎症组胆囊黏膜Mucin-3表达阳性率分别为30.1%（11/36）和35.0%（7/20）,显著低于对照组75.0%（9/12）（2χ=12.74、13.46,P〈0.01）;结石组与炎症组之间比较,差异无显著性（χ2=0.21,P〉0.05）。结石组的肝组织中MDR3 mRNA的表达量低于炎症组和对照组,差异有显著性（F=19.785,q=8.432-10.037,P〈0.01）;炎症组肝组织MDR3 mRNA的表达量与对照组比较差异无显著性（P〉0.05）。结石组胆囊黏膜中Mucin-3蛋白阳性表达者肝组织中的MDR3 mRNA的表达量与Mucin-3蛋白阴性表达者比较,差异有显著意义（t=3.142,P〈0.05）。结论 Mucin-3基因参与了胆囊结石形成的全过程。在胆囊结石形成的后期阶段,MDR3与Mucin-3基因相互作用,共同影响胆囊结石的形成。     

血清脂类、载脂蛋白指标异常与胆囊胆固醇结石病例对照分析

目的分析血清脂类、载脂蛋白指标异常与胆囊胆固醇结石病例对照比较。方法选择经手术证实的47例胆囊胆固醇结石患者,并按相同年龄、性别和体质量指数与同期健康体检者(对照组)进行1∶1配对,两组均接受血脂(总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白)和载脂蛋白(A和B)指标检测。结果胆囊胆固醇结石患者的血清总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白和载脂蛋白B浓度均明显高于对照组,而前者中高密度脂蛋白浓度则明显低于后者(P均<0.05~0.01)。结论胆囊胆固醇结石患者常伴有明确的血清脂类和载脂蛋白指标异常。     

RNT4在胃癌组织中的表达及意义

目的 观察RNT4蛋白在胃癌组织中的表达及意义,为获取胃癌诊断相关的蛋白分子提供实验依据.方法 采用RT-PCR和Western blot检测RTN4在胃癌组织中的表达;应用免疫组化染色检测胃癌组织中RTN4蛋白的表达率,并分析其表达的临床意义.结果 ①RT-PCR和Western blot结果均显示,与正常胃黏膜组织比较,RTN4在胃癌组织中的表达明显增加(P＜0.05).②胃癌与正常胃黏膜组织中RTN4蛋白的阳性表达率分别为60.9％(28/46)与25％(6/24),RTN4蛋白在胃癌组织中阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织(P＜0.05).结论 RNT4蛋白在胃黏膜组织中高表达与胃癌的发生密切相关.     

宫颈癌中多药耐药相关蛋白基因表达及意义

目的探讨多药耐药相关蛋白（multi-drug resistance-associated protein,MRP）基因在宫颈癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测47份宫颈癌组织和12份正常宫颈组织中MRP基因mRNA的表达情况。结果正常宫颈组织中MRP mRNA的表达为0.20±0.11,宫颈癌组织中为0.51±0.28,宫颈癌组织MRP基因表达高于正常宫颈组织（t=6.04,P〈0.01）。MRP表达在肿瘤直径、有无淋巴转移、不同肿瘤分化程度、组织学分型及不同临床分期上差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 MRP基因可能参与宫颈癌原发性耐药的产生,检测其表达对制订治疗方案有一定价值。     

肝细胞核因子3β在人类肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨肝细胞核因子3β蛋白(HNF-3β)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织和癌旁正常肺组 织中的表达情况,探讨其临床意义.方法 分别采用免疫组化法和RT-PCR 方法检测50 例NSCLC 组织及癌 旁正常肺组织中HNF-3β蛋白和mRNA 的表达.结果 HNF-3β蛋白在NSCLC 和正常癌旁组织中的半定量 评分分别为0.42 ±0.13,2.28 ±0.28,差异有统计学意义(P <0.05).HNF-3βmRNA 在NSCLC 和正常癌旁 组织中的半定量评分分别为1.32 ±0.23,3.68 ±0.32,差异有统计学意义(P <0.05).结论 初步认定HNF- 3β对人类非小细胞肺癌的形成起抑制作用.     

上皮性卵巢癌中MRP1、BCRP、BRCA1基因的表达及其意义

目的探讨MRP1、BCRP、BRCA1在上皮性卵巢癌中的表达情况及其意义。方法 47例上皮性卵巢癌患者卵巢组织标本,根据耐药情况分为耐药组(22例)和敏感组(25例),另选正常卵巢组织标本作为对照组(20例)。采用实时荧光定量PCR技术对上皮性卵巢癌组织和正常卵巢组织中MRP1、BCRP、BRCA1基因的表达情况进行检测。结果 MRP1在上皮性卵巢癌组织中的表达量和表达率均高于正常卵巢组织;BCRP在上皮性卵巢癌组织表达量和表达率均低于正常卵巢组织(P0.05);BRCA1在上皮性卵巢组织中的表达量和表达率与正常卵巢组织比较差异无统计学意义(P0.05)。耐药组MRP1、BRCA1表达量和表达率均高于敏感组;BCRP表达量和表达率均低于敏感组(P0.05)。结论 MRP1和BCRP在上皮性卵巢癌组织中的表达量会显著增加,BRCA1表达量变化不大。MRP1和BCRP表达量的增加可能与化疗耐药有关,影响患者疗效。     

胆囊胆固醇结石患者肝脏LRH－1及调控基因蛋白表达差异

目的研究LRH－1及其调控的靶基因ABCG5／8、CETP、SRBI和CYP7A1蛋白表达变化与胆囊胆固醇结石形成的关系。方法收集胆囊胆固醇结石患者20例,无结石（肝良性肿瘤,肝脏外伤,胆囊非胆固醇息肉）对照15例,分别测定血清血脂全套,胆汁成分分析,结石成分分析,免疫组化法研究胆石患者肝脏LRH一1及其调控的靶基因：SRBI、ABCG5／8和CYP7A1的蛋白表达。结果胆囊胆固醇结石患者胆汁胆固醇饱和指数高于对照组（P〈0．01）。免疫组化分析结果提示结石组肝脏核受体LRH－1蛋白表达明显高于对照组（P〈0．05）,结石组肝脏SRBI、ABCG5／8和CYP7A1蛋白表达也明显高于对照组C〈0．05）。结论核受体LRH-1及其调控的靶基因SRBI和ABCG5／8可能与胆囊胆固醇结石形成相关。     

胸苷酸合成酶mRNA和二氢嘧啶脱氢酶mRNA在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)mRNA和二氢嘧啶脱氢酶(dihydropyrimidinedehydrogenase,DPD)mRNA在结直肠癌中的表达及其与临床病理的关系。方法:采用半定量RT-PCR检测54例结直肠癌肿瘤及临近正常肠黏膜中TSmRNA和DPDmRNA的表达,比较酶表达水平与临床病理间的关系,并对其中10例采用免疫组化进行蛋白表达定位。结果:结直肠癌组织中TSmRNA含量(1.37±0.72)显著高于正常肠黏膜(0.97±0.59)(P     

姜黄素对肝癌细胞耐药基因表达的影响

目的:研究姜黄素对人肝癌细胞Huh7和Hep3B中耐药基因(MDR1、MRP1和DRG2)表达的影响,探讨姜黄素诱导肝癌细胞凋亡的分子作用机制.方法:以DAPI核染色法研究姜黄素对不同肝癌细胞的凋亡诱导作用.利用JC-1染料进行线粒体染色研究姜黄素对Huh7和Hep3B细胞线粒体膜电位的影响.通过半定量PCR(RT-PCR)检测姜黄素对耐药基因表达的影响.结果:姜黄素可以显著抑制Huh7细胞中耐药基因MRP1的表达.结论:姜黄素可能通过抑制耐药基因MRP1的表达诱导肝癌细胞Huh7凋亡.     

耐多药相关蛋白、P-糖蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的　观察耐多药相关蛋白 (MRP)、P 糖蛋白 (P gp)在肺癌组织中的表达情况 ,以及MRP与P gp之间的相关性 ,探讨MRP、P gp与患者预后的关系。 方法　应用链霉亲和素 生物素过氧化物酶复合物 (S P)免疫组化法检测MRP、P gp的表达情况。结果　 4 2例非小细胞肺癌中MRP阳性率为 4 5 .2 % ,腺癌中的MRP的表达明显高于鳞癌 (P <0 .0 5 ) ;P gp阳性表达率为4 0 .4 % ,P gp的表达与组织类型、细胞分化水平、TNM临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ;肺癌组织中P gp与MRP的表达具有明显相关性 (P <0 .0 1) ;MRP、P gp阴性患者术后 3年无病生存期明显高于MRP、P gp阳性患者 (P <0 .0 5 )。结论　MRP、P gp可作为临床判断化疗疗效的参考指标及预测肺癌患者预后的指标     

胆宁片对胆汁33.5kDa泡蛋白含量和结构的影响

目的：探讨胆宁片对胆石症患者胆汁中33.5kDa泡蛋白含量及其结构的影响。方法：2008年1月—2010年3月对60例胆囊切除病例和40例胆总管探查病例进行前瞻性临床研究,其中60例胆囊切除病例随机分为3组：胆固醇结石胆宁片组（n=20）、胆固醇结石对照组（n=20）、胆色素性结石组（n=20）,另外设立正常对照组（n=20）。通过酶联免疫吸附法检测每份胆汁中33.5kDa泡蛋白含量,比较各组之间的差异。40例胆总管探查病例分为研究组和对照组（n=20）,通过蔓陀螺凝集素探针（DSA）介导的蛋白印迹法检测胆汁中33.5kDa泡蛋白糖链条带DSA结合率,比较2组糖链结构的变化。结果：胆固醇结石组胆汁中33.5kDa泡蛋白含量显著高于胆色素结石组和正常对照组,胆固醇结石胆宁片治疗组胆汁33.5kDa泡蛋白含量较对照组显著降低（P〈0.01）。胆固醇结石治疗组泡蛋白糖链条带DSA结合率较对照组显著下降（P〈0.05）。结论：胆宁片能降低胆固醇结石患者胆汁中33.5kDa泡蛋白含量,并通过改变糖链结构而使其促成核活性发生变化。     

快速准确检测Tim分子表达方法的建立

目的建立快速准确检测外周血单个核细胞中Tim分子表达的方法,为进一步建立乙肝新型检测指标奠定基础。方法密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),Trizol法抽提总RNA,分别进行常规RT-PCR及荧光定量RT-PCR,比较两种方法检测结果。结果常规RT-PCR成功扩增人Tim-1及Tim-3,可见清晰条带。荧光定量RT-PCR扩增目的基因融解曲线良好,Tim-1在中、重度慢性肝炎病人中的表达显著高于正常对照组(P<0.05),Tim-3在急性肝炎组中的表达显著高于正常对照组(P<0.01)。结论成功建立Tim分子表达的快速定量检测方法,有助于临床标本检测。     

利用RT-PCR检测SM22基因在胃癌及正常组织中表达差异的生物学意义

目的:检测SM22(smoothmuscle22)mRNA在人胃癌及正常组织中的表达水平,探讨SM22基因与胃癌发生的关系,为进一步鉴定胃癌早期诊断筛查的标志物提供理论依据。方法:应用半定量RT-PCR检测42例胃癌组织及14例胃正常组织中SM22mRNA的表达水平并比较其差异。结果:在胃癌组织SM22mRNA的阳性表达率为92.86%(39/42),在正常组织中的阳性表达率为71.43%(10/14),差异无统计学意义(P>0.05)。半定量光密度计数后SM22mRNA表达量在胃癌组织和正常组织中分别为0.86±0.14和0.32±0.22,差异有统计学意义(P<0.01)。在14对胃癌与正常配对标本中,有10对胃癌及正常组织中SM22mRNA均表达阳性而且在肿瘤组织中表达量明显高于正常组织,有4对标本中SM22mRNA只在胃癌组织中表达而在正常组织中表达阴性。结论:SM22mRNA在胃癌组织中的表达量高于正常组织,提示其在胃癌发生发展中可能起一定作用。     

胆结石小鼠肝脏核受体基因的表达

目的通过胆固醇结石（GS）小鼠肝脏的核受体基因—肝核受体类似物1（1iver receptor homolog 1,LRH-1）、法尼醇受体（farnesoid X receptor,FXR）、类固醇受体（steroid X receptor,SXR）的表达,探讨与胆固醇结石形成关系.方法 C57BL/6雌性小鼠40只,平均出生后10周,重量28-35g,20只一组分为两组,一组予以正常饮食另一组予以高脂饮食喂养,均8周后处死.病理切片检查胆囊壁细胞组织学改变,并分别采用实时定量RT-PCR法和Western Blot法测定肝脏LRH-I、FXR、SXR的mRNA表达.结果胆固醇结石小鼠胆囊壁细胞呈现炎性改变,LRH-I的mRNA表达均高于对照组（P〈0.01）,FXR、SXR的mRNA表达两组差异无统计学意义.结论啮齿动物肝脏LRH-1基因的表达异常与胆固醇结石形成有关,FXR、SXR基因的表达与胆固醇结石形成可能无关.     

乳腺组织中钠/碘转运体基因及蛋白的表达与乳腺疾病发生的关系

目的:研究正常和良/恶性乳腺肿瘤组织中钠-碘转运体(sodium-iodidesymporter,NIS)基因和蛋白的表达情况,探讨NIS与乳腺疾病之间的关系。方法:乳腺组织取自4例乳腺纤维瘤患者,3例乳腺小叶增生患者,8例乳腺癌患者,5例癌旁正常乳腺组织,运用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测NIS的基因与蛋白表达情况。结果:癌旁正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤组织未检出NIS基因和蛋白的表达,而乳腺癌组织NIS基因均见NIS基因表达,且NIS蛋白主要表达在胞浆中。结论:正常乳腺组织中未检测到NIS基因,而乳腺癌组织NIS基因表达明显增加,而NIS蛋白翻译和翻译后水平的缺陷可能是乳腺癌组织摄碘率降低的原因之一。     

中性粒细胞趋化因子在大鼠早期急性肺损伤肺组织中的动态变化

目的建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型,检测肺组织中性粒细胞趋化因子(CINC)的动态变化,探讨CINC与急性肺损伤发病的关系。方法48只SD大鼠随机分为急性肺损伤组(ALI组)和正常对照组(NC组)。通过腹腔注射脂多糖(LPS,3 mg/kg)建立急性肺损伤模型。用免疫组织化学法和半定量RT-PCR分别检测CINC蛋白及其mRNA在造模后1、2和6 h肺组织中的表达变化。结果CINC在急性肺损伤组肺组织中表达明显高于正常对照组;正常肺组织中有微量CINC mR-NA表达,给药2 h后迅速上升,至6 h时其表达进一步增强(P<0.001)。而在正常组CINC的蛋白和基因水平表达均不明显。结论CINC在急性肺损伤中扮演重要的角色,参与急性肺损伤早期发病过程。     

乳腺组织中钠／碘转运体基因及蛋白的表达与乳腺疾病发生的关系

目的：研究正常和良／恶性乳腺肿瘤组织中钠-碘转运体(sodium-iodide symporter，NIS)基因和蛋白的表达情况，探讨NIS与乳腺疾病之间的关系。方法：乳腺组织取自4例乳腺纤维瘤患者，3例乳腺小叶增生患者，8例乳腺癌患者，5例癌旁正常乳腺组织，运用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测NIS的基因与蛋白表达情况。结果：癌旁正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤组织未检出NIS基因和蛋白的表达，而乳腺癌组织NIS基因均见NIS基因表达，且NIS蛋白主要表达在胞浆中。结论：正常乳腺组织中未检测到NIS基因．而乳腺癌组织NIS基因表达明显增加，而NIS蛋白翻译和翻译后水平的缺陷可能是乳腺癌组织摄碘率降低的原因之一.